2024年滬教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年滬教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷178考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列敘述符合基因工程概念的是A.在細(xì)胞內(nèi)直接將目的基因與宿主細(xì)胞的遺傳物質(zhì)進(jìn)行重組，賦予生物新的遺傳特性B.將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的大腸桿菌菌株C.用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上2、下列關(guān)于果醋的制作過程，錯(cuò)誤的是（）A.果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，所以在制作過程中需要通氧氣B.醋酸菌是一種嗜溫菌，溫度要求較高，一般在50℃C.醋酸菌能將果酒變成果醋D.當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌可將葡萄中的糖分解為醋酸3、上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛。他們還研究出一種可以大大提高基因表達(dá)水平的新方法，使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍，標(biāo)志著我國轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。以下與此有關(guān)的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因牛的培育過程只涉及基因工程、胚胎工程的相關(guān)技術(shù)B.該培育過程一般需要用到乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件C.所謂“提高基因表達(dá)水平”主要是指提高人白蛋白基因在牛乳腺細(xì)胞中的含量D.人們只能在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白，是因?yàn)榇嘶蛑淮嬖谟谌橄偌?xì)胞中4、科研人員利用兩種限制酶（R1和R2）分別單獨(dú)處理和同時(shí)處理某DNA分子（用“M”表示）；得到的產(chǎn)物再進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖所示。以下相關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是（）

A.兩種限制酶在M上識別的核苷酸序列相同B.二苯胺試劑也可用于DNA的鑒定，但無法檢測DNA分子的大小和種類C.凝膠中的DNA分子經(jīng)染色后，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來D.限制酶R1與R2都能切斷磷酸二酯鍵5、某興趣小組就“泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化”開展了研究；操作如下:2021年1月4日下午選取1；2、3號三只相同的泡菜壇，在每個(gè)壇中加入洗凈的新鮮蓮花菜，再分別倒入相同量的煮沸并冷卻的鹽水，將壇密封，置于同一環(huán)境中。封壇前進(jìn)行第一次取樣測定亞硝酸鹽含量，后來定時(shí)測定，結(jié)果如圖。

下列對該實(shí)驗(yàn)的分析錯(cuò)誤的是（）A.泡菜制作過程中鹽水需煮沸的目的是為了殺滅雜菌，冷卻后再用是為了防止溫度過高殺死所需菌種B.在腌制過程中泡菜壇中的溶液會增加，這是由于鹽水濃度大于細(xì)胞液濃度，植物細(xì)胞會通過滲透作用失水C.腌制泡菜的過程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是兼性厭氧菌，用水封壇的目的是為乳酸菌提供無氧環(huán)境D.由題圖知，該小組對每個(gè)壇中的數(shù)據(jù)分別畫出曲線，這是不科學(xué)的，設(shè)置三個(gè)泡菜壇目的是進(jìn)行平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，取平均值，使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更真實(shí)6、研究人員將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)虢湍钢?，讓酵母產(chǎn)生LTP1蛋白。下圖為該實(shí)驗(yàn)過程的部分流程。下列說法正確的是（）

A.運(yùn)用PCR擴(kuò)增LTP1基因時(shí)，應(yīng)選擇左圖的A和D作為引物B.為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，可在引物5’端添加限制酶的識別序列C.如圖中為了篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培養(yǎng)基D.為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)，需要在目的基因兩側(cè)添加大麥的啟動子和終止子評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)7、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的正確觀點(diǎn)是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對治療性克隆D.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交8、下列關(guān)于發(fā)酵工程的應(yīng)用，敘述正確的是（）A.檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，可以通過黑曲霉發(fā)酵制得B.可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗C.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌特異性強(qiáng)，只能用來防治一種農(nóng)林害蟲D.一種真菌通過發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋病9、為探究某物種的等位基因“CST1”與“cst1E81K”的功能，科研人員將表達(dá)CST1和cst1E81K的質(zhì)粒分別導(dǎo)入無法吸收葡萄糖的酵母菌（以麥芽糖為碳源），經(jīng)處理后再將其接種在含不同碳源的培養(yǎng)基上，結(jié)果如下圖所示，下列說法正確的是（）

