《貯煙蟲害生物防治技術(shù)規(guī)程-烯蟲酯法》技 術(shù) 報 告

1《貯煙蟲害生物防治技術(shù)規(guī)程_烯蟲酯法》技術(shù)報告《貯煙蟲害生物防治技術(shù)規(guī)程_烯蟲酯法》項目組2 5 5 8 413 4 5一、項目概述據(jù)中國煙草總公司1990年至1991年對貯煙害蟲危害情況的調(diào)查統(tǒng)計[1,2]，次是鱗翅目。常見的蟲種有：煙草甲[Lasiodermaserricorne(Fabric赤擬谷盜［Trboliumcastaneum（Herbst等，以前兩種最常見，危害也最大。蟲孔的存在，導致煙葉成絲率的降低，害蟲排泄物還造60-γ射線輻射防治煙草甲蟲和煙草粉螟，效果不錯，但目前實際推行還有一定的困難。人為地改變空氣中的氣體成分(如向抑制害蟲的發(fā)生，利用除氧劑防治貯煙害蟲也屬這一范疇。常德卷煙廠用止了煙葉霉變及破碎。藥劑防治包括使用熏6也有人開始使用除蟲菊酯類藥劑（如敵殺死等但由于國內(nèi)多數(shù)倉庫密閉性欠技術(shù)的發(fā)展對于改善熏蒸效果有現(xiàn)實意義。菲·莫公司使用植物性殺蟲劑除蟲菊酯控制貯煙害蟲,貴州省用敵殺死防治貯煙害蟲。目前除了化學防護劑受到普遍重視外，天然植物性殺蟲劑的研究也日益受到重視。據(jù)報道[5-8]，菖蒲、土荊芥 1992年駐馬店煙草公司在煙田中利用性誘劑誘捕煙草夜蛾，取得初步效果。從1994年開始，湖北、湖南、云南、福建等煙區(qū)相繼開始了利用性誘劑防治煙草在開發(fā)高效、高選擇性殺蟲劑的過程中，昆蟲生長調(diào)節(jié)劑(InsectGrowth71967年，Williams提出以保幼激素（JH）及蛻皮激素（MH）為主的IGRs素（MH）及其類似物、抗保幼激素、幾丁質(zhì)合成抑制劑、植物源次生物的拒食保幼激素類似物（JHA）是指以昆蟲體內(nèi)保幼激素為先導化合物開發(fā)的具有圖1-1脂肪族類保幼激素的化學結(jié)構(gòu)Figure1-1Chemicalstructureofaliphaticjuvenilehormones8具有保幼激素活性的昆蟲生長調(diào)節(jié)劑(IGR)能抑制昆蟲卵的孵化，促進發(fā)育胚胎發(fā)育不正常，可起到殺卵劑的作用，其生物活性作用主要表現(xiàn)在：1)抑制保幼激素類農(nóng)藥應(yīng)用最廣的是蒙五一五（Methoprene）[21-22]，它是一種昆生活周期。蒙五一五有兩種劑型用于控制煙草甲蟲和煙草粉正常貯存條件下，兩年后仍有效果[24]。在工廠，蒙五一五的Dianex型用作空間噴霧劑，一旦使用，與害蟲有關(guān)的消費者投訴案可減少89%[26]。為了保證防治效果，表面煙塵中的蒙五一五含量9烯蟲酯除了用在煙葉上防蟲以外，在其他很多實驗顯示，Methoprene可以有效地抑制Oryzaephilissurinamensis(L.)，地應(yīng)用于保護貯藏的谷物不受Rdominica的侵襲[27]。它的使用可以有效地降低Rdominica的產(chǎn)卵能力，僅使用很低的濃度即可達到需要的收效。同樣，Methoprene也能應(yīng)用于玉米的貯存[28]。造成貯存玉米病蟲害的害蟲有很多種，Methoprene對于其中的Rdominica的抑制表現(xiàn)出很高的活性準可加入到飲用水中（1mg／kg）防治蚊因而被廣泛地應(yīng)用于淡水棲息地的蚊子的防治(尤其是在澳大利亞)[30]。生物分析數(shù)據(jù)顯示,人工合成的Methoprene能夠作為一種幼蟲殺蟲劑來有效地抑制蚊類昆蟲(如黃熱蚊等)的生長。將其噴灑于水中，制從4英寸到15英尺水深范圍內(nèi)的，不論是清澈的具有高生物活性的脂肪族保幼激素類似物Methoprene對蠅類昆蟲的生長具使用Methoprene，可以干擾果蠅的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、唾液腺和肌肉組織的變形性用Methoprene等脂族類保幼激素類似物作為添加劑制成食餌，可以吸引工蟻將其搬入蟻巢，以使蟻后和其它螞蟻都被感染，從而使Pharaoh’sant的蟻巢內(nèi)的下，對玉米象、赤擬谷盜、書虱防治效果較好，害蟲出現(xiàn)幼蟲→蛹、蛹→成蟲利用保幼激素類似物Methoprne處理天蠶五齡期具有明顯的增絲效果[36]。Methoprne五齡期處理后的繭層量,繭層率和葉絲相對轉(zhuǎn)化率用JH及其類似物處理蜜蜂幼蟲能促進短期的行為的形成[37-38]。前提物質(zhì)的使用，僅許可并嚴格限制磷化鋁的使用。2019年《中共中央、國務(wù)圖1-2《中共中央、國務(wù)院關(guān)于深化改革加強食品安全工作的意見2019》截圖Figure1-2Screenshotof"OpinionsoftheCentralCommitteeoftheCommunistPartyofChinaandtheStateCouncilonDeepeningReformandStrengtheningFoodSafetyWorkin2019"1）高毒性，對人體有危害，磷化鋁易潮解，吸收空氣中的水分后，分解放2）自燃，當溫度超過60℃時會立即在空氣中自燃，與氧化劑能發(fā)生強烈圖1-3技術(shù)路線圖調(diào)研國內(nèi)外烯蟲酯使用的相關(guān)法律法規(guī)、標準文獻。