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課時作業(yè)三十六一、選擇題1.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述正確的是()A.轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因,可能通過花粉傳入環(huán)境中B.轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物,不會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加C.動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)D.如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界,則不存在平安性問題A[轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因可能會通過花粉被油菜的近緣物種接受,造成意料之外的抗除草劑基因傳播,形成基因污染,有可能會對生態(tài)系統(tǒng)的平衡和穩(wěn)定構(gòu)成威逼,A項正確;在轉(zhuǎn)入抗蟲基因后,不能適應(yīng)這種抗蟲植物的昆蟲的死亡率將大大增加,只有存在對應(yīng)的抗性基因的昆蟲才能生存下來,增加了昆蟲群體中抗性基因的頻率,B項錯誤;生物界中全部物種基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯用同一套密碼子和相同的氨基酸,所以動物的生長激素基因可以在植物體內(nèi)得到表達(dá),C項錯誤;即便轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來自于自然界,通過轉(zhuǎn)基因工程后,可能會使目標(biāo)生物毀滅非正常進(jìn)化過程中的性狀轉(zhuǎn)變,有可能會影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,D項錯誤。]2.(2022·長沙模擬)甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獵取目的基因的兩種方法,以下說法中錯誤的是()A.甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫B.乙方法可建立該細(xì)菌的cDNA文庫C.甲方法要以脫氧核苷酸為原料D.乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與C[甲圖描述的為該細(xì)菌的基因組文庫,只要利用DNA限制性核酸內(nèi)切酶將其原有的DNA切斷即可,不需要以脫氧核苷酸為原料。乙圖描述的為細(xì)菌的部分基因文庫,乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與,并需要以脫氧核苷酸為原料。]3.下圖為基因表達(dá)載體的模式圖。下列有關(guān)基因工程中載體的說法錯誤的是()A.基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建B.任何基因表達(dá)載體的構(gòu)建都是一樣的,沒有差別C.圖中啟動子位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位D.抗生素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因,用于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因B[由于受體細(xì)胞有植物、動物和微生物之分,以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方式不同,因此,基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會有所差別,不行能是千篇一律的。]4.(2022·廣東四校聯(lián)考)將人的干擾素基因通過基因定點突變,使干擾素第17位的半胱氨酸轉(zhuǎn)變成絲氨酸,改造后的干擾素比自然干擾素的抗病毒活性和穩(wěn)定性顯著提高,此項技術(shù)屬于()A.蛋白質(zhì)工程 B.細(xì)胞工程C.胚胎工程 D.生態(tài)工程A[蛋白質(zhì)工程是利用基因工程手段,包括基因的定點突變和基因表達(dá)對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,以期獲得性質(zhì)和功能更加完善的蛋白質(zhì)分子。由題意知該技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程。]5.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中,下列操作錯誤的是()A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C.將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體D.用含除草劑的培育基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞A[構(gòu)建重組DNA分子時,需用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體,再用DNA連接酶連接形成重組DNA分子,而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,所以A項錯誤。重組DNA分子形成后要導(dǎo)入受體細(xì)胞(若是植物細(xì)胞,則可導(dǎo)入其原生質(zhì)體),若導(dǎo)入的受體細(xì)胞是體細(xì)胞,經(jīng)組織培育可獲得轉(zhuǎn)基因植物。目的基由于抗除草劑基因,所以未成功導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞不具有抗除草劑的力氣,可用含除草劑的培育基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞。]