2025年新世紀版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年新世紀版選擇性必修3生物上冊月考試卷813考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、為有效防范由各類生物因子、生物技術誤用濫用等引起的生物性危害，生物安全已納入國家安全體系。以下選項中會給我國帶來生物安全風險的是（）A.將新冠患者的血漿采集后注射到危重患者體內(nèi)B.試管嬰兒通過基因篩查技術阻斷遺傳疾病的遺傳C.利用生物技術改造的工程菌獲得大量的抗生素D.克隆技術可應用到器官移植但不能進行人體克隆2、下列關于家庭中制作果酒、果醋、泡菜過程的敘述，正確的是A.都需要嚴格的滅菌B.都需要接種相應微生物C.都在無氧條件下進行D.都利用異養(yǎng)微生物發(fā)酵3、下列對制作果酒、果醋、腐乳和泡菜的相關敘述錯誤的是（）A.制作果酒時，發(fā)酵液裝入發(fā)酵瓶后留有約1/3的空間B.制作果醋時，通氧不足或溫度過低可能造成發(fā)酵失敗C.制作腐乳的鹵湯時，料酒加的量較多，易造成豆腐腐敗變質(zhì)D.測定泡菜中的亞硝酸鹽含量，每次取樣后要迅速封口4、下列與土壤中尿素分解菌的分離與計數(shù)相關的敘述，正確的是（）A.可以通過設置空白對照組來檢驗培養(yǎng)基是否受到了雜菌的污染B.對樣品中的尿素分解菌進行計數(shù)時可采用平板劃線法進行接種C.統(tǒng)計尿素分解菌的數(shù)目時應該選擇菌落數(shù)多的培養(yǎng)基進行計數(shù)D.尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成氨后會使培養(yǎng)基pH下降5、羊在畜牧生產(chǎn)和生物醫(yī)學模型方面都具有重要價值，因此與羊相關的基礎生物學研究也格外受到關注?？茖W家通過胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相關敘述錯誤的是（）A.從雌性肉羊卵巢內(nèi)取出的卵母細胞不可直接進行體外受精B.可用普通雌性羊作為受體進行胚胎移植但需生理狀態(tài)相同C.可以通過胚胎分割技術，得到更多遺傳性狀相同的肉羊后代D.在胚胎移植前，需要對體外培養(yǎng)的原腸胚進行質(zhì)量篩查6、為了示蹤衰老細胞在機體中的分布，科研人員綜合利用基因工程和細胞工程的技術手段，將綠色熒光蛋白基因gf插入到了小鼠p16基因的下游，使兩個基因“融合”。轉(zhuǎn)基因小鼠的衰老細胞中，p16和gfp會特異性表達，從而使其在紫外光下呈綠色。下列分析錯誤的是（）A.可用PCR技術特異性地快速擴增綠色熒光蛋白基因gfpB.轉(zhuǎn)基因小鼠的p16基因和gfp基因具有各自獨立的啟動子C.常用顯微注射法將改造好的融合基因注入小鼠的受精卵中D.可選擇發(fā)育到桑葚胚期的轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎移植到受體母鼠子宮內(nèi)7、科學家將含有人溶菌酶基因的表達載體注射到雞胚細胞中獲得轉(zhuǎn)基因雞，人溶菌酶基因能在雞的輸卵管細胞中特異性表達，最終在雞蛋中收集人溶菌酶。將含有人溶菌酶基因的表達載體導入雞胚細胞中常采用的方法是（）A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法B.顯微注射法C.鈣離子處理法D.核酸雜交法評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細菌細胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細胞內(nèi)容物泄漏，最終導致細菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對癌細胞甚至感染了病毒的宿主細胞均具有殺傷作用。下列相關敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過程B.抗菌肽改變了細胞膜的通透性，使細胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術生產(chǎn)抗菌肽時，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路9、多種實驗材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實驗效果。下列敘述錯誤的是（）A.將粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分數(shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì)，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會出現(xiàn)藍色10、為對某樣品中噬菌體計數(shù)，工作人員將0.1mL稀釋倍的噬菌體樣品與敏感細菌混合后平鋪在平板上培養(yǎng)一段時間，長滿細菌的平板因部分細菌被噬菌體裂解而形成圓形透明斑，即噬菌斑（1個噬菌斑為1個pfu），噬菌體效價可用每毫升樣品中含有的pfu數(shù)表示。下列敘述正確的是（）

