2024年華師大新版選修1生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年華師大新版選修1生物上冊月考試卷917考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列關于蛋白質(zhì)性質(zhì)的敘述中，不會影響到蛋白質(zhì)的泳動速度的是A.蛋白質(zhì)分子的大小B.蛋白質(zhì)分子的密度C.蛋白質(zhì)分子的形狀D.蛋白質(zhì)分子的等電點2、某研究小組欲研究被石油污染過的土壤中細菌的數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是A.稱取和稀釋被污染的土壤時應在火焰旁B.用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基進行篩選C.分離菌種時可采用稀釋涂布平板法接種D.對細菌進行計數(shù)時宜采用平板劃線法接種3、下列有關分解纖維素的微生物的分離的敘述，不正確的是（）A.纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法B.對分解纖維素的微生物進行了初步篩選后無需再進行其他實驗C.纖維素酶的測定方法，一般是對所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定D.纖維素酶是一種復合酶4、以下關于植物克隆的說法正確的是A.從莖尖、腋芽開始的植物組培可以不經(jīng)過愈傷組織B.離體組織為起點的胚胎發(fā)生途徑，可以不經(jīng)過脫分化和再分化C.針對莖尖開始的發(fā)芽培養(yǎng)基包含相對較少的BA和相對較多的NAAD.在植物組培的繼代培養(yǎng)中，將一直保留其原有的遺傳特性5、下列關于胡蘿卜素的敘述，正確的是（）A.胡蘿卜素的化學性質(zhì)不穩(wěn)定，易揮發(fā)B.胡蘿卜素易溶于乙醇，微溶于石油醚C.所有胡蘿卜素都包含有多個碳碳雙鍵D.胡蘿卜素的提取效率與顆粒含水量成正比6、酶制劑、固定化酶、固定化細胞已經(jīng)廣泛應用于各個領域，下列敘述正確的是（）A.用于治療消化不良癥的腸溶多酶片含有多種消化酶，但嚼服后會失去療效B.固定化酵母細胞的常用方法是吸附法，這種方法對酵母細胞活性影響最小C.固定化酶的應用中，要控制好pH、溫度、溶解氧和營養(yǎng)條件D.固定化細胞用于生產(chǎn)胞外酶和分泌到胞外的產(chǎn)物7、下列關于凝膠色譜法原理的敘述，錯誤的是（）A.凝膠是微小的多孔球體，大多數(shù)是由多糖類化合物構成的B.交聯(lián)葡聚糖凝膠(G-75)中的75表示凝膠的得水值C.相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠顆粒外部移動D.相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)只能在凝膠顆粒內(nèi)部移動評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)8、圖1表示制備固定化酵母細胞的有關操作；圖2是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵的示意圖。下列敘述正確的是。

A.剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應迅速與活化的酵母菌混合制備混合液B.圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠C.圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸D.圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中9、為探究不同糖源（蜂蜜、黃冰糖）對藍莓酒發(fā)酵產(chǎn)物的影響，某研究小組研發(fā)出如下的藍莓酒發(fā)酵工藝，其中“主發(fā)酵”時酵母菌會繁殖、大部分糖的分解和代謝物會生成，“后發(fā)酵”是在低溫、密閉的環(huán)境下藍莓酒會成熟。下列敘述錯誤的是（）

A.菌種甲在產(chǎn)生CO2的同時會產(chǎn)生酒精B.切片后需對發(fā)酵液進行消毒然后再分組C.倒罐均需保留空間以促進菌種有氧呼吸D.主發(fā)酵要控制無氧，后發(fā)酵要控制有氧10、下列關于制作果酒、果醋和腐乳的敘述，合理的是（）A.在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長B.條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小D.將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大用鹽量11、下列實驗過程中，出現(xiàn)的正?，F(xiàn)象有（）A.制作果酒時，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲D.用固定化酵母進行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面12、下列關于血紅蛋白提取和分離的過程及原理的敘述，錯誤的是（）A.為了防止血液凝固，應在采血器中預先加入抗凝血劑檸檬酸鈉B.SDS能使蛋白質(zhì)完全變性，使電泳遷移率完全取決于電荷的性質(zhì)和多少C.利用0.9%的NaCl對血紅蛋白溶液透析12小時，可以去除小分子雜質(zhì)D.在凝膠柱中加入蛋白樣品后即可連接緩沖溶液洗脫瓶進行洗脫和收集樣品評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)13、凝膠色譜柱的裝填。

裝填凝膠時要盡量________，從而降低顆粒之間的空隙。不能有________存在，因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的________，降低分離效果。洗脫液不能______，露出凝膠顆粒，否則需重新裝填。14、樣品處理及粗分離。

