CNAS-TRL-011 2020 輕工產(chǎn)品化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南

發(fā)布日期：2020年4月20日中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)前言 3 42規(guī)范性引用文件 43術(shù)語(yǔ)和定義 4 75方法特性參數(shù)的確認(rèn)和驗(yàn)證 6方案設(shè)計(jì)與實(shí)施 20附錄B方法特性參數(shù)的典型評(píng)定方法及注意事項(xiàng) 21附錄C儀器分析方法開(kāi)發(fā)步驟及條件參數(shù)優(yōu)化注意事項(xiàng) 發(fā)布日期：2020年4月20日前言本文件依據(jù)CNAS-CL01《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》,主要參考GB/T27417-2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》、GB/T32465-2015《化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求》中關(guān)于化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證的要求，并結(jié)合輕工產(chǎn)品(玩具、家具、紡織品、電子電氣產(chǎn)品、食品等)實(shí)驗(yàn)室化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證(以方法驗(yàn)證為主)的特性與操作實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)而制定。本文件主要用于規(guī)范認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室方法確認(rèn)和驗(yàn)證活動(dòng)，以確保認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室制定的方法確認(rèn)和驗(yàn)證方案合理適用。本文件從總體規(guī)則要求、方法特性參數(shù)的選擇和評(píng)定方法、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)等方面提出和制定輕工產(chǎn)品化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南，并根據(jù)光譜和色譜類(lèi)儀器的不同特點(diǎn)，給出方法特性參數(shù)的典型評(píng)定方法細(xì)則和注意事項(xiàng)，同時(shí)，對(duì)不同的常用儀器方法(UV-Vis、AAS、AFS、ICP、等),給出方法開(kāi)發(fā)步驟及條件參數(shù)優(yōu)化的注意事項(xiàng)，并提供了相關(guān)的典型實(shí)例。本文件從操作層面上就實(shí)施方法給出指導(dǎo)性建議，所提供的方法特性參數(shù)評(píng)定方法并非是唯一可選的，僅供相關(guān)方參考，不是增加或減少認(rèn)可準(zhǔn)則要求和評(píng)審依據(jù)。本文件由中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)提出并歸口。本文件主要起草單位：廣州海關(guān)技術(shù)中心、中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可中心、廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)研究院、通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司廣州分公司、北侖海關(guān)技術(shù)中心、美泰玩具技術(shù)咨詢(xún)(深圳)有限公司。本文件主要起草人：劉崇華、霍江蓮、洗燕萍、余奕東、霍煒強(qiáng)、李丹、付冉冉、梁瑩、吳妙玲。發(fā)布日期：2020年4月20日1范圍本文件適用于從事輕工產(chǎn)品(玩具、家具、紡織品、電子電器產(chǎn)品、食品等)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的本文件附錄A、附錄B、附錄C和附錄D分別提供了方法確認(rèn)和驗(yàn)證技術(shù)路線(xiàn)圖、方法特性參數(shù)的典型評(píng)定方法及注意事項(xiàng)、各類(lèi)儀器分析方法開(kāi)發(fā)步驟及條件參數(shù)優(yōu)化的注意事項(xiàng)，2規(guī)范性引用文件件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括修改單)適用于本文件。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測(cè)合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求ISO/IEC指南99:2007國(guó)際計(jì)量學(xué)詞匯—基本和通用概念及相關(guān)術(shù)語(yǔ)CNAS-CL01:2018檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則3術(shù)語(yǔ)和定義3.2方法驗(yàn)證methodverification3.4篩選方法screeningmethod發(fā)布日期：2020年4月20日在的方法。3.5關(guān)注濃度水平levelofinterest對(duì)判斷樣品中物質(zhì)或分析物是否符合法規(guī)規(guī)定和要求的有決定性意義的濃度(如：法規(guī)要求的物質(zhì)限值)。3.6選擇性selectivity測(cè)量系統(tǒng)按規(guī)定的測(cè)量程序使用并提供一個(gè)或多個(gè)被測(cè)量的測(cè)得的量值時(shí)，每個(gè)被測(cè)量的值與其他被測(cè)量或所研究的現(xiàn)象、物體或物質(zhì)中的其他量無(wú)關(guān)的特性。3.7線(xiàn)性范圍linearityofcalibration對(duì)于分析方法而言，用線(xiàn)性計(jì)算模型來(lái)定義儀器響應(yīng)與濃度的關(guān)系，該計(jì)算模型的應(yīng)用范圍。3.8檢出限limitofdetection,LOD由給定量程序獲得的測(cè)得的量值，其對(duì)物質(zhì)中不存在某種成分的誤判概率為β,對(duì)物質(zhì)中存在某種成分的誤判概率為α。即分析物質(zhì)能在可靠將分析物測(cè)定信號(hào)區(qū)別于特定基體背景(噪音)的最低濃度或量。3.8.1儀器檢出限instrumentaldetectionlimit,IDL為用儀器可靠地將目標(biāo)分析物信號(hào)從背景(噪音)中識(shí)別出來(lái)時(shí)分析物的最低濃度或量。3.8.2方法檢出限Mmethoddetectionlimit,MDL為用特定方法可靠地將分析物測(cè)定信號(hào)從特定基質(zhì)背景中識(shí)別或區(qū)分出來(lái)時(shí)分析物的最低濃度或量。即用該方法測(cè)定出大于相關(guān)不確定度的最低值。注1:確定MDL時(shí)，應(yīng)考慮到所有基質(zhì)的干擾。3.9定量限limitofquantification,LOQ樣品中被測(cè)組分能被定量測(cè)定的最低濃度或最低量，此時(shí)的分析結(jié)果應(yīng)能確保一定的正確度和精密度。3.9.1儀器定量限instrumentalquantificationlimit,IQL儀器能夠可靠檢出并定量被分析物的最低量。儀器定量限可定義為儀器能夠?qū)Ψ治鑫镞M(jìn)行可靠確認(rèn)和定量的最低濃度值。3.9.2方法定量限methodquantificationlimit,MQL在特定基質(zhì)中在一定可信度內(nèi)，用某一方法可靠地檢出并定量被分析物的最低量。方法定量發(fā)布日期：2020年4月20日限可定義為在特定基體中在某一可信度內(nèi)對(duì)分析物能進(jìn)行可靠確認(rèn)和定量的最低濃度值。在規(guī)定條件下，對(duì)同一類(lèi)似被測(cè)對(duì)象重復(fù)測(cè)量所得示值或測(cè)得的量值間的一致程度。在一組測(cè)量條件下的測(cè)量精密度，這些條件包括相同的測(cè)量程序、相同地點(diǎn)并且對(duì)相同或相似的被測(cè)對(duì)象在一長(zhǎng)時(shí)間段內(nèi)重復(fù)測(cè)量，但可包含其它相關(guān)條件的改變。測(cè)量系統(tǒng)的示值變化除以相應(yīng)被測(cè)量的量值變化所得的商。在規(guī)定條件下，由具有一定的儀器的測(cè)量不確定度的測(cè)量?jī)x器或測(cè)量系統(tǒng)能夠測(cè)量出的一組同類(lèi)量的量值。在相同測(cè)量程序、相同操作者、相同測(cè)量系統(tǒng)、相同操作條件和相同地點(diǎn)，并在短時(shí)間內(nèi)對(duì)同一或相類(lèi)似的被測(cè)對(duì)象重復(fù)測(cè)量的一組測(cè)量條件下獲得的測(cè)量精密度。在不同地點(diǎn)、不同操作者、不同測(cè)量系統(tǒng)，對(duì)同一或相類(lèi)似被測(cè)對(duì)象重復(fù)測(cè)量的一組測(cè)量條件下獲得的測(cè)量精密度。和的項(xiàng)數(shù)減去和中諸項(xiàng)數(shù)的約束數(shù)。無(wú)窮多次重復(fù)測(cè)量所得測(cè)得的量值的平均值與一個(gè)參考量值間的一致程度。系統(tǒng)測(cè)量誤差的估計(jì)值。