【創(chuàng)新設(shè)計(jì)】2021版生物二輪專題復(fù)習(xí)(江蘇版)應(yīng)用題組集訓(xùn)7-3-考點(diǎn)2-克隆技術(shù)-

考點(diǎn)二克隆技術(shù)再悟高考1．推斷正誤(1)組織培育、細(xì)胞雜交、顯微注射、核移植均為培育草莓脫毒苗所接受的技術(shù)(2022·廣東，2改編) (×)提示只有組織培育為培育脫毒苗接受的技術(shù)。(2)動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性(2022·江蘇，22C)(×)提示推斷是否體現(xiàn)細(xì)胞全能性的依據(jù)是能否發(fā)育成新個(gè)體。(3)去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理(2008·全國(guó)Ⅰ，5B) (√)提示前者用纖維素酶和果膠酶處理；后者用胰蛋白酶處理。2．(2021·重慶卷，2)如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是 ()。A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群解析①是獲得的已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，A項(xiàng)錯(cuò)誤；胰蛋白酶使得組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞，B項(xiàng)錯(cuò)誤；③同時(shí)具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性，C項(xiàng)錯(cuò)誤；④是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D項(xiàng)正確。答案D3．(2022·福建卷，33)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：(1)步驟①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的________。(2)步驟②中，重組胚胎培育到________期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分別出ES細(xì)胞。(3)步驟③中，需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達(dá)載體?？梢砸罁?jù)Rag2基因的________設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體，所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有________________酶的酶切位點(diǎn)。(4)為檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)狀況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的________，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交試驗(yàn)。解析(1)核移植過程中，體細(xì)胞核移植前要除去受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，若不去掉卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，細(xì)胞里面就有兩個(gè)細(xì)胞核，造成遺傳物質(zhì)不能穩(wěn)定表達(dá)。(2)囊胚期細(xì)胞開頭消滅分化，分化為滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，其中后者具有發(fā)育的全能性，屬于ES細(xì)胞。(3)步驟③過程是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(ES細(xì)胞)中，導(dǎo)入之前應(yīng)構(gòu)建基因表達(dá)載體。在生物體外可通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其條件是模板DNA、依據(jù)Rag2基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)的引物、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶等，另?yè)?jù)題干可知，獲得Rag2目的基因需要用HindⅢ和PstⅠ兩種限制酶，所選擇的載體上應(yīng)具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位點(diǎn)，以便目的基因和載體能夠連接在一起。(4)檢測(cè)目的基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)時(shí)，應(yīng)接受抗原—抗體雜交技術(shù)，即提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原－抗體雜交，看是否有雜交帶。答案(1)細(xì)胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列HindⅢ和PstⅠ(4)蛋白質(zhì)創(chuàng)新猜測(cè)4．(2022·南通二模)下圖是通過植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的途徑，相關(guān)敘述正確的是 ()。A．該途徑依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性B．①過程中需把握好培育基中植物激素的比例C．②過程需用肯定濃度的胰蛋白酶處理愈傷組織D．③過程需使用固體培育基，有利于細(xì)胞增殖解析本工程不以生產(chǎn)完整植株為目的，只得到愈傷組織細(xì)胞，不滿足全能性特點(diǎn)，A錯(cuò)誤；①過程為脫分化過程，需把握好培育基中植物激素的比例，B正確；動(dòng)物細(xì)胞工程才需用肯定濃度的胰蛋白酶處理組織，C錯(cuò)誤；本試驗(yàn)需要利用細(xì)胞來生產(chǎn)產(chǎn)品，應(yīng)使用液體培育基，便利添加養(yǎng)分物質(zhì)和取出代謝產(chǎn)物，D錯(cuò)誤。答案B5．(2022·山東《考試大綱》調(diào)研卷)模型是對(duì)爭(zhēng)辯對(duì)象進(jìn)行的概括性描述，下圖為表示細(xì)胞融合的過程模型，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)若該圖表示植物細(xì)胞融合的過程，丁細(xì)胞稱為__________。欲將丁細(xì)胞培育成植株，可選用________技術(shù)，這一過程的核心就是______和______兩個(gè)階段。(2)若該圖表示動(dòng)物細(xì)胞融合的過程，丁細(xì)胞稱為__________。過程①區(qū)分于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)因素是__________。動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)，合成培育基中除必要的養(yǎng)分外，通常需要加入__________等一些自然?成分。(3)若該圖表示制備單克隆抗體的部分過程，經(jīng)過選擇性培育的丁細(xì)胞稱為____________。丁細(xì)胞的特點(diǎn)是______________________________________。解析(1)植物細(xì)胞融合獲得的細(xì)胞稱為雜種細(xì)胞。需要利用植物組織培育技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成植株，這一培育過程的核心步驟就是脫分化和再分化。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合獲得的細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞。過程①誘導(dǎo)融合區(qū)分于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒。動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)，合成培育基中除必要的養(yǎng)分外，通常需要加入血清和血漿等一些自然?成分。(3)制備單克隆抗體的過程中，經(jīng)過選擇性培育的丁細(xì)胞稱為雜交瘤細(xì)胞，丁細(xì)胞的特點(diǎn)是既能快速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。答案(1)雜種細(xì)胞植物組織培育脫分化再分化(2)雜交細(xì)胞滅活的病毒血清和血漿(3)雜交瘤細(xì)胞既能快速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體6．利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)可以使哺乳動(dòng)物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”。如圖是利用奶牛乳腺生產(chǎn)人血清白蛋白的圖解，請(qǐng)回答下列問題：(1)在上述過程中，常用______________酶將奶牛組織分散成單個(gè)細(xì)胞。在體外培育分散的動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，所需氣體主要有______________。(2)在上述過程中，常借助基因表達(dá)載體將人血清白蛋白基因?qū)肽膛Ｊ荏w細(xì)胞中，構(gòu)建基因表達(dá)載體需要的酶有______________________；將人血清白蛋白基因?qū)肽膛Ｊ荏w細(xì)胞最常用的方法是_________________________。(3)在上述過程中，用于核移植的去核卵細(xì)胞一般處于______期。動(dòng)物體細(xì)胞經(jīng)核移植可獲得完整動(dòng)物個(gè)體體現(xiàn)了______________________具有全能性。(4)圖中M應(yīng)當(dāng)包括早期胚胎培育、胚胎移植等過程。在培育奶牛早期胚胎的過程中，所用培育液成分除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等養(yǎng)分成分以及____________等物質(zhì)。胚胎移植在胚胎工程中的意義在于________________________________。解析(1)在動(dòng)物細(xì)胞工程中，常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞。在培育動(dòng)物細(xì)胞過程中，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培育液的pH。(2)在基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的兩種工具酶是限制酶和DNA連接酶。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最常用的方法是顯微注射法。(3)在核移植過程中，作為受體細(xì)胞的去核卵細(xì)胞一般處于減數(shù)其次次分裂中期。動(dòng)物體細(xì)胞經(jīng)核移植可獲得完整動(dòng)物個(gè)體體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。(4)哺乳動(dòng)物胚胎培育需要“兩鹽”(無機(jī)鹽和有機(jī)鹽)、“兩素”(激素和維生素)、“兩酸”(核苷酸和氨基酸)和動(dòng)物血清等。答案(1)胰蛋白酶(膠原蛋白)O2和CO2(2)限制酶和DNA連接酶顯微注射法(3)MⅡ中(減數(shù)其次次分裂中)動(dòng)物體細(xì)胞核(4)動(dòng)物血清提高優(yōu)良母畜的繁