第七章細菌感染的檢測方法與防治原則課件

第七章細菌感染的檢測方法與防治原則

免疫病原教研室靖吉芳

教學(xué)大綱掌握內(nèi)容標本采集原則人工免疫的分類及常用生物制劑熟悉內(nèi)容抗細菌感染免疫的特點了解內(nèi)容細菌感染診斷的常用方法第一、二、三代疫苗的優(yōu)缺點第一節(jié)細菌感染的實驗室診斷細菌學(xué)診斷檢測病原菌及其抗原、代謝產(chǎn)物或其核酸以達到診斷目的。血清學(xué)診斷通過檢測患者血清中的特異性抗體達到診斷目的。一、臨床標本的采集及運送原則標本的采集與運送：早期、無菌、因病而異、雙份血清、快、標記

二、細菌的檢測

直接涂片鏡檢(痰/糞便/拭子等)標本分離培養(yǎng)→可疑菌落

增菌(血液/腦脊液等)

涂片鏡檢生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定藥敏試驗動物試驗涂片鏡檢生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定藥敏試驗動物試驗分離培養(yǎng)根據(jù)營養(yǎng)/生長條件/菌落特征初步鑒別細菌涂片鏡檢(動力/形態(tài)/大小/排列方式/染色特性/特殊結(jié)構(gòu))生化試驗(根據(jù)酶和代謝產(chǎn)物鑒別細菌)動物實驗(檢測細菌毒力)藥敏試驗(指導(dǎo)臨床用藥)病原菌抗原的檢測酶免疫技術(shù)協(xié)同凝集試驗免疫熒光技術(shù)對流免疫電泳免疫印記技術(shù)協(xié)同凝集實驗免疫熒光技術(shù)病原菌核酸的檢測核酸雜交技術(shù)PCR技術(shù)基因芯片技術(shù)其他檢測法氣相色譜法呼氣試驗三、血清學(xué)診斷用已知的細菌或其特異性抗原去檢測患者體液中有無相應(yīng)抗體以及效價的動態(tài)變化,作為某些傳染病的輔助診斷主要適用于抗原性較強的病原和病程較長的傳染病的診斷因一般采取病人血清進行試驗，故稱血清學(xué)診斷.要求：雙份血清判斷：后期比早期效價高4倍以上方法直接凝集實驗補體結(jié)合實驗中和試驗乳膠凝集實驗ELISA——酶聯(lián)免疫吸附試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗第二節(jié)細菌感染的特異性預(yù)防特異性防治是給機體注射或服用病原微生物抗原或特異性抗體，以達到預(yù)防和治療疾病的目的,這種方法稱為人工免疫,包括人工主動免疫和人工被動免疫.一、人工主動免疫

概念：將疫苗或類毒素接種于人體，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，從而對相應(yīng)病原體感染產(chǎn)生特異性預(yù)防作用的措施。

（一）疫苗1死疫苗：已死,多次接種,劑量大,副反應(yīng)明顯

2活疫苗（減毒活疫苗）：

（一）疫苗2活疫苗（減毒活疫苗）：活,無毒或弱毒,接種一次,劑量小,副作用小,免疫力持久.嚴防回復(fù)毒力

活疫苗與死疫苗的比較

活疫苗死疫苗接種次數(shù)1次2-3次

接種量小較大

接種反應(yīng)輕重

免疫效果較好,維持1-5年差,維持0.5-1年

毒力回升有可能不可能

安全性有潛在危險性安全性好

疫苗穩(wěn)定性相對不穩(wěn)定相對穩(wěn)定

保存不易保存易保存3亞單位疫苗:利用保護性抗原,不含核酸,無毒性、可避免回復(fù)突變。（一）疫苗

4基因工程疫苗:如把HBsAg基因插入酵母細胞中，成功制備乙型肝炎疫苗。優(yōu)點：安全、經(jīng)濟、可批量生產(chǎn)缺點：技術(shù)要求高（一）疫苗5重組載體疫苗:將編碼某一抗原的基因轉(zhuǎn)入減毒的病毒或細菌而制成的疫苗。痘苗病毒為常用載體。為活疫苗的一種特殊形式。

（一）疫苗6核酸疫苗（DNA疫苗）

是將編碼保護性抗原的基因重組到真核表達載體上，然后將重組的質(zhì)粒DAN直接注射入宿主體內(nèi)，外源基因在體內(nèi)所表達的抗原能刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。優(yōu)點：免疫效果好、可同時誘導(dǎo)體液和細胞免疫、免疫應(yīng)答持久、制備簡單、成本低廉、可聯(lián)合免疫。缺點：安全？（一）疫苗（二）類毒素（toxoid）

