《煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南》編制說(shuō)明

《煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南》標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明14/14《煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南》標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明湖北省煙草公司恩施州公司湖北省煙草科學(xué)研究院2022年2月

目錄目錄 21工作簡(jiǎn)況 31.1任務(wù)來(lái)源 31.2項(xiàng)目承擔(dān)單位、協(xié)作單位及主要分工 31.3主要工作過(guò)程 31.3.1前期研究工作 31.3.2項(xiàng)目啟動(dòng) 41.3.3分析數(shù)據(jù)、開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，擬定初稿 41.3.4征求意見(jiàn) 42相關(guān)領(lǐng)域的國(guó)、內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)研究和制修訂情況 43標(biāo)準(zhǔn)編制原則及主要內(nèi)容確定的依據(jù) 53.1標(biāo)準(zhǔn)適用范圍 53.2標(biāo)準(zhǔn)編制原則 53.3標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容確定的依據(jù) 53.3.1范圍的確定 53.3.2規(guī)范性引用文件 63.3.3術(shù)語(yǔ)和定義 63.3.4生產(chǎn)流程和技術(shù)要求 63.3.4.1煙草秸稈組成成分分析 63.3.4.2煙草秸稈生物有機(jī)肥養(yǎng)分釋放規(guī)律 73.3.4.3煙草秸稈發(fā)酵腐熟菌的篩選和組配 73.3.4.4煙草秸稈生物有機(jī)肥安全性 93.3.4.5煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)工藝參數(shù)與流程 103.3.4.6煙草秸稈生物有機(jī)肥應(yīng)用效果 114標(biāo)準(zhǔn)預(yù)期產(chǎn)生的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)效益 135采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的情況 136與有關(guān)的現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系 147重大分歧意見(jiàn)的處理經(jīng)過(guò)和依據(jù) 148作為強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)或推薦性標(biāo)準(zhǔn)的建議及主要依據(jù) 149標(biāo)準(zhǔn)宣貫的要求和措施建議 1410廢止現(xiàn)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建議 1411其他應(yīng)予以說(shuō)明的事項(xiàng) 141工作簡(jiǎn)況1.1任務(wù)來(lái)源煙草行業(yè)指導(dǎo)性技術(shù)文件《煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南》是國(guó)家煙草專(zhuān)賣(mài)局2018年度下達(dá)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制訂項(xiàng)目（國(guó)煙科[2018]177號(hào)），項(xiàng)目類(lèi)別：YC/Z制訂，合同號(hào)：2018B008。該項(xiàng)目為標(biāo)準(zhǔn)制訂項(xiàng)目,歸口農(nóng)業(yè)分技術(shù)委員會(huì)。1.2項(xiàng)目承擔(dān)單位、協(xié)作單位及主要分工本項(xiàng)目由湖北省煙草公司恩施州公司牽頭承擔(dān)，湖北省煙草科學(xué)研究院為協(xié)作單位。湖北省煙草公司恩施州公司負(fù)責(zé)項(xiàng)目技術(shù)路線以及技術(shù)方案的制定與實(shí)施；湖北省煙草科學(xué)研究院參與項(xiàng)目技術(shù)路線以及技術(shù)方案的制定，并指導(dǎo)項(xiàng)目的實(shí)施。