被測(cè)量的測(cè)得的量值與其真值間的一致程度。3.20穩(wěn)健度ruggedness發(fā)布日期：2020年4月20日實(shí)驗(yàn)條件變化對(duì)分析方法的影響程度。3.21基質(zhì)效應(yīng)matrixeffect樣品中被分析物以外的組分對(duì)分析物的分析過(guò)程的干擾以及對(duì)分析結(jié)果的準(zhǔn)確性的影響。3.22回收率recovery也稱(chēng)加標(biāo)回收率，是指在樣品(也可以是溶液樣品)加入已知含量的分析物并在整個(gè)分析方法過(guò)程中測(cè)定，測(cè)定的結(jié)果減去原先未添加分析物的溶液測(cè)定結(jié)果并除以所添加濃度含量，則計(jì)算出的百分比數(shù)值。3.23樣品空白sampleblank不含目標(biāo)分析物但仍含有與實(shí)際樣品基本一致的基體的樣品，按日常樣品相同的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)獲得的空白。4.方法確認(rèn)和驗(yàn)證要求4.1總體要求4.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室制定的方法、超出預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法或其他擴(kuò)充和修改過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行方法確認(rèn)。4.1.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法(或經(jīng)過(guò)技術(shù)確認(rèn)且方法特性參數(shù)已知的非標(biāo)準(zhǔn)方法，如：知名技術(shù)組織發(fā)布的方法)進(jìn)行驗(yàn)證。4.1.3方法確認(rèn)通常應(yīng)根據(jù)預(yù)期用途，充分識(shí)別其方法特性參數(shù)要求，通過(guò)參考相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)方法和文獻(xiàn)資料，結(jié)合方法開(kāi)發(fā)和條件優(yōu)化試驗(yàn)，并通過(guò)特定的試驗(yàn)獲得非標(biāo)準(zhǔn)方法的特性參數(shù)，對(duì)待確認(rèn)方法能否合理滿(mǎn)足預(yù)期用途進(jìn)行確認(rèn)。方法的確認(rèn)應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注其科學(xué)性。附錄C提供了各類(lèi)儀器分析方法開(kāi)發(fā)步驟及條件參數(shù)優(yōu)化的注意事項(xiàng)。4.1.4方法驗(yàn)證通常需通過(guò)設(shè)計(jì)特定的試驗(yàn)獲得方法在本實(shí)驗(yàn)室的方法性能參數(shù)，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法本身要求(含方法特性參數(shù)要求)和其他通用要求對(duì)其進(jìn)行評(píng)定，用以證實(shí)該實(shí)驗(yàn)室在現(xiàn)有的設(shè)施設(shè)備、人員、環(huán)境等條件下，是否有能力正確運(yùn)用該方法。方法的驗(yàn)證應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注其符合性。附錄B給出了化學(xué)分析中方法特性參數(shù)的典型評(píng)定方法及注意事項(xiàng)。4.2人員要求4.2.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保對(duì)實(shí)施方法確認(rèn)和驗(yàn)證所需的人員能力，即確定檢測(cè)人員是否具備所需的技能及能力，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行人員培訓(xùn)，經(jīng)考核后授權(quán)。4.2.2實(shí)施方法確認(rèn)的實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)了解和熟悉所確認(rèn)的相關(guān)領(lǐng)域檢測(cè)方法原理，具有較為豐富的檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)和一定的方法開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn)，掌握影響方法特性參數(shù)結(jié)果的關(guān)鍵因素。發(fā)布日期：2020年4月20日4.3方法特性參數(shù)選擇4.3.1方法確認(rèn)4.3.1.1實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行方法確認(rèn)前，應(yīng)充分識(shí)別其方法特性參數(shù)要求，并對(duì)具體要求做詳細(xì)說(shuō)明。如：明確檢測(cè)對(duì)象特定的需求，包括樣品的主要基體成分及特性、待測(cè)物質(zhì)的主要特性、濃度含量水平(或相關(guān)限值)、可接受的測(cè)量不確定度(或測(cè)量誤差)需要。典型的化學(xué)定量分析需要確認(rèn)的方法特性參數(shù)見(jiàn)表1。表1典型方法確認(rèn)參數(shù)的選擇√定量限√靈敏度一√線(xiàn)性范圍√測(cè)量范圍√√精密度(重復(fù)性和再現(xiàn)性)√正確度√√測(cè)量不確定度(MU)√注3:當(dāng)已經(jīng)確認(rèn)檢出限，定量限也可以省略；當(dāng)已經(jīng)確認(rèn)線(xiàn)性范圍，測(cè)量范圍可以省注4:基質(zhì)效應(yīng)和穩(wěn)健度確認(rèn)通常不一定單獨(dú)進(jìn)行，可在對(duì)其他方法性能參數(shù)確認(rèn)時(shí)加以考慮。4.3.1.2對(duì)于定量分析方法確認(rèn)，至少需要評(píng)定方法正確度和測(cè)量精密度。而對(duì)于痕量分析，則需要增加考慮方法檢出限和定量限。4.3.1.3如采用實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)，參與實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)的實(shí)驗(yàn)室，相關(guān)的或類(lèi)似的檢測(cè)項(xiàng)目建議通過(guò)CNAS認(rèn)可或具有其他等同資質(zhì)，并具有確認(rèn)活動(dòng)所需要的人員、設(shè)備和設(shè)施等資源。4.3.1.4某些修改內(nèi)容技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)較低情況下，對(duì)超出預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法或其他擴(kuò)充和修改過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行方法確認(rèn)，可僅針對(duì)受影響的方法特性參數(shù)進(jìn)行確認(rèn)或者可與標(biāo)準(zhǔn)方法比對(duì)確認(rèn)無(wú)需全面確認(rèn)。但當(dāng)修改后的樣品方法檢測(cè)的樣品基質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)方法適用范圍內(nèi)樣品基質(zhì)有著本質(zhì)區(qū)別，則應(yīng)全面確認(rèn)。4.3.2.1實(shí)驗(yàn)室在引入并使用標(biāo)準(zhǔn)方法前，應(yīng)充分識(shí)別標(biāo)準(zhǔn)方法的規(guī)定要求，如人員、設(shè)施和環(huán)境、設(shè)備等硬件條件，還應(yīng)通過(guò)試驗(yàn)證明結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，如檢出限和定量限、精密度、線(xiàn)性范圍等方法特性指標(biāo)。通常情況下，方法驗(yàn)證參數(shù)選擇可參考表2,并應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足相應(yīng)的要發(fā)布日期：2020年4月20日表2典型方法驗(yàn)證參數(shù)的選擇及其要求√定量限√靈敏度一一一一線(xiàn)性范圍√曲線(xiàn)線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)滿(mǎn)足標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定或通測(cè)量范圍√應(yīng)覆蓋方法的最低濃度水平(定量限)—一精密度(重復(fù)性和再現(xiàn)性)√2方法給出的指標(biāo)或滿(mǎn)足化學(xué)分析通用正確度√— 測(cè)量不確定度(MU)— 注3:當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)方法沒(méi)有特別規(guī)定的情況下，如已經(jīng)驗(yàn)證檢出限，定量限可以性范圍，測(cè)量范圍可以省略。注4:基質(zhì)效應(yīng)驗(yàn)證通常不單獨(dú)進(jìn)行，可在對(duì)其他方法性能參數(shù)驗(yàn)證時(shí)加以考注5:如果實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)對(duì)方法精密度和正確度進(jìn)行驗(yàn)證，則可以不對(duì)測(cè)量不而，對(duì)不確定度的評(píng)定可能是認(rèn)可機(jī)構(gòu)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的專(zhuān)門(mén)要求(如：CNAS-CL01-G003:2019)。