2025年華師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷626考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.單克隆抗體制備過程中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行多次篩選的目的和方法相同B.將胚胎或幼齡動(dòng)物組織制成單細(xì)胞后需去除胰蛋白酶C.單一抗體檢測(cè)能篩選出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞D.細(xì)胞核移植是體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵步驟2、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.菜花提取的DNA濾液中，加入冷酒精有利于溶解DNAB.雞血細(xì)胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于溶解細(xì)胞膜C.洋蔥鱗片葉碎片中，加入沐浴液和食鹽后研磨有利于去除細(xì)胞膜D.與雞血相比，用同樣方法從等體積兔血中提取DNA的量較高3、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B.家庭制作果酒、果醋和泡菜通常都不是純種發(fā)酵C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D.測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是在酸性條件下，亞硝酸鹽與重鉻酸鉀反應(yīng)形成玫瑰紅色4、抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）是由細(xì)胞毒素通過一個(gè)化學(xué)鍵與單克隆抗體連接而成的；是一類新興的抗癌治療藥物，此類藥物借助單克隆抗體的特異性，定向運(yùn)送細(xì)胞毒素到腫瘤部位，這一新技術(shù)可以提高化學(xué)治療的療效，降低或消除細(xì)胞毒素分子對(duì)非靶組織；非靶細(xì)胞的毒性。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.要實(shí)現(xiàn)ADCs精準(zhǔn)殺傷腫瘤細(xì)胞需腫瘤細(xì)胞表面受體能對(duì)其特異性識(shí)別B.若利用放射性同位素標(biāo)記單克隆抗體，則可以對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行定向的放療C.ADCs在溶酶體酶的作用下釋放出細(xì)胞毒素，由細(xì)胞毒素直接殺死腫瘤細(xì)胞D.制備單克隆抗體時(shí)，至少需經(jīng)過兩次篩選才能得到分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞5、在降雨量少且分布不均勻的西北地區(qū)，蘋果樹腐爛病在各個(gè)蘋果產(chǎn)區(qū)經(jīng)常發(fā)生，已經(jīng)成為蘋果產(chǎn)量和安全種植的主要限制因素，篩選蘋果腐爛病的拮抗放線菌對(duì)該病的防治具有重要意義?？蒲泄ぷ髡呃肞DA培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌和蘋果樹腐爛病菌。在PDA培養(yǎng)基平板上進(jìn)行下圖所示的操作，將培養(yǎng)皿置于28°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待甲圖培養(yǎng)皿的菌體長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿時(shí)，測(cè)量乙圖中放線菌周圍抑菌圈的直徑，進(jìn)行篩選。下列分析不正確的是（）

A.甲圖的培養(yǎng)皿為對(duì)照組，乙圖的培養(yǎng)皿為實(shí)驗(yàn)組B.應(yīng)從發(fā)病的土壤取樣，分離得到蘋果樹腐爛病菌和放線菌C.PDA培養(yǎng)基中含有兩種微生物生長(zhǎng)發(fā)育所需的水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等D.乙圖中顯示抑菌圈直徑越小的放線菌，其拮抗蘋果樹腐爛病菌的能力越強(qiáng)6、科學(xué)家構(gòu)建了含有大洋鱈魚抗凍蛋白基因啟動(dòng)子和大鱗鮭魚生長(zhǎng)激素基因的表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入了大西洋鮭的細(xì)胞中，獲得了生長(zhǎng)速度加快的轉(zhuǎn)基因大西洋鮭。相關(guān)敘述正確的是()A.轉(zhuǎn)基因大西洋鮭體內(nèi)抗凍蛋白明顯增加B.構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶和DNA聚合酶C.大鱗鮭魚生長(zhǎng)激素基因不能通過PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得D.轉(zhuǎn)基因大西洋鮭生長(zhǎng)激素含量增加導(dǎo)致生長(zhǎng)速度加快評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)7、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對(duì)Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強(qiáng)，對(duì)Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴(kuò)增MT-like基因，并進(jìn)一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴(kuò)增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計(jì)一對(duì)與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物C.設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對(duì)D.長(zhǎng)度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度8、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.較高溫度和密閉環(huán)境有利于果醋的發(fā)酵B.鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會(huì)影響腐乳風(fēng)味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)D.與自然發(fā)酵相比，人工接種菌種不易被雜菌污染9、某種病毒的主要表面抗原為S蛋白，用S蛋白制備的單克隆抗體可用于該種病毒的檢測(cè)。下列說法正確的是（）