調(diào)研國內(nèi)外烯蟲酯添加工藝，考察行業(yè)打葉復(fù)烤等工藝線，為添制備含烯蟲酯的溶液和煙草的梯度樣品，在行業(yè)內(nèi)分別考察S/R-烯蟲酯和S-烯蟲酯對煙草甲和煙草粉螟生物活性的影響，根據(jù)試驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析，獲得烯蟲酯治理煙草蟲害最優(yōu)有效實際濃度，總結(jié)烯蟲酯在煙葉上的衰減規(guī)律，評估烯蟲酯治理蟲害的法、添加量等影響因素，提出生物防蟲技術(shù)應(yīng)用的良好生產(chǎn)規(guī)范（GMP）和關(guān)二、研究報告GB/T20478-2006《植物檢疫術(shù)語》描述為：生物防治，利用活的天敵、拮利用活天敵、拮抗生物、競爭性生物或其他本項目采納了GB/T27614的定義，且增加廣義的“生物防治”的內(nèi)容，定義變態(tài)，自Roller等(1967)分離鑒定了第一個保幼激素以來，迄今滯育的重要圖2-1烯蟲酯的化學結(jié)構(gòu)Figure2-1Chemicalstructureofmethoprene微溶于水，25℃時水中溶解度為1.39mg/L；其蒸氣壓為2.36×10-4mmHg動物長期口服烯蟲酯也未發(fā)現(xiàn)導致癌癥；實驗動物在懷孕前和/或懷孕期間接觸烯蟲酯的定義，暫時未見標準的定義，本項目主要依據(jù)ChemSpider搜索后一個為化學相關(guān)學者與從業(yè)人員提供化學結(jié)構(gòu)式等相關(guān)訊息的在線搜索服務(wù)網(wǎng)insectgrowthregulator,interfereswithaninsreachingmaturityorreproducing,isabiologicalpesticide.MedChem本項目擬對S-烯蟲酯的定義為：S-(+)-烯蟲酯是烯蟲酯一種手性異構(gòu)體。GB/T8321.8-2007《農(nóng)藥合理使用準則》曾許可烯蟲酯在“倉儲煙葉”范疇使用量10mg/kg和每支卷煙重為0.GB/T23220.2-2023《煙葉儲存保管方法第2部分根據(jù)片煙流量在打葉復(fù)烤落料口均勻施加S-烯蟲YQ50《煙葉農(nóng)藥最大殘留限量》規(guī)定了煙葉中烯蟲酯最大殘留量為2003年7月4日向世界貿(mào)易組織各成員通報了一項關(guān)堃,章強華.歐盟、美國、日本食品中豁免物質(zhì)的比較研究[J].農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準,2009(01):49-51.圖2-2歐美等國家和國際組織對于烯蟲酯的政策措施Figure2-2PolicymeasuresofEuropeanandAmericancountriesandinternational以在美國蛀蟲控制上烯蟲酯得到了廣泛及長期的應(yīng)用[45-47]。線蟲病害[50]，GregoryJ.等人研究了烯蟲酯對倉儲谷物蠹蟲防治的影響[51,52]等。國際上已經(jīng)開始使用更純的S-烯蟲酯，S-烯蟲酯近年來也得到較多的應(yīng)用[53]，圖2-3國外烯蟲酯應(yīng)用領(lǐng)域Figure2-3ApplicationFieldsofMethopreneAbroad我國煙草行業(yè)早在上個世紀九十年代就開展了相關(guān)研究，湖南中煙在本世了以香茅醛和乙酰乙酸乙酯為原料合成烯蟲酯新方法,縮短了反應(yīng)工藝流程,提高高等問題。在2017、2018年湖南中煙擴葉復(fù)烤應(yīng)用后的蟲害防治效果，隨后從2020年開始，甘肅煙草、江蘇中煙、吉本項目對烯蟲酯樣品進行毒理學試驗和安全性評估，測定了大鼠急性經(jīng)口蟲酯(Methoprene)殘留物殘留限量的最終法規(guī)，將其列為豁免物質(zhì)。殘留限量沒有繼續(xù)存在的必要，烯蟲酯相關(guān)的用途在免除除，以前進行過重估。該文件采取的法規(guī)措施不涉及經(jīng)1996表2-1其它國家、國際組織關(guān)于食品中烯蟲酯的殘留限量規(guī)定Table2-1Othercountriesandinternationalorganizations'residuelimitregulationsformethopreneinfood日本國際食品法典委員會韓國澳大利亞食品名稱限量指標食品名稱限量指標食品限量指標食品限量指標（mg/kg）（mg/kg）名稱（mg/kg）名稱（mg/kg）大麥5稻40稻5谷物2小麥蕎麥小麥粉（全谷除外）小麥粉（限于全谷）大米（糙米）玉米油奶豬肉雞肉552550.20.050.10.1谷物肉肉乳玉米油小麥糠禽蛋可食用下水家禽肉家禽可食用內(nèi)臟0.20.1200250.020.020.020.02高粱大麥黑麥哺乳動物肉哺乳動物副產(chǎn)品5550.20.1小麥小麥糠5PESTICIDERESICUES）于2021年3月收到了動物代謝、植物代謝和環(huán)境及供水系統(tǒng)的食用或使用烯蟲酯后的研究報告，給出的意見為“TheInternationalsevencommodities,were20-40%ofthGEMS/Foodregionaldiets.”