DB50T 1043-2020 無(wú)菌(Germ-free,GF)豬生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范　

ICS65.020.30B40/49DB502020-10-10發(fā)布重慶市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB50/T1043—20201.范圍 32.規(guī)范性引用文件 33.術(shù)語(yǔ)和定義 34.設(shè)施設(shè)計(jì) 45.隔離器 6 87.無(wú)菌豬的制備 98.無(wú)菌豬的飼養(yǎng)管理 1DB50/T1043—2020本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則編寫(xiě)。本標(biāo)準(zhǔn)由重慶市畜牧科學(xué)院提出。本標(biāo)準(zhǔn)由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：重慶市畜牧科學(xué)院、重慶百斯達(dá)生物科技有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：孫靜、葛良鵬、劉作華、梁浩、丁玉春、吳夢(mèng)、林保忠、黃勇、楊松全。2DB50/T1043—2020無(wú)菌（Germ-free,GF）豬生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了無(wú)菌豬的術(shù)語(yǔ)和定義、設(shè)施設(shè)計(jì)、隔離器、日糧，無(wú)菌豬獲取與人工飼養(yǎng)等內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于無(wú)菌豬的制備、培育和相關(guān)實(shí)驗(yàn)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GBZ133醫(yī)用放射性廢物的衛(wèi)生防護(hù)管理GB/T191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T4789.18食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)乳與乳制品檢驗(yàn)GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB8978污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)GB/T18641偽狂犬病診斷技術(shù)GB14925實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施GB/T14926.41實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)菌動(dòng)物生活環(huán)境及糞便標(biāo)本的檢測(cè)方法GB16551豬瘟檢疫技術(shù)規(guī)范GB50052供配電系統(tǒng)設(shè)計(jì)規(guī)范GB50068建筑結(jié)構(gòu)可靠性設(shè)計(jì)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)GB50447實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施建筑技術(shù)規(guī)范SN/T1919-2016豬細(xì)小病毒病檢疫技術(shù)規(guī)范NY/T679豬繁殖與呼吸綜合癥免疫酶試驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)與定義適用于本文件。3.1無(wú)菌豬Germ-free(GF)pig利用現(xiàn)有檢測(cè)手段，無(wú)可檢出一切活的微生物（包括細(xì)菌、病毒）和寄生蟲(chóng)，能保證豬源性細(xì)胞、組織、器官的生物安全性和清晰的微生物背景的實(shí)驗(yàn)用豬，簡(jiǎn)稱無(wú)菌豬。