2025年人教新起點(diǎn)選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教新起點(diǎn)選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、胚胎工程技術(shù)挖掘了動(dòng)物的繁殖潛力，為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效方法。下列有關(guān)胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程可用于稀有動(dòng)物的種族延續(xù)和培育生物制藥的反應(yīng)器B.人工受精需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理但不需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)C.早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中都需要加入血清或血漿D.只有受體和供體生理狀態(tài)相同被移植的胚胎才能繼續(xù)正常發(fā)育2、下列關(guān)于單克隆抗體制備和應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.用特定的抗原飼喂小鼠，再?gòu)男∈笃⑴K中分離B淋巴細(xì)胞B.獲得的融合細(xì)胞都含有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有遺傳物質(zhì)C.經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞即可生產(chǎn)單克隆抗體D.最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準(zhǔn)確、快速等優(yōu)點(diǎn)3、下列有關(guān)蛋白質(zhì)和DNA提取和分離實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)B.透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜C.可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料D.調(diào)節(jié)NaC1溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除血紅蛋白中的部分雜質(zhì)4、從紅豆杉屬植物中提取分離出的紫杉醇是一種有效的抗癌藥物；自然狀態(tài)下紅豆杉生長(zhǎng)慢，紫杉醇含量低，通過植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)可獲得大量紫杉醇。植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是指將游離的單細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)按照一定的細(xì)胞密度懸浮在液體培養(yǎng)基中，用搖床或轉(zhuǎn)床進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)的方法。通過不斷的繼代培養(yǎng)篩選出疏松性均勻一致；分散性良好、大小大致相同的細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)，建立懸浮培養(yǎng)細(xì)胞系。據(jù)圖敘述正確的是（）

A.離體的紅豆杉組織細(xì)胞通過果膠酶分散處理后直接進(jìn)行懸浮培養(yǎng)B.懸浮培養(yǎng)液中大多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)上呈等徑形，核-質(zhì)比率大，胞質(zhì)濃厚，液泡化程度高C.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)培養(yǎng)液中一般細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量比值大于1D.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長(zhǎng)沒有接觸抑制，因此只要空間足夠大，就可以擴(kuò)大培養(yǎng)5、下列關(guān)于相關(guān)實(shí)驗(yàn)失敗的原因分析，錯(cuò)誤的是（）A.制作果酒時(shí)，未對(duì)發(fā)酵裝置進(jìn)行消毒處理，造成發(fā)酵失敗B.制作果醋時(shí)，通入氧氣不足或溫度過低，造成發(fā)酵失敗C.制作腐乳時(shí)，裝瓶后未將瓶口密封，造成豆腐腐敗變質(zhì)D.制作泡菜時(shí)，放鹽的比例過大，造成泡菜腐爛發(fā)霉6、如圖表示通過植物細(xì)胞工程相關(guān)技術(shù)，利用甲（2n）、乙（2n）兩種植物（各含有一種不同的優(yōu)良性狀）培育高產(chǎn)耐鹽植株的過程，其中序號(hào)代表過程或結(jié)構(gòu)。請(qǐng)分析下列說法正確的是（）

A.①過程常用胰蛋白酶作為化學(xué)誘導(dǎo)劑B.②不是甲和乙融合的雜種細(xì)胞C.由愈傷組織到④需經(jīng)過脫分化和再分化的過程D.可通過配制選擇培養(yǎng)基對(duì)目的植株進(jìn)行選擇7、蛋白質(zhì)工程的基本流程正確的是（）

①蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)②DNA合成③預(yù)期蛋白質(zhì)功能④根據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列A.①②③④B.④②①③C.③①④②D.③④①②8、為了示蹤衰老細(xì)胞在機(jī)體中的分布，科研人員綜合利用基因工程和細(xì)胞工程的技術(shù)手段，將綠色熒光蛋白基因gf插入到了小鼠p16基因的下游，使兩個(gè)基因“融合”。轉(zhuǎn)基因小鼠的衰老細(xì)胞中，p16和gfp會(huì)特異性表達(dá)，從而使其在紫外光下呈綠色。下列分析錯(cuò)誤的是（）A.可用PCR技術(shù)特異性地快速擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因gfpB.轉(zhuǎn)基因小鼠的p16基因和gfp基因具有各自獨(dú)立的啟動(dòng)子C.常用顯微注射法將改造好的融合基因注入小鼠的受精卵中D.可選擇發(fā)育到桑葚胚期的轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎移植到受體母鼠子宮內(nèi)評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-）；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是（）