血液由__________和__________組成，其中紅細胞最多。紅細胞的組成中，除水分以外，約90%是__________。血紅蛋白由______條肽鏈組成，包括兩條__________和兩條__________。其中每條肽鏈環(huán)繞一個__________基團，此基團可攜帶一分子氧或一分子__________。血紅蛋白因含有________而呈現(xiàn)____色。15、凝膠材料：______性，______類化合物，如葡聚糖或________。16、凝膠色譜法也稱做__________，是根據(jù)____________的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。17、蛋白質(zhì)是生命活動不可缺少的物質(zhì)。隨著人類基因組計劃的進展以及多種生物基因組測序工作的完成；人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時代。血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，負責血液中氧氣和二氧化碳的運輸。

（1）分離血紅蛋白的方法是_____，其原理是根據(jù)_____來分離蛋白質(zhì)。

（2）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、_____和純度鑒定。

（3）血紅蛋白因含有_____而呈現(xiàn)紅色，采集血液時需要預先加入檸檬酸鈉，目的是_____。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑，如在紅細跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現(xiàn)黃色；在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的_____，目的是使紅細胞破裂釋放血紅蛋白；在透析過程中需要將透析袋放入20mmol/L的_____中。

（4）本實驗用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG-75），其中“G”表示_____，“75”表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸收水分7.5g。在裝填凝膠時色譜柱內(nèi)不能出現(xiàn)氣泡的原因是_____，給色譜柱添加樣品的具體操作是_____。

（5）判斷純化的蛋白質(zhì)是否達到要求，選用的檢測方法是_____。18、默寫：制作果酒和果醋實驗流程示意圖_________19、測定亞硝酸鹽含量的原理：在___________________酸化的條件下，亞硝酸鹽與______________________發(fā)生重氮化反應后，與____________________結(jié)合形成_______________色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量。20、蛋白質(zhì)是生命活動不可缺少的物質(zhì)。隨著人類基因組計劃的進展以及多種生物基因組測序工作的完成；人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時代。血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，負責血液中氧氣和二氧化碳的運輸。

（1）分離血紅蛋白的方法是_____，其原理是根據(jù)_____來分離蛋白質(zhì)。

（2）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、_____和純度鑒定。

（3）血紅蛋白因含有_____而呈現(xiàn)紅色，采集血液時需要預先加入檸檬酸鈉，目的是_____。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑，如在紅細跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現(xiàn)黃色；在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的_____，目的是使紅細胞破裂釋放血紅蛋白；在透析過程中需要將透析袋放入20mmol/L的_____中。

（4）本實驗用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG-75），其中“G”表示_____，“75”表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸收水分7.5g。在裝填凝膠時色譜柱內(nèi)不能出現(xiàn)氣泡的原因是_____，給色譜柱添加樣品的具體操作是_____。

（5）判斷純化的蛋白質(zhì)是否達到要求，選用的檢測方法是_____。21、蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：________、粗分離、______和________。評卷人得分四、實驗題(共2題，共16分)22、根據(jù)提取橘皮精油的實驗流程示意圖回答下列問題：

①石灰水浸泡→②漂洗→③壓榨→④過濾→⑤靜置→⑥再次過濾→橘皮油。

（1）第①步之前對橘皮的處理是__________________。

（2）新鮮的橘皮中含有大量的_________；_________和_________；如果直接壓榨，出油率較低。

（3）壓榨是個機械加壓的過程；其要求是____________________________________。

（4）為了使橘皮油易與水分離；還要分別加入__________________，并調(diào)節(jié)pH至_________。

（5）第④步用_________過濾；目的是除去_________。

（6）第③步用_________過濾。23、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖所示。請回答下列問題：

(1)實驗過程應采用無菌技術，防止培養(yǎng)物被微生物污染及____被微生物感染，操作者的雙手需要進行清潔和____處理。

(2)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是____。

(3)Ⅰ號培養(yǎng)基中的碳源為____。若Ⅰ號培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是____。

(4)部分嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈，應挑出透明圈____(填“大”或“小”)的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，該過程的目的是____目的菌；下次劃線時接種環(huán)上的菌種來源于____。評卷人得分五、非選擇題(共2題，共10分)24、【生物——選修1:生物技術實踐】請回答下面與微生物的培養(yǎng)與應用有關的問題：

（1）在微生物培養(yǎng)過程中；獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是__________________；對玻璃器皿的滅菌方法為__________________。

（2）微生物常用的接種方法有2種；但只有_____________方法可用于微生物的計數(shù)，運用該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果__________________。

（3）農(nóng)作物秸稈中含有大量的纖維素，利用微生物可以將纖維素轉(zhuǎn)化為酒精以供人類所需。將纖維素轉(zhuǎn)化為酒精需要先將纖維素轉(zhuǎn)化為葡萄糖，將纖維素轉(zhuǎn)化為葡萄糖的酶是一種復合酶，它包括C1酶；___________；將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精的微生物是______________。