A.上述酵母菌在接種前的處理是對其進(jìn)行等濃度梯度的稀釋B.在含葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入CST1的酵母菌存活率最高C.據(jù)圖推測，CST1的功能可能是轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞D.導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于導(dǎo)入CST1的酵母菌10、甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細(xì)胞雜交，成功地將乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因引入甲中，下圖為該操作示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可使用離心法B.融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后再進(jìn)行組織培養(yǎng)C.雜種細(xì)胞經(jīng)過一定激素和營養(yǎng)的誘導(dǎo)，發(fā)育成為雜種植株D.篩選出的雜種植株含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，但只能通過母本進(jìn)行傳遞11、在進(jìn)行擬矮牽牛和矮牽牛的種間原生質(zhì)體融合時(shí)，利用親本材料對藥物抗性的差異來選擇雜種細(xì)胞的過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長B.同一株植物的不同細(xì)胞經(jīng)離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合過程一定要在無菌水中進(jìn)行，防止雜菌污染D.通過③得到的愈傷組織等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子12、下列有關(guān)動物細(xì)胞工程操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個(gè)體C.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植13、免疫PCR是對微量抗原的一種檢測方法。下圖是利用該技術(shù)檢測牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標(biāo)記的抗體2，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，最后進(jìn)行電泳檢測，相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象C.電泳檢測結(jié)果只能判斷陽性與否，無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應(yīng)通過PCR技術(shù)間接擴(kuò)增放大，從而達(dá)到可檢測的水平14、傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵B.制作腐乳利用了微生物產(chǎn)生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在無氧條件下產(chǎn)生乙酸評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)15、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。17、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目___________，這是因?yàn)開_____________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。18、目的基因是指：______19、植物基因工程：______。20、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。21、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關(guān)資料，分析和歸納這些資料__________。評卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共8分)22、氧化硫硫桿菌（T．t）通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用。科學(xué)家欲通過實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響。

實(shí)驗(yàn)材料：氧化硫硫桿菌（T．t）菌液；蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液，配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基(含單質(zhì)硫)，恒溫?fù)u床等。

請分析并回答以下問題：

（1）氧化硫硫桿菌的代謝類型為______________，培養(yǎng)氧化硫硫桿菌（T．t）的液體培養(yǎng)基中的碳源是___________，該培養(yǎng)基從功能上屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實(shí)驗(yàn)前，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氧化硫硫桿菌（T．t）菌液已被雜菌污染，于是在配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基中加入____________，用______________法接種并進(jìn)行純化培養(yǎng)；得到了氧化硫硫桿菌菌落。

（3）實(shí)驗(yàn)步驟：

第一步：對配制好的培養(yǎng)基再次進(jìn)行______________滅菌處理；以防止雜菌污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

第二步：取三個(gè)錐形瓶（編號A、B、C）分別加入等量培養(yǎng)基后，再依次分別加入____________________________；

第三步：往A、B、C三組中接種______________后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

第四步：每天測定并記錄各組的硫酸含量。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：如圖所示；據(jù)圖分析實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：________________________________________________________。23、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達(dá)87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發(fā)育周期短、費(fèi)用低、體外受精、透明等優(yōu)點(diǎn)，斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應(yīng)用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領(lǐng)域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達(dá)受阻從而構(gòu)建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關(guān)基因的表達(dá)。針對其作用原理，現(xiàn)有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

為了驗(yàn)證上述假說；研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實(shí)驗(yàn)組和對照組的細(xì)胞中提取總RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進(jìn)行PCR后的結(jié)果為______（填字母）。A．實(shí)驗(yàn)組有雜交帶B．實(shí)驗(yàn)組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進(jìn)行PCR時(shí)，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細(xì)胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行______培養(yǎng)，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為______細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。24、兩只克隆小猴“中中”和“華華”是世界首例非人靈長類動物的體細(xì)胞克隆猴；這是我國的研究成果。一年后5只世界首例生物節(jié)律紊亂的體細(xì)胞克隆猴誕生。下圖為培育克隆猴的流程，回答下列問題：

