DB32-T 4393-2022 桃褐腐病抗性鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T4393—2022桃褐腐病抗性鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程Codeofpracticeforidentificationandevaluationbrownrotresistanceinpeach江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局IDB32/T4393—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省園藝標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本文件起草單位:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。1DB32/T4393—2022桃褐腐病抗性鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了桃褐腐病抗性的無(wú)損傷接種鑒定、有損傷接種鑒定、田間觀測(cè)鑒定、褐腐病抗性等級(jí)的量化指標(biāo)。本文件適用于桃褐腐病抗性的鑒定評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY/T2923—2016桃種質(zhì)資源描述規(guī)范NY/T2341—2013植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南桃DB32/T4159—2021桃品種需冷量評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。桃褐腐病peachbrownrotfructicola)侵染所引起的,發(fā)生在桃果實(shí)、花、嫩梢上的病害。褐腐病易危害臨近成熟的果實(shí),果面先產(chǎn)生淡褐色圓形或近圓形水漬狀小斑,數(shù)日內(nèi)很快擴(kuò)展至果實(shí)的大部分,并在病斑表面由發(fā)病中心向外逐漸產(chǎn)生質(zhì)地緊密而隆起的灰色絨球狀霉叢或霉層,常呈同心環(huán)紋狀排列。本文件是褐腐病危害桃果實(shí)的鑒定過(guò)程與評(píng)價(jià)等級(jí)。4鑒定技術(shù)與評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)4.1準(zhǔn)備將超低溫冰箱保存的褐腐病病菌接種在PDA平板上活化培養(yǎng)。接種前,用適量無(wú)菌水洗下平板上的分生孢子,配制孢子懸浮液,用血球計(jì)數(shù)板調(diào)節(jié)孢子濃度到2×105個(gè)/mL,接種前加入土溫20至終濃度0.01%。采收果皮底色褪綠、達(dá)到商品采收期、成熟度為8.0~8.5的果實(shí),每份品種資源至少采60個(gè)~80個(gè),特殊的處理試驗(yàn)也可放大果實(shí)的數(shù)量。果實(shí)采收應(yīng)需避開雨天,或在雨后3d采收。采收后立即運(yùn)回控溫實(shí)驗(yàn)室(24℃±1℃),平衡果實(shí)溫度4h以上,選取無(wú)病蟲害、無(wú)機(jī)械損傷、成熟度一致的果實(shí)用于褐腐病抗性的接種鑒定。準(zhǔn)備經(jīng)70%酒精消毒的泡沫果箱(尺寸宜為60cm×40cm×15cm),底部鋪雙層吸水紙(或無(wú)菌紗布),倒入100mL無(wú)菌水,均勻放置直徑9cm的培養(yǎng)皿20個(gè),每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放置塑料墊圈1個(gè),再在每個(gè)墊圈上放置1個(gè)桃果實(shí)。圓桃果實(shí)放置時(shí)統(tǒng)一側(cè)面朝上,縫合線水平;蟠桃和油蟠桃放置時(shí)統(tǒng)一果2DB32/T4393—2022頂朝上,縫合線豎直。4.2無(wú)損傷人工接種鑒定4.2.1無(wú)損接種在果實(shí)側(cè)面接種10μL的孢子懸浮液,每個(gè)果實(shí)接種1個(gè)點(diǎn),待接種部位自然晾干后再用塑料膜密封果箱,保持果箱內(nèi)濕度90%以上。接種后,在控溫實(shí)驗(yàn)室(24℃±1℃)培養(yǎng)觀測(cè)。4.2.2無(wú)損接種病果率增加速率統(tǒng)計(jì)每天同一時(shí)刻觀察接種點(diǎn)的褐腐病發(fā)生情況,統(tǒng)計(jì)病果率(%),統(tǒng)計(jì)終點(diǎn)為所有的果實(shí)全部發(fā)病或自然腐爛或最長(zhǎng)至15d。病果率(%)=病果數(shù)/調(diào)查總果數(shù)×100。果實(shí)采收后接種,以無(wú)損接種后的天數(shù)為自變量,以病果率為因變量,作截距為0的線性回歸,斜率即為病果率的日增加速率。4.2.3基于無(wú)損接種病果率增加速率的抗性等級(jí)病果率增加速率(%/d):1級(jí)<0.8,2級(jí)[0.8,3.8),3級(jí)[3.8,6.8),4級(jí)[6.8,9.7),5級(jí)[9.7,12.7),6級(jí)[12.7,15.7),7級(jí)[15.7,18.7),8級(jí)[18.7,21.6),9級(jí)≥21.6。