類毒素是外毒素經(jīng)0.3-0.4%甲醛處理后,失去毒性仍保持抗原性的生物制品.如白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素等,還可與死疫苗一起制成聯(lián)合疫苗,如DPT二、人工被動免疫概念:輸入含有特異性抗體免疫血清、純化免疫球蛋白或細胞因子等免疫制劑，使機體立即獲得免疫力的過程，稱人工被動免疫.可用于緊急預(yù)防和治療。

類毒素（無毒抗原）外毒素（極毒抗原）抗毒素（抗毒抗體）免疫動物脫毒0.3-0.4%甲醛抗毒素-----動物血清中提取的免疫球蛋白丙種球蛋白-----人類免疫球蛋白其他免疫制劑

﹡干擾素-主要為INF-γ,通過產(chǎn)生炎癥反應(yīng)和活化Mφ增強機體對胞內(nèi)寄生菌的抵抗能力

﹡

IL-2-能刺激T細胞增殖,增強細胞免疫功能

﹡集落刺激因子、LAK細胞等這些免疫制劑在抗菌免疫中應(yīng)用不多，主要試用于一些病毒性疾病和腫瘤

人工自動免疫和人工被動免疫的比較

區(qū)別要點主動免疫被動免疫

免疫物質(zhì)抗原抗體或CK接種次數(shù)1-3次1次免疫出現(xiàn)時間慢,2-4周快,立即免疫持續(xù)時間長,數(shù)月-數(shù)年短,2-3周主要用途預(yù)防治療或緊急預(yù)防C7課堂檢測題(20s/題，同桌分奇偶數(shù)答題）1．屬于人工自動免疫的生物制品（）A白喉抗毒素B破傷風(fēng)類毒素C細胞因子D胸腺素E白細胞介素2．下列哪種生物制品用于人工被動免疫()A卡介苗B麻疹減毒活疫苗C乙肝疫苗D胎盤丙種球蛋白E類毒素333．一個從未進行過破傷風(fēng)免疫接種的人目前有可能感染這種細菌,醫(yī)生決定對他進行被動免疫,應(yīng)該注射（）A破傷風(fēng)類毒素B破傷風(fēng)抗毒素C破傷風(fēng)外毒素D混合的人丙種球蛋白E血液4．下列哪種生物制品對人既是抗原又是抗體（）A類毒素B卡介苗(BCG)C動物免疫血清D轉(zhuǎn)移因子E活疫苗345．下列哪項屬于人工主動免疫()A注射丙種球蛋白預(yù)防麻疹B接種卡介苗預(yù)防結(jié)核C注射免疫核糖核酸治療惡性腫瘤D注射CK治療腫瘤E骨髓移植治療白血病6、細菌感染的血清學(xué)診斷中，通常采取雙份血清檢測，要確認現(xiàn)癥感染，需要恢復(fù)期或一周后血清抗體效價比早期A升高4倍以上（含4倍）B升高2倍以上C升高4倍以上D降低4倍以上（含4倍）E降低2倍以上357.類毒素刺激機體后產(chǎn)生的特異性免疫應(yīng)答物質(zhì)是（）A干擾素B抗毒素C補體D乙型溶素E細胞因子15．細菌標本的采集與送檢錯誤做法是（2）A根據(jù)病原菌不同而采集不同標本B標本最好在使用抗生素之前采集C盡量采取病變明顯部位的材料D用于分離的標本均需冷藏快送E采局部標本時應(yīng)先用消毒劑，避免雜菌污染36A通過胎盤或初乳B接種抗毒素C接種疫苗D患傳染病后E注射丙種球蛋白3712.自然自動免疫獲得方式（）14．人工自動免疫獲得方式（）11.人工被動免疫獲得方式（多）13.自然被動免疫獲得方式（）第三節(jié)細菌感染的治療原則何時用？怎樣用？

WHO的統(tǒng)計結(jié)果表明，中國有1/2的兒童一旦出現(xiàn)咳嗽、流鼻涕的癥狀，就使用抗生素進行治療。

對全國83萬名0～13歲兒童支氣管哮喘患病情況調(diào)查顯示，94%以上的哮喘兒童應(yīng)用抗菌藥物治療，多數(shù)為盲用或濫用。www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－資料