A.B淋巴細(xì)胞分離自經(jīng)S蛋白免疫過的小鼠B.稀釋培養(yǎng)后多孔玻璃板中的雜交瘤細(xì)胞數(shù)目可能不到細(xì)胞總數(shù)的一半C.集落①的細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生單克隆抗體D.集落②～④的細(xì)胞可用于擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體10、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是（）A.對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器B.中國對(duì)于克隆人的態(tài)度是不反對(duì)治療性克隆，可以有限制的進(jìn)行克隆人的實(shí)驗(yàn)C.對(duì)轉(zhuǎn)基因植物外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物11、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結(jié)合，發(fā)揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細(xì)胞取自注射過HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡C.放入96孔板的細(xì)胞為多種雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生所需抗體D.將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體12、在中國的傳說中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在-．次釀酒時(shí)發(fā)酵過頭，直至第21天開缸時(shí)，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是（）A.酒發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌細(xì)胞的線粒體中產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)或發(fā)酵裝置沒有清洗干凈D.釀酒時(shí)糖類未耗盡，酵母菌的發(fā)酵也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多13、利用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素原。下列相關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.人和大腸桿菌在合成胰島素原時(shí)，轉(zhuǎn)錄和翻譯的場(chǎng)所是相同的B.DNA連接酶能催化磷酸與脫氧核糖形成化學(xué)鍵C.通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，則可判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌D.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原有較高的生物活性14、下列關(guān)于“試管嬰兒”、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”技術(shù)及安全倫理的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.“試管嬰兒”、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”技術(shù)在生物學(xué)上所依據(jù)的原理都是無性生殖B.“試管嬰兒”、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”技術(shù)對(duì)人類的作用是相同的C.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”形成的胚胎需遺傳學(xué)診斷后植入母體孕育D.不符合遺傳要求的胚胎如何處理會(huì)引起道德倫理之爭(zhēng)評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、______——“分子手術(shù)刀”17、其它載體：_______18、植物基因工程：______。19、什么是生物武器？簡(jiǎn)述生物武器的危害。__________評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共20分)20、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯(cuò)誤21、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。()A.正確B.錯(cuò)誤22、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤23、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共32分)24、單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高，用于診療疾病具有準(zhǔn)確；高效等特點(diǎn)。下圖表示單克隆抗體制備過程。

回答下列問題：

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則A是_________________細(xì)胞，誘導(dǎo)d過程常用的因素是_________________（答出一個(gè)即可）。

（2）用于篩選細(xì)胞D的培養(yǎng)基必需滿足兩個(gè)條件：一是_________________細(xì)胞都會(huì)死亡；二是保證_________________細(xì)胞能生長(zhǎng)。

（3）使用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測(cè)試劑，可用_________________（選填數(shù)字標(biāo)號(hào)：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細(xì)胞。25、德陽中江盛產(chǎn)蜜柚；汁多肉脆，口感香甜。但是近年各地大面積種植該類產(chǎn)品，導(dǎo)致大量果品積壓。為了解決果農(nóng)的燃眉之急，有一定生物學(xué)知識(shí)的村干部想到了多渠道開發(fā)產(chǎn)品的方法，幫助果農(nóng)辦起了加工廠。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題；

（1）利用蜜柚果肉可以生產(chǎn)果汁，為提高出汁率和澄清度，可向蜜柚汁中加入果膠酶將果膠分解為________；生產(chǎn)果汁剩下的柚皮可用________法提取精油；作為工業(yè)原料。

（2）在利用蜜柚汁制作果酒的過程中；為了提高酵母菌的發(fā)酵效率，工作人員對(duì)酵母菌進(jìn)行了固定化，過程如下：酵母細(xì)胞活化→①→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞。

上述流程中，①為配制________溶液；溶化海藻酸鈉時(shí)，要用________加熱；直至其完全溶化。

（3）上述固定酵母細(xì)胞的方法稱為法________，而制備固定化淀粉酶則不用此法進(jìn)行固定，原因是________________________________

（4）在利用蜜抽果酒制作果醋的過程中，一工作人員又向發(fā)酵裝置中添加一定量的蜜柚汁（不影響菌種的活性），檢測(cè)發(fā)現(xiàn)乙醇的利用速率迅速下降，原因是________________________________________________。26、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請(qǐng)回答下列問題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿一異戊醇，實(shí)驗(yàn)過程中加入氯仿一異戊醇離心后，應(yīng)取①______加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對(duì)玉米開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進(jìn)行的四種人工繁殖過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）植物組織培養(yǎng)過程中，外植體需要進(jìn)行消毒處理。利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用________消毒30s后；用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導(dǎo)，對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進(jìn)苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是_______（填下列序號(hào)）。

①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散②剛?cè)诤系碾s交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離。