(1)在“中中”“華華”之前，科學(xué)家已培育了胚胎細(xì)胞克隆猴，胚胎細(xì)胞核移植難度明顯低于體細(xì)胞核移植的原因是_____。

(2)科學(xué)家首先將采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)至____期，然后去核，這里的“去核”實(shí)際上是指去除____。核移植過程中用滅活的仙臺病毒進(jìn)行了短暫處理，其目的是_____。形成的重構(gòu)胚具有_____的能力。體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，需提供適宜的營養(yǎng)及環(huán)境條件，推測環(huán)境條件包括_____（答出2點(diǎn)）。

(3)我國科研團(tuán)隊(duì)采集一只睡眠紊亂最明顯的BMAL1基因敲除的獼猴的體細(xì)胞，通過核移植技術(shù)獲得了5只克隆猴，理論上這5只克隆猴之間的細(xì)胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。為驗(yàn)證上述5只基因敲除獼猴存在晝夜節(jié)律紊亂問題，科學(xué)家用檢測設(shè)備監(jiān)測實(shí)驗(yàn)猴，通過行為學(xué)分析檢測其是否明顯表現(xiàn)出睡眠紊亂的癥狀，對照組的設(shè)置應(yīng)為_____。在研究人類疾病致病機(jī)制、研發(fā)人類新藥時(shí)，選用“模型猴”更優(yōu)于“模型鼠”的原因是_____。25、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________評卷人得分五、綜合題(共2題，共6分)26、M蛋白在人體神經(jīng)發(fā)育過程中起重要作用；M基因發(fā)生突變或表達(dá)異?？蓪?dǎo)致神經(jīng)發(fā)育紊亂性疾病，如Rett綜合征和MDS等。

(1)M蛋白可識別并結(jié)合甲基化DNA，進(jìn)而調(diào)控靶基因的_____。

(2)對一位Rett綜合征患者進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)；其M基因發(fā)生了一個(gè)堿基對的替換，細(xì)胞內(nèi)只有截短的M蛋白。

①一個(gè)堿基對的替換導(dǎo)致M基因的mRNA_____；翻譯后合成了截短的M蛋白。

②研究者提出，可通過改造tRNA使患者細(xì)胞能夠合成正常長度的M蛋白。請簡述利用該技術(shù)治療此類Rett綜合征的基本原理。_____

(3)圖1為一個(gè)MDS患者的家系圖。采集全部家系成員外周血進(jìn)行檢測；核型分析未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目異常，測序發(fā)現(xiàn)其M基因均為野生型，M基因表達(dá)的檢測結(jié)果如圖2，M基因拷貝數(shù)如下表。

檢測對象M基因拷貝數(shù)Ⅰ11Ⅰ23Ⅱ13Ⅱ22正常男性1正常女性2

①根據(jù)以上信息推測Ⅱ2患病的原因。_____

②女性體細(xì)胞中有一條X染色體是失活的，失活X染色體上絕大多數(shù)基因被沉默。用限制酶HpaⅡ剪切Ⅰ2基因組DNA；然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增及電泳，結(jié)果如圖3。

圖3中引物組合應(yīng)為_____。

③Ⅰ2的M基因拷貝數(shù)高于正常女性，但表型正常，請結(jié)合以上研究提出合理解釋。_____27、HIV侵入感染T細(xì)胞時(shí)；需要先與T細(xì)胞膜上的CCR5受體結(jié)合才能進(jìn)入T細(xì)胞，該受體由CCR5基因編碼。科學(xué)家預(yù)想：將造血干細(xì)胞中的CCR5基因人為敲除，這樣形成的T細(xì)胞膜上將不會出現(xiàn)該受體，HIV就無法進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，將敲除了CCR5基因的造血干細(xì)胞回輸患者體內(nèi)，有望治療艾滋病。回答下列問題：

(1)與選取別人的造血干細(xì)胞相比，選取患者自己的造血干細(xì)胞進(jìn)行基因敲除的優(yōu)點(diǎn)是___________。將造血干細(xì)胞培養(yǎng)成T細(xì)胞，從本質(zhì)上是__________的結(jié)果。