1.3主要工作過(guò)程1.3.1前期研究工作2008年，湖北省煙草公司以恩施州公司、省煙草科學(xué)研究院為班底成立了生物技術(shù)組，確立了《生物技術(shù)在特色優(yōu)質(zhì)煙葉生產(chǎn)上的應(yīng)用研究》重大專(zhuān)項(xiàng)（鄂煙科【2008】14號(hào)），2010年改為《煙葉秸稈生物有機(jī)肥研制及在煙葉生產(chǎn)上的應(yīng)用研究》（鄂煙科【2010】08號(hào)，合同號(hào)：027Y2010—017），全面開(kāi)展煙草秸稈生物有機(jī)肥領(lǐng)域試驗(yàn)研究和產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)工作。煙草秸稈生物有機(jī)肥的研制與開(kāi)發(fā)項(xiàng)目涉及的研究?jī)?nèi)容較多，為了加強(qiáng)技術(shù)攻關(guān)力量，有針對(duì)性的開(kāi)展研制與開(kāi)發(fā)工作。先后與華中農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草學(xué)院、中科院成都生物所等科研院所建立了合作關(guān)系，參與了煙草秸稈養(yǎng)分分析、田間礦化規(guī)律、發(fā)酵腐熟技術(shù)、安全性評(píng)價(jià)等方面的研究。整個(gè)項(xiàng)目按照“煙草秸稈—生物有機(jī)肥—煙葉種植”的循環(huán)農(nóng)業(yè)模式思路，圍繞煙草秸稈成分分析及養(yǎng)分釋放規(guī)律、發(fā)酵及功能菌篩選、生產(chǎn)工藝及田間應(yīng)用效果等方面開(kāi)展研究。按照“小試—中試—規(guī)模化生產(chǎn)”步驟，實(shí)現(xiàn)研究成果快速有效轉(zhuǎn)化，促進(jìn)煙草秸稈生物有機(jī)肥產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，從而在煙區(qū)構(gòu)建了以煙草秸稈為紐帶的循環(huán)農(nóng)業(yè)新模式，探索了“低碳煙草、清潔生產(chǎn)、循環(huán)農(nóng)業(yè)”的可持續(xù)發(fā)展之路。1.3.2項(xiàng)目啟動(dòng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)合同確定的項(xiàng)目范圍、主要內(nèi)容和項(xiàng)目技術(shù)方案，對(duì)項(xiàng)目組進(jìn)行分工部署，制定項(xiàng)目工作計(jì)劃，提出各階段工作目標(biāo)。1.3.3分析數(shù)據(jù)、開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，擬定初稿總結(jié)、挖掘歷年來(lái)國(guó)內(nèi)外與此標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)的項(xiàng)目成果，歸納、總結(jié)目前煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)的優(yōu)劣之處，形成《煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南》（初稿）。1.3.4征求意見(jiàn)項(xiàng)目組結(jié)合相關(guān)數(shù)據(jù)和試驗(yàn)驗(yàn)證總結(jié)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)初稿進(jìn)行修改完善，完成了該標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明的起草工作，形成了標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿。2相關(guān)領(lǐng)域的國(guó)、內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)研究和制修訂情況到目前為止，國(guó)外尚未查詢到有關(guān)煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。