發(fā)布日期：2020年4月20日 4.3.2.2定量分析方法驗(yàn)證過(guò)程中關(guān)鍵的參數(shù)應(yīng)取決于方法的特性和可能測(cè)到的樣品基質(zhì)的檢測(cè)范圍，至少應(yīng)測(cè)定正確度和精密度。對(duì)于痕量化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)確保獲得適當(dāng)?shù)臋z出限和定量限。4.3.2.3當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)方法中已經(jīng)對(duì)測(cè)量不確定度主要來(lái)源的值規(guī)定了限值，并規(guī)定了計(jì)算結(jié)果的表示方式(或者如果標(biāo)準(zhǔn)方法中已確定并驗(yàn)證了結(jié)果的測(cè)量不確定度),則實(shí)驗(yàn)室只需證實(shí)相關(guān)關(guān)鍵影響因素已經(jīng)按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行控制，無(wú)需重新評(píng)定測(cè)量不確定度。4.3.2.4當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)方法中規(guī)定的部分儀器參數(shù)不適用于實(shí)驗(yàn)儀器時(shí)(或標(biāo)準(zhǔn)中缺乏部分儀器參數(shù)),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)有關(guān)方法條件進(jìn)行細(xì)化或者調(diào)整，通過(guò)一定的儀器條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，選取適合本型號(hào)儀器的儀器工作條件，并編制作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。4.3.2.5當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)中含有多種方法的，應(yīng)對(duì)本實(shí)驗(yàn)室選用的方法逐一進(jìn)行驗(yàn)證。4.3.2.6當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)方法適用于多種檢測(cè)對(duì)象時(shí)，應(yīng)對(duì)本實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用的不同類(lèi)型基質(zhì)樣品逐一進(jìn)行驗(yàn)證。4.3.2.7對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證，必要時(shí)可參加能力驗(yàn)證或開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)。4.4文件化要求4.4.1在進(jìn)行方法確認(rèn)和驗(yàn)證時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)做好相關(guān)記錄，包括用于確認(rèn)和驗(yàn)證結(jié)果、所獲得結(jié)果的方法和程序，以及方法是否滿(mǎn)足非標(biāo)方法的預(yù)期用途和標(biāo)準(zhǔn)方法要求的結(jié)論。4.4.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)編制相關(guān)方法確認(rèn)和驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)告中宜包含目的、待確認(rèn)的非標(biāo)方法作業(yè)指導(dǎo)書(shū)或待驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)方法編號(hào)、方法摘要、所用的儀器和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、方法特性參數(shù)評(píng)定過(guò)程(含實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、使用的樣品基質(zhì)類(lèi)型、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、判定依據(jù))、以及最終結(jié)論、審核及批準(zhǔn)人員、報(bào)告日期等關(guān)鍵要素。4.4.3相關(guān)報(bào)告和記錄應(yīng)存檔并確保在需要時(shí)，如：報(bào)告限量的設(shè)定、內(nèi)部質(zhì)量控制結(jié)果評(píng)價(jià)所規(guī)定限值的確定等有關(guān)數(shù)據(jù)能正確得到利用。4.4.4對(duì)于非標(biāo)方法確認(rèn)，一般應(yīng)同時(shí)制定如下文件：a)方法的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)；b)方法的編制說(shuō)明；c)實(shí)驗(yàn)室間或不同專(zhuān)家給出的方法確認(rèn)報(bào)告；d)使用該方法出具的典型報(bào)告。5方法特性參數(shù)的確認(rèn)和驗(yàn)證5.1選擇性5.1.1在對(duì)某些的選擇性不太好的檢測(cè)技術(shù)方法、基質(zhì)成分復(fù)雜的樣品痕量雜質(zhì)檢測(cè)等干擾風(fēng)險(xiǎn)較的高方法確認(rèn)過(guò)程中均應(yīng)更加關(guān)注考察其選擇性。5.1.2在進(jìn)行方法確認(rèn)過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)根據(jù)預(yù)期用途樣品范圍，采用多種不同類(lèi)型的含量已知的代表性樣品來(lái)證實(shí)方法的選擇性，所用的樣品種類(lèi)從單純的目標(biāo)分析物標(biāo)準(zhǔn)溶液到具有復(fù)雜基體的實(shí)際樣品，也可用不同基體類(lèi)型的空白實(shí)際樣品。發(fā)布日期：2020年4月20日5.1.4在進(jìn)行方法驗(yàn)證過(guò)程中，由于標(biāo)準(zhǔn)方法制定方已經(jīng)進(jìn)行過(guò)確認(rèn)，通常所建立的標(biāo)準(zhǔn)方法具有較好的選擇性，可不對(duì)方法選擇性進(jìn)行驗(yàn)證。但當(dāng)方法適用檢測(cè)對(duì)象種類(lèi)繁多或樣品基質(zhì)成分復(fù)雜，且難以通過(guò)全部樣品基質(zhì)或其他參數(shù)進(jìn)行干擾試驗(yàn)時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)方法的實(shí)驗(yàn)室仍需根據(jù)自身樣品情況選擇某些特定的樣品對(duì)方法選擇性進(jìn)行驗(yàn)證。a)分析一定數(shù)量的代表性空白樣品(不含待測(cè)定物質(zhì)的實(shí)際樣品),檢查在目標(biāo)分析物出現(xiàn)的區(qū)域是否有干擾(信號(hào)、峰等),所選空白樣品盡量考慮不同基體類(lèi)型；b)對(duì)有參考值的實(shí)際樣品進(jìn)行分析或在代表性空白樣品中添加一定濃度的有可能干擾分析物定性和/或定量的物質(zhì)；c)當(dāng)有實(shí)驗(yàn)室有對(duì)同類(lèi)樣品的其他已獲認(rèn)可的具有可比性的標(biāo)準(zhǔn)方法或公認(rèn)的檢測(cè)方法，也可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部方法比對(duì)來(lái)檢查。應(yīng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法的要求或者實(shí)驗(yàn)室的預(yù)期目的來(lái)決定是否進(jìn)行檢出限和定量限的確認(rèn)，通常情況下，當(dāng)分析物濃度遠(yuǎn)大于LOQ時(shí)，沒(méi)有必要評(píng)定方法的LOD和LOQ。但是對(duì)于那些濃度接近于LOD與LOQ的痕量和超痕量檢測(cè)，并且報(bào)告為“未檢出”時(shí)，或需要利用檢出限或定量限進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定或法規(guī)決策時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確定LOD和LOQ。不同的基質(zhì)類(lèi)型可能需要分別評(píng)定LOD和LOQ。由于LOD和LOQ有一定的倍數(shù)關(guān)系(通常LOQ為L(zhǎng)OD的2-5倍),某些情況下可能僅評(píng)定LOD和LOQ其中之一進(jìn)行評(píng)定。確定檢出限的方法很多，常用方法如下：a)空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法評(píng)定LOD即通過(guò)分析大量的樣品空白或加入最低可接受濃度的樣品空白來(lái)確定LOD。獨(dú)立測(cè)試的次數(shù)應(yīng)不少于10次(n≥10),計(jì)算出檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差(s),計(jì)算方法參見(jiàn)表3。