A.可用滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.未融合的細(xì)胞和融合的同種核細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的選擇透過性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)10、我國(guó)科學(xué)家提出的異種克隆大熊貓實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.科學(xué)家通過對(duì)母兔注射孕激素，進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞B.異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)，為保證無毒無菌環(huán)境，往往需要在培養(yǎng)液中加入維生素C.囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成，后者將來可發(fā)育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環(huán)境與大熊貓差異大，異種重構(gòu)囊胚可能不能正常發(fā)育出大熊貓幼仔11、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)，可確定T-DNA的插入位置12、白地霉侵染是導(dǎo)致柑橘酸腐病的主要原因，實(shí)驗(yàn)證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對(duì)白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長(zhǎng)的必需元素，是胞內(nèi)重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴(kuò)散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復(fù)合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結(jié)合的數(shù)量減少D.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果13、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，貼壁的細(xì)胞不一定都能增殖并形成克?。▎蝹€(gè)細(xì)胞繁殖形成的細(xì)胞群體），而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞，這一特點(diǎn)可用于測(cè)定動(dòng)物細(xì)胞的增殖能力。大致流程如下圖，相關(guān)敘述不正確的是（）

A.出現(xiàn)接觸抑制后，細(xì)胞克隆停止增殖B.克隆細(xì)胞與接種的細(xì)胞的遺傳信息不一定相同C.胰蛋白酶可使細(xì)胞分散成單個(gè)利于計(jì)數(shù)D.需采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細(xì)胞克隆14、勤洗手是預(yù)防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測(cè)了用凝膠洗手前后手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測(cè)流程見下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)C.培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀15、抗體的結(jié)構(gòu)分為V區(qū)（識(shí)別并結(jié)合抗原的區(qū)域）和C區(qū)（抗體的支架），鼠源抗體具有外源性，會(huì)被人體免疫系統(tǒng)當(dāng)作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構(gòu)建人一鼠嵌合抗體，操作流程如圖所示。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）

A.與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞為能分泌抗體的漿細(xì)胞B.用選擇性培養(yǎng)基可篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.為獲得結(jié)構(gòu)正確的嵌合抗體，受體細(xì)胞應(yīng)選用大腸桿菌D.人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時(shí)外源性下降16、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長(zhǎng)素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素17、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)，不同相對(duì)分子質(zhì)量DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切質(zhì)粒后，電泳后出現(xiàn)3條帶。下列敘述正確的是（）A.該質(zhì)粒上只有3個(gè)酶切位點(diǎn)B.瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNAC.外加電場(chǎng)時(shí)，DNA向正極泳動(dòng)D.瓊脂糖帶負(fù)電荷，有利于DNA的泳動(dòng)評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)18、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________19、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。20、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。21、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為_______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目___________，這是因?yàn)開_____________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測(cè)定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。22、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。23、沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌；被感染了沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會(huì)使人發(fā)生食物中毒。沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機(jī)溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門氏菌的繁殖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）培養(yǎng)沙門氏菌時(shí)要進(jìn)行無菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時(shí)一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對(duì)獲得的沙門氏菌常采用________的方法長(zhǎng)期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲(chǔ)存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學(xué)特性，可采用________法來提取，提取過程中影響精油品質(zhì)的因素有________。24、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無害。（選擇性必修3P111）()25、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關(guān)資料，分析和歸納這些資料__________。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共12分)26、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答下列問題：

（1）為了獲得尿素分解菌；可在__________取樣；經(jīng)系列處理后如圖2所示培養(yǎng)基，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是___________；__________。

（2）甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比；唯一的區(qū)別是___________。

（3）在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋；稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在___________________的平板，則說明稀釋操作比較成功。

（4）對(duì)分離得到的尿素分解菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)；可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是尿素分解菌_____________________，再結(jié)合菌落的特征等進(jìn)行確定。

（5）統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_________，除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。27、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖；請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）釀造葡萄酒時(shí)；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

（2）將發(fā)酵裝置放在18～25℃環(huán)境中，每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對(duì)從出料口c取樣的物質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn)，若樣液變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。

（4）產(chǎn)生酒精后，若在發(fā)酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環(huán)境中，適時(shí)打開______向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________。28、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，請(qǐng)回答下列問題：

(1)強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對(duì)沒有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。29、番茄果實(shí)在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。評(píng)卷人得分五、綜合題(共2題，共16分)30、閱讀下列材料；回答問題。