無(wú)損接種褐腐病抗性評(píng)價(jià)等級(jí)與數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)參考附錄A,該指標(biāo)可作為桃果實(shí)抗褐腐病侵染的能力。1級(jí)為高抗,2級(jí)~3級(jí)為較抗,4級(jí)~6級(jí)為中等,7級(jí)~8級(jí)為較感,9級(jí)為高感。4.3有損傷人工接種鑒定4.3.1有損接種接種前用接種針在果實(shí)側(cè)面刺破外果皮,深度2mm~3mm,在穿刺孔內(nèi)接種10μL的孢子懸浮液,待接種部位自然晾干后再用塑料膜密封果箱,保持濕度90%以上。接種后,在控溫實(shí)驗(yàn)室(24℃±1℃)培養(yǎng)觀測(cè)。4.3.2有損接種病斑直徑增加速率統(tǒng)計(jì)每天同一時(shí)刻測(cè)量病斑直徑(cm),每個(gè)果實(shí)的統(tǒng)計(jì)終點(diǎn)為病斑覆蓋達(dá)到果實(shí)的一半。以有損接種后的天數(shù)為自變量,以每個(gè)果實(shí)的病斑直徑為因變量,作截距為0的線性回歸,斜率即為病斑直徑的擴(kuò)展速率;以所有接種果實(shí)的平均值作為該樣品的病斑直徑擴(kuò)展速率。4.3.3基于有損接種病斑直徑增加速率抗性等級(jí)有損接種病斑直徑擴(kuò)展速率(cm/d):1級(jí)<0.98,2級(jí)[0.98,1.19),3級(jí)[1.19,1.40),4級(jí)[1.40,1.61),5級(jí)[1.61,1.83),6級(jí)[1.83,2.04),7級(jí)[2.04,2.25),8級(jí)[2.25,2.46),9級(jí)為≥2.46。有損接種褐腐病抗性評(píng)價(jià)的等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)參考附錄B,該指標(biāo)可作為桃果實(shí)抗褐腐病擴(kuò)展的能力。1級(jí)為高抗,2級(jí)~3級(jí)為較抗,4級(jí)~6級(jí)為中等,7級(jí)~8級(jí)為較感,9級(jí)為高感。4.4田間自然發(fā)病4.4.1田間觀測(cè)方法田間觀測(cè),統(tǒng)計(jì)成熟度8.0~8.5的果實(shí),記錄病果率(%)。套袋栽培時(shí),提前3d拆袋,再觀測(cè)病果率。3DB32/T4393—20224.4.2病果率統(tǒng)計(jì)果實(shí)成熟前連續(xù)觀測(cè),以發(fā)病最嚴(yán)重時(shí)的病果率作為該品種該年度的病果率統(tǒng)計(jì)值。田間觀測(cè)鑒定的病果率統(tǒng)計(jì)至少有2年以上的平均值。4.4.3基于田間觀測(cè)鑒定的褐腐病抗性等級(jí)病果率(%):1級(jí)<5,2級(jí)[5,10),3級(jí)[10,15),4級(jí)[15,20),5級(jí)[20,25),6級(jí)[25,30),7級(jí)[30,35),8級(jí)[35,40),9級(jí)≥40?；谔镩g觀測(cè)的褐腐病抗性評(píng)價(jià)參考附錄C。1級(jí)為高抗,2級(jí)~3級(jí)為較抗,4級(jí)~6級(jí)為中等,7級(jí)~8級(jí)為較感,9級(jí)為高感。4DB32/T4393—2022附錄A(資料性)無(wú)損接種褐腐病抗性等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)無(wú)損接種褐腐病抗性等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)見表A.1O表A.1無(wú)損接種褐腐病抗性等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)抗性等級(jí)數(shù)量等級(jí)無(wú)損接種病果率增加速率/(%/d)高抗1級(jí)1級(jí)<0.8較抗2級(jí)0.8≤2級(jí)<3.83級(jí)3.8≤3級(jí)<6.8中等4級(jí)6.8≤4級(jí)<9.75級(jí)9.7≤5級(jí)<12.76級(jí)12.7≤6級(jí)<15.7較感7級(jí)15.7≤7級(jí)<18.78級(jí)18.7≤8級(jí)<21.6高感9級(jí)9級(jí)≥21.65DB32/T4393—2022附錄B(資料性)有損接種褐腐病抗性等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)有損接種褐腐病抗性等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)見表B.1O表B.1有損接種褐腐病抗性等級(jí)和數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)抗性等級(jí)數(shù)量等級(jí)有損接種病斑直徑擴(kuò)展速率/(cm/d)高抗1級(jí)1級(jí)<0.98較抗2級(jí)0.98≤2級(jí)<1.193級(jí)1.19≤3級(jí)<1.40中等4級(jí)1.40≤4級(jí)<1.615級(jí)1.61≤5級(jí)<1.836級(jí)1.83≤6級(jí)<2.04較感7級(jí)2.04≤7級(jí)<2.258級(jí)2.25≤8級(jí)<2.46高感9級(jí)9級(jí)≥2.466DB32/T4393—2022(資料性)田間自然觀測(cè)褐腐