3.2悉生豬Gnotobitoic(GN)pig以無(wú)菌豬為對(duì)象，通過(guò)微生物移植技術(shù)構(gòu)建出只含有特定菌群，并始終在可屏蔽外界微生物條件下生活的實(shí)驗(yàn)用豬，可分為單一菌株移植悉生豬和組合菌群移植悉生豬。3DB50/T1043—20203.3隔離環(huán)境Isolationenvironment與外界完全隔離，可阻斷任何外源微生物侵入的封閉空間。3.4屏障環(huán)境Barrierenvironment隔離環(huán)境的第一層保障，用于放置和使用無(wú)菌隔離器。4設(shè)施設(shè)計(jì)4.1選址4.1.1場(chǎng)址遠(yuǎn)離有嚴(yán)重空氣污染、噪聲干擾和生物安全風(fēng)險(xiǎn)等區(qū)域。4.1.2設(shè)施供電符合GB50052的要求。屏障設(shè)施和隔離環(huán)境設(shè)施應(yīng)采用不低于二級(jí)電力負(fù)荷供電。宜具備雙路供電或具備應(yīng)急電源，保持屏障設(shè)施和隔離環(huán)境設(shè)施的不間斷運(yùn)轉(zhuǎn)。4.1.3水源充足，取用方便，有存儲(chǔ)、凈化設(shè)施，能夠保證生產(chǎn)、生活用水，水質(zhì)應(yīng)符合GB5749的規(guī)定。4.2規(guī)劃布局4.2.1生產(chǎn)區(qū)布局4.2.1.1無(wú)菌豬生產(chǎn)區(qū)按照非凈化區(qū)、凈化區(qū)、糞污處理區(qū)等功能分區(qū)。各功能區(qū)之間應(yīng)設(shè)置防疫隔離帶或墻。4.2.1.2非凈化區(qū)的設(shè)置包括辦公室、監(jiān)控室、庫(kù)房、機(jī)械設(shè)備室（維修室）、淋浴室、工作人員休息室、更衣室、母豬準(zhǔn)備室、走廊、廢棄物品存放處理間、清洗消毒室、污物走廊、以及人員用衛(wèi)生間等。4.2.1.3凈化區(qū)的設(shè)置一般按照無(wú)菌豬接生區(qū)、無(wú)菌豬生產(chǎn)區(qū)、實(shí)驗(yàn)區(qū)和輔助區(qū)分區(qū)。凈化生產(chǎn)區(qū)包括更衣間、緩沖間、風(fēng)淋室、潔凈手術(shù)室、無(wú)菌豬生產(chǎn)飼養(yǎng)室等。凈化實(shí)驗(yàn)區(qū)包括更衣間、緩沖間、風(fēng)淋室、潔凈手術(shù)室、隔離飼養(yǎng)室等。凈化生產(chǎn)區(qū)和凈化實(shí)驗(yàn)區(qū)可共用更衣間、緩沖間、風(fēng)淋室和潔凈手術(shù)室等功能區(qū)。輔助區(qū)包括熏蒸房、潔凈物品存放室、潔凈走廊。4.2.1.4糞污處理區(qū)主要包括獸醫(yī)室、隔離豬舍、病死豬處理區(qū)、貯糞池、污水池。應(yīng)設(shè)在場(chǎng)區(qū)下風(fēng)向或側(cè)風(fēng)向及地勢(shì)較低處，與生產(chǎn)區(qū)保持100m以上的間距。糞污處理應(yīng)有單獨(dú)通道，便于病死豬消毒和污物處理。4.3設(shè)施要求4.3.1設(shè)施一般要求4.3.1.1無(wú)菌豬生產(chǎn)區(qū)應(yīng)合理組織氣流和布置送、排風(fēng)口的位置，避免死角、斷流、短路。無(wú)菌豬生產(chǎn)場(chǎng)區(qū)建筑物門、窗應(yīng)有良好的密封性。凈化生產(chǎn)區(qū)和凈化實(shí)驗(yàn)區(qū)的潔凈走廊凈寬度不應(yīng)小于1.5m，門凈寬度應(yīng)不小于0.8m。4DB50/T1043—20204.3.1.2屏障環(huán)境設(shè)施由非潔凈區(qū)進(jìn)入潔凈區(qū)及潔凈區(qū)的各類管線管口，應(yīng)采取可靠的密封措施。排水管道管徑不宜小于DN150。屏障環(huán)境設(shè)施應(yīng)設(shè)環(huán)境監(jiān)控系統(tǒng)，其他級(jí)別設(shè)施根據(jù)需要設(shè)置環(huán)境監(jiān)控系統(tǒng)。各類環(huán)境控制設(shè)備應(yīng)定期保養(yǎng)維修。