我國有50%的人生病時使用抗生素，但事實上只有25%的患病者需要使用抗生素。

我國門診感冒患者約有75％應(yīng)用抗生素；外科手術(shù)應(yīng)用抗生素的情況則高達95％；我國住院患者的抗生素應(yīng)用率為79％，這一數(shù)字遠高于英國的22％和各國平均水平30％。www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－資料

不送檢驗標本，沒有藥敏試驗，長期“經(jīng)驗用藥”，你有足夠的經(jīng)驗嗎？病毒感染者常規(guī)使用：預(yù)防？“保險”？無知？其他？忽視毒副反應(yīng)的濫用：肝腎毒性、藥物熱

首選三代、四代頭孢，是對還是錯？

首選碳青霉烯類——所謂“一次搞定”，是對還是錯？濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－表現(xiàn)·無菌手術(shù)的濫用:術(shù)前、術(shù)中、術(shù)后各個環(huán)節(jié)的濫用：劑量、時間、預(yù)防？·無依據(jù)地濫用：如不明原因發(fā)熱、病毒感染（談SARS治療）、局部疼痛·無指征地聯(lián)合用藥：保險？經(jīng)驗？·抗感染治療中忽視支持治療·抗結(jié)核藥物單用，或療程不足濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－表現(xiàn)·不恰當(dāng)聯(lián)用:如頭孢菌素與大環(huán)內(nèi)酯類藥物聯(lián)用（有爭議？）·錯誤聯(lián)用:氧哌嗪青霉素＋派拉西林合用16天（同一藥物，只是名字、廠家不同）·無知用藥：慶大霉素與奈替米星合用，同屬氨基糖苷類藥合用，加重了耳腎毒性·胡亂用藥：頸部無菌手術(shù)預(yù)防性使用頭孢他定8g/d，10天，出院后帶紅霉素www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－舉例

該患者藥物使用劑量小于正常健康人耐受臨床試驗最大劑量（2.4g），排除中毒；患者過去曾經(jīng)使用過林可霉素2.4g，靜脈滴注,未見異常，排除單純過敏反應(yīng)所致。通過標準化輸液泵給藥試驗發(fā)現(xiàn)，該藥的可能致死輸注速度為20.04mg／min，而該患者的給藥速度是致死速度的3倍！提示患者死因與滴速過快有密切關(guān)系。www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－舉例1女性患者，靜脈滴注林可霉素1.8g/250ml，0.5小時內(nèi)滴注完畢，滴注結(jié)束時猝死，其滴速是每分鐘59.76mg。林可霉素具有神經(jīng)肌肉接頭阻滯作用,與麻醉藥、肌松藥聯(lián)合應(yīng)用時應(yīng)該減量,否則可因協(xié)同作用而易引起呼吸抑制,甚至致死。而本例一次使用林可霉素1.2g，劑量偏大,應(yīng)該0.6g間隔8－12小時重復(fù)使用。提示,患者的死亡可能與林可霉素劑量過大和林可霉素與麻醉藥、肌松藥不良相互作用有關(guān)。www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－舉例１患者因急性闌尾炎術(shù)后靜脈滴注林可霉素1.2g/500m1預(yù)防感染，滴注完畢后，呼吸衰竭、休克死亡。

慶大霉素的腎毒性明顯，屢有報道

一般用該藥不可超過14天！

用藥中要進行腎功能監(jiān)測

必要時應(yīng)作血藥濃度監(jiān)測www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－舉例1男性患者，44歲，因急性胰腺炎入院，給予慶大霉素24萬單位，每日一次，靜脈滴注，共29天，最終因急性腎功能衰竭治療無效死亡。

羅氏芬可以肌肉注射，也可以靜脈推注，常規(guī)推注劑量每次2g，本例計量過大，推注速度？多數(shù)麻醉藥能夠?qū)е陆M織胺釋放，故誘導(dǎo)麻醉后使用抗生素經(jīng)常出現(xiàn)皮疹

本例是否與過敏反應(yīng)有關(guān)上海某醫(yī)院一患者因?qū)︻^孢類抗生素過敏死亡的病例

我院還出現(xiàn)術(shù)中胸腔用羅氏芬灌洗出現(xiàn)休克的案例www.medinfect.com濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種－舉例1男性患者，55歲，因腦膠質(zhì)瘤擬行手術(shù)，誘導(dǎo)麻醉后給予羅氏芬4g靜脈推注，數(shù)分鐘血壓下降、心律減慢，至心跳驟停。經(jīng)胸