第十三章巴比妥類藥物的分析課件

第五章巴比妥類藥物的分析

巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物應用廣泛，容易因不合理使用而引起中毒。本章重點介紹巴比妥類藥物的化學結構與分析方法間的關系，介紹鑒別、檢查和含量測定的原理與方法。一、巴比妥類藥物的基本結構通式

5,5-取代的巴比妥類藥物

5區(qū)別各種巴比妥類藥物

環(huán)狀丙二酰脲、1,3-二酰亞胺基團決定巴比妥類藥物的特性

1.環(huán)狀母核部分2.取代基部分二、理化性質（一）物理性質

1.白色結晶或結晶性粉未，具有固定的熔點。

2.游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機溶劑。

化學性質

巴比妥類藥物分子結構中都有1,3-二酰亞胺基團，能發(fā)生酮式和烯醇式的互變異構，在水溶液中可以發(fā)生二級電離。因此，本類藥物的水溶液顯弱酸性（pKa為7.3-8.4），可與強堿形成水溶性的鹽類。1.弱酸性與強堿的成鹽反應：2.水解反應

（1）與銀鹽的反應

3、與重金屬離子的反應（2）與銅鹽的反應

有色配位化合物（3）與鈷鹽的反應

無水;所用試劑均應不含水分。反應條件：堿性：異丙胺（4）與汞鹽的反應巴比妥類藥物+汞鹽→白色↓（可溶于氨試液）4、與香草醛（vanillin）的反應

紫色-藍色乙醇5、紫外吸收光譜特征H2SO4溶液(0.05mol/L)pH9.9緩沖溶液NaOH溶液(0.1mol/L)(pH13)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜Anm硫噴妥的紫外吸收光譜HCl溶液(0.1mol/L)NaOH溶液(0.1mol/L)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征和其電離的程度有關

5,5-取代的巴比妥類藥物在pH=2的酸性溶液中，因不電離，幾乎無明顯的紫外吸收。在pH=10的堿性溶液中，發(fā)生一級電離于240nm處有最大吸收。在pH=13的強堿性溶液中，發(fā)生二級電離，最大吸收紅移至255nm處。硫代巴比妥類藥物在酸性或堿性溶液中，均有較明顯的紫外吸收。

7、顯微結晶特征藥物本身的晶形巴比妥：長方形；苯巴比妥：球形→花瓣狀反應產物的晶形巴比妥＋銅吡啶試液→十字形紫色結晶苯巴比妥＋銅吡啶試液→細小不規(guī)則或似菱形的淺紫色結晶6、薄層色譜行為特征對照品對照鑒別（1）與銀鹽的反應、（二）銅鹽反應二、鑒別試驗（一）、丙二酰脲類反應（二）熔點測定巴比妥類的鈉鹽＋酸→游離巴比妥類藥物↓→過濾→洗滌→干燥→測熔點苯巴比妥鈉的鑒別取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過量稀鹽酸，即析出白色結晶性沉淀，濾過；沉淀用水洗凈，在105℃干燥后，依法測定，熔點為174-178℃。

司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色不飽和烴取代基的反應①與溴試液或碘試液的反應②與KMnO4的反應可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（三）、特殊取代基及元素的反應②與NaNO2—H2SO4反應

苯巴比妥與甲醛—H2SO4反應生成玫瑰紅色

苯巴比妥與NaNO2—H2SO4反應生成橙黃色→橙紅色③與甲醛—H2SO4反應①硝化反應芳香取代基的反應硫元素的反應

（四）、鈉鹽的鑒別反應1.焰色反應取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色

2.與醋酸氧鈾鋅反應取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色↓（五）、紅外分光光度法第三節(jié)特殊雜質檢查一、苯巴比妥的特殊雜質檢查

酸度乙醇溶液的澄清度中性或堿性物質二、司可巴比妥鈉的特殊雜質檢查

溶液的澄清度中性或堿性物質

終點指示：電位法指示（Ag電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極）自身指示

一、銀量法1.原理：反應摩爾比（1∶1）溶劑系統(tǒng)：甲醇+3%無水碳酸鈉第四節(jié)含量測定

苯巴比妥：

取本品約0.2g，精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新制的3％無水碳酸鈉溶液15m1，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mo1/L）相當于23.22mg的C12H12N2O3。

2.測定方法與計算原料藥：直接滴定法

3.注意事項（1）無水碳酸鈉應新鮮配制（2）AgNO3滴定液應新鮮配制（3）銀電極使用前應進行處理

凡取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵可與溴定量地發(fā)生加成反應，故可采用溴量法進行測定。如司可巴比妥鈉及其膠囊的測定二、溴量法1.原理