③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細(xì)胞的形態(tài)大小一致27、新冠病毒竟然是友軍？近日有媒體報(bào)道稱感染新冠病毒可以治療肺癌；該報(bào)道中的結(jié)論是基于美國科學(xué)家發(fā)表的一篇論文《鼻部吸入新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展》。該研究使用新冠病毒的刺突蛋白S1進(jìn)行了體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，分析回答下列問題：

(1)體外實(shí)驗(yàn)：首先培養(yǎng)肺癌細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)液中除了加入必要的營養(yǎng)物質(zhì)外，還加了一定濃度的________以防止雜菌污染，細(xì)胞瓶放在37℃的________中培養(yǎng)。隨后用刺突蛋白S1處理肺癌細(xì)胞并檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明________。

(2)小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：流程如圖2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3。其中NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮，長(zhǎng)時(shí)間對(duì)小鼠進(jìn)行NNK處理的目的是________。

(3)對(duì)比體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多，推測(cè)原因可能是刺突蛋白S1引起了免疫系統(tǒng)的________功能激活。為了進(jìn)一步確認(rèn)肺部腫瘤比例的減少到底是不是因?yàn)樾鹿诓《敬掏坏鞍譙1的作用，還應(yīng)增加一組對(duì)照為NNK+________。

(4)上述研究成果是否足以證明感染新冠病毒可以治療肺癌？請(qǐng)做出判斷并說明理由________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)28、近年來；生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛；發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁澹ú僮鬟^程如圖1），獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻，并利用地?zé)釓U水培養(yǎng)，不僅能生產(chǎn)生物柴油，還能治理地?zé)釓U水。

注：LacZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X﹣gal；從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落則成白色。

（1）提取紫蘇細(xì)胞的總RNA經(jīng)過________得到的cDNA，經(jīng)_______技術(shù)擴(kuò)增得到DGAT1基因，與克隆質(zhì)粒pMD19連接，將連接產(chǎn)物導(dǎo)入到經(jīng)CaCl2處理后的處于__________的大腸桿菌細(xì)胞，并接種到添加__________的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時(shí)間后，挑選顏色為__________的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)；提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。

（2）用限制酶酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因，并與酶切后的載體pBI121連接得到________，并導(dǎo)入到四尾柵藻。DGAT1基因序列兩端無限制酶酶切位點(diǎn)，由表1中信息推測(cè)擴(kuò)增DGAT1基因時(shí)所用一對(duì)引物的一端分別加上的限制酶識(shí)別序列是_______________。

表1限制酶及其識(shí)別序列。

。限制酶。

識(shí)別序列。

BamHⅠ

5’-GGATCC-3’

3’-CCTAGG-5’

HindⅢ

5’-AAGCTT-3’

3’-TTCGAA-5’

EcoRⅠ

5’-GAATTC-3’

3’-CTTAAG-5’

XbaⅠ

5’-TCTAGA-3’

3’-AGATCT-5’

（3）對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因四尾柵藻檢測(cè)的方法有__________（寫出兩種方法）。

（4）研究人員利用地?zé)釓U水培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻并檢測(cè)其油脂含量；結(jié)果如圖2。

結(jié)果顯示：__________________。

（5）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對(duì)地?zé)釓U水的去污能力；研究人員設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并得到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2。

表2培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的地?zé)釓U水各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果。

。各項(xiàng)指標(biāo)。

總氮（mg/L）

總磷（mg/L）

氟化物（mg/L）

廢水培養(yǎng)基。

23.3

4.32

4.56

培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后。

1.9

0.45

0.84

該實(shí)驗(yàn)不能說明轉(zhuǎn)DGAT1基因顯著提高了四尾柵藻的去污能力。請(qǐng)進(jìn)一步完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。____________。29、研究表明來源于大腸桿菌的蘇氨酸輸出蛋白（由rhtA基因編碼）能夠識(shí)別5-氨基乙酰丙酸，并將其輸出至細(xì)胞外。為探究蘇氨酸輸出蛋白對(duì)5-氨基丙酸合成的影響，研究人員從大腸桿菌的基因組DNA中擴(kuò)增出rhtA基因，并構(gòu)建出相應(yīng)的重組質(zhì)粒，獲得轉(zhuǎn)rhtA基因的工程菌；其基本操作流程如圖所示，已知引物A；B的序列分別是：5'AGGAAACAGACCATGGAATTCATGCCTGGTTCATTACGTAAAATG3'、5'GCCAAGCTTGCATGCCTGCAGTTAATTAATGTCTAATTCTTTTATTTTGCTC3'。

回答下列問題：

(1)由圖可知，獲取大量rhtA基因要經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增，若要擴(kuò)增出N個(gè)rhtA基因，需要引物A、B各___________個(gè)，對(duì)引物A的設(shè)計(jì)要求是__________（答出2點(diǎn)即可）﹔通過過程①得到重組質(zhì)粒，需選用的兩種限制酶是__________，兩者起作用部位的化學(xué)鍵是____________。