4.3.1.3外環(huán)境應(yīng)整潔，便于清掃和消毒。應(yīng)排水暢通，無(wú)廢物堆積和無(wú)水積存。4.3.1.4應(yīng)設(shè)置人、動(dòng)物、物品專用出入口，道路通暢，配置專用的消毒設(shè)施與設(shè)備。4.3.1.5應(yīng)有防治外來(lái)動(dòng)物進(jìn)入的措施。4.3.2設(shè)施建筑構(gòu)造要求4.3.2.1屏障環(huán)境設(shè)施的結(jié)構(gòu)安全等級(jí)應(yīng)不低于GB50068中建筑結(jié)構(gòu)安全等級(jí)二級(jí)的要求。4.3.2.2屏障環(huán)境設(shè)施應(yīng)能承載吊頂內(nèi)設(shè)備管線的荷載，以及高壓滅菌器、空調(diào)設(shè)備、清洗池等設(shè)備的荷載。4.3.2.3屏障環(huán)境設(shè)施和隔離器放置的凈化區(qū)內(nèi)不宜設(shè)排水溝或者地漏；若已存在排污管口，應(yīng)加上密封蓋，防止異味或其他污物竄入。非凈化區(qū)內(nèi)設(shè)置地漏的房間，坡度不應(yīng)小于1%，地面應(yīng)做防水處理。4.3.2.4屏障環(huán)境設(shè)施的清洗消毒間與潔凈物料儲(chǔ)存間之間應(yīng)設(shè)置消毒滅菌設(shè)施設(shè)備。4.3.2.5淋浴室、清洗消毒區(qū)的地面和墻面均應(yīng)做防水處理。4.3.3主要分區(qū)設(shè)置要求4.3.3.1凈化區(qū)內(nèi)墻表面應(yīng)光滑平整，陰陽(yáng)角均為圓弧形，易于清洗、消毒。墻面應(yīng)采用不易脫落、耐腐蝕、無(wú)反光、耐沖擊的材料。地面應(yīng)防滑、耐磨、無(wú)滲漏。天花板應(yīng)耐水、耐腐蝕。上、下水系統(tǒng)應(yīng)有防止逆流以及防止外來(lái)動(dòng)物進(jìn)入的措施。4.3.3.2凈化區(qū)的輔助區(qū)應(yīng)實(shí)行環(huán)境控制，便于設(shè)備和配件的清洗處理，防止病原微生物污染、寄生蟲(chóng)污染和外來(lái)動(dòng)物進(jìn)入，墻壁和地板應(yīng)作防水處理。設(shè)置熏蒸房，對(duì)進(jìn)入凈化區(qū)的大型設(shè)備進(jìn)行熏蒸消毒，其墻壁和地板應(yīng)作防水、防腐處理，設(shè)排風(fēng)口。4.3.3.3非凈化區(qū)應(yīng)設(shè)置母豬準(zhǔn)備室和配套設(shè)備，方便手術(shù)前動(dòng)物體表清潔和消毒。4.3.4給排水要求4.3.4.1無(wú)菌豬的飲用水定額應(yīng)滿足無(wú)菌豬飲用水需要。4.3.4.2凈化區(qū)的用水應(yīng)達(dá)到無(wú)菌要求，按GB/T14926.41規(guī)定的飲水檢測(cè)方法執(zhí)行。非凈化區(qū)用水應(yīng)符合GB5749的要求。4.3.4.3無(wú)菌豬生產(chǎn)區(qū)（實(shí)驗(yàn)區(qū)）的給水干管宜布設(shè)在專用夾層內(nèi)。管道穿越凈化區(qū)的壁面處應(yīng)采取可靠的密封措施。4.3.4.4屏障環(huán)境設(shè)施的給水管道和管件，應(yīng)選用環(huán)保、耐腐蝕、連接方便可靠、不生銹、不易老化的管材和管件。管道外表面可能凝露時(shí)，應(yīng)采取有效的防凝露措施。4.3.4.5屏障環(huán)境設(shè)施生產(chǎn)區(qū)（實(shí)驗(yàn)區(qū)）內(nèi)無(wú)排水管或者地漏。4.3.4.6屏障環(huán)境設(shè)施清洗消毒室的地漏應(yīng)采用密閉型。5DB50/T1043—20204.3.4.7排水管道應(yīng)選用耐腐蝕、連接方便可靠、不生銹、不易老化的管材和管件。4.3.4.8屏障環(huán)境設(shè)施的排水宜與其他生活排水分開(kāi)設(shè)置。4.3.5糞污、廢棄物及動(dòng)物尸體處理4.3.5.1生產(chǎn)區(qū)應(yīng)設(shè)有污水初級(jí)處理設(shè)備或化糞池，糞污、廢液經(jīng)處理后應(yīng)達(dá)到GB8978二類一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)要求。