二、非選擇題6.下圖為培育轉(zhuǎn)基因小鼠的部分過程示意圖。請回答下列問題。(1)若需在短時間內(nèi)獲得較多的外源基因,通常接受技術(shù)。(2)圖中的A細(xì)胞通常為細(xì)胞,將外源基因?qū)朐摷?xì)胞常用的方法是。(3)仔鼠誕生后可用其尾巴進(jìn)行DNA檢測,通過方法,檢測出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì),可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì),并用相應(yīng)的抗體進(jìn)行雜交,若有雜交帶毀滅,則表明小鼠體內(nèi)的外源基因。(4)在外源基因?qū)胄∈蟮腁細(xì)胞時,外源基因可能隨機(jī)地插入到該細(xì)胞的DNA中。這些細(xì)胞有的能發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠,有的卻死亡。請分析外源基因插入后導(dǎo)致有些A細(xì)胞死亡的最可能緣由。答案(1)PCR(2)受精卵顯微注射法(3)DNA分子雜交抗原-抗體已表達(dá)(4)外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動必需的某些基因不能正常表達(dá)7.回答有關(guān)基因工程的問題。(1)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時,用不同類型的限制酶切割DNA后,可能產(chǎn)生黏性末端,也可能產(chǎn)生末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生(相同、不同)黏性末端的限制酶。(2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時,構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動子等,其中啟動子的作用是。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時,常用處理大腸桿菌,以利于表達(dá)載體進(jìn)入;為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交,該雜交技術(shù)稱為。為了檢測胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成,常用抗原—抗體雜交技術(shù)。(3)假如要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的上。解析(1)DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸兩側(cè)將DNA切開時,產(chǎn)生的是黏性末端,而當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線切開時,產(chǎn)生的是平末端。要使目的基因和質(zhì)粒直接進(jìn)行連接,應(yīng)使用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,使二者產(chǎn)生相同黏性末端。(2)一個基因表達(dá)載體的組成,除含有目的基因外,還必需有啟動子、終止子和標(biāo)記基因。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合部位,可以驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時,為便于表達(dá)載體進(jìn)入,常用CaCl2處理大腸桿菌。要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出對應(yīng)的mRNA,可接受分子雜交技術(shù),即用目的基因片段作探針,與mRNA雜交,假如顯示出雜交帶,則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA。(3)運用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時,要先將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中,然后將該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過DNA重組將目的基因插入到植物細(xì)胞的染色體DNA上。答案(1)平相同(2)驅(qū)動胰島素基因轉(zhuǎn)錄出mRNACaCl2溶液(或Ca2+)分子雜交技術(shù)蛋白質(zhì)(3)T-DNA染色體DNA8.人外周血單核細(xì)胞能合成白介素2(IL~2)。該蛋白可增加機(jī)體免疫功能,但在體內(nèi)易被降解。爭辯人員將IL-2基因與人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一個融合基因,并在酵母菌中表達(dá),獲得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白。其技術(shù)流程如圖。請回答下列問題。(1)培育人外周血單核細(xì)胞的適宜溫度為℃;圖中②表示過程。(2)表達(dá)載體1中的位點,應(yīng)為限制酶BglⅡ的識別位點,才能成功構(gòu)建表達(dá)載體2。(3)表達(dá)載體2導(dǎo)入酵母菌后,融合基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA中,與IL-2蛋白對應(yīng)的堿基序列不能含有(起始、終止)密碼子,才能成功表達(dá)出IL-2-HSA融合蛋白。(4)應(yīng)用雜交技術(shù)可檢測酵母菌是否表達(dá)出IL-2-HSA融合蛋白。解析(1)人體的體溫是37℃左右,因此培育人體細(xì)胞的最適宜溫度就是37℃。由mRNA到cDNA過程是逆轉(zhuǎn)錄過程。