A.透明的平板培養(yǎng)一段時間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，是由細菌大量繁殖造成的B.噬菌體樣品應有足夠的稀釋度，以保證初期一個細菌最多被一個噬菌體吸附C.若平均每個平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價為1.5×108pfu/mLD.若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細菌，噬菌斑計數(shù)結果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低11、甲圖為牛胚胎移植示意圖，乙圖為胚胎發(fā)育某時期示意圖，下列敘述錯誤的是（）

A.甲圖中沖卵的目的是獲取受精卵B.對供體母牛和受體母牛注射性激素，進行同期發(fā)情處理C.性別鑒定時需將圖乙②處細胞做染色體分析D.受精卵形成乙的過程中進行卵裂，每個細胞的體積變小12、抗體的結構分為V區(qū)（識別并結合抗原的區(qū)域）和C區(qū)（抗體的支架），鼠源抗體具有外源性，會被人體免疫系統(tǒng)當作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構建人一鼠嵌合抗體，操作流程如圖所示。下列相關說法錯誤的是（）

A.與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞為能分泌抗體的漿細胞B.用選擇性培養(yǎng)基可篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞C.為獲得結構正確的嵌合抗體，受體細胞應選用大腸桿菌D.人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時外源性下降13、研究人員用無機鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復土壤D.相對于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌14、下圖表示選用具有同一外源目的基因?qū)δ称贩N奶牛進行遺傳特性改造的三種途徑；下列有關敘述正確的是（）

A.獲得奶牛1通常采用顯微注射法導入外源基因B.奶牛2體內(nèi)不同組織細胞的基因組成一定相同C.成功獲得奶牛1、2、3表明三個受體細胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的獲得均需在體外進行早期胚胎培養(yǎng)評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、一般包括______、______等技術16、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。17、請回答下列有關生物技術的安全性和倫理問題：

（1）一些持支持態(tài)度的科學家認為，由于不同物種間存在__________，同時花粉的傳播距離和__________有限；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中，絕大多數(shù)科學家都能自覺遵守科學研究道德。例如，把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有___________的生物上；對外源DNA進行認真選擇，避免能夠表達出對人體有毒性或過敏的___________．

（3）一些持反對態(tài)度的科學家認為，由于克隆技術尚不成熟，現(xiàn)在就做克隆人很可能孕育出有嚴重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學家則認為，一些技術問題可以通過胚胎分級、______和__________等方法得到解決。

（4）對于克隆技術，中國政府的態(tài)度是___________．但不反對___________。18、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。19、獲取目的基因的方法______、______、______評卷人得分四、綜合題(共3題，共27分)20、麗輪枝菌（一種絲狀真菌）是引起棉花黃萎病的主要病原菌。為觀察大麗輪枝菌對棉花根侵染路徑，研究人員利用綠色熒光蛋白基因（sGFP）轉(zhuǎn)染大麗輪枝菌，培育出表達綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因菌株，主要過程如下（圖中a鏈和b鏈分別是相應基因轉(zhuǎn)錄模板鏈）。分析回答：

（1）過程①中，PCR擴增sGFP的原理是________，該過程除需要根據(jù)________設計特異性引物序列外，為保證sCFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物的5ˊ端添加限制酶識別序列，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5ˊ→3ˊ）為________。

（2）過程①中，除了要添加模板、引物、原料外，還需添加_____酶。若1個sGFP片段連續(xù)擴增4次，則會形成_____個兩條鏈等長的sGFP片段，消耗_____個引物1。

（3）過程②需要的工具酶是________。研究中將sGFP插入到構巢曲霉啟動子和終止子之間的目的是_________。

（4）將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時，需要用_______處理農(nóng)桿菌；使其轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細胞。

（5）過程③中需要配制細菌培養(yǎng)基，配制時要在培養(yǎng)基滅菌并冷卻到80℃左右后，再加入用潮霉素溶液，潮霉素不能與培養(yǎng)基一同滅菌的原因是_________。