表3定量檢測(cè)中LOD的表示方法1)樣品空白獨(dú)立測(cè)試10次**:僅當(dāng)空白中干擾物質(zhì)的信號(hào)值高于樣品空白值的3s的概率遠(yuǎn)小于發(fā)布日期：2020年4月20日CNAS-TRL-011:2020第12頁(yè)共80頁(yè)注1:“最低可接受濃度”為在所得不確定度可接受的情況下所加入的最低濃度；注2:假設(shè)實(shí)際檢測(cè)中樣品和空白應(yīng)分別測(cè)定，且通過(guò)樣品濃度扣減空白信號(hào)對(duì)應(yīng)的濃度進(jìn)行空白校正。注3:獨(dú)立測(cè)試是指結(jié)果是在不受到以前同樣或類(lèi)似樣品測(cè)試結(jié)果的影響的測(cè)樣品空白值的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差均受樣品基質(zhì)影響，因此最低檢出限也因受樣品基質(zhì)種類(lèi)的b)信噪比法評(píng)定LOD對(duì)于定量方法來(lái)說(shuō)，由于儀器分析過(guò)程都會(huì)有背景噪音，常用的方法就分析物樣品與空白樣品的測(cè)量信號(hào)進(jìn)行比較，確定能夠可靠檢出的最信噪比是2:1或3:1。c)目視評(píng)價(jià)法評(píng)定LOD低濃度值的方法。即在樣品空白中加入一系列不同濃度的分析物，隨機(jī)對(duì)每一個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)行約7次的獨(dú)立測(cè)試，通過(guò)繪制陽(yáng)性(或陰性)結(jié)果百分比與濃度相對(duì)應(yīng)的反應(yīng)曲線(xiàn)確定閾值濃度。該受準(zhǔn)則等。通常建議將空白值加上10倍的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差作為L(zhǎng)OQ,也可以3倍的LOD或高于方法確認(rèn)中使用正確度評(píng)定中最低加標(biāo)量的50%作為L(zhǎng)OQ。如為增加數(shù)據(jù)的可信性，LOQ也可用10倍的LOD來(lái)表示。5.3測(cè)量范圍a)方法的測(cè)量范圍應(yīng)覆蓋方法的最低濃度水平(定量限)和關(guān)注濃度水平；b)至少需要確認(rèn)方法測(cè)量范圍的最低濃度水平(定量限)、關(guān)注濃度水平和最高濃度水平的c)若方法的測(cè)量范圍呈線(xiàn)性，也可通過(guò)線(xiàn)性范圍的評(píng)5.4線(xiàn)性范圍a)采用校準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量，一般應(yīng)具有6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)(包括空白)。對(duì)于篩選方法，線(xiàn)性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.98。對(duì)于準(zhǔn)確定量的方法，線(xiàn)性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于b)校準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)應(yīng)盡可能均勻地分布在關(guān)注的濃度范圍內(nèi)并能覆蓋該范圍；c)濃度范圍一般應(yīng)覆蓋樣品中可能涉及的分析物濃度或關(guān)注濃度的50%～150%,如需做空白時(shí)，則應(yīng)覆蓋關(guān)注濃度的0~150%;d)應(yīng)充分考慮可能的基質(zhì)效應(yīng)影響，排除其對(duì)校準(zhǔn)曲線(xiàn)的干擾。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)提供文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)發(fā)布日期：2020年4月20日數(shù)據(jù)，說(shuō)明目標(biāo)分析物在溶劑中、樣品中和基質(zhì)成分中的穩(wěn)定性，并在方法中予以明確。通常各種分析物在保存條件下的穩(wěn)定性都已有很好的研究，監(jiān)測(cè)保存條件應(yīng)作為常規(guī)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)系統(tǒng)的一部分。對(duì)于缺少穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的目標(biāo)分析物，應(yīng)提供能分析其穩(wěn)定性的測(cè)定方法和確認(rèn)結(jié)果。5.4.2若在所考察的濃度范圍之內(nèi)不能呈現(xiàn)所期待的線(xiàn)性關(guān)系，則應(yīng)設(shè)法消除導(dǎo)致線(xiàn)性差的因素，或者限制(縮小)濃度的范圍以確保其線(xiàn)性。5.4.3在滿(mǎn)足一般應(yīng)用要求前提下，曲線(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍不宜過(guò)寬，因其測(cè)量的不確定度亦會(huì)隨著濃度范圍變廣而增加。5.5基質(zhì)效應(yīng)5.5.1當(dāng)方法確認(rèn)過(guò)程中存在基體干擾時(shí)，應(yīng)通過(guò)在典型樣品前處理好的消解液或萃取液中添加標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行識(shí)別。對(duì)不同基體類(lèi)型樣品溶液應(yīng)分別識(shí)別，每種基體類(lèi)型樣品溶液一般應(yīng)重復(fù)測(cè)定至少2次。時(shí)進(jìn)行。5.5.2若萃取液或消解液添加標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)出的結(jié)果要較單純標(biāo)準(zhǔn)溶液(僅含簡(jiǎn)單溶劑，無(wú)樣品基體)測(cè)出的結(jié)果有顯著差異，則應(yīng)考慮基體的存在對(duì)儀器的響應(yīng)有抑制或增強(qiáng)的影響。實(shí)驗(yàn)室可通過(guò)分析基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、改變基質(zhì)成分含量、與其他參考方法進(jìn)行比等方法對(duì)基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。5.5.3在研究基體對(duì)儀器響應(yīng)的影響時(shí)，可通過(guò)配制加入基質(zhì)和不含有基質(zhì)兩套濃度一致的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)，以考察這兩個(gè)曲線(xiàn)斜率是否存在顯著性差異。若不存在顯著性差異，如：曲線(xiàn)斜率偏差小于10%,則認(rèn)為不需要對(duì)基體影響進(jìn)行校正。5.6準(zhǔn)確度一般情況下，準(zhǔn)確度涵蓋正確度和精密度，即：方法準(zhǔn)確度的評(píng)定包含考察系統(tǒng)誤差(評(píng)定正確度)和隨機(jī)誤差(評(píng)定精密度)。5.6.1正確度5.6.1.1正確度差意味著存在系統(tǒng)誤差，一般用偏倚表示。最理想的偏倚評(píng)定是利用樣品的基質(zhì)匹配且濃度相近的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(CRMs)進(jìn)行測(cè)試。若無(wú)法獲得CRMs,則需要尋找可替代的物質(zhì)來(lái)評(píng)定。采用基體與待測(cè)樣品的基體類(lèi)似，有足夠可靠的參考值的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(RMs)來(lái)評(píng)定也是一個(gè)好的選擇。經(jīng)過(guò)多個(gè)合作實(shí)驗(yàn)室協(xié)同試驗(yàn)測(cè)定獲得的特性值的樣品可以用于此目的。5.6.1.2在條件允許下，應(yīng)盡可能采用覆蓋濃度測(cè)試范圍的不同試樣評(píng)定偏倚。當(dāng)一個(gè)方法不能如預(yù)期在整個(gè)測(cè)試范圍獲得一致的偏倚時(shí)(如非線(xiàn)性校準(zhǔn)曲線(xiàn)),則需要對(duì)不同濃度水平的樣品進(jìn)行測(cè)定(至少對(duì)高或低含量測(cè)試)。否則，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)證明在整個(gè)測(cè)試范圍之內(nèi)具有相同的正確度。相似的正確度。發(fā)布日期：2020年4月20日 5.6.1.3如果無(wú)法獲得合適CRMs或RMs,則偏倚只能通過(guò)在基質(zhì)空白(或者含有目標(biāo)物的實(shí)際樣品)中加入一系列濃度的目標(biāo)物所得回收率來(lái)評(píng)定。即：將已知濃度的分析物加到樣品中，按照預(yù)定的分析方法進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得的實(shí)際濃度減去原先未添加分析物時(shí)樣品的測(cè)定濃度，并除以所添加濃度的百分率?；厥章?R)可通過(guò)如下公式計(jì)算：其中：C1是指加標(biāo)之后測(cè)定的濃度；C2是指加標(biāo)之前測(cè)定的濃度；C3是指添加目標(biāo)物后的理論濃度。