(2)為精準(zhǔn)敲除掉CCR5基因，科研人員設(shè)想利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除CCR5基因，過程如圖所示：合成一段與CCR5基因互補(bǔ)的單鏈引導(dǎo)RNA序列；通過__________法將單鏈引導(dǎo)RNA序列和Cas9蛋白導(dǎo)入患者的造血干細(xì)胞，單鏈引導(dǎo)RNA序列上的堿基與CCR5基因上的堿基序列進(jìn)行識別并配對的原則是__________；Cas9蛋白與單鏈引導(dǎo)RNA的組合本質(zhì)上與基因工程的__________酶功能類似，可引導(dǎo)Cas9蛋白切割CCR5基因相鄰脫氧核苷酸之間的__________鍵；從而敲除CCR5基因。

(3)上述操作過程已在克隆猴實(shí)驗(yàn)中獲得成功，與不同供體克隆猴相比，使用同一供體克隆猴進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的優(yōu)勢是____________。培育體細(xì)胞克隆猴，涉及的胚胎工程技術(shù)主要有__________（答出2項(xiàng)即可）。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；基因工程是在生物體外將DNA進(jìn)行重組形成重組DNA分子；然后導(dǎo)入受體細(xì)胞，賦予生物新的遺傳特性，A錯(cuò)誤；

B；將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌；獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株，這是基因工程技術(shù)的應(yīng)用，B正確；

C；用紫外線照射青霉菌；使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株，這是誘變育種，與基因工程無關(guān)，C錯(cuò)誤；

D；基因工程是按照人們的意愿；對生物進(jìn)行的定向改造，而自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上不符合基因工程的概念，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【分析】

醋酸菌好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

【詳解】

A；醋的制作需用醋酸菌；醋酸菌是一種好氧菌，所以在制作過程中需適時(shí)通氧氣，A正確；

B；醋酸菌是一種嗜溫菌；溫度要求較高，一般在30-35℃左右，B錯(cuò)誤；

C；醋酸菌能在氧氣充足；糖源不足的條件下將果酒轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰?，在生成醋酸，因此可以制作果醋，C正確；

D；當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)；醋酸菌可將葡萄中的糖分解成醋酸，D正確。

故選B。3、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動物的受體細(xì)胞是受精卵；所以含有轉(zhuǎn)基因的受精卵在形成個(gè)體時(shí)，所有細(xì)胞都會含有轉(zhuǎn)入的基因，“提高基因的表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞表達(dá)出更多的人白蛋白，而不是含有更多的白蛋白基因。只在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中才能獲取人白蛋白，因?yàn)槿税椎鞍谆蛑辉谂Ｈ橄偌?xì)胞才表達(dá)。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因牛的培育過程涉及基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)以及配套工程的相關(guān)技術(shù)；A錯(cuò)誤；

B；由題意“使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍”可知：該培育過程一般需要用到乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件使目的基因在乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)；B正確；

C；提高基因表達(dá)水平是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有的人白蛋白基因指導(dǎo)合成更多的人白蛋白；C錯(cuò)誤；

D；人們只能在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白；是因?yàn)榇嘶蛑辉谌橄偌?xì)胞中表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選B。4、A【分析】【分析】

用瓊脂糖凝膠電泳方法檢測DNA分子；在同一電場；同一凝膠中，DNA分子在電場中的遷移速度主要與DNA分子的大小有關(guān)，DNA分子越大，遷移速率越慢，反之則越快。

【詳解】

A；據(jù)圖可知；兩種限制酶處理M后，得到一種大小的DNA片段，說明M為環(huán)狀DNA分子，兩種限制酶在M上均只有一個(gè)識別、切割位點(diǎn)，但二者識別的核苷酸序列不應(yīng)相同，A錯(cuò)誤；

B；二苯胺試劑與DNA共熱；可產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，此方法可用于DNA的鑒定，但無法檢測DNA分子的大小和種類，B正確；

C；凝膠中的DNA分子經(jīng)染色后；對波長為300nm的紫外光吸收性強(qiáng)，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，C正確；

D、限制酶R1與R2可識別特定的脫氧核苷酸序列；并在特定位點(diǎn)切斷磷酸二酯鍵，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】5、C【分析】【分析】