（6）選擇過程③篩選培養(yǎng)得到的不同農(nóng)桿菌菌落，分別提取細菌質(zhì)粒DNA，并用BamHI和HindIII完全酶切可以得到________種長度不同的DNA片段。

（7）將導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌加入大麗輪枝菌的孢子細胞懸液中，在適宜條件完成轉(zhuǎn)染后利用濾膜過濾得到孢子細胞，再在真菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得菌落，最終通過檢測_______篩選出綠色熒光蛋白旺盛表達的大麗輪枝菌。21、CRISPR/Cas系統(tǒng)是細菌在進化中形成的一種防御機制。Cas蛋白能截取噬菌體的DNA片段；并將其插入到細菌自身的CRISPR基因中，整合有噬菌體DNA片段的CRISPR基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生RNA，此RNA與Cas蛋白共同構成CRISPR/Cas復合物，在此RNA引導下，該復合物能定點切割對應的噬菌體DNA片段?？茖W家通過改造此系統(tǒng)，產(chǎn)生了CRISPR/Cas9基因編輯技術，可以實現(xiàn)對DNA的定點切割，其工作原理如下圖所示。2019年上?？蒲袌F隊通過基因編輯技術切除獼猴受精卵中的生物節(jié)律核心基因BMAL1，再利用體細胞克隆技術，獲得了5只BMAL1基因敲除的克隆猴。這是國際上首次成功構建出的一批遺傳背景一致的生物節(jié)律紊亂的獼猴模型。請回答下列問題：

（1）CRISPR/Cas系統(tǒng)中的Cas蛋白合成的場所是_________；該系統(tǒng)需要對特定的DNA序列識別并切割，其功能類似于基因工程工具酶中的_________，作用的化學鍵為_________。推測該系統(tǒng)在細菌體內(nèi)的生理意義是____________________。

（2）由于Cas9蛋白沒有特異性；用CRISPR/Cas9系統(tǒng)切割BMAL1基因，向?qū)NA的識別序列應具有的特點是能與____________________通過堿基互補配對結合。

（3）在個體水平鑒定BMAL1基因敲除成功的方法是觀察獼猴是否表現(xiàn)為_____________。

（4）該團隊利用一只BMAL1缺失的成年獼猴體細胞克隆出5只后代的實驗中；涉及的生物技術有____________________(答出兩項即可）。

（5）基因編輯后通過體細胞克隆得到的數(shù)只BMAL1缺失獼猴(A組)，與僅通過基因編輯多個受精卵得到的數(shù)只BMAL1缺失獼猴(B組)比較，________(填“A組”或“B組”)更適合做人類疾病研究模型動物，理由是_______________________。22、特異性重組的Cre/loxP敲除系統(tǒng)是首先利用同源重組將基因組上的靶基因替換為兩端帶有重組位點loxP的karR基因，然后由重組酶Cre識別loxP位點并發(fā)生重組反應，去除基因組上的karR基因，進一步利用質(zhì)粒的溫敏特性將其消除，從而實現(xiàn)靶基因的敲除。下圖是研究人員利用Cre/loxP敲除系統(tǒng)敲除谷氨酸棒狀桿菌argR基因（精氨酸代謝的調(diào)控因子），獲得高產(chǎn)精氨酸菌株的過程，其中kanR是卡那霉素抗性基因；cat是氯霉素抗性基因，HindⅢ；BanHⅠ是限制酶。請據(jù)圖回答下列問題：

(1)①過程的原料是_____，所需的酶是_____。

(2)下列引物1、引物2用于擴增argR基因上游序列，引物3、引物4用于擴增argR基因下游序列，下劃線序列是相關限制酶識別序列，則HindⅢ、BamHⅠ的識別序列分別是_____、_____。

引物1：5'-GTCGACGGTATCGAT____AGGACTCAAACTTATGACTTCACAACCA-3'

引物2：5-CGCCCTATAGTGAGTCGTATTGGGATTTAAGTTTTCCGGTGTTGACG-3'

引物3：5'-CTTTAGTGAGGGTTAATTGCGCGTTAATCGCTTGTTAATGCAGGCA-3'