在采用回收率來(lái)評(píng)定方法正確度時(shí)應(yīng)重點(diǎn)考慮以下影響因素：a)不同濃度水平回收率有所差異，方法回收率的偏差范圍可參考表4進(jìn)行評(píng)價(jià)。表4方法回收率偏差范圍濃度水平范圍(p)允許偏差范圍0.01%≤p<0.1%僅作為參考。b)應(yīng)特別注意的是，100%的回收率并不一定意味著好的正確度，但差的回收率則一定意味著有偏倚。某些情況下，實(shí)驗(yàn)室只能依賴(lài)于加標(biāo)來(lái)評(píng)定其偏倚。在這種情況下，可利用已知偏倚的國(guó)際或國(guó)家認(rèn)可的參考方法來(lái)評(píng)定另一種方法的偏倚，或者利用兩種方法按照相關(guān)測(cè)試程序?qū)Χ喾N基質(zhì)或濃度的典型樣品進(jìn)行測(cè)定，并用t-檢驗(yàn)(t-test)對(duì)分析方法間的偏倚顯著性進(jìn)行評(píng)定。c)通常情況下宜在方法的盡可能早期步驟，如稱(chēng)樣時(shí)添加目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行方法回收率試驗(yàn)，以獲得方法全程回收率，若向經(jīng)過(guò)前處理后的樣品萃取液或消解液添加，則所獲得的回收率僅考察儀器檢測(cè)方法的正確度。5.6.1.4實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡可能參加包括采用實(shí)際樣品或與本實(shí)驗(yàn)室日常檢測(cè)樣品類(lèi)型相同或相似的樣品的能力驗(yàn)證，以進(jìn)一步確認(rèn)或驗(yàn)證方法的正確度。發(fā)布日期：2020年4月20日5.6.2精密度5.6.2.1概述精密度用于表述在重復(fù)性條件下的重復(fù)性和再現(xiàn)性條件下的再現(xiàn)性。單個(gè)實(shí)驗(yàn)室通常使用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性或中間精密度等術(shù)語(yǔ)來(lái)表示其再現(xiàn)性精密度。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證，通常僅在應(yīng)用該方法的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，可僅對(duì)方法重復(fù)性進(jìn)行驗(yàn)證；如標(biāo)準(zhǔn)方法提供了中間精密度數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)室最好能同時(shí)進(jìn)行中間精密度的驗(yàn)證。對(duì)于非標(biāo)方法的確認(rèn)，則宜同時(shí)對(duì)方法重復(fù)性和再現(xiàn)性進(jìn)行確認(rèn)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)方法驗(yàn)證或方法確認(rèn)獲取精密度試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)特別注意：a)為獲得正常操作條件下方法的精密度，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)方法或作業(yè)指導(dǎo)書(shū)規(guī)定的日常樣品測(cè)試條件下進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試樣品為日常分析的典型樣品，樣品準(zhǔn)備和前處理應(yīng)與正常操作一致，試劑、測(cè)試設(shè)備、分析人員和操作均要實(shí)際測(cè)試的情況一致；b)測(cè)定精密度數(shù)據(jù)的樣品應(yīng)盡量采用含有待測(cè)物質(zhì)且足夠均勻的實(shí)際樣品進(jìn)行測(cè)量。如果無(wú)法獲得均質(zhì)材料則應(yīng)通過(guò)人工制備模擬樣品進(jìn)行評(píng)定；c)精密度會(huì)隨著分析物濃度的變化而變化，因而需要在多個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)行測(cè)定(其中應(yīng)包含測(cè)試范圍內(nèi)最低濃度)。對(duì)于可疑基體產(chǎn)生的影響，測(cè)定多個(gè)濃度點(diǎn)顯得尤為必要。當(dāng)分析物濃度很低，其重復(fù)測(cè)定結(jié)果波動(dòng)可能相對(duì)較大，如：超過(guò)平均值的50%,此時(shí)，應(yīng)調(diào)查精密度較差可能的原因。對(duì)于某些測(cè)試，可能只對(duì)數(shù)據(jù)使用者的特別顯著的一個(gè)或兩個(gè)濃度進(jìn)行評(píng)定，如產(chǎn)品質(zhì)量控制要求或法規(guī)限值對(duì)應(yīng)的濃度水平；d)對(duì)于單一實(shí)驗(yàn)室的方法確認(rèn)，獲取實(shí)驗(yàn)室再現(xiàn)性測(cè)量精密度的最佳方式是對(duì)實(shí)驗(yàn)室的某一個(gè)相同的樣品和CRMs或RMs在正常條件下進(jìn)行長(zhǎng)期獨(dú)立測(cè)定。這種條件下獲得的精密度即為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性測(cè)量精密度。如果精密度試驗(yàn)是在對(duì)不同樣品、不同時(shí)間分別重復(fù)進(jìn)行，且每組數(shù)據(jù)之間沒(méi)有顯著性差異，則這些數(shù)據(jù)將用于計(jì)算合并標(biāo)準(zhǔn)偏差，用于評(píng)價(jià)方法再現(xiàn)性；e)如果測(cè)試方法是用于對(duì)一系列樣品類(lèi)型進(jìn)行測(cè)定，如不同分析物樣品基質(zhì)，則精密度的評(píng)定需要選擇每個(gè)類(lèi)型代表性的樣品進(jìn)行測(cè)定。5.6.2.2重復(fù)性a)重復(fù)性可用標(biāo)準(zhǔn)偏差(s)、方差(s2)等表示，通常需要在重復(fù)性條件下進(jìn)行足夠的重復(fù)測(cè)試次數(shù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)計(jì)算獲得；b)重復(fù)性體現(xiàn)了測(cè)量結(jié)果短期變化，同樣也適用于評(píng)定在單一批次分析中重復(fù)測(cè)定可能存在的差異。然而，重復(fù)性可能會(huì)低估在長(zhǎng)期正常條件下測(cè)量結(jié)果的分散性；c)重復(fù)性的測(cè)定通常在自由度至少為6的情況下測(cè)定。如：對(duì)一個(gè)樣品測(cè)定7次；或?qū)?個(gè)樣品，每個(gè)樣品測(cè)定4次；或?qū)?個(gè)樣品，每個(gè)樣品測(cè)定3次。儀器重復(fù)性可通過(guò)對(duì)發(fā)布日期：2020年4月20日校準(zhǔn)曲線(xiàn)中標(biāo)準(zhǔn)溶液、加標(biāo)溶液進(jìn)樣測(cè)定7次，然后計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差。進(jìn)樣應(yīng)按隨機(jī)順序進(jìn)行以降低偏差；d)方法重復(fù)性可通過(guò)準(zhǔn)備不同濃度的樣品(可采用實(shí)際樣品，也可采用添加了所需分析物的實(shí)際樣品),然后在較短的時(shí)間間隔內(nèi)由同一個(gè)分析員進(jìn)行分析測(cè)定，并計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。得到的標(biāo)準(zhǔn)偏差s除以平均值后的百分率即得到測(cè)試結(jié)果變異系數(shù)(CV值),不同含量測(cè)試結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)(CV值)可參考表5進(jìn)行評(píng)表5實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)a)與重復(fù)性類(lèi)似，再現(xiàn)性也可表示為標(biāo)準(zhǔn)偏差(s)、方差(s2)等表示，通常需要在再現(xiàn)性條件下進(jìn)行足夠的測(cè)試次數(shù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)計(jì)算獲得。如：使用同一標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)同一樣品的某個(gè)參數(shù)由不同分析員、不同設(shè)備在不同時(shí)間內(nèi)，或者在不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行測(cè)定；b)與重復(fù)性類(lèi)似，再現(xiàn)性的測(cè)定通常在自由度至少為6的情況下測(cè)定；c)與重復(fù)性類(lèi)似，方法的再現(xiàn)性通常隨分析物濃度降低而變差；d)再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差可通過(guò)一系列多個(gè)樣品獲得，或多個(gè)系列測(cè)定結(jié)果的合成標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行計(jì)算。5.7穩(wěn)健度5.7.1方法穩(wěn)健度(耐變性的量度)是在對(duì)實(shí)驗(yàn)條件發(fā)生小變化情況結(jié)果不被影響的程度，研究方法條件變化對(duì)方法性能的響應(yīng)影響。