獲得2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的CRISPR-Cas系統(tǒng)是一種高效的基因編輯技術(shù)。其中CRISPR-Cas9體系在作物遺傳育種研究中應(yīng)用較為廣泛（原理如圖）。

CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA約為20個(gè)堿基；在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過程中，容易隨機(jī)引起一些堿基對(duì)的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變。

近年來；人們對(duì)長(zhǎng)粒香型稻米的需求量越來越大，研究者利用CRISPR-Cas9體系，改造東北廣泛種植的“龍粳”稻米，使其在保留了原來抗倒伏；耐寒性強(qiáng)等特點(diǎn)的同時(shí)，具備了長(zhǎng)粒、香味濃厚的特點(diǎn)。通過研究，科學(xué)家已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多與粒長(zhǎng)相關(guān)的基因，例如GS9基因，以及與稻米香味相關(guān)的Badh2基因。當(dāng)破壞GS9基因的正常表達(dá)時(shí)，稻米表現(xiàn)出粒長(zhǎng)增加的特性；當(dāng)破壞Badh2基因的正常表達(dá)時(shí)，稻米產(chǎn)生更多的香味。因此，科學(xué)家利用CRISPR-Cas9技術(shù)在“龍粳”稻中沉默GS9和Badh2基因獲得了更長(zhǎng)更香的稻米。

但是CRISPR-Cas的功能不僅限于切割靶基因。一些研究者進(jìn)行如下設(shè)計(jì)：使Cas蛋白的剪切域失活；將新的蛋白與該蛋白融合，這樣Cas9可被用于將這些蛋白運(yùn)輸至特定的DNA序列。舉例來說，Cas與轉(zhuǎn)錄激活因子融合，將RNA聚合酶帶到目標(biāo)位置，以啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。Cas與脫氨酶融合，能使特定的DNA堿基變異——使胸腺嘧啶（T）取代胞嘧啶（C），這種精準(zhǔn)基因編輯意味著我們能將致病突變轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€(gè)健康版本的基因，或?qū)⒔K止密碼子引入特定部位。涌現(xiàn)出來的這些新想法表明，目前取得的成果可能只是CRISPR-Cas應(yīng)用潛力的冰山一角，無論接下來取得什么進(jìn)展，CRISPR-Cas掀起的革命遠(yuǎn)沒有結(jié)束。

（1）科學(xué)家利用CRISPR-Cas9體系構(gòu)建了T0代水稻，水稻中同時(shí)含有GS9基因的向?qū)NA和Cas9蛋白復(fù)合體及_________復(fù)合體，其中，2個(gè)向?qū)NA依據(jù)_________原則尋找相應(yīng)的靶基因，靶基因在Cas9蛋白的作用下被剪切，Cas9蛋白在這個(gè)過程中發(fā)揮了基因工程工具中_________酶的功能。

（2）由文中信息可知，為獲得粒更長(zhǎng)、香味更濃厚的水稻，可通過將T0代植株__________的方法，獲得純合的T1代水稻突變體植株。提取T1代突變體植株大DNA進(jìn)行測(cè)序；挑選出GS9基因和Badh2基因突變的純合子，如下圖：

Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割GS9基因和Badh2基因，在隨后DNA自我修復(fù)的過程中，GS9基因和Badh2基因中_____________________；導(dǎo)致GS9和Badh2基因沉默。

（3）閱讀材料可知，CRISPR-Cas9的功能有__________________________。31、下圖是基因工程方法培育抗蟲棉的過程。請(qǐng)回答相關(guān)問題：

(1)從蘇云金芽孢桿菌的DNA上獲取抗蟲基因，需要用到的工具是_______，此工具主要是從______生物中分離純化出來的，它能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧梭苷酸之間的______鍵斷開。

(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因?yàn)門i質(zhì)粒上具有______它能把目的基因整合到受體細(xì)胞______。

(3)E過程是利用______技術(shù)完成的，要確定抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個(gè)體水平上還需要做______實(shí)驗(yàn)。

(4)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，除采用上圖中的方法外，還可采用_____法和_____法。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精；胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)；實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。

【詳解】

A；稀有動(dòng)物可以通過胚胎工程中的體外受精；胚胎移植繁殖數(shù)量更多的后代，完成種族的延續(xù)。把藥物基因與動(dòng)物的乳腺細(xì)胞中的調(diào)控元件組合導(dǎo)入動(dòng)物受精卵中，就可以作為生物制藥反應(yīng)器，A正確；