我們將（2E4E7S/R）烯蟲酯送檢“湖南省勞動衛(wèi)生職業(yè)病防治所”和“青島斯表2-2烯蟲酯大鼠急性經(jīng)口毒性試驗結(jié)果Table2-2AcuteOralToxicityTestResults雌50雄50生活常用品食鹽更低；經(jīng)對比可知，烯蟲酯（2E4E7S/R）和烯蟲酯（2E4E7S）圖2-4烯蟲酯與其它物質(zhì)成分LD50的比較Figure2-4ComparisonofLD50betweenmethopreneandothersubstance研究所”，進行了烯蟲酯藥液的鼠傷寒沙門氏菌誘變性試驗。具體檢測方法見生表2-3烯蟲酯的鼠傷寒沙門氏菌誘變性試驗結(jié)果Table2-3ResultsofthemutagenicitytestforSalmonellatyphimuriuminducedbymethoprene表2-4烯蟲酯誘發(fā)體內(nèi)紅細胞微核率(?)Table2-4Micronucleusrateofredbloodcellsinducedbyf組別微核率(?)空白對照陽性對照37.0±4.87.03mg/kg14.3±5.314.06mg/kg16.6±2.8微核檢測。送檢樣品為兩種，一種為對照卷試驗方案是按照軍事醫(yī)學科學院制訂的相關(guān)標準執(zhí)行的，按標準吸煙條件圖2-5兩種卷煙對Beas-2B細胞增殖的影響Figure2-5EffectsoftwotypesofcigarettesontheproliferationofBeas-2BcellsTable2-6MutagenicitytestresultsofSalmonellatyphimuriumintwotypesof苯并（a）芘±±±55±±±±95±±±±935表2-7兩種卷煙卷煙CSC誘發(fā)細胞微核率(?)Table3-15Cellmicronucleusratesinducedb組別及劑量微核率空白34.2±7.4環(huán)磷酰胺94.9±11.2IC5071.3±10.01/2IC5063.2±15.0對照煙1/4IC5056.5±7.11/8IC5045.6±9.3IC5065.6±7.41/2IC5061.3±9.9實驗煙1/4IC5047.4±8.71/8IC50（1）烯蟲酯藥劑雌、雄大鼠急性經(jīng)口半數(shù)致死劑量（LD50）均大于5000（2）烯蟲酯在受試劑量下的藥液對鼠傷寒沙門氏菌的致突變和誘發(fā)體內(nèi)紅（3）添加了烯蟲酯的卷煙煙氣冷凝物（CSC）的細胞毒性和體外細胞微核（4）國際食品法典農(nóng)藥殘留委員會CCPR（CODEXCOMMITTEEONPESTICIDERESICUES）于2021年3月收到了動物代謝、植物代謝和環(huán)境及供水系統(tǒng)的食用或使用烯蟲酯后的研究報告，做出結(jié)論“TheMeetinthelong-termintakeofresiduesofmethopreneresultingfromitsbeenconsideredbyJMPRJMPRdecidedthatanARfDisunnecessary.TheMeetingtherefshort-termintakeofmethopreneresiduesisunlikelytopresentapublichealth”煙草甲（Lasiodemaserricorne(Fa,卵卡b,卵卡放大后的情況Figure3-1:Theeffectofsoakingeggmethodonthehatchingoftobaccobeetleeggs化為幼蟲。取出經(jīng)過消毒處理的煙葉片，用孔徑1.3cm的打孔器，制作成葉碟干，分別置于24孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)板蓋中加濾紙保濕，每個處理重復(fù)3板。用小毛筆將煙草甲初孵幼蟲，分別接入已經(jīng)放入浸Figure3-2:Theeffectofleafsoakingmethodonthegrowthanddevelopmentof入煙葉片段收集卵塊，置于溫度28±1℃,相對濕度70%±5%的條件下培養(yǎng)和觀Figure3-3:Theeffectoftestingagentsonthereproductiveabilityofadult采用PROCANOVA進行方差分析，差異顯著性測驗采用鄧肯新復(fù)極差法。毒力回歸曲線采用PROCPROBIT計算，求出LC50和LC95及其置信限。