4.3.5.2一次性工作服、口罩、帽子、手套及實(shí)驗(yàn)廢棄物等應(yīng)按《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部令（第36號(hào)）——醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》進(jìn)行無(wú)害化處理。注射針頭、刀片等銳利物品應(yīng)收集到利器盒中統(tǒng)一處理。4.3.5.3動(dòng)物尸體及組織應(yīng)裝入專用尸體袋中，低溫存放，并按照《病死動(dòng)物無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范（農(nóng)醫(yī)發(fā)[2013]34號(hào)）》要求，集中做無(wú)害化處理。4.3.5.4無(wú)菌豬飼養(yǎng)用的隔離器設(shè)計(jì)有污物存儲(chǔ)層，污物排放頻率根據(jù)污物產(chǎn)量確定。排放前，隔離器的排污管出口應(yīng)浸入消毒液；排放后，應(yīng)先關(guān)閉排污閥門，再將管口撤出消毒液。5隔離器5.1分類無(wú)菌豬隔離器分為無(wú)菌子宮剝離器、無(wú)菌運(yùn)輸隔離器和無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器。5.1.1無(wú)菌子宮剝離器適用于無(wú)菌子宮剖除術(shù)獲取無(wú)菌仔豬。無(wú)菌狀態(tài)下，結(jié)扎并脫離母體的子宮經(jīng)子宮剝離器的消毒渡槽，進(jìn)入子宮剝離器內(nèi)操作平臺(tái)，在平臺(tái)上獲取新生仔豬。5.1.2無(wú)菌運(yùn)輸隔離器與無(wú)菌子宮剝離器對(duì)接，用于無(wú)菌新生仔豬的轉(zhuǎn)移；單獨(dú)使用時(shí)，用于無(wú)菌豬轉(zhuǎn)運(yùn)。5.1.3無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器正壓時(shí)，適用于無(wú)菌豬和悉生豬的飼養(yǎng)，阻斷外源微生物侵入到隔離器內(nèi)部區(qū)域；負(fù)壓時(shí)，適用于豬感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，阻斷感染源擴(kuò)散到隔離器外部區(qū)域。無(wú)菌豬始終生活于無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器內(nèi)。5.2結(jié)構(gòu)5.2.1無(wú)菌豬子宮剝離器應(yīng)由架體、密封罩、隔離腔體、消毒液槽、操作手套、無(wú)菌操作臺(tái)、傳遞通道、進(jìn)出風(fēng)過(guò)濾系統(tǒng)等組成。5.2.2無(wú)菌豬運(yùn)輸隔離器應(yīng)由架體、密封罩、隔離腔體、傳遞通道、操作手套、進(jìn)出風(fēng)過(guò)濾系統(tǒng)等組成。5.2.3無(wú)菌豬飼養(yǎng)隔離器應(yīng)由架體、密封罩、隔離腔體、傳遞通道、操作手套、進(jìn)出風(fēng)過(guò)濾系統(tǒng)、飼喂系統(tǒng)等組成。6DB50/T1043—20205.3規(guī)格5.3.1無(wú)菌子宮剝離器應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)豬飼育品種的要求確定子宮剝離器的消毒液槽和無(wú)菌操作臺(tái)的尺寸。5.3.2無(wú)菌運(yùn)輸隔離器應(yīng)根據(jù)無(wú)菌豬大小、運(yùn)輸數(shù)量的要求確定無(wú)菌運(yùn)輸器的尺寸。5.3.3無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)豬飼育品種、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的要求確定隔離器的尺寸。