（4）下表是分離某種微生物的培養(yǎng)基配方：

。成分。

MgS04

葡萄糖。

X物質(zhì)。

水。

瓊脂。

用量。

5g

10g

7g

lOOOmL

20g

表中X物質(zhì)最可能為______________(碳源、氮源、無機鹽）；培養(yǎng)基中添加瓊脂的作用是______________。25、哺乳動物成熟的紅細胞,在生命科學研究中有著廣泛的應用。請回答下列有關問題:

(1)哺乳動物成熟的紅細胞是由骨髓中的造血干細胞經(jīng)__________(填“有絲分裂”或“無絲分裂”)和分化形成的。

(2)從哺乳動物成熟的紅細胞中提取血紅蛋白時,首先要用相當于紅細胞液體體積五倍的__________洗滌紅細胞__________次,然后用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。

(3)得到血紅蛋白混合液之后,可先用離心法進行__________,再通過__________法或凝膠電泳法進一步純化。使用前一種方法純化時,先從色譜柱洗脫出來的是__________(填“大分子”或“小分子”)蛋白質(zhì)。

(4)用凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量時,需要在凝膠中加入SDS,目的是__________；使電泳遷移率完全取決于分子的大小。

(5)因哺乳動物成熟的紅細胞__________,常被用作制備細胞膜的材料。與提取血紅蛋白不同的是:在制備細胞膜時,紅細胞的破裂只能使用__________而不能使用__________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)26、橘皮精油無色透明；具有誘人的橘香味，在食品；醫(yī)藥化妝品等領域具有廣泛的應用回答下列問題:

（1）橘皮精油的主要成分是______；常用新鮮的橘皮提取橘皮精油；理由是______

（2）新鮮橘皮中含有大量的_________；若直接壓榨桶皮，出油率較低。為提高出油率可采取的措施是_____.

（3）在橘皮壓榨時；為了使橘皮精油易與水分離，采取的措是__________壓榨法得到的糊狀液體可通過______法初步除去其中的固體物和殘渣。

（4）提取的橘皮精油需要在黑暗條件下保存，理由是____27、乳酸菌在細胞代謝過程中會分泌細菌素；有機酸等物質(zhì)；細菌素對多種食品中常見的致病菌具有廣譜的抑菌活性。實驗小組為了檢測細菌素的抗菌活性，將富集培養(yǎng)后的乳酸菌菌株分離純化，并接種到MRS液體培養(yǎng)基中。回答下列問題：

(1)純化乳酸菌可以用平板劃線法，該方法所用的接種工具是__________，對該工具進行滅菌的方法是___________。

(2)利用平板劃線法純化乳酸菌時，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的________開始，目的是_________。平板劃線法不能用于微生物的計數(shù)，其原因是______。

(3)用打孔法測定乳酸菌分泌的細菌素對指示菌的抑菌效果時，應該先吸取稀釋的_______菌液涂布到平板中，再使用5mm直徑的打孔器打孔，每孔分別注入離心后的50μLMRS液體培養(yǎng)基的_____（填“上清液”或“沉淀物”）。培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當抑菌圈的直徑至少大于________才能判斷為具有抑菌活性。

(4)實驗小組用經(jīng)乳酸調(diào)節(jié)pH至3.5（與發(fā)酵48h后發(fā)酵液的pH相同）的MRS液體培養(yǎng)基作為空白對照組，觀察其抑菌情況。設置該組實驗的目的是__________。28、蜜柚有“天然水果罐頭”之稱；目前，蜜柚果汁飲料的生產(chǎn)是蜜柚開發(fā)利用的主要途徑之一。某科研單位開展了利用果膠酶對蜜柚汁澄清效果的研究，如圖為酶解溫度的實驗結(jié)果，蜜柚汁的透光率代表澄清效果，透光率越高澄清效果越好。請回答下列相關問題:

（1）在蜜柚果汁飲料生產(chǎn)中；加入果膠酶不僅使榨取果汁變得更容易，也可使果汁變得澄清。果膠酶使果汁變得澄清的主要原因是________________________。從圖示判斷，在蜜柚果汁飲料生產(chǎn)中，所用果膠酶活性的最適溫度約為__________℃，判斷依據(jù)是____________________。

（2）在進行圖示對應的實驗過程中；要保證每組實驗在設定的溫度下進行，應進行的操作是：取若干支試管均分為兩組，將____________________，再將相同溫度下的兩組混合后置于設定的溫度下進行實驗，實驗中還應確保每組實驗的____________________（寫兩個影響因素）等均相同且適宜。

（3）果膠酶是一類酶的總結(jié)，包括_______________________________29、蘋果是常見水果；口感好、營養(yǎng)價值高；廣受人們喜愛，但其收獲的季節(jié)性強，易造成積壓滯銷，腐爛變質(zhì)。某市為緩解產(chǎn)銷矛盾，提高產(chǎn)品的附加值，利用蘋果生產(chǎn)果汁、果酒和果醋，大致工藝流程如下圖。請分析回答：