2002-2004年，農(nóng)業(yè)部先后制定頒布了《有機(jī)肥料》（NY525-2002）和《生物有機(jī)肥》（NY884-2004）等農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)提升有機(jī)肥產(chǎn)品質(zhì)量，規(guī)范有機(jī)肥行業(yè)發(fā)展發(fā)揮了重要作用。隨著有機(jī)肥生產(chǎn)和應(yīng)用技術(shù)的發(fā)展，原標(biāo)準(zhǔn)中的一些內(nèi)容及指標(biāo)需要修訂完善。2012年，在深入調(diào)研、收集資料、樣品測(cè)定與試驗(yàn)驗(yàn)證的基礎(chǔ)上，農(nóng)業(yè)部修訂發(fā)布了新的《有機(jī)肥料》（NY525-2012）和《生物有機(jī)肥》（NY884-2012）等農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。2016年，安徽省制定頒布了《秸稈生物有機(jī)肥料》（DB34/T2739-2016）地方標(biāo)準(zhǔn)。2019年12月17日，國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)批準(zhǔn)發(fā)布強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《肥料中有毒有害物質(zhì)的限量要求》（GB38400-2019），并于2020年7月1日起實(shí)施。2021年5月，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)發(fā)布《有機(jī)肥料》（NY525-2012）農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，新的《有機(jī)肥料》標(biāo)準(zhǔn)將替代舊的《有機(jī)肥料》（NY525-2012），并于2021年6月1日起實(shí)施。項(xiàng)目組在標(biāo)準(zhǔn)制訂時(shí)，對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了深入的分析和對(duì)比，進(jìn)行一定程度地借鑒和參考，某些共性的內(nèi)容盡量與上述標(biāo)準(zhǔn)保持一致，體現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)之間的協(xié)調(diào)一致性。3標(biāo)準(zhǔn)編制原則及主要內(nèi)容確定的依據(jù)3.1標(biāo)準(zhǔn)適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了煙草秸稈生物有機(jī)肥的術(shù)語(yǔ)和定義、生產(chǎn)流程、技術(shù)要求、質(zhì)量控制、包裝、標(biāo)志、運(yùn)輸、貯存和檢驗(yàn)規(guī)則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于以煙草秸稈為主要原料，經(jīng)建堆、注水、添加有機(jī)物料、腐熟菌種和功能菌種等工序，經(jīng)發(fā)酵腐熟工藝制成的煙草秸稈生物有機(jī)肥。3.2標(biāo)準(zhǔn)編制原則煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南編制遵循“科學(xué)、實(shí)用、合理”的原則，力爭(zhēng)做到應(yīng)用可行性、技術(shù)適用性、實(shí)施科學(xué)性，既起到指導(dǎo)和規(guī)范煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)，又服務(wù)于煙草行業(yè)綠色發(fā)展的作用。3.3標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容確定的依據(jù)3.3.1范圍的確定緊密結(jié)合煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)特點(diǎn)和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容，合理規(guī)定了標(biāo)準(zhǔn)要求的內(nèi)容和適用范圍。3.3.2規(guī)范性引用文件梳理標(biāo)準(zhǔn)文本中規(guī)范性引用的標(biāo)準(zhǔn)等文件，按照GB/T1.1-2020的要求進(jìn)行有序羅列和表述。3.3.3術(shù)語(yǔ)和定義術(shù)語(yǔ)內(nèi)容的確立，是通過(guò)綜合調(diào)查資料，項(xiàng)目組成員共同研討而確定，既立足術(shù)語(yǔ)本身又緊密結(jié)合本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)際特點(diǎn)。