引物4：5'-CGCTCTAGAACTAGT____CAAAGCCTCGTGAGCCTTAATC-3'

(3)②過程（融合PCR）是采用具有互補末端引物，形成具有重疊鏈的PCR引物，通過PCR引物重疊鏈的延伸，從而將不同來源的DNA片段連接起來。下列引物5、引物6用于擴增兩端含loxP的karR片段，引物5、引物6可分別與_____、_____（引物1；引物2、引物3、引物4）重疊從而實現(xiàn)不同DNA片段的連接。

引物5：5'-CGTCAACACCGGAAAACTTAAATCCCAATACGACTCACTATAGGGCG-3'

引物6：5-TGCCTGCATTAACAAGCGATTAACGCGCAATTAACCCTCACTAAAG-3'

(4)④過程將質(zhì)粒3導入_____態(tài)谷氨酸棒狀桿菌，⑤過程在同源重組的作用下谷氨酸棒狀桿菌株的argR基因被替換為_____片段。

(5)⑥過程導入質(zhì)粒4的目的是_____。

(6)由于質(zhì)粒4的溫敏特性，⑦過程先在37℃條件下培養(yǎng)消除質(zhì)粒4，然后用影印接種（A、B、C三個培養(yǎng)基中接種菌種的位置相同）培養(yǎng)驗證其抗性，其結果如下圖，則_____是目的基因被敲除的目的菌株。

參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

1.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術的利弊；正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。

2.試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術。

【詳解】

A；新冠患者的血漿中可能含有病毒；采集后是不可以直接輸入到任何人身體里的，輸入到危重患者身體里存在安全隱患，與題意相符，A正確。

B；試管嬰兒可以通過基因篩選技術來阻斷遺傳疾病的遺傳；因此經(jīng)過一定的技術手段可以避免安全風險，與題意不符，B錯誤；

C；利用生物技術改造的工程菌獲得大量的抗生素已經(jīng)投入生產(chǎn)；一般不會帶來生物安全風險，與題意不符，C錯誤；

D；克隆技術可以克隆器官；但是不可以進行人體克隆，這樣可以避免影響倫理道德，與題意不符，D錯誤。

故選A。

【點睛】2、D【分析】【分析】

【詳解】

AB；制作果酒、果醋、泡菜；可以借助于水果、蔬菜表面的微生物，不一定需要接種相應微生物，不需要進行滅菌，AB錯誤；

C；果酒制作需要先通氣后密封；果醋制作需要有氧條件，泡菜發(fā)酵需要在無氧條件下進行，C錯誤；

D；參與果酒制作的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型；參與果醋制作的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，參與泡菜制作的乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，D正確。

故選D。3、C【分析】【分析】

腐乳制作的步驟：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。在選葡萄時應先沖洗1～2次，再去除枝梗，以防葡萄破損被雜菌污染；醋酸菌好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸。表達式為：C2H5OH→CH3COOH+H2O；當氧氣；糖源都充足時；醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

【詳解】

A；制作果酒時；將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶要留1/3空間，以保證含有一定量氧氣，目的是讓酵母菌進行有氧呼吸，快速繁殖，A正確；

B；醋酸菌為好氧菌；最適溫度生長溫度為30～35℃，因此制作果醋時，通氧不足或溫度過低，B正確；

C；制作腐乳的鹵湯時；料酒加的量較少，易造成豆腐腐敗變質(zhì)，加料酒的量多，成熟期延長，C錯誤；

D；測定泡菜中的亞硝酸鹽含量；每次取樣后要迅速封口，防止雜菌污染，D正確。

故選C。4、A【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數(shù)的關鍵是經(jīng)梯度稀釋后的稀釋倍數(shù)要合適，計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實驗組平板進行計數(shù)。

【詳解】

A；該實驗可設置空白對照組；以檢驗培養(yǎng)基是否受到雜菌污染，同時也能確定培養(yǎng)基是否符合要求，A正確；

B；對樣品中的尿素分解菌進行計數(shù)時可采用平稀釋涂布平板法進行接種；B錯誤；

C；統(tǒng)計尿素分解菌的數(shù)目時；以菌落數(shù)在30--300以上的平板進行計數(shù)，求其平均值，C錯誤；

D；尿素分解菌合成的脲酶可催化尿素分解成氨；從而會使培養(yǎng)基pH升高，據(jù)此通常在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑來鑒別尿素分解菌，D錯誤。