（1）用蘋果加工成果汁的過程中；需要加入果膠酶，果膠酶可以將果膠分解成____________。

（2）果酒發(fā)酵之后進行果醋發(fā)酵；需要改變的條件包括：①_________________；②________________。

（3）為使酵母菌能反復利用，常用_____法固定。酵母細胞實驗研究表明使用固定化酵母進行發(fā)酵的酒精產(chǎn)量平均值明顯高于使用游離酵母進行發(fā)酵的對照組，可能的原因是____________________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

帶電顆粒在電場作用下；向著與其電性相反的電極移動，稱為電泳。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。

【詳解】

蛋白質(zhì)的泳動速度與蛋白質(zhì)電荷數(shù)、分子量大小、分子體積、形狀等有關，而與蛋白質(zhì)分子的密度無關。故選B。2、D【分析】【詳解】

A；微生物的分離和培養(yǎng)的關鍵技術是無菌技術；因此在微生物的分離和培養(yǎng)的過程中稱取和稀釋土壤時應在火焰旁等活動要在火焰旁進行,A正確；

B；篩選出能分解石油的細菌；培養(yǎng)基的配方應以石油為唯一碳源，B正確；

C；對微生物進行分離和計數(shù)；應該用稀釋涂布平板法，C正確。

D；對活菌進行計數(shù)常用稀釋涂布平板法而不能用平板劃線法；D錯誤。

故選D。3、B【分析】【詳解】

纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種，A項正確；初步篩選只是分離純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶的實驗，B項錯誤；纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定，C項正確；纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；D項正確。

【點睛】

分離纖維素分解菌的幾個關鍵步驟。

（1）分離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養(yǎng)基；再用鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長；因培養(yǎng)基中無凝固劑，為液體培養(yǎng)基，利用液體培養(yǎng)基能使營養(yǎng)成分充分消耗，以增加纖維素分解菌的濃度。

（2）鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為固體培養(yǎng)基，因為要在培養(yǎng)基上形成我們?nèi)庋劭梢姷木?。剛果紅染色法應用的就是此培養(yǎng)基。4、A【分析】【分析】

1、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。

2；人工種子通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；通過人工薄膜包裝得到的種子。

【詳解】

A；植物組織培養(yǎng)根據(jù)再生途徑分為：愈傷組織途徑、芽增殖途徑、原球莖途徑、體胚發(fā)生途徑；所以從莖尖、腋芽開始的植物組培可以不經(jīng)過愈傷組織，A正確；

B；離體組織為起點的胚胎發(fā)生途徑；一般要經(jīng)過脫分化和再分化過程，B錯誤；

C；生長素和細胞分裂素的用量比例將影響細胞的分化方向；針對莖尖開始的發(fā)芽培養(yǎng)基包含相對較多的BA和相對較少的NAA，C錯誤；

D；在植物組培的繼代培養(yǎng)中；有些細胞會發(fā)生遺傳物質(zhì)的變化，D錯誤。

故選A。5、C【分析】【分析】

胡蘿卜素化學性質(zhì)穩(wěn)定；不溶于水，易溶于石油醚等有機溶劑，可以用萃取法提取。萃取時的有機溶劑應該具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶。提取的胡蘿卜素粗品可通過紙層析進行鑒定。

【詳解】

胡蘿卜素的化學分子式中包含多個碳碳雙鍵；根據(jù)雙鍵的數(shù)目可將胡蘿卜素分為α；β、Υ三類，β-胡蘿卜素是其中最主要的組成成分，胡蘿卜素的化學性質(zhì)穩(wěn)定，微溶于乙醇，易溶于石油醚，胡蘿卜素的提取效率與顆粒含水量成反比，ABD錯誤，C正確。

故選C。6、A【分析】試題分析：

A.消化酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)；能被消化道中的水解酶水解，正確；

B.固定化酶和固定化細胞利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術；包括包埋法；化學結(jié)合法和物理吸附法，B錯誤；

C.固定化酶的應用中；不需要營養(yǎng)條件，要控制好pH；溫度，但和溶解氧無關，C錯誤；

D.固定化細胞在多步酶促反應中發(fā)揮連續(xù)催化作用；無分泌到胞外的產(chǎn)物，D錯誤。故選A。

考點：此題考查固定化酶和固定化細胞，考查學生對基礎知識的掌握和應用能力，解題的關鍵是理解固定化技術的相關知識。7、D【分析】【分析】

凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,所用的凝膠實際上是一些微小的多孔球體；在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長，移動速度較慢；而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。

【詳解】

A；凝膠實際上是一些微小的多孔球體；在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，大多數(shù)是由多糖類化合物構成的，A正確；

B；交聯(lián)葡聚糖凝膠(G-75)中的75表示凝膠的得水值；即每克凝膠膨脹時吸水7.5g，B正確；

C；相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道；只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快，C正確；