3.3.4生產(chǎn)流程和技術(shù)要求生產(chǎn)流程和技術(shù)要求是本標(biāo)準(zhǔn)的核心部分，主要內(nèi)容包括煙草秸稈組成成分和養(yǎng)分轉(zhuǎn)化規(guī)律、煙草秸稈發(fā)酵腐熟菌的篩選和組配、煙草秸稈生物有機(jī)肥安全性、煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)工藝參數(shù)與流程、煙草秸稈生物有機(jī)肥的田間應(yīng)用等。主要指標(biāo)的確定依據(jù)參見(jiàn)“《煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)指南》技術(shù)報(bào)告”。3.3.4.1煙草秸稈組成成分分析3.3.4.1.1不同作物秸稈的組分比較經(jīng)過(guò)對(duì)煙草、玉米、水稻、小麥、大麥、燕麥、高粱的組分比較，煙草秸稈干物質(zhì)、灰分、鉀、氯和氮含量適中，與其它秸稈差異不大，具備有機(jī)肥生產(chǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ)。煙草秸稈較其它秸稈的木質(zhì)素和纖維素偏高，說(shuō)明煙草秸稈較禾本科類(lèi)秸稈發(fā)酵分解難度偏高。3.3.4.1.2煙草秸稈組成成分分析湖北省不同類(lèi)型和地區(qū)煙草秸稈中有機(jī)碳含量相近，還原糖和總糖以烤煙、白肋煙和曬煙含量高，煙堿、氯和鉀含量差異不明顯；煙草秸稈礦質(zhì)元素鉀、鈣、磷和鎂含量較高，硼、銅、鐵、錳、鈉和鋅含量較低，氨基酸含量烤煙＞馬里蘭煙＞白肋煙＞曬煙＞香料煙；煙草秸稈重金屬均在生物有機(jī)肥限量標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，適合作為生物有機(jī)肥原料。3.3.4.2煙草秸稈生物有機(jī)肥養(yǎng)分釋放規(guī)律3.3.4.2.1煙草秸稈生物有機(jī)肥模擬發(fā)酵研究隨著模擬發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，煙草秸稈生物有機(jī)肥中各氨基酸組分的含量、氨基酸總量和不同種類(lèi)的有機(jī)酸均逐漸提高，說(shuō)明煙草秸稈生物有機(jī)肥在發(fā)酵過(guò)程中含氨基酸和有機(jī)酸組分能夠有效分解、釋放，且發(fā)酵時(shí)間越長(zhǎng)，氨基酸和有機(jī)酸組分釋放、分解越充分，越有利于作物生長(zhǎng)發(fā)育。研究發(fā)現(xiàn)煙桿有機(jī)肥發(fā)酵35天時(shí)，煙草秸稈生物有機(jī)肥中高級(jí)脂肪酸組分分解和釋放最為強(qiáng)烈。未腐熟的煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)種子發(fā)芽有抑制作用，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間充分發(fā)酵腐熟后，煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)種子發(fā)芽率的抑制作用降低，印證了煙煙草秸稈生物有機(jī)肥充分發(fā)酵腐熟的必要性。3.3.4.2.2煙草秸稈生物有機(jī)肥田間礦化研究3.3.4.2.2.1碳素礦化動(dòng)態(tài)變化隨著土壤礦化時(shí)間的延長(zhǎng)，煙草秸稈生物有機(jī)肥和商品有機(jī)肥處理的土壤有機(jī)碳含量呈現(xiàn)逐漸增高趨勢(shì)，但對(duì)照土壤有機(jī)碳含量基本保持平穩(wěn)，且在各個(gè)取樣時(shí)期，煙草秸稈生物有機(jī)肥處理土壤有機(jī)碳含量均高于商品有機(jī)肥處理，說(shuō)明煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)提高土壤有機(jī)質(zhì)含量、培肥土壤效果好于商品有機(jī)肥。3.3.4.2.2.2氮素礦化動(dòng)態(tài)變化煙草秸稈生物有機(jī)肥處理土壤全氮含量大于商品有機(jī)肥處理，土壤有機(jī)氮的礦化率小于商品有機(jī)肥處理，說(shuō)明煙草秸稈生物有機(jī)肥氮的供應(yīng)總量高于商品有機(jī)肥，且釋放的有機(jī)形態(tài)氮轉(zhuǎn)換為無(wú)機(jī)形態(tài)氮的比例相對(duì)商品有機(jī)肥低，表明煙草秸稈生物有機(jī)肥氮含量充足，但氮素轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)形態(tài)氮的過(guò)程緩慢，有利于煙桿生物有機(jī)肥氮素的持續(xù)穩(wěn)定供應(yīng)，施用到煙田后，既能有效培肥土壤，也不會(huì)產(chǎn)生土壤供氮能力過(guò)高的現(xiàn)象。