分析題圖：在1；2、3號壇中；亞硝酸鹽的含量變化都表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢，其中在1月7日亞硝酸鹽含量最高，到1月14日亞硝酸鹽的含量下降到最低水平，之后亞硝酸鹽的含量基本保持不變。在泡菜腌制的初期，壇內(nèi)環(huán)境有利于硝酸鹽還原菌的繁殖，這些細(xì)菌可以促進(jìn)硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，但隨著腌制時(shí)間的增加，乳酸菌也大量繁殖，對硝酸鹽還原菌產(chǎn)生一定的抑制作用，使其生長繁殖受影響，造成泡菜中亞硝酸鹽含量又有所下降。

【詳解】

A；泡菜制作過程中需要消毒；鹽水需煮沸的目的是為了殺滅雜菌，冷卻后再用是為了防止溫度過高殺死所需菌種，A正確；

B；在腌制過程中由于加入鹽水；由于鹽水濃度大于細(xì)胞液濃度，植物細(xì)胞會通過滲透作用失水，泡菜壇中的溶液會增加，B正確；

C；腌制泡菜的過程中；起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，C錯(cuò)誤；

D；由題圖知；每個(gè)壇亞硝酸鹽含量測定間隔時(shí)間不同，該小組對每個(gè)壇中的數(shù)據(jù)分別畫出曲線，這是不科學(xué)的，設(shè)置三個(gè)泡菜壇目的是進(jìn)行平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，取平均值，使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更真實(shí)，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】6、B【分析】【分析】

圖示表示將使啤酒產(chǎn)生豐富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中；使其產(chǎn)生LTP1蛋白，酸出泡沫豐富的啤酒的過程，圖中A為獲取目的基因的過程，B為質(zhì)粒，C為基因表達(dá)體。

【詳解】

A；結(jié)合題意可知；DNA復(fù)制只能從5’到3’，而DNA聚合酶只能從引物的3’端延伸DNA鏈，因此構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取B和C作為引物，A錯(cuò)誤；

B；為構(gòu)建重組質(zhì)粒(即將目的基因和質(zhì)粒整合到一起)；在引物5’端需要適當(dāng)增加限制酶識別序列B正確；

C；由圖可知；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，四環(huán)素抗性基因被破壞，而青霉素抗性基因沒有被破壞，因此將導(dǎo)入C的酵母菌分別在含有青霉素和四壞素的兩種選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，則在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活，才能篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，C錯(cuò)誤；

D；為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)；需要在目的基因兩側(cè)添加酵母的啟動子和終止子，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共8題，共16分)7、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

我國反對以克隆人為目的任何實(shí)驗(yàn)和舉動；主要是基于以下四方面的倫理考慮：

1；克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)；

2；克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律；

3；克隆人將擾亂社會家庭的正常倫理定位；

4；克隆人的安全性在倫理上也難以確認(rèn)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒性別會引起性別比例失調(diào)；違背倫理道德，我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，A錯(cuò)誤；

B；基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)；但不反對治療性克隆，C正確；

D；大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選BC。8、A:B【分析】【分析】

發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段；利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育；培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。

【詳解】

A；檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑；可以通過黑曲霉發(fā)酵制得，A正確；

B；可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗；B正確；

C；利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌可以用來防治80多種農(nóng)林害蟲；C錯(cuò)誤；

D；一種放線菌通過發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋?。籇錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】9、A:C【分析】【分析】

從左圖看出；在添加麥芽糖的培養(yǎng)基中空質(zhì)粒組；導(dǎo)入CST1和導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落數(shù)目相差不大，但在麥芽糖+葡萄糖類似物組中，導(dǎo)入CST1的酵母菌菌落數(shù)目最少，說明吸收葡萄糖類似物最多。

【詳解】

A；從圖中可以看出；后一稀釋濃度是前一稀釋濃度的5倍，所以是進(jìn)行等濃度梯度的稀釋，A錯(cuò)誤；

B；在含葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上；導(dǎo)入CST1的酵母菌菌落顏色最淺，說明存活率最低，B錯(cuò)誤；

C；導(dǎo)入CST1的酵母菌在葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目降低；由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測CST1能轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖類似物進(jìn)入酵母菌，所以其功能可能是轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞，C正確；