(2)過程②⑤在操作時(shí)，一般需用鈣離子處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種____________的生理狀態(tài)。過程③將大腸桿菌體內(nèi)的質(zhì)粒提取出來進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)，以EeoRI切割pEC-XK99E質(zhì)粒為對(duì)照，分別對(duì)重組質(zhì)粒用EcoRⅠ單酶切、以（1）選用的雙酶對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，然后用電泳技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示，若2是對(duì)照，則3、4分別是單酶切、雙酶切的結(jié)果，做出此推測(cè)的依據(jù)是__________。

(3)將正確的質(zhì)粒導(dǎo)入A19后，后續(xù)的步驟是___________。本技術(shù)選用微生物大腸桿菌作為受體細(xì)胞，而不選用動(dòng)物細(xì)胞，理由是___________（答出一點(diǎn)即可）。30、若在重金屬鎘污染的土壤中種植水稻；鎘會(huì)經(jīng)水稻的根系吸收而使大米中的鎘含量超標(biāo)。研究人員利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)改變編碼水稻鎘載體蛋白的基因結(jié)構(gòu)，使該蛋白功能缺失，從而培育出了低．鎘吸收的水稻突變體。CRISPR/Cas9主要由人工設(shè)計(jì)的向?qū)NA（gRNA）和Cas9蛋白組成，gRNA與待編輯的目的基因部分序列互補(bǔ)，能引導(dǎo)Cas9蛋白與目的基因的特異性位點(diǎn)結(jié)合并進(jìn)行定點(diǎn)切割?；卮鹣铝袉栴}。

（1）Cas9蛋白的作用與基因工程中使用的___________酶相似。Cas9蛋白與目的基因結(jié)合后，使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的_______________斷開，切除基因內(nèi)部的部分片段，再在_______________酶作用下重新連接所需的兩個(gè)片段；即得到被編輯的目的基因。

（2）編輯成功的目的基因可采用_______________技術(shù)擴(kuò)增，再組裝到相應(yīng)的載體上，該載體的結(jié)構(gòu)還應(yīng)包括________________和標(biāo)記基因。

（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入水稻愈傷組織細(xì)胞后，若想獲得完整的植株，還需借助_______技術(shù)。如果被編輯的目的基因已經(jīng)插入水稻的染色體DNA上，但植株對(duì)鎘的吸收并未減少，根據(jù)中心法則分析，可能的原因是__________________________________________。31、2019年中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)；成功構(gòu)建了世界首例核心節(jié)律基因BMAL1敲除獼猴模型，并成功用基因敲除猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)培育了5只克隆疾病猴，為節(jié)律紊亂相關(guān)疾病機(jī)理的研究提供了比較理想的動(dòng)物模型。CRISPR—Cas9基因編輯系統(tǒng)由單鏈向?qū)NA(sgRNA)和Cas9蛋白組成。回答下列問題：

（1）科學(xué)家常用________法將CRISPR—Cas9基因編輯系統(tǒng)導(dǎo)入獼猴細(xì)胞。為使靶基因發(fā)生改變，實(shí)現(xiàn)基因敲除，編輯系統(tǒng)利用sgRNA來識(shí)別靶基因DNA，并引導(dǎo)Cas9蛋白剪切DNA。sgRNA能識(shí)別靶基因DNA的原因是______________________。

（2）設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)在對(duì)核心節(jié)律基因BMAL1進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理（如下圖）；請(qǐng)分別說明理由。

①第1組：__________________；

第2組：___________________________。

②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增核心節(jié)律基因BMAL1時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是______________。

（3）PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)開___________________________。

（4）克隆猴被用于人類疾病研究與治療中所具有的突出優(yōu)點(diǎn)是_____________。(答出一點(diǎn))參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、A【分析】【分析】

制備單克隆抗體過程中的篩選：

第一次篩選是獲得雜交瘤細(xì)胞。即將未融合的B淋巴細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞以及B-B融合、瘤-瘤融合的細(xì)胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰；篩選出B-瘤融合的細(xì)胞。

第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B-瘤細(xì)胞用相應(yīng)抗原檢測(cè)的方法篩選出來。因?yàn)閺捏w內(nèi)取免疫過的B淋巴細(xì)胞時(shí)取出很多種；形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種，所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A；單克隆抗體制備過程中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行多次篩選的目的和方法不相同；第一次采用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次是通過抗體陽性檢測(cè)法篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；將胚胎或幼齡動(dòng)物組織制成單細(xì)胞后需去除胰蛋白酶；以免對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程造成影響，B正確；

C；第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B-瘤細(xì)胞用相應(yīng)抗原檢測(cè)的方法篩選出來；能篩選出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；