D；相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，也能在凝膠外部移動，D錯誤。

故選D。二、多選題(共5題，共10分)8、B:C:D【分析】【分析】

制作固定化酵母細胞的實驗步驟：1、酵母細胞的活化；2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液；3；配制海藻酸鈉溶液（該實驗成敗的關鍵步驟）；4、海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合；5、固定化酵母細胞。

【詳解】

A；溶化的海藻酸鈉應冷卻至室溫后與活化的酵母菌混合；A錯誤；

B、海藻酸鈉與酵母菌混合液應滴入CaCl2溶液中；以制備凝膠珠，B正確；

C；攪拌可使酵母菌與培養(yǎng)液充分接觸；有利于發(fā)酵的順利進行，C正確；

D；凝膠珠用蒸餾水沖洗2～3次后；再轉(zhuǎn)移到發(fā)酵裝置中，D正確。

故選BCD。9、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一類單細胞真菌；能以多種糖類作為營養(yǎng)物質(zhì)和能量的來源，因此在一些含糖量較高的水果；蔬菜表面經(jīng)常可以發(fā)現(xiàn)酵母菌的存在。酵母菌是兼性厭氧微生物，在無氧條件下能進行酒精發(fā)酵，可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長的重要因素，釀酒酵母的最適生長溫度約為28℃。

【詳解】

A、發(fā)酵產(chǎn)生果酒的菌種是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸產(chǎn)生CO2；但不產(chǎn)生酒精，A錯誤；

B；切片后對發(fā)酵液進行消毒；防止雜菌污染，再進行分組，B正確；

C；壓榨倒罐用于主發(fā)酵需保留空間以促進酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐時菌種是進行無氧呼吸，C錯誤；

D；主發(fā)酵先有氧促進酵母菌大量繁殖；后無氧進行酒精發(fā)酵，后發(fā)酵要控制無氧，D錯誤。

故選ACD。10、A:B:C【分析】【分析】

果酒、果醋制作原理與發(fā)酵條件。

果酒制作

果醋制作

菌種

酵母菌

醋酸菌

菌種

來源

附著在葡萄皮上的酵母菌

變酸酒表面的菌膜

發(fā)酵

過程

有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6O26CO2＋6H2O；無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精：C6H12O62C2H5OH＋2CO2

氧氣、糖源充足時：

C6H12O6＋2O22CH3COOH＋2CO2＋2H2O；

缺少糖源、氧氣充足時：

C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O

溫度

一般酒精發(fā)酵18～25℃，

繁殖最適為20℃左右

最適為30～35℃

氣體

前期：需氧，后期：無氧

需要充足的氧氣

【詳解】

果酒發(fā)酵后期；酵母菌活動逐漸減弱，產(chǎn)生的二氧化碳逐漸降低，放氣時間間隔可延長，A正確。當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌可將葡萄汁中的果糖分解成醋酸，B正確。果酒發(fā)酵過程中因為營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，有氧呼吸過程中也有水的產(chǎn)生，故發(fā)酵液的密度減小，C正確。制作腐乳時是逐層加鹽，瓶口處需加大用鹽量，以減小被雜菌污染的可能性，D錯誤。故選：ABC。

【點睛】

解答本題關鍵在于對果酒、果醋的制作原理的理解應用。11、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時；除了產(chǎn)生酒精，還會產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點睛】12、B:C:D【分析】【分析】

血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：樣品處理：①紅細胞的洗滌；②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液。粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

【詳解】

A；為了防止血液凝固；應在采血器中預先加入抗凝血劑檸檬酸鈉，A正確；

B；在一定pH下；使蛋白質(zhì)基團帶上正電或負電；加入帶負電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小，B錯誤；

C；利用磷酸緩沖液對血紅蛋白溶液的透析12小時；可以去除小分子雜質(zhì)，C錯誤；

D；在凝膠柱中加入蛋白樣品后；等樣品完全進入凝膠層后才能連接緩沖溶液洗脫瓶進行洗脫和收集樣品，D錯誤。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)13、略

【分析】【詳解】

人教版教材指出，凝膠色譜柱的裝填裝柱前要將色譜柱垂直固定在支架上。因為干的凝膠和用級沖液平衡好的凝膠的體積差別很大，因此裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計算所需要的凝膠量。凝膠用蒸餾水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液，在與色譜柱下端連接的尼龍管打開的情況下，一次性緩慢倒人色譜柱內(nèi)，裝填時可輕輕蔽動色譜柱，使凝膠裝填均勻。在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在。氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。在凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。一旦發(fā)生這種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填?！窘馕觥烤o密氣泡洗脫次序流干14、略

【分析】【詳解】

樣品處理及粗分離：

血液由血漿和血細胞組成，其中紅細胞最多。紅細胞的組成中，除水分以外，約90%是血紅蛋白。血紅蛋白由4條肽鏈組成，包括兩條α-肽鏈和兩條β-肽鏈。其中每條肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅基團，此基團可攜帶一分子氧或一分子二氧化碳。血紅蛋白因含有血紅素而呈現(xiàn)紅色?！窘馕觥垦獫{血細胞血紅蛋白4α-肽鏈β-肽鏈亞鐵血紅基團二氧化碳血紅素紅15、略

