![DB22-T 3353-2022 豬δ冠狀病毒檢測(cè) 重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)法_第1頁](http://file4.renrendoc.com/view12/M07/33/28/wKhkGWeBH2mAehlRAADIGE-wphY084.jpg)
![DB22-T 3353-2022 豬δ冠狀病毒檢測(cè) 重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)法_第2頁](http://file4.renrendoc.com/view12/M07/33/28/wKhkGWeBH2mAehlRAADIGE-wphY0842.jpg)
![DB22-T 3353-2022 豬δ冠狀病毒檢測(cè) 重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)法_第3頁](http://file4.renrendoc.com/view12/M07/33/28/wKhkGWeBH2mAehlRAADIGE-wphY0843.jpg)
![DB22-T 3353-2022 豬δ冠狀病毒檢測(cè) 重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)法_第4頁](http://file4.renrendoc.com/view12/M07/33/28/wKhkGWeBH2mAehlRAADIGE-wphY0844.jpg)
![DB22-T 3353-2022 豬δ冠狀病毒檢測(cè) 重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)法_第5頁](http://file4.renrendoc.com/view12/M07/33/28/wKhkGWeBH2mAehlRAADIGE-wphY0845.jpg)
版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
DB22DB22/T3353—2022豬δ冠狀病毒檢測(cè)重組酶聚合酶擴(kuò)增Recombinasepolymeraseamplificationmethodforthedetectionofporcinedeltacoronavirus2022-01-28發(fā)布2022-02-28實(shí)施吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布I1反轉(zhuǎn)錄重組酶聚合酶擴(kuò)增reversetranscription-recombinasepolymerascDNA互補(bǔ)脫氧核糖核酸(ComplementaryPBS磷酸鹽緩沖液(PhosphaRPA開始反應(yīng)后,引物與重組酶組合形成復(fù)合物,在模板中尋找同源雙鏈DNA進(jìn)行定位,完成定位后發(fā)生鏈交換反應(yīng),形成D-環(huán)狀結(jié)構(gòu),使DNA結(jié)合蛋白與單鏈DNA鏈綁定。隨后DNA聚合酶識(shí)別復(fù)2合物中重組酶解離引物后暴露的3′端,進(jìn)行片段擴(kuò)增,形成兩條新的雙鏈DNA,如此循環(huán),從而完成ATGTGCCTGGTGTTCAGGAGATGCTTTTCGCTAGTTGGTTTGGTGGGTGGCTCATAGGTCTGG6.1.2磷酸鹽緩沖液(PBS0.01mol/L,pH7.47.2臺(tái)式低溫高速離心機(jī)(4℃,12000r/min)。39.1.1采集腸管組織樣品不少于5g(7.1)。做好9.2.1使用無菌棉簽(6.2.1,7.5采集肛門糞便不少于5g,樣品采集后冷凍或4℃4的擴(kuò)增產(chǎn)物及Marker(6.1.9)分別加入凝膠孔(7.35V/min5Atggctgcaccagtagtccctactactgacgcgtcttggtttcaggtgctcaaagctcaaaataaaaaggctactcatcctcagtttcgtggcaatggaggcttaactccgccatcaaacccgttgaaaaccatggctactggctgcgttacaccagacaaaagccaggtggtactccgattcctccatcctatgccttttattatactggcacaggtcccagaggaaatcttaagtatggtgaactccctcctaatgacaccccagcaaccactcgtgttacttgggttaagggttcgggagctgacactattaagcctcatgttgccaaacgcaaccccaacaatcctaaacatcagctgctacctctccgattcccaaccggagatggcccagctcaaggtttcagagttgaccccttcaacgctagaggaagacctcaggagcgtggaagtggcccaagatctcaatctgttaactccagaggcacaggcaatcagcccaggaaacgcgctgcacccgctgcggtacgtcgtaagacccaacatcaagctcccaagcggactttacccaagggtaaaaccatttctcaggtatttggcaaccggtctcgcactggtgccaatgtcggctctgcagacactgagaagacgggtatggctgatcctcgcatcatggctctagccagacatgtgcctggtgttcaggagatgcttttcgcccaccttgagagcaactttcaggcgggggcaattacccttaccttctcttactcaatcacagtcaaggagggttctcctgactatgagagacttaaggatgcgctcaatacggtcgttaaccagacctatgagccacccaccaaaccaactaaggacaagaagcctgacaaacaagaccagtctgctaaacccaaacagcagaagaaacctaaaaaggtaactctgccagcagacaaacaggattgggagtgggatgatgcttttgagataaagcaggaatcagcagcg將感受態(tài)細(xì)胞E.coliDH5α置于冰上,待其融化;在超凈工作臺(tái)中將加入合成質(zhì)粒1μL~3μL加入100μL感受態(tài)細(xì)胞,混勻,冰浴30min;42℃熱激1min~2min,冰浴1min~2min;加900μL完全吸收后,37℃倒置培養(yǎng)12h~16h。PCR反應(yīng)程序:95℃,5min;95℃,30s;58℃,30s,72℃,1min,72℃,10min,35個(gè)12h~16h。瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物,統(tǒng)計(jì)含目標(biāo)條帶菌落號(hào)備用。6℃,180rpm,12h~16h;取3mL~5m
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2025年川味復(fù)合調(diào)味料合作協(xié)議書
- 2025年五年級(jí)品德教學(xué)工作總結(jié)模版(三篇)
- 2025年代理售后服務(wù)合同模板(2篇)
- 2025年代理加工合同標(biāo)準(zhǔn)版本(2篇)
- 2025年九年級(jí)語文下冊(cè)教學(xué)工作總結(jié)范文(二篇)
- 2025年個(gè)人簡易倉庫租賃合同(4篇)
- 2025年二手車賣車協(xié)議樣本(4篇)
- 2025年代理合作協(xié)議范例(三篇)
- 2025年人教版小學(xué)二年級(jí)語文下冊(cè)教學(xué)工作總結(jié)范文(二篇)
- 2025年個(gè)人工程勞務(wù)合同樣本(三篇)
- 中國古代文學(xué)史 馬工程課件(上)01總緒論
- GB/T 22085.1-2008電子束及激光焊接接頭缺欠質(zhì)量分級(jí)指南第1部分:鋼
- 上海中心大廈-介紹 課件
- 《口腔修復(fù)學(xué)》種植義齒-課件
- 非酒精性脂肪性肝病防治指南解讀課件
- 地理微格教學(xué)課件
- 合成氨操作規(guī)程
- 清華大學(xué)抬頭信紙
- 牛津譯林版六年級(jí)下冊(cè)單詞詞匯表匯總(完整打印版)
- JJF 1975-2022 光譜輻射計(jì)校準(zhǔn)規(guī)范
- Q∕SY 05268-2017 油氣管道防雷防靜電與接地技術(shù)規(guī)范
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論