D；用體細(xì)胞克隆動(dòng)物是通過核移植實(shí)現(xiàn)的；動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，D正確。

故選A。2、C【分析】【分析】

1；DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同；在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；

2；DNA不溶于酒精溶液；

3；蛋白質(zhì)不能忍受60～80℃的高溫；DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒有影響；

4；DNA含量相對(duì)較高的生物組織；如雞血、菜花、洋蔥等。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；所以加入冷酒精不利于溶解DNA，A錯(cuò)誤；

B；DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；不利于提取DNA，洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，B錯(cuò)誤；

C；沐浴液屬于洗滌劑；能夠瓦解細(xì)胞膜，C正確；

D；DNA含量相對(duì)較高的生物組織；如雞血、菜花、洋蔥等；兔屬于哺乳動(dòng)物，血中DNA含量少，D錯(cuò)誤。

故選C。3、B【分析】【分析】

1；在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖；再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌好氧型細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。

3；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/p>

【詳解】

A；乳酸菌是一種嚴(yán)格的厭氧菌；有氧氣存在時(shí)，其發(fā)酵會(huì)受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯(cuò)誤；

B；家庭制作果酒、果醋和泡菜通常都不是純種發(fā)酵；B正確；

C；果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低；果酒制作過程中產(chǎn)生二氧化碳，發(fā)酵液pH也逐漸降低，C錯(cuò)誤；

D；果酒制作過程中不能反復(fù)沖洗葡萄；以免葡萄皮上的酵母菌丟失，D錯(cuò)誤。

故選B。4、C【分析】【分析】

題圖分析；抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素類藥物與單克隆抗體結(jié)合，被腫瘤細(xì)胞特異性識(shí)別，通過胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，溶酶體使其裂解，釋放藥物，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。

【詳解】

A；抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素類藥物與單克隆抗體結(jié)合；被腫瘤細(xì)胞上的受體特異性識(shí)別，通過胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞，A正確；

B；若利用放射性同位素標(biāo)記單克隆抗體；若單克隆抗體能與腫瘤細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合，則可以對(duì)腫瘤細(xì)朐進(jìn)行定向的放療，B正確；

C；結(jié)合圖示可以看出；ADCs在溶酶體酶的作用下釋放出細(xì)胞毒素，在細(xì)胞毒素介導(dǎo)下啟動(dòng)了腫瘤細(xì)胞的凋亡過程，C錯(cuò)誤；

D；制備單克隆抗體時(shí)；至少需經(jīng)過兩次篩選才能得到分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，其中第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

菌落是指由一個(gè)微生物細(xì)胞或一堆同種細(xì)胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度；形成肉眼可見的子細(xì)胞群落。菌落形態(tài)包括菌落的大小；形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地、顏色和透明程度等，每一種細(xì)菌在一定條件下形成固定的菌落特征。不同種或同種在不同的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的．這些特征對(duì)菌種識(shí)別、鑒定有一定意義。

【詳解】

A；甲圖的培養(yǎng)皿為對(duì)照組；乙圖的培養(yǎng)皿為實(shí)驗(yàn)組，A正確；

B；在發(fā)病的土壤取樣；才能分離得到蘋果樹腐爛病菌和放線菌，B正確；

C；培養(yǎng)基應(yīng)含有微生物生長(zhǎng)發(fā)育所需的水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)；C正確；

D；放線菌的抑菌圈直徑越大；表明其拮抗蘋果樹腐爛病的能力越強(qiáng)，D錯(cuò)誤。

故選D。6、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

轉(zhuǎn)基因大西洋鮭體內(nèi)抗凍蛋白有所增加，但是不會(huì)明顯增加，A錯(cuò)誤；構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶和DNA連接酶，B錯(cuò)誤；大鱗鮭魚生長(zhǎng)激素基因能通過PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得，C錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)基因大西洋鮭生長(zhǎng)激素含量增加導(dǎo)致生長(zhǎng)速度加快，D正確；故選D。二、多選題(共8題，共16分)7、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴(kuò)增不需要DNA連接酶，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計(jì)一對(duì)與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對(duì)，C正確；

D；因G-C堿基對(duì)之間的氫鍵多于A-T堿基對(duì)之間的氫鍵；GC堿基對(duì)含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對(duì)含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】8、A:C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖；再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要營養(yǎng)成分是蛋白質(zhì)和脂肪；都是大分子有機(jī)化合物，難以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多種微生物分泌的蛋白酶，能將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多種微生物的協(xié)同下，豆腐轉(zhuǎn)變成腐乳。