故選A。

【點睛】5、D【分析】【分析】

試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后；再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術，可見試管嬰兒技術主要包括體外受精；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術。

【詳解】

A；從卵巢內(nèi)取出卵母細胞不可直接進行體外受精；需要培養(yǎng)到MII中期，A正確；

B；胚胎移植需要受體的生理狀態(tài)滿足胚胎的發(fā)育；B正確；

C；可以通過胚胎分割技術獲得遺傳性狀相同的多個子代；C正確；

D；早期胚胎培養(yǎng)到桑基胚或囊胚階段進行移植；D錯誤。

故選D。6、B【分析】【分析】

基因工程的操作步驟：(1)目的基因的獲??；方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成；(2)基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟?；虮磉_載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞；根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；(4)目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；綠色熒光蛋白基因gfp為DNA片段；可用PCR技術特異性地快速擴增，A正確；

B；將綠色熒光蛋白基因gfp插入到了小鼠p16基因的下游；使兩個基因“融合”，因此p16基因和gfp基因共用了一個啟動子，它們之間關聯(lián)表達，B錯誤；

C；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；C正確；

D；胚胎移植時；應選擇處于桑葚胚或囊胚期的胚胎，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

顯微注射法是利用管尖極細（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射針；將外源基因片段直接注射到原核期胚或培養(yǎng)的細胞中，然后藉由宿主基因組序列可能發(fā)生的重組；缺失、復制或易位等現(xiàn)象而使外源基因嵌入宿主的染色體內(nèi)。

【詳解】

A；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用于轉(zhuǎn)入植物細胞；A錯誤；

B；顯微注射法常用于轉(zhuǎn)入動物細胞；B正確；

C；鈣離子處理法常用于轉(zhuǎn)入微生物細胞；C錯誤；

D；核酸雜交法是檢測目的基因的方法；不是導入細胞的方法，D錯誤。

故選B。二、多選題(共7題，共14分)8、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進化的特點，病毒是一種體積非常微小，結構極其簡單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒有細胞結構。不能獨立生活，只能寄生在活細胞內(nèi)，并在寄主細胞內(nèi)進行繁殖。一旦離開了活細胞，病毒就無法生存，就會變成結晶體。

2；真菌較細菌作為受體細胞的優(yōu)勢是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對蛋白進行加工和修飾。

【詳解】

A；通過題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過程，A錯誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細菌細胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細胞內(nèi)容物泄漏，最終導致細胞死亡”，即改變了細胞膜的通透性，使細胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來源于真核細胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因為真菌是真核細胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對癌細胞甚至病毒等均具有強有力的殺傷作用”，則對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點睛】9、C【分析】【分析】

根據(jù)DNA的溶解性提取DNA；1；DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同。2、DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。3、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

【詳解】

A；將粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNA；A正確；

B；DNA不溶于酒精；而某些蛋白質(zhì)溶解于酒精，可用體積分數(shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；

C；香蕉果肉組織細胞有細胞壁保護；因此加蒸餾水不會破壞細胞，不能將DNA釋放岀來，C錯誤；

D；將DNA再次溶于NaCl溶液；加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻出現(xiàn)藍色，D正確。

故選C。

【點睛】10、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一種個體微小結構簡單；只含一種核酸(DNA或RNA)和蛋白質(zhì)組成的，必須在活細胞內(nèi)寄生并以復制方式增殖的非細胞結構生物。

【詳解】

A；噬菌體在細菌細胞中；沒有裂解細菌，細菌繁殖導致透明的平板培養(yǎng)一段時間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，A正確；

B；噬菌體樣品應有足夠的稀釋度；以保證初期一個細菌最多被一個噬菌體吸附，如果稀釋度不夠，會出現(xiàn)兩個或多個噬菌體吸附同一個細菌，從而導致噬菌斑數(shù)量減少，噬菌斑計數(shù)結果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低，B正確；