1月齡內(nèi)的無(wú)菌仔豬，飼養(yǎng)隔離器的最小空間宜滿足表1的要求。表11月齡無(wú)菌豬飼養(yǎng)隔離器最小空間項(xiàng)目體重（kg）≥5且≤10>10kg底板面積m2/頭0.17～0.350.35～0.520.52～0.70籠內(nèi)高度m0.40.40.55.4要求5.4.1隔離腔體可選用軟質(zhì)或硬質(zhì)材料。軟質(zhì)隔離腔體主體空間大小可隨通風(fēng)而變化，宜用于無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器。硬質(zhì)隔離腔體主體空間大小應(yīng)不隨通風(fēng)而變化，宜用于無(wú)菌運(yùn)輸隔離器、無(wú)菌子宮剝離器。5.4.2架體采用不銹鋼材料制作，表面應(yīng)光潔、耐腐蝕。架體應(yīng)穩(wěn)定、牢固、平整，裝拆和移動(dòng)方便。風(fēng)機(jī)與架體采用管道連接，運(yùn)行時(shí)無(wú)明顯振動(dòng)。5.4.3密封罩宜采用耐腐蝕、耐高溫、耐壓、易清洗、透明、柔韌、無(wú)毒塑料密封罩，具有帶塞消毒孔。宜用于無(wú)菌豬隔離器內(nèi)物品傳遞系統(tǒng)的密封。觀察窗宜置于隔離器頂部，使用耐腐蝕、耐高溫、易清洗、透明等硬質(zhì)材料密封連接。5.4.4傳遞通道用于物品和動(dòng)物的密封傳遞。應(yīng)密封。5.4.5操作手套連接于隔離器密封罩的操作用膠質(zhì)手套，應(yīng)密封、大小適用。5.4.6進(jìn)出風(fēng)過(guò)濾系統(tǒng)進(jìn)風(fēng)處應(yīng)有初效、中效、高效過(guò)濾，出風(fēng)處應(yīng)有高效過(guò)濾。5.4.7消毒液槽7DB50/T1043—2020宜采用耐腐蝕的不銹鋼等硬質(zhì)材料密封連接組成，具有開(kāi)口，應(yīng)可以液封，具有放水口，可排放廢5.4.8無(wú)菌操作臺(tái)采用耐腐蝕的不銹鋼等硬質(zhì)材料密封連接組成，底部具有水平推拉蓋，應(yīng)可密封。5.5性能空氣進(jìn)風(fēng)口應(yīng)經(jīng)初效、中效、高效三級(jí)過(guò)濾，出風(fēng)口經(jīng)高效過(guò)濾，使隔離器內(nèi)在靜態(tài)時(shí)的送風(fēng)口潔凈度達(dá)到GB14925-2010要求的7級(jí)或更高潔凈度要求，沉降菌不應(yīng)檢出，氣流速度應(yīng)為0.1-0.3m/s，內(nèi)外梯度壓差應(yīng)為20-55Pa，換氣次數(shù)應(yīng)為20-50次/h，噪音應(yīng)≤55db。5.6用途在隔離環(huán)境下，無(wú)菌豬隔離器的用途見(jiàn)表2。表2無(wú)菌豬隔離器用途項(xiàng)目環(huán)境分類使用功能適用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)菌子宮剝離器正壓無(wú)菌豬子宮外表面消毒和新生無(wú)菌仔豬的獲取無(wú)菌豬無(wú)菌運(yùn)輸隔離器正壓新生無(wú)菌仔豬運(yùn)輸、體表清潔和運(yùn)輸無(wú)菌豬無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器正壓/負(fù)壓正壓用于無(wú)菌豬的飼養(yǎng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和悉生豬的實(shí)驗(yàn)/負(fù)壓用于豬感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)無(wú)菌豬、悉生豬6.1分類根據(jù)無(wú)菌豬的日齡，日糧主要分為代乳粉、粉料、顆粒料。6.1.1代乳粉宜選用商業(yè)化新生乳豬奶粉或新生嬰兒奶粉。采用輻照、高壓高溫處理等方法滅菌。宜采用Co60輻照滅菌。6.1.2粉料選用乳豬全價(jià)粉料。采用輻照、高壓高溫處理等方法滅菌。宜采用Co60輻照滅菌。6.1.3顆粒料選用成年豬用全價(jià)顆粒料。采用輻照、高壓高溫處理等方法滅菌。