B；人工受精不需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；B錯(cuò)誤；

C；早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中都需要加入血清或血漿；C正確；

D；經(jīng)過同情發(fā)情處理；使得受體與供體的生理狀態(tài)基本相同，則被移植胚胎繼續(xù)正常發(fā)育，D正確。

故選B。2、D【分析】【詳解】

先利用特定的抗原注射小鼠；再?gòu)男∈笃⑴K中分離B淋巴細(xì)胞，抗原主要成分是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)飼喂小鼠，水解失去活性，A錯(cuò)誤；

雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有遺傳物質(zhì)；獲得的融合細(xì)胞包括雜交瘤細(xì)胞；漿細(xì)胞自身融合型、癌細(xì)胞自身融合型，B錯(cuò)誤；

選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞還需通過抗體檢測(cè)后才能通過體外或體內(nèi)培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體；C錯(cuò)誤；

單克隆抗體制備最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準(zhǔn)確、快速等優(yōu)點(diǎn)，D正確。3、D【分析】【分析】

DNA的粗提取的步驟主要有：實(shí)驗(yàn)材料的選?。黄扑榧?xì)胞、獲得含DNA的濾液、去除濾液中的雜質(zhì)、DNA的析出與鑒定。

【詳解】

A；豬紅細(xì)胞沒有細(xì)胞壁；可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，A正確；

B；透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜；小分子雜質(zhì)可以通過，B正確；

C；雞血細(xì)胞中含有豐富的DNA和血紅蛋白；可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料，C正確；

D；加入木瓜蛋白酶會(huì)將蛋白質(zhì)水解；D錯(cuò)誤。

故選D。4、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性；其過程是：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。

【詳解】

A；離體的紅豆杉組織細(xì)胞通過纖維素酶和果膠酶分散處理后直接進(jìn)行懸浮培養(yǎng)；A錯(cuò)誤；

B；懸浮培養(yǎng)液中細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；大多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)上大小相差不大，細(xì)胞的核-質(zhì)比率大，胞質(zhì)濃厚，液泡化程度高，B正確；

C；脫分化過程一般細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量比值小于1；C錯(cuò)誤；

D；植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中植物細(xì)胞生長(zhǎng)沒有接觸抑制；但是受營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的影響，不可能無限擴(kuò)大培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

故選B。5、D【分析】【分析】

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指直接利用原材料中天然存在的微生物；或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團(tuán)；鹵汁等發(fā)酵物中微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)。

【詳解】

A；制作果酒時(shí)；未對(duì)發(fā)酵裝置進(jìn)行消毒處理，可能會(huì)有雜菌污染，造成發(fā)酵失敗，A正確；

B；制作果醋時(shí)；利用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧微生物，培養(yǎng)的條件為30-35℃，所以通入氧氣不足或溫度過低，造成發(fā)酵失敗，B正確；

C；制作腐乳時(shí)；裝瓶后未將瓶口密封，造成雜菌污染，造成豆腐腐敗變質(zhì)，C正確；

D；制作泡菜時(shí)；鹽具有抑制微生物生長(zhǎng)的作用，放鹽的比例過小，會(huì)造成泡菜腐爛發(fā)霉，D錯(cuò)誤。

故選D。6、B【分析】【分析】

該圖是植物原生質(zhì)體融合以及植物細(xì)胞培養(yǎng)過程圖；①表示利用化學(xué)或物理方法融合細(xì)胞，②表示正在融合的細(xì)胞，③表示雜種細(xì)胞，④表示雜種植株。植物組織培養(yǎng)：在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官；組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。

【詳解】

A；在培育高產(chǎn)耐鹽植株時(shí)；若使用化學(xué)方法誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體融合，則①過程可選用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑，A錯(cuò)誤；

B；甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)融合后可能形成甲和甲融合、乙和乙融合及甲和乙融合的細(xì)胞；且②為尚未再生出細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，不是細(xì)胞，B正確；

C；愈傷組織到④只需經(jīng)過再分化的過程；C錯(cuò)誤；

D；對(duì)目的植株進(jìn)行篩選應(yīng)從植物性狀水平篩選；而運(yùn)用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)屬于細(xì)胞水平，故應(yīng)當(dāng)用高鹽環(huán)境對(duì)目的植株進(jìn)行篩選，D錯(cuò)誤。