的抑制孵化效果相當，當濃度為5ppm時煙草甲卵死亡率均高于80％，表明兩Table3-1Inhibitioneffectofpesticidesontobaccobeetleeggs15Table3-2ComparisonofLC50andLC95fortheinhibitionoftobaccobeetleeggsbypesticides標準品0.1201+0.0926X0.7770(0.0327-2.1314)24.5738(6.5782-23473.9314)-0.6933+2.3523X1.9712(1.5113-2.6322)9.8628(6.1611-22.9890)試驗結(jié)果（表3-3和表3-4）表明：與對照相比，自制樣品和烯蟲酯標準品煙葉片，煙草甲幼蟲化蛹的數(shù)量顯著低于對照，經(jīng)56d發(fā)育，對照已全部完成羽化，取食5ppm藥量處理的煙葉片的幼蟲Table3-3EffectsofChem/60.4±10.4////56.3±2.10.0±0.02.1±2.1//50.0±0.01.4±1.4//Table3-4Effectsofpesticidesontheemergenceoftobaccobeetles42d/0.552.1±2.1/2.1±2.10.0±0.0/5Table3-5Effectsofpesticidesonthereproductiveabilityoftobaccobeetleadults煙草粉螟（EphestiaelutellaHubner長沙市卷煙廠煙草倉庫采集，并在室5d后檢查記載煙草粉螟幼蟲死亡情況，計算死亡率，并根據(jù)機率值分析法求出每濃度3次重復(fù)。處理完畢，用黑布將杯口蓋住，置于溫度25±5℃、相對濕度3齡幼蟲10頭，4次重復(fù)。處理完畢，用黑布將煙草粉螟成蟲羽化后，于產(chǎn)卵箱內(nèi)進行單對培養(yǎng)，3d后在箱中放入成束捆將供試藥劑按(1)的方法對煙草粉螟幼蟲進行毒力測定，得結(jié)果見表Table3-6ToxicitytestresultsofmethopreneontobaTable3-7Resultsofthedeterminationoftheeggkillingactivityofmethopreneagainst（95％CL）(mg/L)％，Table3-8Effectsofmethopreneonthegrowthanddevelopmentoftobaccoborer注：用Duncan’s新復(fù)極差測驗，同及標準品處理煙草粉螟后，成蟲每雌產(chǎn)卵量分別為50.50粒和42.25粒，差異較Table3-9EffectsofmethopreneontheReproductiveCapacityofTobaccoBorer64采用S-烯蟲酯或S/R-烯蟲酯持續(xù)處理煙草螟1齡幼蟲，在藥劑濃度2.5圍內(nèi)，當藥劑濃度大于等于10mg/kg時，可殺滅全部幼蟲，死亡蟲態(tài)為幼蟲，隨著劑量升高幼蟲致死時間縮短。在2.5mg/kg藥劑濃度下，有12.2%的幼蟲存活并發(fā)育至成蟲，在5mg/kg藥劑濃度下，有6.1%得幼蟲存活并發(fā)育至成蟲，（1）5mg/kg的烯蟲酯處理對煙草甲和煙草粉螟卵的孵化有顯著的抑制作用，其中，5mg/kg烯蟲酯處理后7d，煙草甲和煙草粉螟卵校正死亡率％；80%。毒力測定結(jié)果顯示，烯蟲酯對煙草甲和煙草粉螟卵的毒力較高，其LC50（2）幼蟲的致死效果隨著濃度的增加而增加，大于5mg/kg的烯蟲酯處理（4）烯蟲酯屬保幼激素類似物，能干擾昆蟲正常的生長發(fā)育，抑制成蟲化值，綜合各項生物活性實測數(shù)據(jù)和實際操作過程損失等情況，本項目推薦采用標準儲備液：準確稱取烯蟲酯標準品（精確至0.1mg用無水乙醇配制成5mg/mL儲備液。于4℃冰箱中避光保存。稱取1g煙絲或粉碎的煙葉，精確至0.1mg，置于50mL棕色錐形瓶——進樣口溫度：280℃?！獋鬏斁€溫度：280℃?！婋x能量：70eV?！獪y定方式：選擇離子監(jiān)測方式（SIM）掃——溶劑延遲：3min。圖4-1不同溶劑回收率Figure4-1Recoveryratesofdifferentsolvents進行GC/MS分析。超聲提取時間對樣品中烯蟲酯的提取效果如圖4-2所示，從圖4-2不同提取時間的回收率Figure4-2Recoveryratesatdifferentextrac將系列的標準溶液進行GC/MS分析后，以烯Figure4-3ExampleofionchromatographyforstandardsoluTable4-2Recoveryratean/(%)/(%)/(%)式中：Xi——試樣中烯蟲酯含量，單位為毫克每千克（mg/kgCi——由標準工作曲線得出的試樣中烯蟲酯濃度；單位為微克每升(μg/mLCi0——由標準工作曲線得出的空白中烯蟲酯濃度；單位為微克每升(μg/mLV——萃取液體積，單位為毫升（mLI——稀釋倍數(shù)；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。以兩次平行測定的平均值作為最終檢測結(jié)果，精確至0.1mg/kg。兩次平行測定結(jié)果的相對平均偏差應(yīng)小于10%。式中：Yi——試樣中S-(+)-烯蟲酯含量，單位為毫克每千克（mg/kgCi——由標準工作曲線得出的試樣中（S/R）烯蟲酯或S-(+)-烯蟲酯濃度；單位為微克每升(μg/mLCi0——由標準工作曲線得出的空白中（S/R）烯蟲酯或S-(+)-烯蟲酯濃度；單位為微克每升(μg/mLV——萃取液體積，單位為毫升（mLK——S-(+)-烯蟲酯占比，產(chǎn)品定性結(jié)果為（S/R）烯蟲酯時，K為S-(+)-烯蟲酯占（S/R）烯蟲酯的比例，產(chǎn)品定性結(jié)果為S-(+)-烯蟲酯時，K取1；w——片煙水含量，單位為百分號；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。