【分析】【詳解】

凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖或瓊脂糖。葡聚糖凝膠指的是由一定平均相對分子質(zhì)量的葡聚糖和甘油基以醚橋形式相互交聯(lián)而成，具有立體網(wǎng)狀結(jié)構，應用面廣的一類凝膠；瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠，多用于對染色體DNA在凝膠內(nèi)進行原位酶切及DNA片段回收?！窘馕觥慷嗫锥嗵黔傊?6、略

【分析】【詳解】

分離蛋白質(zhì)分子的一種常用方法是凝膠色譜法，也稱做分配色譜法，是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢?！窘馕觥糠蛛x色譜法相對分子質(zhì)量17、略

【分析】【分析】

血紅蛋白存在于紅細胞內(nèi)；由四條肽鏈構成，兩條α肽和兩條β肽鏈，每條肽鏈圍繞一個亞鐵血紅素基團，一個血紅素基團可攜帶一分子氧或一分子二氧化碳。

【詳解】

（1）分離血紅蛋白的方法是凝膠色譜法（又叫分配色譜法）；是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)分子直接穿過凝膠顆粒間的空隙，路徑短，移動速度快，優(yōu)先可收集到；相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)分子進入凝膠珠的內(nèi)部，路徑長，移動速度慢，可在后收集。

（2）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理；粗分離、純化和純度鑒定。

（3）血紅蛋白因含有亞鐵血紅素基團而呈現(xiàn)紅色；采集血液時需要預先加入檸檬酸鈉防止血液凝固。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑，如在紅細跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現(xiàn)黃色；在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的甲苯，破壞細胞膜，釋放血紅蛋白；在透析過程中需要將透析袋放入20mmol/L磷酸緩沖液，除去無機鹽和小分子蛋白質(zhì)。

（4）純度鑒定中；用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠，其中“G”表示凝膠的交聯(lián)程度；膨脹程度和分離范圍。在裝填凝膠時色譜柱內(nèi)不能出現(xiàn)氣泡，氣泡會攪亂蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。給色譜柱添加樣品的具體操作是吸管吸1mL樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時，吸管管壁貼著管壁環(huán)繞移動加樣，同時注意不要破壞凝膠面。

（5）經(jīng)過凝膠色譜法獲得的蛋白質(zhì)；為了確定其是否達要求，可用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進行檢測。

【點睛】

本題考查血紅蛋白的提取和分離方法、凝膠色普的操作、異常原因分析，要求考生熟記課本相關知識，并理解運用?！窘馕觥磕z色譜法（又叫分配色譜法）相對分子質(zhì)量的大小純化亞鐵血紅素基團防止血液凝固甲苯磷酸緩沖液凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍氣泡會攪亂蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果吸管吸1mL樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時，吸管管壁貼著管壁環(huán)繞移動加樣，同時注意不要破壞凝膠面。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】鹽酸對氨基苯磺酸N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽玖瑰紅20、略

【分析】【分析】

血紅蛋白存在于紅細胞內(nèi)；由四條肽鏈構成，兩條α肽和兩條β肽鏈，每條肽鏈圍繞一個亞鐵血紅素基團，一個血紅素基團可攜帶一分子氧或一分子二氧化碳。

【詳解】

（1）分離血紅蛋白的方法是凝膠色譜法（又叫分配色譜法）；是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)分子直接穿過凝膠顆粒間的空隙，路徑短，移動速度快，優(yōu)先可收集到；相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)分子進入凝膠珠的內(nèi)部，路徑長，移動速度慢，可在后收集。

（2）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理；粗分離、純化和純度鑒定。

（3）血紅蛋白因含有亞鐵血紅素基團而呈現(xiàn)紅色；采集血液時需要預先加入檸檬酸鈉防止血液凝固。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑，如在紅細跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現(xiàn)黃色；在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的甲苯，破壞細胞膜，釋放血紅蛋白；在透析過程中需要將透析袋放入20mmol/L磷酸緩沖液，除去無機鹽和小分子蛋白質(zhì)。

（4）純度鑒定中；用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠，其中“G”表示凝膠的交聯(lián)程度；膨脹程度和分離范圍。在裝填凝膠時色譜柱內(nèi)不能出現(xiàn)氣泡，氣泡會攪亂蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。給色譜柱添加樣品的具體操作是吸管吸1mL樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時，吸管管壁貼著管壁環(huán)繞移動加樣，同時注意不要破壞凝膠面。

（5）經(jīng)過凝膠色譜法獲得的蛋白質(zhì)；為了確定其是否達要求，可用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進行檢測。