故選B。7、C【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本流程是：③預(yù)期蛋白質(zhì)功能→①預(yù)期蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)組成→④根據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列→②合成DNA。綜上所述；C正確，ABD錯(cuò)誤。

故選C。8、B【分析】【分析】

基因工程的操作步驟：(1)目的基因的獲??；方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；綠色熒光蛋白基因gfp為DNA片段；可用PCR技術(shù)特異性地快速擴(kuò)增，A正確；

B；將綠色熒光蛋白基因gfp插入到了小鼠p16基因的下游；使兩個(gè)基因“融合”，因此p16基因和gfp基因共用了一個(gè)啟動(dòng)子，它們之間關(guān)聯(lián)表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；C正確；

D；胚胎移植時(shí)；應(yīng)選擇處于桑葚胚或囊胚期的胚胎，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)9、A:C【分析】【分析】

（1）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖；誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺(tái)病毒）等；A正確；

B；兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長(zhǎng)，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；

C；因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步通過專一抗體陽性檢測(cè)，把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的；D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】10、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞；然后經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)獲得異種重構(gòu)囊胚，再利用胚胎移植技術(shù)將重構(gòu)囊胚移植如代孕兔體內(nèi)。

【詳解】

A；科學(xué)家通過對(duì)母兔注射促性腺激素；進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)；往往需要在培養(yǎng)液中加入抗生素，從而保證無毒無菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；

C；囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成；其中滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育為胎盤和胎膜，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構(gòu)囊胚在代孕兔的子宮內(nèi)能正常著床，但是不能正常發(fā)育生產(chǎn)出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能讓異種重構(gòu)囊胚正常發(fā)育，D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】11、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】12、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯(cuò)誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結(jié)合增強(qiáng)；抑菌圈的紅色加深，C錯(cuò)誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復(fù)合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。13、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中；當(dāng)出現(xiàn)接觸抑制后，細(xì)胞克隆停止增殖，A正確；

B；在細(xì)胞分裂的過程中；可能會(huì)發(fā)生基因突變，因此，克隆細(xì)胞與接種的細(xì)胞的遺傳信息不一定相同，B正確；

C；胰蛋白酶可使細(xì)胞分散成單個(gè)；從而利于計(jì)數(shù)，C正確；

D；需采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細(xì)胞克??；D錯(cuò)誤。

故選D。14、A:C:D【分析】微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)）：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)；不能用于活菌計(jì)數(shù)，故統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；

B；除圖中操作外；還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；

C；由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上顯示的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)、甚至幾個(gè)活菌，C錯(cuò)誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯(cuò)誤。

故選ACD。15、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤細(xì)胞為無限增殖的細(xì)胞；分裂能力強(qiáng)，制備單克隆抗體的過程中還需該雜交細(xì)胞具備分泌特異性抗體的功能，而漿細(xì)胞為能夠分泌抗體的細(xì)胞，故與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞為能分泌抗體的漿細(xì)胞。

2；骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞在融合的過程中可能會(huì)出現(xiàn)多種融合結(jié)果；如骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，而實(shí)驗(yàn)需要的是骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，但只能篩選出能雜交瘤細(xì)胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞則需要進(jìn)行專一性抗體檢測(cè)。

【詳解】

A；與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞取自脾臟；不一定是能分泌抗體的漿細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞在融合的過程中可能會(huì)出現(xiàn)多種融合結(jié)果；如骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，而實(shí)驗(yàn)需要的是骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，但是只能篩選出能雜交瘤細(xì)胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞則需要進(jìn)行專一性抗體檢測(cè)，B錯(cuò)誤；

C；抗體為分泌蛋白；需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對(duì)其進(jìn)行加工，大腸桿菌為原核生物，無高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，為獲得結(jié)構(gòu)正確的嵌合抗體，受體細(xì)胞不應(yīng)該選用大腸桿菌，C錯(cuò)誤；

D；結(jié)合題干“鼠源抗體具有外源性；會(huì)被人體免疫系統(tǒng)當(dāng)作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構(gòu)建人一鼠嵌合抗體”可知，該抗體不是原本的鼠源抗體，保留了其V區(qū)，但是其中還有一部分來自于人本身，使得人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時(shí)外源性下降，D正確。