以兩次平行測定的平均值作為最終檢測結(jié)果，精確至0.1mg/kg。兩次平行測定結(jié)果的相對平均偏差應(yīng)小于10%。（2S/R）烯蟲酯標準溶液——流動相：等度，正己烷/異丙醇=99.8:0.——柱溫：室溫?！獧z測波長：270nm對分離手性化合物經(jīng)常使用的ChiralcelOD、OJ、AD、AS、DaicelFigure4-4(R/S)chromatogramofthestandardsampleoffenpropathrinFigure4-5ChromatogramofS-fenpropathrinstandardsample進行了多次不同比例的試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在正己烷/異丙醇=99.8:0.2時，烯蟲酯定性分析結(jié)果描述為：樣品為S-烯蟲酯，或樣品為烯蟲酯，或樣品不是烯峰面積S?+?烯蟲酯峰面積S?+?烯蟲酯峰面積S?+?烯蟲酯+峰面積R?烯蟲酯式中：K——樣品中S-(+)-烯蟲酯占比，即S-(+)-烯蟲酯占（S/R）烯蟲酯的比例，一般為0.5。（1）由于烯蟲酯存在立體異構(gòu)和手性旋光異構(gòu)體，我們采用了不同的方法（2）本報告采用LC法對烯蟲酯進行手性拆分定性分析，主要用于批量采更加便于復(fù)烤企業(yè)等開展檢測工作，因此，當采用2.性之后（通常工業(yè)企業(yè)技術(shù)中心都具備LC儀器和檢測能力本報告擬再采用法被CIPAC采納，CIPAC/5359/mS-Methoprene(June,2023)注腳說明：CIPACprovisionalmethod2023.BasedonamethodsuppliedbySynergeticaChangzhouLtd.英國皇家化學學會(RoyalSocieTable5-1HalflifeofmethopreneunderdifferentconditionsMassAmount(percent)Half-Life(hr)AirWater0烯蟲酯：烯蟲酯-廣西昊旺生物科技有限公司；烯蟲酯（S）-勝杰生命科技標準儲備液：準確稱取烯蟲酯標準品（精確至0.1mg用無水乙醇配制成5mg/mL儲備液。于4℃冰箱中避光保存；酸棕櫚酸酯7.5g后放入燒杯中，量取75ml乙醇放入燒杯中充分溶解各組分，灑在10kg煙絲上，得到烯蟲酯濃度為50mg/kg勻噴灑在10kg煙絲上，得到烯蟲酯濃度為20mg/kg的煙絲樣品；取40將（1）的所有樣品分別置于見光的環(huán)境中，存放一定時間后，分別蕩1h后，加入適量無水硫酸鈉，靜置過夜，然后把錐式中：Y為半衰期，X為時間周期Table5-4Changesintheconcentrationofmethopreneafterstorageofsolutionsacertainperiodoftime16Figure5-1AttenuationcurveofmethopreneinaqueoussolutionTable5-5Changesintheconcentrationofmethopreneinsoluultravioletlightforacertainperiodoftime06Figure5-2Attenuationcurveofmethopreneunderstrongultravioletlight將水溶液樣品2-4放置在強紫外等照射下15min，烯蟲酯濃度對存放時間作Table5-6Changesintheconcentrationofmethopreneinstemperatureforacertainperiodoftime0369與初始濃度的比值（%）Figure5-3AttenuationcurveofimidaclopridunderhightemperatureTable5-7:Changesinmethopperiodoftime取樣時間16905003-3#10mg/kg9.568.375.544.523.473-2#20mg/kg9.589.287.593-1#50mg/kg51.1643.6535.820.15Figure5-4AttenuationcurveofmethopreneintobaccounderlightavoidanceTable5-8Attenuationequationfordifferentconcentrationsofmethoprenein覆蓋兩層麻袋片，整體避光保存，持續(xù)監(jiān)測500d，烯蟲酯濃度對存放時間作圖（圖5-4我們發(fā)現(xiàn)在較低濃度水平下（100ppm以下）濃度越低烯蟲酯衰減速Figure5-5Trendofhalf-lifeofmethopreneintobaccounderdarkconditionsovertime完成，烯蟲酯的添加工藝采用本報告2.6的方法，2016年、2017年兩個烤季每Table5-8Residualdetectionoftobaccocontainingmethopreneinactualwarehousetes（月）5（mg./kg)Figure5-6AttenuationcurveofmethopreneintheactualwarehousetestFigure5-7Trendofhalf-lifeofmethopreneintobaccowithtimeintheactualwarehousetest從烯蟲酯生物活性和長期跟蹤烯蟲酯衰減來看，烯蟲酯（添加比例為10mg/kg時）在長達6年的時間內(nèi)仍然保持一個對于煙葉倉儲來說藥效期已經(jīng)足夠，可見烯蟲酯非由圖5-6衰減趨勢預(yù)測可知，36月（3年）后，煙草中烯蟲酯的濃度約殘留>2mg/kg，由本報告2.3可知，這個濃度下烯蟲酯仍然保持一定的生物活性，對烯蟲酯的衰減影響因素較多，紫外光的影響較大，初始濃度也有較大影響，溫量的粘附，采用現(xiàn)有的加料工藝，添加比例過?。