C、若平均每個平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價為：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C錯誤；

D；若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細菌；會導致形成噬菌斑數(shù)量減少，從而導致噬菌斑計數(shù)結果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低，D正確。

故選ABD。11、A:B:C【分析】【分析】

分析甲圖：甲圖為牛胚胎移植示意圖；胚胎移植的具體過程為：對供；受體的選擇和處理；配種或人工授精；對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存；胚胎進行移植；移植后的檢查；對受體母牛進行是否妊娠的檢查。分析乙圖：①是滋養(yǎng)層；②是內(nèi)細胞團；③是囊胚腔。

【詳解】

A；沖卵是指把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來；甲圖中沖卵的目的是獲取早期胚胎，A錯誤；

B；為使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)；通常需要注射孕激素等激素使其同期發(fā)情，B錯誤；

C；進行性別鑒定需要取囊胚的①滋養(yǎng)層細胞做DNA分析；C錯誤；

D；受精卵形成乙囊胚的過程中進行卵裂；每個細胞的體積變小，細胞總體積不變或略有減少，D正確。

故選ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤細胞為無限增殖的細胞；分裂能力強，制備單克隆抗體的過程中還需該雜交細胞具備分泌特異性抗體的功能，而漿細胞為能夠分泌抗體的細胞，故與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞為能分泌抗體的漿細胞。

2；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞在融合的過程中可能會出現(xiàn)多種融合結果；如骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合，B淋巴細胞與B淋巴細胞融合，而實驗需要的是骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的細胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，但只能篩選出能雜交瘤細胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞則需要進行專一性抗體檢測。

【詳解】

A；與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞取自脾臟；不一定是能分泌抗體的漿細胞，A錯誤；

B；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞在融合的過程中可能會出現(xiàn)多種融合結果；如骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合，B淋巴細胞與B淋巴細胞融合，而實驗需要的是骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的細胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，但是只能篩選出能雜交瘤細胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞則需要進行專一性抗體檢測，B錯誤；

C；抗體為分泌蛋白；需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對其進行加工，大腸桿菌為原核生物，無高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，為獲得結構正確的嵌合抗體，受體細胞不應該選用大腸桿菌，C錯誤；

D；結合題干“鼠源抗體具有外源性；會被人體免疫系統(tǒng)當作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構建人一鼠嵌合抗體”可知，該抗體不是原本的鼠源抗體，保留了其V區(qū)，但是其中還有一部分來自于人本身，使得人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時外源性下降，D正確。

故選ABC。13、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會導致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象，對生長不利，A錯誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應的特點；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。14、A:D【分析】【分析】

分析題圖：奶牛1的培育采用了基因工程技術；早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術；奶牛2的培育采用可基因工程技術、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；A正確；

B；奶牛2的培育過程中；在囊胚階段注入了含有外源基因的受體細胞，因此其體內(nèi)不同組織細胞的基因型可能不同，B錯誤；

C；奶牛3表明受體細胞的細胞核具有全能性；C錯誤；

D；結合分析可知；奶牛1、2、3的獲得均需在體外進行早期胚胎培養(yǎng)，D正確。

故選AD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術、②.動物細胞融合與單克隆抗體16、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞17、略

【分析】1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術。

2；設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態(tài)度的科學家認為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時花粉的傳播距離和存活時間有限，不會造成轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中；為保證轉(zhuǎn)基因生物的安全，要把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對外源DNA進行認真選擇，避免能夠表達出對人體有毒性或過敏的蛋白質(zhì)等等。

（3）堅持克隆人的科學家則認為；一些技術問題可以通過胚胎分級；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國政府對于克隆技術的態(tài)度是禁止生殖性克??；但不反對治療性克隆。

【點睛】

本題難度一般，屬于考綱中識記、理解層次的要求，結合基因工程的應用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，并且深入考查了相關基礎知識，要求考生能夠構建一定的知識網(wǎng)絡．面對轉(zhuǎn)基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食?！窘馕觥竣?生殖隔離②.存活時間③.特定缺陷④.蛋白質(zhì)⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術四、綜合題(共3題，共27分)20、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；根據(jù)PCR過程的特點可繪制1個sGFP片段復制圖示如下：