方法穩(wěn)健度的確認(rèn)是為了更好的確認(rèn)繼而控制那些能夠?qū)е聹y(cè)試結(jié)果變化的影響因素，用以更好地提高方法的準(zhǔn)確度，指示方法在正常使用情況下的可靠性。5.7.2確認(rèn)化學(xué)分析方法穩(wěn)健度時(shí)，首先可選擇樣品預(yù)處理、凈化、分析過(guò)程等可能影響檢測(cè)結(jié)果的因素(包括試劑來(lái)源和保存時(shí)間、溶劑、標(biāo)準(zhǔn)和樣品提取物、加熱速率、溫度、pH值，以及許多其它可能出現(xiàn)的因素)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)該因素做適當(dāng)修改以符合自身的具體情況。5.7.3穩(wěn)健度試驗(yàn)通?？稍陬A(yù)先設(shè)定好的微小合理?xiàng)l件變化下，通過(guò)對(duì)空白樣品、CRMs、RMs、已知含量等均勻樣品的多次重復(fù)測(cè)定結(jié)果統(tǒng)計(jì)判斷來(lái)進(jìn)行；也可以依據(jù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部方法開(kāi)發(fā)數(shù)據(jù)、方法技術(shù)特性等來(lái)評(píng)定出穩(wěn)健度的影響因素。發(fā)布日期：2020年4月20日 5.7.4實(shí)驗(yàn)室可通過(guò)方案設(shè)計(jì)來(lái)考察來(lái)分析單個(gè)或者多個(gè)因素對(duì)穩(wěn)健度的影響。改變某個(gè)條件固5.7.5當(dāng)發(fā)現(xiàn)對(duì)測(cè)定結(jié)果有顯著影響的因素(如溫度極限值、時(shí)間或pH范圍),應(yīng)通過(guò)進(jìn)一步的試驗(yàn)確定這個(gè)因素的允許極限(或允許范圍),進(jìn)而采取措施控制這些影響。對(duì)結(jié)果有顯著影響定量化學(xué)分析方法確認(rèn)通常包括評(píng)定方法測(cè)量不確定度。量(如：取樣、樣品前處理、儀器測(cè)試)。CNAS-GL009:2018《材料理化檢測(cè)測(cè)量不確定度評(píng)估6.方案設(shè)計(jì)與實(shí)施6.1方案設(shè)計(jì)原則證計(jì)劃。但對(duì)于測(cè)試樣品類(lèi)型復(fù)雜、方法技術(shù)不夠清晰、缺少方法特定指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證，a)考慮客戶(hù)要求和標(biāo)準(zhǔn)方法的規(guī)定；b)驗(yàn)證和確認(rèn)的對(duì)象、方法的適用范圍、常見(jiàn)樣品類(lèi)型；c)方法規(guī)定要求和客戶(hù)的識(shí)別(包括資源配置要求和方法性能要求);d)驗(yàn)證和確認(rèn)的方法特性參數(shù)及其評(píng)定各參數(shù)的試驗(yàn)方法(如儀器和試劑、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、采e)實(shí)驗(yàn)室的資源條件(如儀器和試劑、環(huán)境條件、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì));g)擬定驗(yàn)證和確認(rèn)的工作計(jì)劃，包括可對(duì)責(zé)任人員、完成時(shí)間作出計(jì)劃安排。發(fā)布日期：2020年4月20日6.1.2靈活性原則6.1.2.1方案的設(shè)計(jì)應(yīng)根據(jù)當(dāng)前的主要目的及檢測(cè)方法的適用范圍，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室自身實(shí)際，充分考慮方法技術(shù)特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)室樣品基質(zhì)類(lèi)型、目標(biāo)物的濃度水平、測(cè)量的目的、客戶(hù)可以接受的測(cè)量不確定度等綜合確定應(yīng)加以確認(rèn)和驗(yàn)證的方法性能參數(shù)和內(nèi)容。6.1.2.2實(shí)驗(yàn)室在建立新非標(biāo)方法，或者對(duì)修改標(biāo)準(zhǔn)方法時(shí)，應(yīng)考慮該技術(shù)是否經(jīng)過(guò)同行審查或來(lái)自知名出版者認(rèn)可的期刊上，是否能在相關(guān)領(lǐng)域的專(zhuān)家團(tuán)體所接受，是否存在已經(jīng)在本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證類(lèi)似技術(shù)操作的方法。如有可靠的資料證明其科學(xué)性和符行性，意味著其風(fēng)險(xiǎn)較低，相關(guān)的確認(rèn)或驗(yàn)證可以在一定程度進(jìn)行簡(jiǎn)化或省略。6.1.3經(jīng)濟(jì)性原則6.1.3.1在設(shè)計(jì)方案時(shí)，實(shí)驗(yàn)室既要考慮方法確認(rèn)和驗(yàn)證的成本，更要考慮其效益，應(yīng)盡可能樹(shù)立風(fēng)險(xiǎn)意識(shí)，對(duì)風(fēng)險(xiǎn)高的參數(shù)應(yīng)詳細(xì)確認(rèn)和驗(yàn)證，反之，對(duì)于公認(rèn)的結(jié)論或?qū)嶒?yàn)室大量數(shù)據(jù)足以證明的結(jié)果，實(shí)驗(yàn)室可以利用相關(guān)經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)或?qū)Υ_認(rèn)和驗(yàn)證適當(dāng)進(jìn)行簡(jiǎn)化或省略。6.1.3.2基于實(shí)際情況，對(duì)于非例行測(cè)試方法的確認(rèn)和驗(yàn)證可適當(dāng)減少部分方法特性參數(shù)的確認(rèn)和驗(yàn)證。通過(guò)對(duì)某個(gè)具體代表性試驗(yàn)結(jié)果，并根據(jù)該試驗(yàn)和實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景的差異，利用泛化方法來(lái)擴(kuò)大該結(jié)果的適用范圍，從而降低方法確認(rèn)的成本。6.1.3.3對(duì)于變更標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證，可僅驗(yàn)證受變更影響的方法性能參數(shù)；對(duì)擴(kuò)項(xiàng)同類(lèi)參數(shù)新標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證，可參考或利用類(lèi)似標(biāo)準(zhǔn)方法歷史數(shù)據(jù)，以減少重復(fù)性試驗(yàn)，降低方法驗(yàn)證的成本。6.3實(shí)施步驟6.3.1一般程序?qū)嶒?yàn)室引入新方法前，需要經(jīng)過(guò)判斷來(lái)決定對(duì)該方法是進(jìn)行驗(yàn)證或者確認(rèn)。通常針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法或者知名技術(shù)組織公布的且方法性能參數(shù)已知的方法需要采用驗(yàn)證的方式，而對(duì)于非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)的方法修改后的標(biāo)準(zhǔn)方法則需要確認(rèn)，對(duì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)室擬定用于檢測(cè)并申請(qǐng)認(rèn)可的方法，其確定方法確認(rèn)和驗(yàn)證的技術(shù)路線(xiàn)圖參見(jiàn)附錄A。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)方法的修改，修改的部分有相關(guān)參考文獻(xiàn)進(jìn)行作為技術(shù)支持，方法無(wú)須全面確認(rèn)，僅需進(jìn)行相應(yīng)的驗(yàn)證。當(dāng)方法樣品基體和檢測(cè)項(xiàng)目沒(méi)有發(fā)生變化時(shí)，可以根據(jù)變化的技術(shù)內(nèi)容對(duì)驗(yàn)證進(jìn)行簡(jiǎn)化甚至省略。但修改涉及樣品基質(zhì)或檢測(cè)項(xiàng)目變化，則需要對(duì)修改后的方法進(jìn)行全面確認(rèn)。6.3.2資源條件評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室在擬通過(guò)試驗(yàn)對(duì)方法特性參數(shù)評(píng)價(jià)前并應(yīng)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法或非標(biāo)方法的文本或相應(yīng)的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，以評(píng)定實(shí)驗(yàn)室所擁有的人員、設(shè)備、方法、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試劑材料和檢測(cè)環(huán)境等資源條件是否滿(mǎn)足檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)或非標(biāo)方法要求。發(fā)布日期：2020年4月20日6.3.3驗(yàn)證試驗(yàn)及方法特性參數(shù)的評(píng)價(jià)6.3.4.