╬pm級而且，在添加烯蟲1.儲料罐2.料液輸送管3.液位顯示器4.壓力變送器5.清洗水排水管6.進Fig.6-1StructuralsketchofmicrosprayfeedingsystFig.6-2WorkingdiagramofthejetsFig.6-3Distributiondiagramofthejets由圖6-4可見，噴淋加料系統(tǒng)安裝在烤片機下料口至落葉振槽之間。該區(qū)間Fig.6-4Positionofthemicrosprayfeedingsystem試劑：2E、4E-Methoprene（40596-69--Ei=Mic×100%E=nmi?MiEi=Mic×100%E=nTab.1Testingschemeforaccuracyofthemicrosprayfeedingsystem序號/‰片煙重量M/kg/kg/kg123456789330.402采用烯蟲酯替代文獻中的標記物丙二醇。加料均勻系數(shù)CU（Coefficient采用湘西龍山C3F-A煙葉進行打葉復(fù)烤試驗，固定片煙流量為7000kg/h，采用參考文獻[58]中的方法檢測料液有效利用率，采用烯蟲酯替代文獻[58]中采用湘西龍山C3F-A煙葉進行打葉復(fù)烤試驗，固定片煙流量為9000kg/h，Tab.6-2Averagerelativeerrorofthemicrosprayfeedingsystem/‰/%123456789根據(jù)2.6.2（4）的方法完成試驗，由表6-3Tab.6-3Feedinguniformityofmethopr123Fig.6-5Influenceofdamperonfeedinguniformity根據(jù)2.3.2（5）的方法完成試驗，由表6-4利用率影響較大。在排風風門關(guān)閉狀態(tài)下，噴淋加料系統(tǒng)的料液有效利用率達92.6%；當風門全開時會導致烤片機內(nèi)形成較大負壓，霧化的料液可能隨負壓排Tab.6-4Effectiveutilizationofthemethoprenesolution123加料后成品片煙含水率符合《YCT147－2010打葉煙葉質(zhì)量檢驗》[59Tab.6-5Influencetothemoistureoffinishedtobaccostripbythemicr0/定期對兩個庫房進行蟲情監(jiān)控，由圖6-6可見，烯蟲酯的防蟲效果優(yōu)于磷化Fig.6ComparisonofinsectcontroleffectofMethopreneandHydrogenphosphide（2）烯蟲酯加料后片煙含水率變化<±0.1%，烯蟲酯藥液的添加對片煙含水（3）該加料系統(tǒng)設(shè)計靈活，可拆卸并可兼顧無需加料時的其他正常生產(chǎn)，添加工藝可行性較強，在煙葉其它物料微量添加（4）在煙葉貯存過程中，相比磷化氫熏蒸法，烯蟲酯處理的貯煙具備更好本項目負責《貯煙蟲害生物防治技術(shù)規(guī)程烯蟲2022烤季9.29萬擔云南保山2萬擔湖南吉首復(fù)烤廠7.29萬擔湖南郴州、云南保山、云南大理、貴州畢節(jié)具備烯蟲酯臨時添加能力和經(jīng)驗Table7-1Uniformityofonlineadditionofmethoprenen=24n=11n=26n=10Table7-2F-testforuniformityofonlineadditionofmethopreneF組內(nèi)（誤差）2Table7-3EffectiveutilizationrateofonlineadditionofmethopreneFigure7-1ComparisonofinsectinfestationintobaccostorageusingthemethodsofmethopreneandphosphinefumigatFigure7-2Distributionofinsectsintobaccostorageusingthemethodofmethoprene項目牽頭承擔單位湖南中煙對已采用和未采用烯蟲酯處理的片煙進行了對由湖南中煙趙瑜等5位評委參加評價，綜合評價在存放一定時間后（8個月添加10mg/kg烯蟲酯的片煙與對照在感官評吸方蟲酯殘留的卷煙，于2024年8月對已添加和未添加烯蟲酯處理的卷煙（白沙-硬紅運當頭）進行了對比感官評吸，由湖南中煙傅見山、胡國昌等加評價，綜合評價意見如表7-5所示，結(jié)果表明，添加5mg/kg烯蟲酯的卷煙與節(jié)此外具備烯蟲酯臨時添加能力和經(jīng)驗的復(fù)烤廠還有3家（福建三明、福建2.