D、在麥芽糖+葡萄糖類似物的培養(yǎng)基中，導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌菌落數(shù)目多，說明其存活率更高，由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于導(dǎo)入CST1的酵母菌；D錯(cuò)誤。

故選C。10、A:B:C【分析】【分析】

題圖分析：該圖為體細(xì)胞雜交過程；其中A為去除細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體，可以用酶解法，B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細(xì)胞應(yīng)該具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因，甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因，該過程的原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有化學(xué)法（聚乙二醇）和物理法（離心、振動、電刺激等）兩大類；A正確；

B；雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是細(xì)胞融合成功的標(biāo)志；融合成功之后再進(jìn)行組織培養(yǎng)，B正確；

C；雜種細(xì)胞經(jīng)過外源生長素和細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo)；脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，進(jìn)一步成為雜種植株，C正確；

D；甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；雜種植株細(xì)胞核內(nèi)含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因，因此精子中具備一半核基因，并可通過父本（精子）進(jìn)行傳遞，D錯(cuò)誤。

故選ABC。11、C:D【分析】【分析】

人工種子是以植物組織培養(yǎng)的胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽為原料,用人工薄膜包裝而成的種子。

【詳解】

A；由圖可知；只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長得到雜種植物，A正確；

B；同一株植物的不同細(xì)胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同，B正確；

C；②是原生質(zhì)體的融合過程；原生質(zhì)體放入無菌水中可能會吸水漲破，C錯(cuò)誤；

D；通過③得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子；D錯(cuò)誤。

故選CD。12、A:B【分析】【分析】

動物細(xì)胞工程技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)；動物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù)；其中動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分。干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分，A錯(cuò)誤；

B；動物細(xì)胞融合不能形成雜種個(gè)體；形成的是雜種細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜種個(gè)體，兩者都能形成雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動物體細(xì)胞分化程度較高；全能性較低，因此動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選AB。13、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測系統(tǒng)；將一段已知序列的DNA片段標(biāo)記到抗體2上，通過抗原抗體的特異性識別并結(jié)合，抗體2會和固定抗體1；抗生素形成復(fù)合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進(jìn)行擴(kuò)增，通過檢測PCR產(chǎn)物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測的牛乳中可能含有牛乳腺細(xì)胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經(jīng)過PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物中，不僅有抗體2上的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴(kuò)增產(chǎn)物，使檢測結(jié)果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴(kuò)增，會出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應(yīng)；是通過PCR技術(shù)擴(kuò)增抗體2上連接的DNA，最后通過檢測擴(kuò)增產(chǎn)物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關(guān)，抗原、抗體的數(shù)量可通過PCR技術(shù)間接擴(kuò)增放大，C錯(cuò)誤，D正確。

故選ABD。14、A:B:C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

4；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；在無氧條件下；乳酸菌能將葡萄糖分解成乳酸，腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵，A正確；

B；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，B正確；

C；酵母菌在無氧條件下；可通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精，C正確；

D；醋酸菌是好氧型生物；制作果醋利用了醋酸菌在有氧條件下產(chǎn)生醋酸，D錯(cuò)誤。

故選ABC。三、填空題(共7題，共14分)15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子17、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1421、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個(gè)宿主轉(zhuǎn)移到另一個(gè)宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時(shí)近年來由于溫室效應(yīng)加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學(xué)研究，掌握防范的措施和防范，實(shí)現(xiàn)最好的防護(hù)，目前對致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用?！窘馕觥恐虏∥⑸锸侵缚梢郧址溉梭w，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共8分)22、略

【分析】【分析】

微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）

結(jié)合題意“氧化硫硫桿菌通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用”可知，氧化硫硫桿菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型；由于該菌可以進(jìn)行化能合成作用，可以利用液體培養(yǎng)基中的無機(jī)碳或CO2；可以其作為液體培養(yǎng)基中的碳源；該培養(yǎng)基中含有單質(zhì)硫，對生長的菌類具有選擇作用，在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

培養(yǎng)微生物應(yīng)用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；故應(yīng)在配置好的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂；對微生物進(jìn)行純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）