【詳解】

（1）PCR擴增sGFP的原理是雙鏈DNA復制，由于DNA兩條鏈反向平行，且DNA聚合酶只能使新合成的DNA子鏈從5′→3′方向延伸，所以該過程需要根據(jù)sGFP兩端（3′端）堿基序列設計特異性引物序列，為了保證sGFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物的5′端添加限制酶識別序列，由于質(zhì)粒大片段是利用HindⅢ和BamHⅠ共同切割得到的質(zhì)粒的長片段，所以B鏈5′是利用HindⅢ切割形成的黏性末端，根據(jù)HindⅢ識別的堿基序列可知，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5′→3′）為AGCT。

（2）擴增過程中需要用到Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）。由分析圖示可知；第一；二輪循環(huán)合成的子鏈長度均不同，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的子代DNA分子中，存在兩個含有等長的兩條核苷酸鏈的DNA分子，即僅含引物之間的序列，第三輪的DNA再進行一次半保留復制，可形成8個兩條鏈等長的sGFP片段，消耗7個引物1。

（3）過程②為構建重組DNA；需要的工具酶是DNA連接酶。啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，而終止子是使轉(zhuǎn)錄終止的序列，而目的基因不攜帶啟動子和終止子，所以將sGFP插入到構巢曲霉啟動子和終止子之間的目的是保證sGFP能在大麗輪枝菌細胞中表達。

（4）將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時利用的方法是Ca2+處理法，即需要用Ca2+（CaCl2）處理農(nóng)桿菌；使其轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細胞。

（5）由于潮霉素在滅菌時結構被破壞；不能發(fā)揮選擇作用，所以潮霉素不能與培養(yǎng)基一同滅菌。

（6）根據(jù)質(zhì)粒中BamHⅠ和HindⅢ的識別位點、以及用BamHⅠ和HindⅢ酶切后得到的質(zhì)粒大片段為3500bp，可知質(zhì)粒小片段應為3750-3500=250bp，應出現(xiàn)3500bp和250bp兩種片段。sGFP的基因長度為720bp，質(zhì)粒大片段為3500bp，二者連接后的長度為3500+720=4220bp。用BamHⅠ和HindⅢ完全酶切后會形成3500bp和720bp兩種片段。綜上共出現(xiàn)3種，即3500bp、250bp、720bp片段。

（7）轉(zhuǎn)基因成功的標志是形成目的基因的產(chǎn)物；所以最終可通過檢測大麗輪枝菌菌絲細胞中綠色熒光強度，以篩選出綠色熒光蛋白旺盛表達的大麗輪枝菌。

【點睛】

本題主要考查基因工程相關知識，要求考生掌握基因工程的操作步驟，能準確識別圖示的各個過程，理解基因表達載體的組成及其各組分的作用，理解PCR擴增的原理和過程?！窘馕觥緿NA分子復制sGFP兩端的堿基序列AGCTTaq酶87DNA連接酶保證sGFP基因可以在大麗輪枝菌細胞中表達Ca2+（CaCl2）潮霉素在高溫滅菌時結構會被破壞3大麗輪枝菌細胞中綠色熒光的強度21、略

【分析】【分析】

1.基因工程的工具：①限制酶；能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運載體，質(zhì)粒是最常用的運載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物；動植物病毒。

2.基因治療：把正常的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細胞中；使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的?；蛑委煼譃轶w外基因治療和體內(nèi)基因治療兩種類型。

【詳解】

（1）核糖體是蛋白質(zhì)的合成車間；顯然Cas蛋白合成的場所是核糖體，該系統(tǒng)需要對特定的DNA序列識別并切割，其功能類似于基因工程工具酶中的限制酶，作用的化學鍵為磷酸二酯鍵，細菌體內(nèi)含有該系統(tǒng)，其意義在于切割外源DNA，保護細菌自身的遺傳信息不受干擾。

（2）由于Cas9蛋白沒有特異性；而CRISPR/Cas9系統(tǒng)能特定切割BMAL1基因，顯然向?qū)NA能識別BMAL1基因中特定的序列，從而在特定部位完成定向切割。

（3）BMAL1是控制生