【詳解】

A；果醋制作的菌種是醋酸菌；屬于好氧菌，故密閉環(huán)境不利于果醋的發(fā)酵，A錯(cuò)誤；

B；腐乳制作過程中；鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會(huì)影響腐乳風(fēng)味，B正確；

C、參與果酒制作的酵母菌是兼性厭氧型真核生物，參與果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，參與腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)或線粒體、果醋制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，而腐乳制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是線粒體；C錯(cuò)誤；

D；與自然發(fā)酵相比；人工接種過程中利用了嚴(yán)格的滅菌措施，可以防止其它雜菌污染，且發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好，D正確。

故選AC。

【點(diǎn)睛】9、A:B:C【分析】【分析】

10、A:C:D【分析】【分析】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員；牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

【詳解】

A；對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，堅(jiān)決禁止生物武器，A正確；

B；中國對(duì)于克隆人的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；但不反對(duì)治療性克隆，B錯(cuò)誤；

C；為了防止產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)；對(duì)轉(zhuǎn)基因植物外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，最大限度的保證人體到的安全，C正確；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題；要馬上停止試驗(yàn)，并銷毀重組生物，以最大程度地保證轉(zhuǎn)基因技術(shù)和產(chǎn)品的安全性，D正確。

故選ACD。11、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細(xì)胞應(yīng)取自注射過HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親本細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞類型、骨髓瘤細(xì)胞類型）和融合的具有同種核的細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞型）都會(huì)死亡，B正確；

C；將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后；放入96孔板，不一定都能產(chǎn)生所需抗體，還需進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)圖可知；圖中細(xì)胞群a在加入HA抗原后呈陽性，說明細(xì)胞群a產(chǎn)生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。12、A:C:D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；酵母菌是兼性厭氧型微生物；所以發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖，A正確；

B；酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物；在酵母菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生，可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)酒精的產(chǎn)生，B錯(cuò)誤；

C；酒變酸是醋酸桿菌發(fā)酵的結(jié)果；墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)，發(fā)酵裝置沒有清洗干凈，導(dǎo)致醋酸菌混入發(fā)酵液中，C正確；

D；在釀酒的過程中；糖類即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過程也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對(duì)發(fā)酵起抑制作用，導(dǎo)致酵母菌發(fā)酵停止，D正確；

故選ACD。13、A:C:D【分析】【分析】

大腸桿菌是原核生物；原核細(xì)胞與真核細(xì)胞相比，最大的區(qū)別是原核細(xì)胞沒有被核膜包被的成形的細(xì)胞核（沒有核膜；核仁和染色體）；原核細(xì)胞只有核糖體一種細(xì)胞器；原核細(xì)胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯在相同時(shí)空中進(jìn)行，而真核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程在不同時(shí)間和空間進(jìn)行。

【詳解】

A；人體胰島細(xì)胞是真核細(xì)胞；在合成胰島素原時(shí)，轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核中進(jìn)行，翻譯在細(xì)胞質(zhì)的核糖體上進(jìn)行，原核細(xì)胞沒有細(xì)胞核，A錯(cuò)誤；

B；DNA連接酶能在兩個(gè)相同黏性末端配對(duì)后的磷酸與脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵（磷酸二酯鍵）；B正確；

C；通過檢測(cè)；大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，不能判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌，也可能是導(dǎo)入后沒有表達(dá)，C錯(cuò)誤；

D；大腸桿菌是原核生物；沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)胰島素原進(jìn)行加工，因此人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原沒有生物活性，D錯(cuò)誤。

故選ACD。14、A:B【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；試管嬰兒的培育主要采用的是體外受精、胚胎移植等技術(shù)；屬于有性生殖。試管嬰兒是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，屬于有性生殖，A錯(cuò)誤；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒可用于疾病治療；試管嬰兒用于解決不孕不育問題，B錯(cuò)誤；

C；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”形成的胚胎需遺傳學(xué)診斷后選擇符合要求的胚胎植入母體孕育；C正確；

D；不符合遺傳要求的胚胎如何處理會(huì)引起道德倫理之爭(zhēng)；D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共5題，共10分)15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】噬菌體、動(dòng)植物病毒18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)19、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物，若用與戰(zhàn)爭(zhēng)，則可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥可镂淦鞣N類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物。四、判斷題(共4題，共20分)20、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。21、A【分析】【分析】

早期胚胎發(fā)育從受精卵開始；當(dāng)卵裂分裂到16-32個(gè)細(xì)胞時(shí)，卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑葚時(shí)，這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。胚胎進(jìn)一步發(fā)育，細(xì)胞開始出現(xiàn)分化，形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；滋養(yǎng)層；隨著胚胎進(jìn)一步發(fā)育，胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時(shí)期聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)，故“胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化表述”正確。22、A【分析】【詳解】

雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。23、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。本說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共32分)24、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：