一般采用鈷60輻照滅菌。6.2衛(wèi)生要求細(xì)菌、真菌不得檢出，黃曲霉毒素、砷、鉛以及亞硝酸鹽4項(xiàng)指標(biāo)應(yīng)符合GB/T4789.18要求。不宜添加任何藥物。8DB50/T1043—20206.3包裝裝于防潮的紙箱、紙桶（袋）或聚丙烯塑料桶（袋）中，內(nèi)襯包裝食品用高阻隔材質(zhì)的真空包裝袋。6.4貯存應(yīng)貯存在清潔、干燥、陰涼、通風(fēng)的專用倉(cāng)庫(kù)中。要防蟲(chóng)蛀、鼠害、防擠壓、霉變和污染。6.5保質(zhì)期不少于3個(gè)月，不宜超過(guò)6個(gè)月。7無(wú)菌豬的制備7.1品種選擇根據(jù)使用用途選擇合適的品種。以畜牧研究為主或短期實(shí)驗(yàn)時(shí)，宜選擇體型較大品種；以醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究為主或長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)時(shí)，宜選擇小型品種。7.2妊娠母豬的篩選妊娠豬應(yīng)未注射豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗，外觀健康、無(wú)異常；不宜選擇初產(chǎn)和第六胎次以上的母豬。應(yīng)排除經(jīng)胎盤垂直傳播的四種病毒，包括豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病、豬細(xì)小病毒病。病原篩查方法參照GB/T16551、GB/T18641、NY/T679和SN/T1919-2016執(zhí)行。7.3飼養(yǎng)環(huán)境與條件的準(zhǔn)備7.3.1隔離器的準(zhǔn)備無(wú)菌子宮剝離器、無(wú)菌運(yùn)輸隔離器和無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器宜在手術(shù)前7-10天開(kāi)始準(zhǔn)備。隔離器內(nèi)部，宜選用1.5%-2.0%新制的過(guò)氧乙酸噴霧10分鐘，1-2小時(shí)后開(kāi)啟隔離器上送風(fēng)裝置，過(guò)夜排出殘留消毒液。經(jīng)微生物檢測(cè)合格，持續(xù)空轉(zhuǎn)備用。手術(shù)前1天，將無(wú)菌子宮剝離器和無(wú)菌運(yùn)輸隔離器用傳遞系統(tǒng)連接，1.5%-2.0%新制的過(guò)氧乙酸噴霧消毒傳遞通道內(nèi)部空間，靜置1小時(shí)后送風(fēng)過(guò)夜，排出隔離器內(nèi)部殘余消毒液，備用。7.3.2屏障環(huán)境的維持上述三類隔離器應(yīng)始終在屏障設(shè)施下使用。無(wú)菌豬凈化區(qū)內(nèi)各功能區(qū)，宜采用1.5%-2.0%新制的過(guò)氧乙酸每天噴霧消毒1次。根據(jù)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)出次數(shù)增加，適當(dāng)增加噴霧消毒次數(shù)。7.4剖腹產(chǎn)手術(shù)7.4.1時(shí)間宜在預(yù)定分娩日的前兩天內(nèi)進(jìn)行。妊娠末期應(yīng)積極觀察母豬行為，減少因提前分娩而終止手術(shù)的事件發(fā)生。7.4.2妊娠母豬術(shù)前準(zhǔn)備動(dòng)物準(zhǔn)備間內(nèi)，母豬限位于移動(dòng)欄中，以溫水沖洗母豬體表，擦干；移動(dòng)至手術(shù)準(zhǔn)備間，用海綿刷子蘸取碘伏，將母豬體表全部擦拭；再將妊娠豬移至手術(shù)間，進(jìn)行麻醉、并綁定于手術(shù)床上。宜采用異9DB50/T1043—2020氟烷呼吸麻醉法，配合肌肉松弛劑使用。7.4.3剖腹產(chǎn)手術(shù)麻醉后，對(duì)整個(gè)腹部再次進(jìn)行碘伏消毒。剃毛，墊滅菌手術(shù)創(chuàng)巾，切開(kāi)腹腔，拉出子宮，結(jié)扎子宮頸部、切斷兩端，將子宮浸入無(wú)菌子宮剝離器的消毒液槽內(nèi)10-20s，之后移入無(wú)菌子宮剝離器的無(wú)菌操作臺(tái)，取出胎兒、擦干羊水、剪斷臍帶。