第一步；對培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；

第二步；由于本實(shí)驗(yàn)的目的是通過實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響，則實(shí)驗(yàn)的自變量為硫酸鋅的有無及其含量，實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故本步驟應(yīng)在三個(gè)錐形瓶中分別加入等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液；

第三步；遵循無關(guān)變量一致原則，故往A；B、C三組中接種等量的氧化硫硫桿菌（T．t）后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

（4）

據(jù)圖分析；與對照（蒸餾水組）相比，低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對實(shí)驗(yàn)室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與掌握。熟記相關(guān)知識并能結(jié)合術(shù)語分析作答是解題關(guān)鍵。【解析】（1）自養(yǎng)需氧型無機(jī)碳或CO2選擇培養(yǎng)基。

（2）瓊脂平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）高壓蒸汽等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液等量的氧化硫硫桿菌（T．t）

（4）低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用23、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構(gòu)建的原理是使胰島素基因表達(dá)受阻，而使胰島素基因表達(dá)受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實(shí)線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機(jī)理有兩種假說：可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切，也可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴(kuò)增能得到內(nèi)含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切，故實(shí)驗(yàn)組中應(yīng)含有內(nèi)含子2的序列，而對照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進(jìn)行PCR反應(yīng)，其結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組中有雜交帶，而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時(shí)被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進(jìn)行PCR，觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細(xì)胞，然后對其進(jìn)行原代培養(yǎng)，接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的表達(dá)的相關(guān)知識點(diǎn)，明確基因轉(zhuǎn)錄出來的mRNA是要經(jīng)過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據(jù)題干提取有效信息進(jìn)行答題?！窘馕觥?1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。（得分點(diǎn)：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內(nèi)細(xì)胞團(tuán)原代飼養(yǎng)層24、略

【分析】【分析】

1；克隆動物概念：將動物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動物個(gè)體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

2；原理：動物細(xì)胞核的全能性。

3；動物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動物胚胎細(xì)胞分化程度低；恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。

【詳解】

（1）體細(xì)胞分化程度高；表現(xiàn)全能性困難，而胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性容易，因此動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。

（2）去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂II中期；去核是指去除紡錘體—染色體復(fù)合物；核移植前需用滅活的仙臺病毒對體細(xì)胞進(jìn)行短暫處理，在此過程中，滅活的仙臺病毒的作用是誘導(dǎo)體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合。目前動物細(xì)胞核移植技術(shù)普遍使用的去核方法是顯微操作法，核移植的具體操作是將體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞，從而得到重構(gòu)胚，使其具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力；體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入動物血清等一些天然成分，并將其置于含有95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)基，并創(chuàng)造無菌；無毒環(huán)境。胚胎移植前還需對代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣可以使移植的胚胎獲得相同的生理環(huán)境，以保證胚胎能夠繼續(xù)發(fā)育。

（3）通過核移植技術(shù)獲得了5只克隆猴，理論上這5只克隆猴之間的細(xì)胞核基因型相同，細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞；為了驗(yàn)證這5只基因敲除獼猴是否存在晝夜節(jié)律紊亂問題，該實(shí)驗(yàn)的自變量是BMAL1基因是否敲除，因變量是是否出現(xiàn)睡眠紊亂癥狀。所以對照組的設(shè)置應(yīng)為與克隆獼猴生理狀態(tài)相同的正常的獼猴個(gè)體(或不存在BMAL1缺失）。在研究人類疾病致病機(jī)制、研發(fā)人類新藥時(shí)，因?yàn)楹锱c人的親緣關(guān)系更近，故選用“模型猴”更優(yōu)于“模型鼠”?！窘馕觥?1)胚胎細(xì)胞分化程度低；表現(xiàn)全能性相對容易。

(2)MⅡ紡錘體-染色體復(fù)合物誘導(dǎo)細(xì)胞融合發(fā)育成完整個(gè)體無菌；無毒的環(huán)境；溫度、pH、滲透壓，氣體環(huán)境。

(3)相同與克隆猴生理狀態(tài)相同的正常個(gè)體（或不存在BMAL基因缺失個(gè)體）猴與人的親緣關(guān)系更近25、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能