【點睛】

本題考查血紅蛋白的提取和分離方法、凝膠色普的操作、異常原因分析，要求考生熟記課本相關知識，并理解運用。【解析】凝膠色譜法（又叫分配色譜法）相對分子質(zhì)量的大小純化亞鐵血紅素基團防止血液凝固甲苯磷酸緩沖液凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍氣泡會攪亂蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果吸管吸1mL樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時，吸管管壁貼著管壁環(huán)繞移動加樣，同時注意不要破壞凝膠面。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳21、略

【分析】【詳解】

血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。首先通過洗滌紅細胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品的處理；再經(jīng)過透析去除分子量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離；然后通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化；最后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。【解析】樣品處理純化純度鑒定四、實驗題(共2題，共16分)22、略

【分析】【分析】

石灰水堿性；可以防止壓榨時材料滑脫；分解果膠；為了使橘皮油易與水分離，還要分別加入鹽，利于分離；特別注意前后兩次過濾有所區(qū)別，第一次過濾是用布袋，目的是除去粗雜質(zhì)；第二次過濾用濾紙，目的是除去較細致的雜質(zhì)。

【詳解】

（1）第①步石灰水浸泡之前對橘皮干燥去水；提高出油率。

（2）新鮮的橘皮中含有大量的果蠟；果膠和水分；如果直接壓榨，出油率較低。

（3）壓榨是個機械加壓的過程；其要求是既要將原料壓緊，防止原料滑脫，又要將油分擠壓出來。

（4）為了使橘皮油易與水分離；還要分別加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉，并調(diào)節(jié)pH至7~8。

（5）壓榨液中含有橘皮油和大量的水分；還有一些糊狀殘渣等物質(zhì)，可先經(jīng)過第④過濾步用普通布袋過濾，除去固體物和殘渣。

（6）第③再次過濾；用過濾紙過濾，濾液與吸出的上層橘油合并，成為最終的橘皮精油。

【點睛】

考查橘皮精油提取實驗流程中所用的試劑及作用、操作的要求與目的。熟悉課本的實驗是解決問題的關鍵。【解析】干燥去水果蠟果膠水分既要將原料壓緊，防止原料滑脫，又要將油分擠壓出來相當于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉7~8普通布袋固體物和殘渣濾紙23、略

【分析】（1）整個實驗過程應采用無菌技術；防止培養(yǎng)物被微生物污染及操作者自身被微生物感染，實驗前后操作者的雙手需要進行清潔和消毒處理。（2）培養(yǎng)基制作完成后要調(diào)整pH，再滅菌。（3）Ⅰ號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，該篩選要使用以淀粉為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基。用稀釋涂布平板法接種前需要對菌液進行梯度稀釋，如果培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋不夠）。（4）嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈越大，說明嗜熱菌產(chǎn)生高溫淀粉酶的效率越高，應該就是篩選的目的微生物，將其菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，該過程的目的是純化目的菌，接種時下次劃線時接種環(huán)上的菌種來源于上次劃線的末端。

【考點定位】微生物的分離和培養(yǎng)【解析】(1)操作者自身消毒(2)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌(3)淀粉菌液濃度過高(或稀釋不夠)(4)大純化上次劃線末端五、非選擇題(共2題，共10分)24、略

【分析】試題分析：培養(yǎng)基為微生物提供生長；繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)；營養(yǎng)物質(zhì)歸納為碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水；根據(jù)化學成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基；根據(jù)性質(zhì)分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基；篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基；微生物的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法；其中稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數(shù)。

（1）微生物培養(yǎng)過程中；獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是無菌技術，即防止外來雜菌的污染，其中常用的對培養(yǎng)皿進行滅菌的方法是干熱滅菌法。

（2）常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種；但只有稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)；由于一個菌落可能是由兩個或多個細菌長成，因此運用該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際數(shù)目低。

（3）纖維素分解菌能產(chǎn)生分解纖維素的纖維素酶，該酶是一種復合酶，一般認為它至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分；酵母菌可進行有氧呼吸和無氧呼吸；無氧呼吸時能產(chǎn)生酒精。

（4）據(jù)表中數(shù)據(jù)可知；表中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏氮源，故X物質(zhì)最可能為氮源；培養(yǎng)基中添加瓊脂可作為凝固劑，使液體培養(yǎng)基變成固體培養(yǎng)基。

【點睛】掌握微生物的兩種接種方法以及這兩種方法的比較是解答本題的難點?！窘馕觥糠乐雇鈦黼s菌的入侵干熱滅菌法稀釋涂布平板法偏小Cx酶和葡萄糖苷酶酵母菌氮源作為凝固劑，使液體培養(yǎng)基變成固體培養(yǎng)基25、略