（1）原理：細(xì)胞增殖。

（2）培養(yǎng)基性質(zhì)：液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環(huán)境。

（3）需要使用動(dòng)物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無菌條件下進(jìn)行。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（6）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

（4）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

【詳解】

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則此過程可以為單克隆抗體的制備過程。故A是已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段（誘導(dǎo)d過程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

（2）一般來說；誘導(dǎo)A細(xì)胞和B細(xì)胞融合，形成C細(xì)胞后，必須利用選擇培養(yǎng)基來篩選出目的細(xì)胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞都會(huì)死亡，而雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞）能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：一是液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環(huán)境。二是氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細(xì)菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經(jīng)人工培養(yǎng)，再用物理或化學(xué)方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，對(duì)某些現(xiàn)實(shí)生活中的生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論?！窘馕觥拷?jīng)過（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細(xì)胞（或漿細(xì)胞，或已免疫的B細(xì)胞，或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺(tái)）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③25、略

【分析】【分析】

1；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

2；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

3；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）為了提高出汁率和澄清度；需要用果膠酶和纖維素酶處理，果膠酶可將果膠分解成半乳糖醛酸（和半乳糖醛酸甲酯）；考慮到成本和技術(shù)難度問題，通常采用壓榨法提取精油；

（2）固定化酵母菌的流程是：酵母細(xì)胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞，故①為配制CaCl2溶液；海藻酸鈉溶化時(shí)；最好采用小火間斷加熱的方法，避免海藻酸鈉焦糊；

（3上述過程將酵母菌包埋在海藻酸鈉制成的凝膠中；其固定酵母細(xì)胞的方法稱為包埋法；酶分子較小，容易從包埋材料中漏出，所以制備固定化淀粉酶則不用此法進(jìn)行固定；

（4）結(jié)合分析可知；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，加入蜜柚汁后，發(fā)酵裝置中糖源充足，醋酸菌直接將葡萄汁中的果糖分解成醋酸，故對(duì)乙醇的利用率迅速下降。

【點(diǎn)睛】

本題以利用蜜柚開發(fā)產(chǎn)品為情景，考查固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)及果醋的制作，學(xué)生的理解能力和綜合分析能力是解答本題的關(guān)鍵。【解析】半乳糖醛酸壓榨CaCl2小火間斷包埋酶分子較小，容易從包埋材料中漏出當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔划?dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將蜜柚汁中的果糖分解成醋酸26、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機(jī)體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細(xì)胞中，前者主要存在于細(xì)胞核中，后者主要存在于細(xì)胞質(zhì)及核仁里。在制備核酸時(shí)，通過研磨破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，使核蛋白被釋放出來。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯(lián)系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細(xì)胞得到單倍體植株；B表示通過胚狀體進(jìn)行無性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細(xì)胞雜交，其中②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會(huì)研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應(yīng)該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。

（3）從表中數(shù)據(jù)可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過程中；整個(gè)過程應(yīng)嚴(yán)格無菌無毒，利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）為促進(jìn)愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需降低2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長(zhǎng)素，以促進(jìn)苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細(xì)胞排列緊密，①錯(cuò)誤；

②剛?cè)诤系闹参矬w細(xì)胞沒有成熟的大液泡；無法構(gòu)成滲透系統(tǒng)，不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，②錯(cuò)誤；

③胚狀體細(xì)胞出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽；因此其細(xì)胞內(nèi)有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結(jié)果形成了具有根和芽的胚狀體；細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯(cuò)誤。

故選③。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，意在考查學(xué)生讀圖能力和分析應(yīng)用能力?！窘馕觥垦心コ浞郑蜏匾种泼富钚砸种艱NA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分?jǐn)?shù)為70-75%）酒精降低（適量的）生長(zhǎng)素③27、略

【分析】【分析】

在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為防止培養(yǎng)過程中雜菌污染，通常要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。培養(yǎng)過程中通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

（1）培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，為防止培養(yǎng)過程中雜菌污染，通常要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。培養(yǎng)肺癌細(xì)胞需要提供適宜溫度和維持培養(yǎng)液的pH，因此要放在37℃的含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

根據(jù)題干“新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展”及圖可知；刺突蛋白能促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且在一定范圍內(nèi)，隨著所用的刺突蛋白的濃度增大，其促進(jìn)凋亡的效果越明顯。

（2）NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮；是致癌物，用其長(zhǎng)時(shí)間處理小鼠目的是誘導(dǎo)小鼠肺部腫瘤產(chǎn)生，即侯建肺癌小鼠模型。