(2)依據(jù)圖解可知目的基因的兩端分別是由限制酶EcoRI、BglⅡ切割的,一般用同一限制酶切割才能形成相同的黏性末端,表達(dá)載體1中的位點a具有EcoRI的識別位點,因此位點a應(yīng)為限制酶BglⅡ的識別位點,才能成功構(gòu)建表達(dá)載體2。(3)mRNA中假如含有終止密碼子,則會導(dǎo)致翻譯終止,不能合成出目的蛋白。(4)抗原、抗體的結(jié)合具有特異性,抗原—抗體雜交技術(shù)可以快速檢測出酵母菌是否表達(dá)出IL-2-HSA融合蛋白。答案(1)37(或36.5±0.5)反(或逆)轉(zhuǎn)錄(2)a(3)終止(4)抗原—抗體9.(2021·合肥模擬)植物生物反應(yīng)器是指通過基因工程途徑,以常見的農(nóng)作物作為“化學(xué)工廠”,通過大規(guī)模種植,生產(chǎn)具有重要功能的蛋白,如人或動物的疫苗、抗體、工農(nóng)業(yè)用酶等各種高價值的生物制品的方法。列舉幾例如下表,請據(jù)此回答問題。反應(yīng)器名稱藥物名稱作用蕪菁生物反應(yīng)器干擾素抗病毒煙草生物反應(yīng)器Ⅰ生長激素促進(jìn)生長煙草生物反應(yīng)器Ⅱ核糖體抑制蛋白抑制HIV增殖番茄生物反應(yīng)器狂犬病病毒糖蛋白(G蛋白)疫苗馬鈴薯生物反應(yīng)器人血清白蛋白(HSA)維持滲透壓、pH緩沖、養(yǎng)分等(1)從基因工程的角度分析,將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞的最常用的方法是,運載體是,目的基因能在植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是。在檢測受體細(xì)胞中是否已經(jīng)導(dǎo)入目的基因時,分子水平上的檢測方法名稱是。(2)從細(xì)胞工程的角度分析,建立“化學(xué)工廠”的理論基礎(chǔ)是。從生態(tài)學(xué)角度考慮操作過程需要。(3)分析說明煙草生物反應(yīng)器Ⅱ生產(chǎn)的藥物作用機(jī)理是。(4)從細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能上分析,生長激素不能使煙草細(xì)胞生長的緣由是;吃G蛋白基因已有效表達(dá)的番茄果實(能、不能)預(yù)防狂犬病。解析(1)植物轉(zhuǎn)基因的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌中含有Ti質(zhì)粒,其上的TDNA能將目的基因整合到植物染色體DNA上去。目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上,可以利用DNA分子雜交技術(shù)來檢測。(2)化學(xué)工廠指利用轉(zhuǎn)基因植株生產(chǎn)人類所需功能蛋白,轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞形成轉(zhuǎn)基因植株過程是通過植物組織培育來實現(xiàn)的,其原理是植物細(xì)胞的全能性。整個過程應(yīng)無菌操作。(3)煙草生物反應(yīng)器Ⅱ生產(chǎn)的是核糖體抑制蛋白,能抑制HIV感染者的T細(xì)胞中核糖體功能,導(dǎo)致HIV蛋白質(zhì)合成受阻,從而抑制HIV的增殖。(4)植物細(xì)胞膜上沒有生長激素的受體,所以生長激素不能促進(jìn)植物細(xì)胞生長。G蛋白是大分子的蛋白質(zhì),食用G蛋白后被分解成氨基酸,不能達(dá)到預(yù)防狂犬病的目的。答案(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法Ti質(zhì)粒整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上DNA分子雜交技術(shù)(2)細(xì)胞的全能性無菌操作(或預(yù)防微生物感染或預(yù)防雜菌污染)(3)該藥物能抑制HIV感染者T細(xì)胞(或被HIV感染的人體細(xì)胞)的核糖體合成HIV蛋白質(zhì)(4)煙草細(xì)胞(膜)上無生長激素的受體不能10.用小鼠進(jìn)行DNA重組爭辯中形成的“基因敲除”技術(shù),能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過程如下:第一步:分別小鼠胚胎干細(xì)胞,這些細(xì)胞中含有需要改造的基因,稱“靶基因”。其次步:獵取與“靶基因”同源的DNA片段,利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因)成為突變DNA(如圖),使該片段上的靶基因失活。第三步:將插入neoR基因(新霉素抗性基因)的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞,再通過同源互換,用失活靶基因取代兩個正常靶基因中的一個,完成對胚胎干細(xì)胞的基因改造。第四步:將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞,轉(zhuǎn)移到特定培育基中篩選培育。其基本原理如下圖所示:(1)其次步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是。neoR基因不僅能使靶基因失活,還是;“靶基因失活”的含義是。(2)從爭辯者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個靶基因的胚胎干細(xì)胞,到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠,運用到的生物技術(shù)有、、等。(3)科學(xué)家可以通過“基因敲除”技術(shù)來治療疾病,上題中獲得的基因敲除小鼠,能否直接用來爭辯基因功能并說明緣由________________________________________________________________________。解析(1)將neoR基因插入靶基因需要用限制酶處理獲得相同的黏性末端,再加入DNA連接酶進(jìn)行連接,故使用的工具酶是基因工程中的限制酶、DN
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