烯蟲酯在線添加的均勻性系數(shù)高于70%，F(xiàn)樣品中烯蟲酯是均勻的，藥液有效利用率可超80%，成品片煙含水率變化值<3.烯蟲酯法和磷化氫熏蒸法煙倉儲蟲情對比結(jié)果表明，在近二十個月的長4.感官評價綜合結(jié)果表明，烯蟲酯法片煙與對照片煙無顯著差異，采用烯Table7-4ComparisonandEvaluationofSensoryQualityofSingleIngredientTob樣品年度香氣特征煙氣特征吃味特征燃燒灰色描述香型風格特征香氣香氣透發(fā)雜氣濃度細膩勁頭刺激余味甜度干燥干凈程度2020中3.57.06.57.05.07.07.0342#2020中3.57.06.57.05.07.07.034注：1#為2020貴州C3F添加10mg/kg烯蟲酯存放8個月，2#為2020貴州C3F未添加烯蟲酯存放8個月Table7-5ComparisonandEvaluationofSensoryQualityofCigaretteswithandwithoutMeth項目樣品編號光澤（5）香氣（32）協(xié)調(diào)（6）雜氣（12）刺激性（20）余味（25）合計ⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢ5433228246548202522205.029.05.022.590.02#5.029.05.022.590.0注：1#為2024年湖南中煙白沙（硬紅運當頭）卷煙成品，2#為煙絲添加了5mg/kg烯蟲酯的白沙（硬紅運當頭）試制卷煙以及應(yīng)急處置方法等規(guī)范性技術(shù)規(guī)程，形成了《貯煙蟲害生物防治技術(shù)規(guī)程烯考慮到烯蟲酯或S-烯蟲酯都存在較好的生物活性，本標準項目推薦使用2E4E（7S/R）烯蟲酯和2E4E（7S）烯蟲酯，未特定推薦2E4E（7S）烯蟲酯，本文件規(guī)定了采用烯蟲酯或S-烯蟲酯防治貯煙蟲害的通用技術(shù)要求，包括烯蟲酯產(chǎn)品要求、烯蟲酯藥液要求、添加工藝注：作為安全衛(wèi)生指標的鄰苯二甲酸酯檢測方法原文引用YQ方法，作為本標準的附件A。GB5009.74食品安全國家標準食GB5009.76食品安全國家標YC/T31煙草及煙草制品試樣的制備和YC/T31提供烯蟲酯片煙貯存的基本要求，引用GB/T27614、GB/T20478提供要求的檢測方法，引用YC/T30-20180提供片煙倉儲蟲害應(yīng)急處置規(guī)則，引用YC/T353提供烯蟲酯添加技術(shù)要求GB/T20478-2006《植物檢疫術(shù)語》描述為：生物防治，利用活的天敵、拮利用活天敵、拮抗生物、競爭性生物或其他和類生物技術(shù)來控制有害生物群體的增殖，以達到壓低甚至消滅有害生物的目變態(tài)，自Roller等(1967)分離鑒定了第一個保幼激素以來，迄今滯育的重要昆蟲正常生長發(fā)育而使昆蟲個體死亡或生活能力減弱的一類化合物，包括昆蟲烯蟲酯的定義，暫時未見標準的定義，本項目主要依據(jù)ChemSpider搜索后翻譯而得，ChemSpider：隸屬英國皇家化學學會(RoyalSocietyofChemistry,insectgrowthregulator,interfereswithaninsreachingmaturityorreproducing,isabiologicalpesticide.MedChem本項目擬對烯蟲酯的定義為：烯蟲酯是一種保幼激素（JH）類似物，不會鑒于農(nóng)村農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥管理司將烯蟲酯歸類為生物化學農(nóng)藥（如下圖其管“用于貯煙蟲害生物防治的烯蟲酯產(chǎn)品應(yīng)具備農(nóng)藥登記證、生產(chǎn)許可證、質(zhì)量標準證等證明，符合國家生物農(nóng)藥管理條例。”YQ標準無法在YC標準中引用，因此最終“烯蟲酯產(chǎn)品中除烯蟲酯主成分外，其它添加成分應(yīng)符合煙草行業(yè)煙Table1SafetyandHeal項目單位檢測方法重金屬（以Pb計）mg/kg≤10.0GB5009.74砷（以As計）mg/kg≤3.0GB5009.76或GB5009.11鄰苯二甲酸酯注（總量）mg/kg≤100.0YQ/T39（作為附錄給出）*鄰苯二甲酸酯主要包括鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯異丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯、鄰苯二甲酸二(4-甲基-甲酸二(2-乙氧基)乙酯、鄰苯二甲酸二戊酯、鄰苯二甲酸二己酯二(2-丁氧基)乙酯、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯、鄰苯二甲注：由于行業(yè)內(nèi)鄰苯二甲酸酯的測定方法為YQ標準，本標準無法引用，擬定將YQ標準作為本標準的附錄A。