Pylon-生物感應(yīng)器-核心技術(shù)和超敏心肌肌鈣蛋白I的發(fā)展

Pylon生物感應(yīng)器:核心技術(shù)和超敏心肌肌鈣蛋白I的發(fā)展RobertZukAugust11,2015核心技術(shù)包被抗體的針頭Pylon生物傳感系統(tǒng)檢測流程檢測試劑條Pylon生物感應(yīng)器的主要特點(diǎn)樣本和試劑使用量少簡易的洗滌操作，單人份包裝避免浪費(fèi)行之有效的反應(yīng)流程，精準(zhǔn)的操作控制程序非液路系統(tǒng)在使用中更方便檢測時間隨反應(yīng)速度變化而可控Ab:Ag:Ab-B:Sa-Cy5-Sa-Cy5Sa-Cy5Sa-Cy5Sa-Cy5Sa-Cy5Sa-Cy5Sa-Cy5Sa-Cy5分支繁多的多糖鏈Cy5:熒光標(biāo)記物B：生物素Sa:鏈酶親和素Ab:Ag:Ab-B:Sa-Cy5以多糖為媒介的信號放大系統(tǒng)

以多糖作為載體的反應(yīng)靈敏度倍增效果

循環(huán)信號增強(qiáng)生物傳感器從含生物素標(biāo)記抗體孔開始進(jìn)行循環(huán)反應(yīng)，最終形成特異性抗體-生物素-鏈酶親和素-熒光素復(fù)合物多步驟循環(huán)循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法(CEFA)消耗極少量的二抗和熒光素標(biāo)記的鏈酶親和素通過循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法，最終形成眾多含有熒光素標(biāo)記鏈酶親和素的復(fù)合物每次反應(yīng)約1.5分鐘每次反應(yīng)均2倍信號放大循環(huán)數(shù)最低檢測濃度(pg/mL)16.423.732.441.1循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法顯著提高試劑檢測的靈敏度循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法顯示了其在定量檢測中的高精密度循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法在超敏肌鈣蛋白I檢測中的應(yīng)用捕獲抗體及檢測抗體分別識別的TnI抗原表位的氨基酸序列該反應(yīng)體系能有效識別cTnI抗原的常用表位與參比試劑的對比檢測，以驗(yàn)證循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法檢測hscTnI的臨床適用性精密性可接受標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)原則中所設(shè)可接受范圍CV≤10%@99thpercentile臨床可接受范圍10%<CV%≤20%不被接受CV>20%可測量的正常人群百分比第3代hscTnI≥95%第二代hscTnI75%-95%第一代hscTnI50%-75%當(dāng)代cTnI<50%基于正常人群樣本檢測結(jié)果所定義的超敏肌鈣蛋白IApple,ClinChem2009敏感性需達(dá)到pg/mL級別可重復(fù)測量的高精密性cTnI抗原存在的多種形式游離或形成復(fù)合物游離片段磷酸化形式肝素干擾自身抗體的干擾檢測時間臨床可接受樣本類型系統(tǒng)和試劑成本hscTnI研發(fā)中的技術(shù)挑戰(zhàn)539份血清樣本

其中女性樣本197份，男性342份反應(yīng)時間：17分鐘樣本用量：40μl.?ETHealthcare,Inc.Allrightsreserved.正常人群hscTnI研究檢出率達(dá)到超敏肌鈣蛋白I的設(shè)計要求可接受的指導(dǎo)原則:變異系數(shù)≤10%@99百分位數(shù)Pylon超敏心肌肌鈣蛋白I檢測的99百分位水平為8pg/ml，滿足指導(dǎo)原則的要求cTnI(pg/mL)輪間變異系數(shù)189%810%420%循環(huán)增強(qiáng)免疫熒光法的獨(dú)特優(yōu)勢簡單