3.3.4.3煙草秸稈發(fā)酵腐熟菌的篩選和組配3.3.4.3.1纖維素降解菌株（1）菌株篩選。經(jīng)過(guò)初篩、復(fù)篩，最后選取纖維素酶活較高的4株菌制備復(fù)合菌劑，即細(xì)菌B4、B26，霉菌M1、M90。（2）菌株鑒定。經(jīng)基因測(cè)序鑒定，菌株B4和B26為龍舌蘭芽胞桿菌（Bacillustequilensis）和枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)。根據(jù)M1和M90的形態(tài)特征和水浸片觀察，初步確定M1和M90均為黑曲霉（Aspergillusniger）。（3）菌株配伍優(yōu)化。對(duì)不同配比的細(xì)菌和真菌的煙稈纖維素降解率檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，M1：M2：B4：B26在4：4：1：1的配比時(shí)，對(duì)煙稈纖維素的降解效果最好。（4）發(fā)酵效果。添加復(fù)合微生物菌劑加快了堆體升溫的速度，縮短了進(jìn)入高溫期的時(shí)間，并提高了堆體最高溫度，延長(zhǎng)了高溫期的時(shí)間。添加復(fù)合微生物菌劑可以明顯加速煙草秸稈中纖維素和半纖維素的降解，與對(duì)照相比其降解率分別提高了68.80%和17.73%，而木質(zhì)素的降解與對(duì)照相比無(wú)明顯區(qū)別。堆肥末期，煙草秸稈中纖維素和半纖維素的含量降至6%以下。3.3.4.3.2木質(zhì)素降解菌株（1）通過(guò)木質(zhì)素降解菌的復(fù)篩，得到木質(zhì)素降解酶活性較高的菌株S13和S18，經(jīng)18srDNA鑒定出兩株菌分別為粗毛栓菌（Trametesgallica）S13和糙皮側(cè)耳（Pleurotusostreatu）S18。（2）利用堆肥過(guò)程中接種篩選的和實(shí)驗(yàn)保存的纖維素降解菌（細(xì)菌B4、B26，霉菌M1、M90）和木質(zhì)素降解菌（白腐菌S13、S18），通過(guò)測(cè)定堆體的溫度、有機(jī)碳含量、全氮含量、水溶性銨態(tài)氮與水溶性硝態(tài)氮含量、前后堆體全鉀含量變化、木質(zhì)纖維素含量等指標(biāo)，驗(yàn)證了木質(zhì)素降解菌在堆肥中對(duì)木質(zhì)素的降解能力對(duì)堆肥腐熟的促進(jìn)作用，成功獲得了煙草秸稈快速腐熟劑的配方。（3）通過(guò)碳源實(shí)驗(yàn)、氮源實(shí)驗(yàn)、培養(yǎng)基無(wú)機(jī)鹽實(shí)驗(yàn)、發(fā)酵初始pH、發(fā)酵初始接種量、初始裝液量等條件的優(yōu)化，獲得S13和S18菌株最佳發(fā)酵培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。3.3.4.3.3煙堿降解菌株（1）篩選得到一株降解煙堿能力最好的菌株EA-17，經(jīng)過(guò)形態(tài)觀察、生理生化試驗(yàn)、16SrRNA全序列分析得到EA-17菌株為嗜組氨醇節(jié)桿菌(Arthrobacterhistidinolovorans)。（2）在初始煙堿含量為0.5-4g/L的發(fā)酵液中培養(yǎng)EA-17菌株24h，初始煙堿含量為0.5g/L和1g/L的發(fā)酵液煙堿降解率分別為81.62%和71.36%，初始煙堿含量為2g/L和4g/L的發(fā)酵液煙堿降解率更是達(dá)到了96.16%和95.63%。（3）通過(guò)培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基優(yōu)化試驗(yàn)，得到適宜EA-17菌株生長(zhǎng)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。3.3.4.4煙草秸稈生物有機(jī)肥安全性3.3.4.4.1病毒血清學(xué)檢測(cè)（1）不同溫度處理煙草秸稈原料及肥料酶聯(lián)免疫結(jié)果表明，對(duì)煙草秸稈原料及肥料采用100℃（2）紫外線處理不同時(shí)間的煙草秸稈粉碎物及生物有機(jī)肥處理酶聯(lián)免疫結(jié)果表明，煙草秸稈粉碎物和生物有機(jī)肥以及CK共12個(gè)樣本均檢測(cè)出了TMV、CMV、PVX和PVY4種病毒。