農(nóng)業(yè)部國家發(fā)展和改革委員會公告第946號對農(nóng)藥產(chǎn)品有效成分含量的管50（克/升四）有效成分含量＜10%（或100克/升）的農(nóng)藥產(chǎn)品（包括相同配比的混配制劑產(chǎn)品其有效成分含量的變化間隔不得小于有效成分含量的50%。中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第11根據(jù)打葉復(fù)烤烯蟲酯添加工藝研究結(jié)果，項目組推薦烯蟲酯配制藥液的濃度為液相色譜法對烯蟲酯進行定性分析，附錄C采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對烯蟲酯中抽取樣品一份，不足三個獨立包裝單元則每個獨定性結(jié)果不是烯蟲酯的，判定整批不合格。定性結(jié)果為烯蟲酯的，按照附錄B判定標準為：原包裝標識含量×105%≥烯蟲酯含量檢測結(jié)果≥原包裝標識含量×90%注。注：GB5009.295-2023《食品安全國家標準化學分析方法驗證通則》中分析方法的正確度要求：在濃度為>1g/kg（質(zhì)量分數(shù)）時，對方法正確度的要求是相對偏差為-10%~+5%。烯蟲酯產(chǎn)品的最低濃度要求是5%，因此，判定原則為：原包裝標示含量×105%≥烯蟲酯含量檢測結(jié)果≥原包裝標示含量×90%。置清晰地標明生產(chǎn)日期和安全使用期或者失5.1.1用于配制烯蟲酯藥液的烯蟲酯產(chǎn)品應(yīng)為符合配制烯蟲酯藥液所采用的溶劑應(yīng)符合國家相關(guān)規(guī)定。推薦使用乙醇和水作制藥液時如需添加其它成分，應(yīng)符合煙草行業(yè)煙草添加劑許可使用要求或符合GB注1：《危險化學品目錄（2015版）實施指南》中危險化學品分類信息表條目2828注釋3中的規(guī)定“條目2828，閃點高于35℃,但不超過60℃的液體如果在持續(xù)燃燒性試驗中得到否定結(jié)果，不作為易燃液體管理?！薄Ｎ墨I[60]研究表明，酒精溶液燃燒的臨界質(zhì)量分數(shù)為36.25%，質(zhì)量分數(shù)低于36.25%的酒精溶液雖然不可燃。注2：烯蟲酯2.5%乙醇20%的水溶液閃點實測值為37.5℃（平均值）5.1.4配制好的烯蟲酯藥液不應(yīng)出現(xiàn)沉淀、分層和絮凝等現(xiàn)象。烯蟲酯藥液配制對于烯蟲酯產(chǎn)品含量檢測的取樣、檢測和判定處置法用GC-MS對樣品中的烯蟲酯進行定量分析；單元樣品，每個獨立包裝單位中抽取樣品一份，每份樣品體積為8mL~12mL，迅速藥液中烯蟲酯含量檢測結(jié)果合格判定標準為：設(shè)計值×105%≥烯蟲酯含量檢測結(jié)果≥設(shè)計值×90%注，否則判定為整批不合格，并重新配制藥液。注：同前期試驗實施過程中，如本報告2.6“烯蟲酯的煙草添加工藝研究”的研究結(jié)果表明，添加烯蟲酯的加料系統(tǒng)加料平均相對誤差在1片煙含水率變化<±0.1%，烯蟲酯藥液的添加對片煙含水率基本無影響，成品片根據(jù)本報告2.6“烯蟲酯的煙草添加工藝研究”的研究結(jié)果形成附錄E，本標6.1.2添加設(shè)備工作時，不應(yīng)出現(xiàn)液滴、管道堵塞和破裂等現(xiàn)象，每次工作前應(yīng)6.1.3宜采用微量加料系統(tǒng)來進行烯蟲酯藥液的添加，微段，減少烯蟲酯在過程中的損失，添加烯蟲酯的工藝實施6.2.1烯蟲酯藥液可在打葉復(fù)烤生產(chǎn)過程在線添加，也可選取其它合適的添加工在出口下料至烤片機尾落葉振槽之間的區(qū)間，但不本文2.3“烯蟲酯的生物活性研究”的研究結(jié)果表明，5mg/kg的烯蟲酯處理減規(guī)律”結(jié)果表明，烯蟲酯在煙葉中的呈現(xiàn)緩慢衰減的規(guī)律，同時考慮到烯蟲酯能相對較低，本文2.7“實倉試驗實施的效果驗證”根據(jù)多家工業(yè)企業(yè)試驗實施的6.3.2烯蟲酯藥液在打葉復(fù)烤在線添加均勻性系數(shù)應(yīng)≥70%，均勻性系數(shù)CU參6.3.3烯蟲酯藥液在打葉復(fù)烤在線添加有效利用率應(yīng)≥70%，有效利用率Q按公按照附錄C的規(guī)定測定樣品中烯蟲酯含量，結(jié)果以S-烯蟲酯計，GB/T23220.2-2023已在YC/T205和YC/T300基礎(chǔ)上進行了更進一步的完善，23220.2描述的“煙垛加蓋防蟲網(wǎng)”，本標準未做強制性規(guī)范要求。擬定片煙入庫7.1.2添加烯蟲酯的片煙宜單獨成庫貯存，不具備單獨成庫能力的應(yīng)與其他殺蟲確保良好的蟲害防治效果。本文2.3“烯蟲酯的生物活性研究”的研究結(jié)果表明，5mg/kg的烯蟲酯處理對煙草甲和煙草粉螟卵的孵化有顯著的抑制作用；本文2.5“烯蟲酯的穩(wěn)定性與衰減規(guī)律”結(jié)果表明，雖然烯蟲酯的推薦添加比例為酯在煙葉倉儲期具備一個較高活性的濃度，在滿足GB/T23220.2-2023《煙葉儲存保管方法第2部分：片煙》的規(guī)范要求以外，本標準擬對入庫的片煙新增了法用GC-MS對樣品中的烯蟲酯進行定量分析按照GB/T23220.2-2023中5.3.2規(guī)定的取樣方法抽取樣品件數(shù)，再從樣件中隨烯蟲酯含量檢測結(jié)果≥5.0mg/kg判定為片煙入庫烯蟲酯含量檢測項合