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)擬定的確認(rèn)或驗(yàn)證方案規(guī)定和相關(guān)檢測(cè)方法(標(biāo)準(zhǔn)方法或非標(biāo)方法),對(duì)不同類(lèi)型的驗(yàn)證樣品，包括空白樣品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、加標(biāo)樣品、日常樣品等進(jìn)行制樣、樣品前處理、上機(jī)測(cè)試、提交結(jié)果等。6.3.4.2實(shí)驗(yàn)室技術(shù)負(fù)責(zé)人應(yīng)提前與實(shí)施相關(guān)人員做好溝通和準(zhǔn)備。作為驗(yàn)證試驗(yàn)實(shí)施者，在執(zhí)行操作前應(yīng)首先掌握標(biāo)準(zhǔn)方法有關(guān)內(nèi)容，仔細(xì)閱讀掌握實(shí)施方案，根據(jù)方案確定的要求來(lái)進(jìn)行，確保驗(yàn)證的有效性和可靠性。6.3.4.3驗(yàn)證試驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)任何異常，應(yīng)該及時(shí)記錄并向?qū)嶒?yàn)室相關(guān)技術(shù)負(fù)責(zé)人匯報(bào)。6.3.4.4試驗(yàn)完成后，應(yīng)整理有關(guān)數(shù)據(jù)，進(jìn)行必要的統(tǒng)計(jì)和計(jì)算，獲得方法各特性指標(biāo)值。6.3.4.5對(duì)照評(píng)價(jià)方法性能的試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)準(zhǔn)則，得出驗(yàn)證結(jié)論，并整理相關(guān)技術(shù)報(bào)告，交相關(guān)技術(shù)負(fù)責(zé)人審核。6.3.4變更標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證當(dāng)方法標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生變更后，應(yīng)首先對(duì)新標(biāo)準(zhǔn)的文本進(jìn)行評(píng)定，再根據(jù)修改程度進(jìn)行方法驗(yàn)證：a)當(dāng)新標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)路線(xiàn)未發(fā)生變化，而僅僅是標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)、年號(hào)或文本格式等發(fā)生變化，則可以直接通過(guò)技術(shù)評(píng)審，投入使用，并及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室認(rèn)可機(jī)構(gòu)申請(qǐng)標(biāo)準(zhǔn)變更；b)當(dāng)新標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)路線(xiàn)與舊標(biāo)準(zhǔn)不一致時(shí)，則需要重新評(píng)價(jià)資源條件是否滿(mǎn)足檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的要求，還需要重新通過(guò)試驗(yàn)相關(guān)技術(shù)參數(shù)以證實(shí)實(shí)驗(yàn)室是否已經(jīng)具備準(zhǔn)確執(zhí)行該新的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)能力。6.3.5確認(rèn)和驗(yàn)證結(jié)果有效性跟蹤6.3.5.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡早通過(guò)參加能力驗(yàn)證或?qū)嶒?yàn)室間比對(duì)、內(nèi)部質(zhì)量控制結(jié)果分析、不符合工作原因分析等確認(rèn)方法驗(yàn)證和確認(rèn)結(jié)果的有效性或發(fā)現(xiàn)可能存在的不足。6.3.5.2若實(shí)驗(yàn)室人員、儀器和環(huán)境發(fā)生重大變化，或者方法實(shí)施多年，則應(yīng)考慮方法性能是否發(fā)生改變。當(dāng)懷疑某個(gè)方法性能可能不滿(mǎn)足要求時(shí)，應(yīng)需要根據(jù)具體的原因進(jìn)行處理，對(duì)某些受影響的檢測(cè)方法特性參數(shù)重新進(jìn)行評(píng)定，以使方法性能得到恢復(fù)，必要時(shí)更新相應(yīng)的報(bào)告。方法確認(rèn)和驗(yàn)證技術(shù)路線(xiàn)圖對(duì)已報(bào)道文獻(xiàn)中的方法特性改變了報(bào)道文獻(xiàn)某些試驗(yàn)條件或基質(zhì)與報(bào)道文獻(xiàn)所用的行全面確認(rèn)或是(含特性參數(shù))是否確認(rèn)否是該非標(biāo)方法是否經(jīng)否是確認(rèn)是否否否是否是否否是是是否是圖A.1方法確認(rèn)和驗(yàn)證技術(shù)路線(xiàn)圖第21頁(yè)共80頁(yè)附錄B:(資料性附錄)方法類(lèi)別1(注：可適用于也適用于ICP-MS空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法。1.采用樣品空白按方法全程步驟處理，獨(dú)立測(cè)試10次，由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得10次測(cè)試結(jié)果(不論結(jié)果正負(fù)數(shù)值作為有效數(shù)差(s),樣品空白平均值+3s為檢出限。實(shí)際工作中，一般空白平均值可以忽樣品空白中加入最低可接受濃度的加標(biāo)樣品代替樣品空白，此時(shí)，直接用3s1.采用樣品空白來(lái)評(píng)估方法檢出限時(shí)，由于樣品空白不含有目標(biāo)物質(zhì)，一種簡(jiǎn)化的計(jì)算方法也可將平均值視為0,即直接用3s為檢2.進(jìn)行樣品空白的測(cè)試時(shí)，則需要注意避免過(guò)程中引入污染。有偶然的污染也只發(fā)生在10次獨(dú)立測(cè)試中的某一次，在使用這些測(cè)試結(jié)果進(jìn)行方法檢出限統(tǒng)計(jì)計(jì)算時(shí)，應(yīng)該注意鑒別，必要時(shí)，可能需要剔除。3.當(dāng)無(wú)法獲得帶有基質(zhì)的樣品空白時(shí)，可法檢出限。但采用試劑空白的方式，容易獲更小的方法檢出限。4.當(dāng)采用試劑空白來(lái)評(píng)估方法檢出限時(shí)，某些儀器方法和AFS,其所獲得的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差非常接在試劑空白中加入低濃度(例如方法中規(guī)定的方法檢出限所對(duì)應(yīng)濃度水平)的目標(biāo)物質(zhì)，通過(guò)對(duì)該加標(biāo)樣品的重復(fù)測(cè)量來(lái)計(jì)算3s獲得最終方法檢出限。5.采用EDXRF進(jìn)行測(cè)定的方法存在明顯的基質(zhì)效應(yīng)，一般采用與樣品相同基質(zhì)樣品空白進(jìn)行評(píng)估。一2參考本文5.1空白測(cè)試和空白添加法。1.ICP—OES,EDXRF等容易存在光譜干擾，可選擇其它合適的譜線(xiàn)或采用內(nèi)標(biāo)法避免該干擾。例如ICP-OES中高含220nm造成干擾。2.GFAAS采用塞曼扣除背景方式或帶平臺(tái)第22頁(yè)共80頁(yè)方法類(lèi)別3(注：可適用于也適用于ICP-MS測(cè)量范圍與線(xiàn)性范圍同時(shí)驗(yàn)證方法測(cè)量范圍。進(jìn)行驗(yàn)證。1.可配制系列濃度(包括空白)標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)試評(píng)估。1.相關(guān)系數(shù)一般用字母r表示，一些標(biāo)準(zhǔn)上會(huì)使用r2,而一些設(shè)備軟件計(jì)算出來(lái)的為r,比較時(shí)應(yīng)注意兩者差異。2.光譜類(lèi)分析設(shè)備的定量方法的相關(guān)系數(shù)一般能于ICP-OES,其線(xiàn)性系數(shù)更是一般可以達(dá)到0.999以上。3.對(duì)于EDXRF,實(shí)際工作中，有時(shí)難以找到6個(gè)同基質(zhì)的CRM,但至少應(yīng)包括高中低3個(gè)濃度水平。針對(duì)金屬類(lèi)基質(zhì)的樣品，一般采用FP法(基本參數(shù)法)代替校準(zhǔn)曲線(xiàn)法，范圍驗(yàn)證無(wú)法通過(guò)線(xiàn)性范圍的驗(yàn)證來(lái)進(jìn)行。一41.采用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(CRM)進(jìn)行測(cè)試，2.樣品加標(biāo)回收率的偏離情況可用來(lái)判1.對(duì)于ICP-OES,樣品溶液中的酸含量與曲線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有的不同，會(huì)帶來(lái)明顯的影響。例如：同一濃度水平下，在ICP-OES中的響應(yīng)值，30%(v/v)硝酸含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液比為5%(v/v)的標(biāo)準(zhǔn)溶液低10%以上。ICP-MS也有類(lèi)似的情樣的影響會(huì)小一些。2.