可能由于肥料的顆粒過(guò)大，使得紫外線消毒效果不佳。（3）通過(guò)對(duì)煙草秸稈生物有機(jī)肥粗提液的病毒檢測(cè)，在原材料和不同發(fā)酵階段的產(chǎn)品中沒(méi)有檢測(cè)到TMV、CMV、PVX、PVY4種病毒的存在。表明煙草秸稈生物有機(jī)肥原材料經(jīng)消毒和發(fā)酵兩個(gè)過(guò)程，產(chǎn)品不攜帶病毒，在生產(chǎn)上應(yīng)用是安全的。3.3.4.4.2盆栽傳毒試驗(yàn)煙草秸稈生物有機(jī)肥盆栽傳毒試驗(yàn)結(jié)果顯示，煙草秸稈生物有機(jī)肥成品與復(fù)合肥盆栽煙草生長(zhǎng)正常，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)病毒病、真菌和細(xì)菌病害的發(fā)生。根據(jù)煙草秸稈生物有機(jī)肥的盆栽傳毒試驗(yàn)結(jié)果，表明煙草秸稈生物有機(jī)肥在生產(chǎn)上應(yīng)用是安全的。3.3.4.4.3重金屬含量分析（1）恩施煙區(qū)使用的生物有機(jī)肥重金屬含量均在安全范圍內(nèi)。同時(shí)，施用生物有機(jī)肥后，土壤中重金屬含量除鎘外，大部分較對(duì)照有所降低。（2）生物有機(jī)肥與土壤、生物有機(jī)肥與煙葉、土壤殘留與煙葉間重金屬鎘含量相關(guān)性較低。3.3.4.5煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)工藝參數(shù)與流程3.3.4.5.1發(fā)酵菌生產(chǎn)工藝煙草秸稈腐熟劑菌種包括纖維素降解霉菌、纖維素降解細(xì)菌以及煙堿降解菌。其中纖維素降解霉菌包括黑曲霉（Aspergillusniger）M1及黑曲霉（Aspergillusniger）M90，纖維素降解細(xì)菌包括龍舌蘭芽胞桿菌（Bacillustequilensis）B4和枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)B26，木質(zhì)素降解菌包括粗毛栓菌（Trametesgallica）S13和糙皮側(cè)耳（Pleurotusostreatus）S18，煙堿降解菌為噬組氨醇節(jié)桿菌（Arthrobacterhistidinolovorans）EA-17。開(kāi)展不同菌株的制備技術(shù)研究，包括霉菌培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)。3.3.4.5.2煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)工藝（1）煙草秸稈收集與粉碎收集干燥后的烤煙和白肋煙全株煙草秸稈，含煙桿和煙蔸兩個(gè)部分，粉碎至粒度3~5mm，呈顆粒、絲或棒狀物。（2）滅菌將粉碎后的煙草秸稈輸送到消毒設(shè)備，溫度≥100℃，操作時(shí)間≥10min。（3）堆肥在滅菌后的煙草秸稈粉碎物堆積成條垛狀，堆體寬1.6m～2m，堆體高1.0m～1.6m，長(zhǎng)度視材料多少和場(chǎng)地大小而定。堆體堆制后，補(bǔ)充一定氮源，調(diào)節(jié)碳氮比達(dá)到25～30；加水，混合均勻，保持堆體含水量在60%～65%。（4）接種把制備好的菌種，包括纖維素降解霉菌（M1和M90）、纖維素降解細(xì)菌（B4和B26）、木質(zhì)素降解菌（S13和S18）、煙堿降解菌（EA-17），以0.2%（質(zhì)量比）接種量接入準(zhǔn)備好的堆體。（5）堆肥腐熟堆體接菌后，適時(shí)進(jìn)行翻堆，堆體原料變成褐色或黑褐色，無(wú)氨臭氣味，堆積材料柔軟腐爛，用手拉捏極易斷碎時(shí)，初步判定發(fā)酵結(jié)束。共需發(fā)酵35d～40d。（6）添加功能菌把制備好的目標(biāo)功能菌種，以0.5%（質(zhì)量比）接種量接入腐熟好的堆肥中。接種方法如下：擴(kuò)培發(fā)酵后的細(xì)菌液，攪拌均勻，用水泵將其均勻的噴灑到堆體上。（7）成品包裝把制備好的肥料按照產(chǎn)品包裝要求包裝成袋。3.3.4.5.3原料及產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)制定了煙草秸稈收購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)、煙草秸稈加工標(biāo)準(zhǔn)和煙草秸稈生物有機(jī)肥產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。3.3.4.5.4煙草秸稈有機(jī)肥和煙草秸稈生物有機(jī)肥產(chǎn)品登記獲得了有機(jī)肥料和生物有機(jī)肥登記證。