（3）由題干“刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多”可知；在體內(nèi)環(huán)境下，刺突蛋白S1激活了免疫系統(tǒng)的免疫監(jiān)視功能，進(jìn)而識(shí)別和殺傷以及清除體內(nèi)的突變細(xì)胞,防止腫瘤的發(fā)生。為探究肺部腫瘤比例的減少是不是因?yàn)樾鹿诓《敬掏坏鞍譙1的作用，還應(yīng)該設(shè)計(jì)一組對(duì)照：NNK+等量其他外源蛋白，若實(shí)驗(yàn)組肺部腫瘤比例的減少量大于對(duì)照組，說明肺部腫瘤比例的減少確實(shí)是因?yàn)樾鹿诓《敬掏坏鞍譙1的作用。

（4）由題干“媒體報(bào)道稱感染新冠病毒可以治療肺癌”可知，其自變量為是否感染新冠病毒，而論文中自變量為刺突蛋白S1處理的濃度，二者不是同種變量，刺突蛋白并不能模擬新冠病毒的感染，無法做出上述推測(cè)，因此結(jié)論并不可靠。【解析】(1)抗生素含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱刺突蛋白能促進(jìn)細(xì)胞凋亡；且在一定范圍內(nèi)，濃度大的促進(jìn)凋亡效果好。（答出自變量和因變量的定性和定量關(guān)系即可）

(2)建立肺癌小鼠模型（誘導(dǎo)肺部腫瘤產(chǎn)生）

(3)免疫監(jiān)視等量其他外源蛋白。

(4)不合理（1分）自變量不同，媒體的報(bào)導(dǎo)中的自變量是新冠病毒的感染，論文中的是刺突蛋白S1，刺突蛋白并不能模擬新冠病毒的感染/對(duì)照設(shè)置不合理，結(jié)論不可靠（與不合理偶聯(lián)，從自變量或?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)角度合理即可）六、綜合題(共4題，共36分)28、略

【分析】【分析】

基因工程：

1；原理：基因重組。

2；工具：限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體。

3；基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的。

鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

4；應(yīng)用：提高生物的品質(zhì)；用工程菌制備疫苗等。

【詳解】

（1）由RNA得到的cDNA需經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄，經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增得到DGAT1基因，與克隆質(zhì)粒pMD19連接，將連接產(chǎn)物導(dǎo)入到經(jīng)CaCl2處理后的處于感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞。分析題圖可知；目的基因插入到LacZ基因中，使該基因被破壞，又由題中信息可知：“LacZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X﹣gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落則成白色?！鼻矣捎谫|(zhì)粒中含有氨芐青霉素抗性基因，故應(yīng)接種到添加氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時(shí)間后，挑選顏色為白色的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。

（2）分析題圖可知：用限制酶酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因，并與酶切后的載體pBI121連接得到重組基因表達(dá)載體，并導(dǎo)入到四尾柵藻。DGAT1基因序列兩端無限制酶酶切位點(diǎn)，由表1中信息可知DGAT1基因的兩端各有限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的識(shí)別位點(diǎn)；故可推測(cè)擴(kuò)增DGAT1基因時(shí)所用一對(duì)引物的一端分別加上的限制酶識(shí)別序列是5’-GGATCC-3’和5’-TCTAGA-3’。

（3）由分析可知；對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因四尾柵藻檢測(cè)的方法有提取轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的基因組DNA，用DGAT1基因的引物進(jìn)行PCR；以DGAT1基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針對(duì)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻進(jìn)行DNA分子雜交或RNA分子雜交；用抗DGAT1的抗體與從轉(zhuǎn)基因四尾柵藻中提取的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交。

（4）分析直方圖可知：轉(zhuǎn)DGAT1基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組。

（5）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照原則；單一變量原則等；故應(yīng)添加對(duì)照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后，檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟等，能結(jié)合題圖信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥磕孓D(zhuǎn)錄PCR感受態(tài)氨芐青霉素和X-gal白色重組表達(dá)載體5’-GGATCC-3’和5’-TCTAGA-3’提取轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的基因組DNA，用DGAT1基因的引物進(jìn)行PCR；以DGAT1基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針對(duì)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻進(jìn)行DNA分子雜交或RNA分子雜交；用抗DGAT1的抗體與從轉(zhuǎn)基因四尾柵藻中提取的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交轉(zhuǎn)DGAT1基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組應(yīng)添加對(duì)照組：廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后，檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量29、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

（1）由圖可知，獲取大量rhtA基因要經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增，若要擴(kuò)增出N個(gè)rhtA基因，需要引物A、B各N-1個(gè)，理由是經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得N個(gè)rhtA基因，其中只有最初的兩條模板鏈不需要引物，則引物的數(shù)量是2N-2個(gè)，引物有A、B兩種，因此各需要N-1個(gè)。引物A要與rhtA基因的相應(yīng)的部位互補(bǔ)