I2＋2Na2S2O3＝2NaI＋Na2S4O6KBrO3＋5KBr＋6HCl＝3Br2＋6KCl＋3H2O

Br2＋2KI＝2KBr＋I2司可巴比妥鈉：取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10m1，振搖使溶解，精密加溴滴定液（0.1mol/L）25ml，再加鹽酸5m1，立即密塞并振搖1min，在暗處靜置15min后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10m1，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相當于13.01mg的C12H17N2NaO3。2.測定方法與計算原料藥：剩余滴定法

3.注意事項（1）操作中要防止溴和碘的逸失（2）平行條件進行空白試驗可減少溴和碘逸失帶來的誤差。1.在水—醇混合溶劑中的滴定法弱酸性pKa7.3～8.4異戊水—醇溶解麝香草酚酞NaOH淡藍色（三）、酸堿滴定法此法終點判斷較困難

取本品約0.5g，精密稱定，加乙醇20m1溶解后，加麝香草酚酞指示液6滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定，并將滴定結果用空白試驗校正，即得。每lml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于22.63mg的C11H18N2O3。

異戊巴比妥的含量測定

溶劑：二甲基甲酰胺滴定劑：甲醇鈉（鉀）指示劑：麝香草酚藍

3、非水溶液滴定法2、在膠束水溶液中進行的滴定法

溶劑：表面活性劑-溴化十六烷基三甲基芐胺水溶液滴定劑：氫氧化鈉滴定液指示劑：麝香草酚肽

四、紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法

本法是將樣品溶解后，根據(jù)溶液的pH值選用其相應的

max處進行直接測定。單組分定量方法：1.吸收系數(shù)法2.標準曲線法

3.對照法

取裝量差異項下的內容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當于硫噴妥鈉0.25g），置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%NaOH溶液定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液；另取硫噴妥對照品，精密稱定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液。照分光光度法，在304nm的波長處分別測定A，根據(jù)每支的平均裝量計算。每1mg硫噴妥相當于1.091mg的C11H17N2NaO2S。如注射用硫噴妥鈉的含量測定（2）經提取分離后的紫外分光光度法根據(jù)巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶的特點，本法可消除干擾物質對巴比妥類藥物測定的影響。取鈉鹽加水溶解，加酸酸化，用氯仿提取后再加堿反提。排除輔料或雜質的干擾。

1、測定方法-取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學環(huán)境（如在其一中加酸、堿或緩沖液改變溶液的pH，或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學反應的試劑），然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當波長處，測其吸收度的差值（

A值）。（3）多組分混合物不經分離的定量方法

——計算分光光度法差示分光光度法（

A法）2.必要條件

（1）供試品在不同的化學環(huán)境中以不同的分子形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異。（2）干擾物的吸收不受測定時化學環(huán)境的影響，光譜行為不變。

供試品在兩種不同的化學環(huán)境中分別以x、y表示，干擾物用z表示3.定量依據(jù)即，吸收度差值（

A）僅與待測組分的濃度有關，而與干擾組分無關，即干擾組分的干擾被消除。

可用對照法或標準曲線法定量

保留了通常的分光光度法簡易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點，又無需事先分離，并能消除干擾。4.特點5.應用（1）于波長240nm處，測定pH10和pH2兩種溶液的吸收度之差（2）于波長260nm處，測定pH10和強堿溶液的吸收度之差（五）、高效液相色譜HPLC法同時測定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡馬西平的濃度色譜條件：色譜柱AgilentZORBAXSB-C18柱(250×4.6mm,5μm),流動相為甲醇∶水∶乙腈(45∶45∶10）流速1.0ml/min,柱溫30℃,檢測波長254nm。血樣處理：取內標溶液100μL，60℃水浴氮氣吹干，加200μL待測血清,加提取液（氯仿：乙酸乙醋=50：50）2ml,旋渦混合5min,以4000轉/分離心10min,用吸管吸取上層水層,棄去。用移液管移取有機相置帶蓋尖底塑料離心管中,于60℃水浴中氮氣吹干,用流動相200μL溶解,取20μL進樣測定方法驗證：標準曲線與線性、精密度（RSD<3%)、方法回收率、提取回收率（大于87%）、穩(wěn)定性等均符合中國藥典的要求（六）電泳法-體內苯巴比妥、巴比妥測定（七）氣相色譜-質譜聯(lián)用體液中七種巴比妥類藥物的同時測定，前處理方法為固相微萃取1、字體安裝與設置如果您對PPT模板中的字體風格不滿意，可進行批量替換，一次性更改各頁面字體。在“開始”選項卡中，點擊“替換”按鈕右側箭頭，選擇“替換字體”。（如下圖）在圖“替換”下拉列