故選ABC。16、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。17、B:C:D【分析】【分析】

分析題干：質(zhì)粒上的DNA分子為環(huán)狀；某種限制性內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶（相同分子量的為一條帶），即3種不同分子量DNA（至少被切割成3條DNA片段），因此環(huán)狀質(zhì)粒上至少有3個(gè)酶切位點(diǎn)。

【詳解】

A；由分析可知；該質(zhì)粒上至少含有3個(gè)酶切位點(diǎn)，A錯(cuò)誤；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，DNA在一定的電場(chǎng)力作用下，在凝膠中向正極泳動(dòng)，DNA分子越大，泳動(dòng)越慢，因此瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNA，B正確；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，因此外加電場(chǎng)時(shí)，DNA向正極泳動(dòng)，C正確；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，若瓊脂糖帶負(fù)電荷，使得電場(chǎng)力增強(qiáng)，有利于DNA向正極泳動(dòng)，D正確。

故選BCD。三、填空題(共8題，共16分)18、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)19、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機(jī)鹽20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、21、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測(cè)定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識(shí)記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1423、略

【分析】【分析】

微生物實(shí)驗(yàn)中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對(duì)于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對(duì)于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對(duì)于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落長(zhǎng)成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個(gè)月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提取；對(duì)于如橘皮精油，其主要儲(chǔ)存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時(shí)一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過一系列梯度稀釋。對(duì)獲得的沙門氏菌進(jìn)行長(zhǎng)期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲(chǔ)存；高溫加工方法進(jìn)行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機(jī)溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行提取，提取過程中蒸餾的溫度、時(shí)間都會(huì)影響精油品質(zhì)。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運(yùn)用，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力。【解析】灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲(chǔ)存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時(shí)間24、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說法錯(cuò)誤。【解析】錯(cuò)誤25、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個(gè)宿主轉(zhuǎn)移到另一個(gè)宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時(shí)近年來由于溫室效應(yīng)加劇，也會(huì)使致病微生物的繁殖周期變短，可能會(huì)使危害性更大，因此我們需要積極開展科學(xué)研究，掌握防范的措施和防范，實(shí)現(xiàn)最好的防護(hù)，目前對(duì)致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用?！窘馕觥恐虏∥⑸锸侵缚梢郧址溉梭w，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對(duì)致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共12分)26、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要分離尿素細(xì)菌應(yīng)該使用只含有尿素為唯一氮源培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基其他細(xì)菌不能生存，存活下來的細(xì)菌則是可以分解尿素。

【詳解】

（1）自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要獲得分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)到含尿素較多的土壤中去取樣，圖2中培養(yǎng)基為微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲為液體培養(yǎng)基；乙為固體培養(yǎng)基，唯一的區(qū)別在于甲培養(yǎng)基內(nèi)無瓊脂；

（3）為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；一般應(yīng)選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，在30-300范圍內(nèi)的菌落數(shù)說明稀釋比較成功；

（4）酚紅遇堿變紅；合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；

（5）該小組采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土壤溶液中活菌的數(shù)目時(shí)；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，只能統(tǒng)計(jì)一個(gè)菌落，細(xì)菌還可以使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【點(diǎn)睛】

熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息并進(jìn)行作答?！窘馕觥亢蛩剌^多的土壤中葡萄糖尿素甲中培養(yǎng)基無瓊脂30~300的平板（則說明稀釋操作比較成功）合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)低顯微鏡直接計(jì)數(shù)27、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機(jī)要清洗干凈；并晾干；②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時(shí)間控制在10～12d左右，可通過出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行，及時(shí)的監(jiān)測(cè)。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時(shí)間控制在前7～8d左右，并注意適時(shí)通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時(shí)；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行進(jìn)行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

（2）榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干，發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發(fā)酵裝置放在18～23℃環(huán)境中，發(fā)酵過程中由于酵母菌呼吸作用會(huì)產(chǎn)生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時(shí)空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會(huì)產(chǎn)生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測(cè)酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會(huì)變?yōu)榛揖G色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握果酒的制作的原理、過程以及發(fā)酵過程中的注意事項(xiàng)是該題的重點(diǎn)，識(shí)記果酒的制作過程是解決重點(diǎn)的關(guān)鍵。理解并識(shí)記果醋的發(fā)酵過程和原理是解決第（4）問的關(guān)鍵。【解析】沖洗CO2防止排氣時(shí)空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細(xì)菌，酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M(jìn)行28、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會(huì)破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場(chǎng)所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場(chǎng)所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對(duì)沒有分化的薄壁細(xì)胞團(tuán)；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染29、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