3.3.4.6煙草秸稈生物有機(jī)肥應(yīng)用效果3.3.4.6.1在煙葉生產(chǎn)上應(yīng)用效果研究3.3.4.6.1.1不同用量研究試驗(yàn)共設(shè)100%化肥、30%煙草秸稈生物有機(jī)肥替代化肥、50%煙草秸稈生物有機(jī)肥替代化肥、70%煙草秸稈有機(jī)肥替代化肥、100%煙草秸稈生物有機(jī)肥5個(gè)處理。（1）施用煙草秸稈生物有機(jī)肥可以促進(jìn)煙株中下部葉片開(kāi)片，能夠提高煙葉產(chǎn)量和產(chǎn)值，增加植煙效益，其中以施用30%和50%煙草秸稈生物有機(jī)肥效果最好。（2）施用煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)上部和下部煙葉的增香效果明顯，其中以30%替代和50%替代處理增香效果最好。（3）經(jīng)過(guò)綜合比較，30%替代綜合效益最好，可以作為田間使用的指標(biāo)。3.3.4.6.1.2不同生物有機(jī)肥應(yīng)用效果研究試驗(yàn)共進(jìn)行2年，共設(shè)煙草秸稈生物有機(jī)肥、餅肥、4種商品有機(jī)肥替代30%總氮后的應(yīng)用效果，100%化學(xué)肥料為對(duì)照。（1）通過(guò)兩年的監(jiān)測(cè)表明，在煙葉生產(chǎn)上使用煙草秸稈生物有機(jī)肥是安全的，同時(shí)應(yīng)慎重選擇使用商品生物有機(jī)肥C，以減少煙葉重金屬污染的風(fēng)險(xiǎn)。（2）施用煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)促進(jìn)株高和中上部葉片的開(kāi)片有一定作用。各處理比較，施用菜枯和煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)煙株農(nóng)藝性狀的影響年度差異不大，比較穩(wěn)定；施用其它生物有機(jī)肥的年度差異比較大，不穩(wěn)定。（3）施用菜枯和煙草秸稈生物有機(jī)肥可以提高產(chǎn)量和產(chǎn)值；施用煙草秸稈生物有機(jī)肥還能夠提高上中等煙比例。（4）施用生物有機(jī)肥可以提高初烤煙葉中的總糖、還原糖和鉀含量，降低初烤煙葉中的煙堿含量。3.3.4.6.1.3煙草秸稈生物有機(jī)肥對(duì)植煙土壤生態(tài)的影響（1）施用煙草秸稈生物有機(jī)肥能夠提高植煙土壤含水率，增強(qiáng)土壤的保水能力。施用煙草秸稈生物有機(jī)肥能夠顯著提高土壤的有機(jī)質(zhì)和堿解氮含量。施用煙草秸稈生物有機(jī)肥可以顯著提高土壤陽(yáng)離子交換量，增強(qiáng)土壤緩沖能力和保肥能力。施用煙草秸稈生物有機(jī)肥是解決土壤酸化問(wèn)題的有效措施。施用煙草秸稈生物有機(jī)肥可以改善土壤質(zhì)地和結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)植煙土壤的透氣性，有利于煙葉的健康生長(zhǎng)。（2）施用煙草秸稈生物有機(jī)肥可改善土壤微生物種群，提升微生物數(shù)量。煙草秸稈生物有機(jī)肥富含有機(jī)質(zhì)，施入土壤增加了其能源物質(zhì)，為微生物的生長(zhǎng)提供了豐富的碳源和氮源，刺激土壤中各種細(xì)菌的繁殖。煙草秸稈生物有機(jī)肥增加了土壤中硝化細(xì)菌和氨化細(xì)菌的數(shù)量。硝化細(xì)菌和氨化細(xì)菌數(shù)量的增加，有利于煙草對(duì)氮的吸收和利用。此外，煙草秸稈生物有機(jī)肥增加了土壤中放線菌數(shù)量，放線菌可產(chǎn)生多種抗生素，抑制土壤中病原菌的生長(zhǎng)，表明煙草秸稈生物有機(jī)肥有利于提高烤煙根系土壤對(duì)病原菌的拮抗和抗病能力。（3）煙草秸稈生物有機(jī)肥明顯提高了酸性磷酸酶和脲酶的活性，有利于改善土壤內(nèi)部的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)循環(huán)，促進(jìn)煙草對(duì)土壤磷肥和氮肥的吸收和利用。3.3.4.6.2在其它作物上應(yīng)用效果研究（1）大豆。共設(shè)5個(gè)處理，分別為20kg、30kg三元復(fù)合肥，40kg、60kg煙桿生物有機(jī)肥，CK為不施肥空白處理。各試驗(yàn)處理平均畝產(chǎn)量為175.3-218.5kg，最高為60kg煙草秸稈生物有機(jī)肥作底肥，施用煙草秸稈生物有機(jī)肥增產(chǎn)效果高于三元復(fù)合肥。在大豆生產(chǎn)中用適量的煙草秸稈生物有機(jī)肥，增產(chǎn)效果