【分析】【分析】

1；哺乳動物成熟的紅細胞是由骨髓中的造血干細胞分裂分化形成；細胞內(nèi)沒有細胞核和眾多的細胞器，所以常常選做為提取細胞膜的材料；

2；紅細胞內(nèi)血紅蛋白的提取和分離一般分為：洗滌→釋放→分離→透析→純化→純度鑒定。

【詳解】

(1)哺乳動物成熟的紅細胞是由骨髓中的造血干細胞經(jīng)有絲分裂和分化形成的。

(2)從哺乳動物成熟的紅細胞中提取血紅蛋白時；首先要用相當于紅細胞液體體積五倍的生理鹽水洗滌紅細胞3次,然后用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白。

(3)得到血紅蛋白混合液之后；可先用離心法進行樣品處理及粗分離，再通過凝膠色譜法或凝膠電泳法進一步純化。使用凝膠色譜法純化時，先從色譜柱洗脫出來的是大分子蛋白質(zhì)。

(4)用凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量時；消為了除凈電荷對遷移率的影響，需要在凝膠中加入SDS，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。

(5)因哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞核和眾多的細胞器,常被用作制備細胞膜的材料。在制備細胞膜時；紅細胞的破裂只能使用蒸餾水而不能使用甲苯，因為蒸餾水的作用是讓紅細胞吸水脹破，而甲苯的作用是溶解細胞膜。

【點睛】

解答本題關鍵需要熟悉血紅蛋白的提取與分離的步驟與相關操作方法以及操作原理?！窘馕觥坑薪z分裂生理鹽水3樣品處理及粗分離凝膠色譜法大分子消除凈電荷對遷移率的影響（或掩蓋不同種蛋白間的電荷差別）沒有細胞核和眾多的細胞器蒸餾水甲苯六、綜合題(共4題，共24分)26、略

【分析】【分析】

根據(jù)植物原料的特點；植物芳香油的提取方法有蒸餾；壓榨和萃取等。

提取橘皮精油；常采用壓榨法．植物芳香油不溶于水，但是極易溶于有機溶劑，如石油醚；酒精、乙醚和戊烷等．芳香油溶解于有機溶劑后，只需蒸發(fā)出有機溶劑，就可以獲得較純凈的植物芳香油了，因此可以用有機溶劑作為提取劑來提取芳香油。

為了提高出油率，首先將橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，壓榨過程常加入一定的NaHC03和Na2S04；并調(diào)節(jié)pH值至7-8。

【詳解】

（1）橘皮精油的主要成分是檸檬烯；常用新鮮的橘皮提取橘皮精油；因為橘皮精油主要存在于橘皮中且新鮮的橘皮中橘皮精油含量高。

（2）由于新鮮橘皮中含有大量的果蠟；果膠、水分；直接壓榨桶皮，會出現(xiàn)滑脫現(xiàn)象，導致出油率較低。為提高出油率可采取的措施是干燥去水，并用石灰水浸泡。

（3）橘皮壓榨時，為了使橘皮精油易與水分離，常采取加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4；壓榨得到的糊狀液體可通過過濾初步除去其中的固體物和殘渣。

（4）由于橘皮精油在光下易分解；所以應將提取的橘皮精油放在黑暗條件下保存。

【點睛】

熟悉壓榨法提取橘皮精油的操作方法和原理是分析解答本題的關鍵?！窘馕觥繖幟氏╅倨ぞ椭饕嬖谟陂倨ぶ校迈r的橘皮中橘皮精油含量高果蠟、果膠、水分干燥去水，并用石灰水浸泡加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4過濾橘皮精油在光下易分解27、略

【分析】【分析】

1；無菌技術的主要內(nèi)容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手；進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

2；微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落，該方法所用的接種工具是接種環(huán)；滅菌方法有：濕熱滅菌；干熱滅菌、灼燒滅菌，對接種環(huán)進行滅菌的常用方法為灼燒滅菌。

（2）利用平板劃線法純化乳酸菌時；第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開始，從而使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，便于獲得單菌落，起到分離菌落的作用；但是平板劃線法不能用于微生物的計數(shù)，因為平板劃線法只在劃線末端出現(xiàn)單菌落，而不能統(tǒng)計出單菌落數(shù)。

（3）要研究的是乳酸菌分泌的細菌素對指示菌的抑菌效果；應該先吸取稀釋的指示菌菌液涂布到平板中進行培養(yǎng)；在提取抑菌有效成分時，只需要獲取細菌素這一物質(zhì)即可，乳酸菌菌體主要分布在離心后的液體培養(yǎng)基的沉淀物中，其分泌物細菌素位于上清液，故需要吸取離心后液體培養(yǎng)基的上清液菌液涂布到平板中；

抑菌圈是指固體培養(yǎng)基表面與試樣接觸的邊界處無菌繁殖的環(huán)帶區(qū)域；利用待測次生代謝產(chǎn)物在瓊脂平板擴散使其周圍的細菌生長受到抑制形成的抑菌圈大小，而本實驗用的是5mm直徑的打孔器打孔，故注入相應物質(zhì)后，培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當抑菌圈的直徑至少大于5mm才能判斷為具有抑菌