7.5無(wú)菌仔豬的獲取與轉(zhuǎn)運(yùn)7.5.1無(wú)菌仔豬的獲取將取出的無(wú)菌新生仔豬通過(guò)滅菌后的傳遞通道，快速移入無(wú)菌運(yùn)輸隔離器，封閉密封罩，盡量降低消毒液對(duì)新生仔豬的刺激。利用加熱設(shè)備對(duì)隔離器外底部進(jìn)行加熱，保持隔離器內(nèi)溫度在34-36℃,防止仔豬受凍。根據(jù)新生仔豬情況，進(jìn)行人工輔助呼吸。從切開(kāi)腹腔到人工輔助呼吸結(jié)束，時(shí)間控制在7.5.2無(wú)菌仔豬的轉(zhuǎn)運(yùn)上述操作完成后，保持密封狀態(tài)，將無(wú)菌運(yùn)輸隔離器與無(wú)菌子宮剝離器斷開(kāi)連接，將無(wú)菌運(yùn)輸隔離器傳遞通道外部密封罩罩上，并采用1.5%-2%新制的過(guò)氧乙酸噴霧消毒隔離器外表面。根據(jù)使用目的，將無(wú)菌運(yùn)輸隔離器推入無(wú)菌豬生產(chǎn)區(qū)或者實(shí)驗(yàn)區(qū)，并通過(guò)滅菌的連接通道和無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器對(duì)接，應(yīng)對(duì)連接通道內(nèi)部空間消毒。靜置10min后，開(kāi)啟連接通道，將新生無(wú)菌仔豬從無(wú)菌運(yùn)輸隔離器轉(zhuǎn)入無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器內(nèi)。保持隔離器內(nèi)溫度在34-36℃。根據(jù)新生仔豬情況，進(jìn)行人工輔助呼吸。轉(zhuǎn)運(yùn)操作時(shí)間控8無(wú)菌豬的飼養(yǎng)管理8.1飼養(yǎng)流程新生仔豬取出后2h內(nèi)第一次人工哺乳。將滅菌的代乳粉和滅菌水按比例混合后（根據(jù)商業(yè)化奶粉使用說(shuō)明確定比例倒入隔離器內(nèi)各食槽內(nèi)。每日早、中、晚各哺乳1次。3日齡前，每次宜給料量100-200mL；4日齡后宜逐漸增加給料量，每次200-300mL。不喂水。21日齡后，飲水不間斷，宜補(bǔ)飼無(wú)菌豬用粉料。42日齡后，宜更換為無(wú)菌豬用顆粒料。8.2溫度管理7日齡內(nèi)，無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器內(nèi)溫度保持32-35℃;8-14日齡內(nèi)，無(wú)菌飼養(yǎng)隔離器內(nèi)溫度不低于30℃;21日齡后隔離器內(nèi)溫度不低于26℃。8.3光照管理仔豬進(jìn)入隔離器后，按照光照12h，黑暗12h執(zhí)行。8.4物品進(jìn)出消毒8.4.1屏障環(huán)境物品進(jìn)出消毒操作8.4.1.1物品轉(zhuǎn)入屏障環(huán)境進(jìn)入屏障環(huán)境的物品應(yīng)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的消毒滅菌處理。滅菌之前，耐高溫高壓物品，如手術(shù)器械、器具、DB50/T1043—2020紗布，宜打包放入滅菌盒或滅菌袋，應(yīng)首選壓力蒸汽滅菌；不耐熱、不耐濕的物品，如采樣拭子、采血針宜選用包裝完整的商業(yè)化產(chǎn)品，并經(jīng)過(guò)環(huán)氧乙烷等低溫滅菌處理；無(wú)菌豬飼養(yǎng)中使用的其他物品，如稱重器、皮尺、記號(hào)筆、塑料制品等，宜純水清潔物品外表面、晾干后，用消毒液（如新制的1.5%-2%過(guò)氧乙酸）噴霧表面至濕潤(rùn)、靜置1h以上。之后，所有待進(jìn)入屏障環(huán)境的滅菌物品應(yīng)放置于傳遞窗，經(jīng)紫外消毒30min后，轉(zhuǎn)入屏障環(huán)境。8.4.1.2物品轉(zhuǎn)出屏障環(huán)境屏障環(huán)境內(nèi)，可循環(huán)使用的物品（如手術(shù)器械、器具、創(chuàng)巾等應(yīng)從污物走廊轉(zhuǎn)出至清洗消毒室，清洗、烘干、保存。不可循環(huán)使用的物品（