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力氣提升植物組織培育和動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)項(xiàng)目植物組織培育動(dòng)物細(xì)胞培育培育基無機(jī)鹽、蔗糖、維生素、植物激素和有機(jī)添加劑(如甘氨酸、瓊脂等),屬于固體培育基葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等,屬于液體培育基取材較幼嫩的細(xì)胞、組織、器官動(dòng)物胚胎或誕生不久的幼齡的器官或組織原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞的增殖培育過程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官(分裂力氣強(qiáng))↓剪碎、胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理單個(gè)細(xì)胞,制細(xì)胞懸液、轉(zhuǎn)入培育液中↓原代培育細(xì)胞貼壁、接觸抑制↓重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理單個(gè)細(xì)胞,制細(xì)胞懸液、轉(zhuǎn)入培育液中↓傳代培育培育結(jié)果可以獲得植株,也可以獲得大量細(xì)胞只能獲得大量細(xì)胞,不能得到生物個(gè)體應(yīng)用①植物快速繁殖與脫毒植物培育②生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品③制造人工種子④用于轉(zhuǎn)基因植物的培育①生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品②培育皮膚移植的材料③檢測(cè)有毒物質(zhì)④用于生理、病理、藥理學(xué)的爭(zhēng)辯相同點(diǎn)①都需要人工條件下的無菌操作,②都是合成培育基,③都需要適宜的溫度、pH等條件(1)細(xì)胞全能性的大小:①受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞;②分裂的植物細(xì)胞(如根尖分生區(qū)、莖形成層)>不分裂的植物細(xì)胞;③高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制,嚴(yán)格來說只有其細(xì)胞核才具有全能性。(2)植物組織培育的培育基大多數(shù)由無機(jī)養(yǎng)分成分、有機(jī)養(yǎng)分成分、激素和瓊脂四部分組成。有機(jī)養(yǎng)分成分主要是小分子有機(jī)物,其中蔗糖具有供應(yīng)養(yǎng)分和調(diào)整滲透壓的作用。植物激素主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,兩者比值不同,對(duì)細(xì)胞發(fā)育方向的影響不同:生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)利于根的分化,抑制芽的形成;生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值低時(shí)利于芽的分化,抑制根的形成;生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值相當(dāng)時(shí)促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng),不分化。(3)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培育時(shí)通常要添加血清,緣由有兩點(diǎn):一是補(bǔ)充合成培育基中不足的成分;二是為動(dòng)物細(xì)胞供應(yīng)與內(nèi)環(huán)境相像的生活環(huán)境。(4)動(dòng)物細(xì)胞培育中兩次用到胰蛋白酶的目的:第一次是將動(dòng)物胚胎或器官剪碎后,用胰蛋白酶分解組織細(xì)胞間質(zhì)中的膠原蛋白,可使組織分散成單個(gè)細(xì)胞;其次次是由于細(xì)胞在培育瓶中貼壁生長(zhǎng),隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖,培育瓶中的細(xì)胞越來越多,當(dāng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)就停止增殖,這種現(xiàn)象叫接觸抑制,所以需要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,進(jìn)行傳代培育。典例1下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培育和植物組織培育的敘述,錯(cuò)誤的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培育和植物組織培育所用培育基不同B.動(dòng)物細(xì)胞培育和植物組織培育過程中都要用到胰蛋白酶C.煙草葉片離體培育能產(chǎn)生新個(gè)體,小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培育增殖D.動(dòng)物細(xì)胞培育可用于檢測(cè)有毒物質(zhì),莖尖培育可用于植物脫除病毒植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)項(xiàng)目植物細(xì)胞雜交(實(shí)例:番茄—馬鈴薯植株)動(dòng)物細(xì)胞融合(實(shí)例:單克隆抗體的制備)過程第1步原生質(zhì)體的制備(酶解法)正常小鼠的處理(注射滅活抗原)第2步原生質(zhì)體的融合(物化法)動(dòng)物細(xì)胞融合(物化生法)第3步雜種細(xì)胞的篩選和培育雜交瘤細(xì)胞的篩選和培育第4步雜種植株鑒定提純單克隆抗體(特異性強(qiáng)、靈敏度高)流程圖①去壁,②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,③再生出細(xì)胞壁(原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志)原理/理論基礎(chǔ)細(xì)胞膜的流淌性、植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞增殖融合前處理用酶解法獲得相應(yīng)的原生質(zhì)體用胰蛋白酶等處理動(dòng)物組織獲得單個(gè)細(xì)胞(先注射特定抗原免疫處理正常小鼠)促融因子物理法:電刺激、離心、振動(dòng)化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)物化法:與植物原生質(zhì)體融合相同生物法:滅活的仙臺(tái)病毒意義和用途①克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 ②培育作物新品種爭(zhēng)辯細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等,最重要的用途是制備單克隆抗體(1)植物體細(xì)胞雜交屬于無性生殖,最終的結(jié)果是得到完整的雜種植株。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方法是用滅活的病毒處理。(3)單克隆抗體制備中兩次篩選的目的①第一次篩選:通過選擇培育基篩選出雜交瘤細(xì)胞;②其次次篩選:通過克隆化培育、抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群。典例2下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.電刺激可以誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合或動(dòng)物細(xì)胞的融合B.用花粉離體培育獲得的抗病植株,其細(xì)胞仍具有全能性C.通過體細(xì)胞雜交技術(shù)培育雜種植株的過程不涉及染色體數(shù)目變異D.動(dòng)物細(xì)胞離體培育更需關(guān)注培育基的滲透壓細(xì)胞核移植與克隆動(dòng)物原理動(dòng)物細(xì)胞核的全能性過程應(yīng)用①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁殖;②疼惜瀕危物種,增加存活數(shù)量;③轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;④轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物作為異種移植的供體;⑤人的核移植胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化形成的組織、器官用于組織及器官的移植(1)核移植時(shí)受體細(xì)胞選用去核卵母細(xì)胞的緣由:①卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得以表達(dá);②卵母細(xì)胞體積比較大,簡(jiǎn)潔操作;③卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,養(yǎng)分豐富,能為早期胚胎的形成供應(yīng)養(yǎng)分。(2)用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,由于10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。細(xì)胞核移植技術(shù)中也可直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中,卵母細(xì)胞去核的方法是顯微操作法。典例3(2022·梅州模擬)(多選)進(jìn)行動(dòng)物克隆繁殖的基本過程如下圖所示。下列敘述
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