類(lèi)似的，復(fù)雜的合金樣品(如：含高濃度的鐵，銅分析如：鉛元素時(shí)，也存在明顯的基質(zhì)效應(yīng)。4.UV-VIS可能會(huì)存在樣品顏色干擾。例如：UV-VIS測(cè)試皮革中的甲醛含量，萃取液呈現(xiàn)黃色可能會(huì)干擾甲醛測(cè)5.GFAAS采用氘燈扣除背景的方式，明顯增加背景值，導(dǎo)致結(jié)果偏低。采用塞曼扣除背景方式，或者第23頁(yè)共80頁(yè)方法類(lèi)別5(注：可適用于也適用于ICP-MS正確度參考本文5.6.1采用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(CRM)通過(guò)其回收率進(jìn)行評(píng)估。1.對(duì)于一些測(cè)試(如非100%萃取的前處理),由于樣品加標(biāo)實(shí)驗(yàn)所2.作為用于篩選分析的EDXRF法，其正確度一般明顯差于ICP-OES一6參考本文5.6.2進(jìn)行。1.重復(fù)性實(shí)驗(yàn)代表了實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)用該方法的最佳水平。的變化正常波動(dòng)水平。(見(jiàn)結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%"。此時(shí)，實(shí)驗(yàn)室在4.作為用于篩選分析的EDXRF法，其精密度明顯差于—第24頁(yè)共80頁(yè)方法類(lèi)別7(注：可適用于也適用于ICP-MS物質(zhì)或均勻的質(zhì)控樣(QC)進(jìn)行采用單因1.單因子評(píng)價(jià)法，也就是每次只變化一個(gè)參數(shù)，評(píng)估該參數(shù)的變化對(duì)于方法的影響。2.影響光譜分析方法主要包括樣品前處理品前處理的影響因素可能有樣品粉碎顆粒尺寸、樣品消解提取條件(溫度、時(shí)間、pH)、殘余溶液酸度等，儀可能有色譜柱的型號(hào)/品牌、流動(dòng)相的變化(對(duì)于LC和LC-MS)、色譜分離程序等，一般采用單因素實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估。3.試驗(yàn)前一般需要通過(guò)查詢(xún)相關(guān)文獻(xiàn)，以便了解和掌握影響檢測(cè)結(jié)果的幾個(gè)關(guān)鍵因素。8色譜法和色譜-質(zhì)(可適用于LC、GC、限信噪比法(一般采用峰/峰(peakto噪比法，即以目標(biāo)分析物峰高為信號(hào)值，與度值為檢出限)。通常以3倍的方法檢出限作為方法定量限。1.當(dāng)方法提供了檢出限，可選用代表性空白樣品添加檢出限濃度水平目標(biāo)分析物并按照檢測(cè)方法進(jìn)行前處理后上機(jī)測(cè)試、評(píng)2.若無(wú)法獲得空白樣品時(shí)，可以考慮用試除以樣品前處理濃縮倍數(shù))進(jìn)行估算，但此種計(jì)算方法容易低估方法檢出限。3.當(dāng)方法沒(méi)有提供檢出限時(shí)，可根據(jù)有關(guān)資料進(jìn)行預(yù)估，進(jìn)行一系列預(yù)估濃度水平附近的試驗(yàn)，以獲得滿(mǎn)足檢出限信噪比要求(信噪4.儀器工作軟件一般可以自動(dòng)計(jì)算信噪比，但是噪比計(jì)算非常關(guān)鍵，通常選擇目標(biāo)峰兩側(cè)的噪音峰值進(jìn)行計(jì)算；對(duì)于目標(biāo)峰兩側(cè)有雜峰或者有其他目標(biāo)峰時(shí)，體噪音趨勢(shì)和平均情況，選取合適的噪音段白樣液和空白加標(biāo)樣液的色譜圖疊加觀(guān)測(cè)來(lái)輔助評(píng)估。法定量限，而不必再單獨(dú)開(kāi)展評(píng)估方法定量限實(shí)驗(yàn)。量離子或定量離子對(duì)色譜峰峰高作不是采用總峰峰高。第25頁(yè)共80頁(yè)方法類(lèi)別9色譜法和色譜-質(zhì)(可適用于LC、GC、估。實(shí)際樣品中可能含有目標(biāo)分析物的同分異構(gòu)體，其與目標(biāo)分析物可能有相同的色譜行為，在方法確認(rèn)時(shí)需要排除干擾線(xiàn)性范圍和測(cè)量范圍同時(shí)驗(yàn)證方法測(cè)量范圍。進(jìn)行驗(yàn)證。1.當(dāng)方法沒(méi)有基質(zhì)效應(yīng)時(shí)，考察純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液；當(dāng)方法存在基質(zhì)效2.色譜類(lèi)分析設(shè)備的定量方法的相關(guān)系數(shù)一般能達(dá)到0.995以上。3.LC-MS和GC-MS常需用到內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法。采用代表性空白樣品進(jìn)行覆蓋測(cè)量范圍不同濃度水平加標(biāo)試一般可同時(shí)驗(yàn)證測(cè)量范圍。 溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液響應(yīng)值比較評(píng)估。1.最好采用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率進(jìn)行比較，一種簡(jiǎn)化方法也可采用單點(diǎn)2.當(dāng)方法存在基質(zhì)效應(yīng)時(shí)，可通過(guò)優(yōu)化凈化消減基質(zhì)效應(yīng)，或者采用基體匹配和內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行校正。3.LC-MS和GC-MS多采用同位素內(nèi)標(biāo)法可對(duì)基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行校正。性和再現(xiàn)性)量均勻的實(shí)際樣品進(jìn)行評(píng)估。1.采用添加回收實(shí)驗(yàn)評(píng)估方法精密度時(shí)，宜添加高低不同濃度水2.對(duì)于禁用物質(zhì)，添加水平一般可為1、2于允許使用物質(zhì)，添加水平一般為0.5、1和2倍允許限量。 正確度準(zhǔn)物質(zhì)樣品進(jìn)行評(píng)估。正確度評(píng)估通?？山Y(jié)合精密度評(píng)估同時(shí)進(jìn)行驗(yàn)一第26頁(yè)共80頁(yè)方法類(lèi)別驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估。1.影響色譜分析方法主要包括樣品前處理和儀器測(cè)定兩類(lèi)，其中樣品前處理的影響因素可能有提取溶劑種類(lèi)、提取溶劑用量與稱(chēng)樣量的比例、提取方式、提取時(shí)間/溫度、凈化條件等，儀器檢測(cè)的影響因素可能有色譜柱的型號(hào)/品牌、流動(dòng)相的變化(對(duì)于LC和LC-MS)、色譜分離程序等，一般采用單因素實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估。2.2.試驗(yàn)前一般需要通過(guò)查詢(xún)相關(guān)文獻(xiàn)，以便了解和掌握影響檢測(cè)結(jié)果的幾個(gè)關(guān)鍵因素。第27頁(yè)共80頁(yè)附錄C:(資料性附錄)1定方法)用于ICP-OES、測(cè)定方法)1.固體樣品采用簡(jiǎn)單工具剪碎或各種粉碎儀器粉碎。樣品前處理。(某些簡(jiǎn)單基質(zhì)樣品可經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的預(yù)處理過(guò)程甚至直接稀釋上機(jī)測(cè)定，如采用環(huán)境水樣加入硝酸后，引入ICP-OES測(cè)定。)1.對(duì)于元素總含量測(cè)定，樣品尺寸越小，越有利于樣品消解，3.注意避免樣品交叉污染，有些元素測(cè)定特別注意容器材質(zhì)，比如常用的玻璃燒杯是鈉鈣玻璃，做這兩種元素時(shí)要避免選 2用于EDXRF固體1.一般采用手工或者機(jī)械剪切，取出大臺(tái)式EDXRF。2.粉末或細(xì)小顆粒狀樣品，無(wú)需制樣，采用樣品杯盛放樣品進(jìn)行測(cè)試即可。1.樣品的形狀(片狀或顆粒狀)和大小尺寸等，會(huì)明顯影響測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確度，因此需盡量保持標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與待測(cè)樣品之間一致物質(zhì)與待測(cè)樣品之間一致的密度或厚度。EDXRF則一般只需將測(cè)3品消解1.根據(jù)樣品的化學(xué)特性，選擇有助于消溶法，次選堿熔法。者混合酸。2.選擇標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋介質(zhì)時(shí)，盡可能選擇與分析樣品匹配的者在特定的溫度下(消解介質(zhì)的沸點(diǎn))一定的消解時(shí)間作為消解終點(diǎn)。4.當(dāng)采用高壓罐消解法、微波消解法，對(duì)于成分未知的樣品，的方法樣品量采用0.05克到0.2克，處理溫度一般不超過(guò)用于元素總含量測(cè)定。第28頁(yè)共80頁(yè)4定方法)品提取一般采用模擬溶液提取法，用模擬汗液、測(cè)成分。1.元素遷移含量測(cè)定不需完全分解破壞樣品，只需將待測(cè)成分較少，處理過(guò)程簡(jiǎn)單，處理?xiàng)l件溫和，空白值低且造成待測(cè)2.但制定該類(lèi)方法必須規(guī)定提取溫度、提取時(shí)間等具體遷移條有可比性。3.采用有機(jī)物作為提取液時(shí)，ICP-AE直接進(jìn)樣，需要將溶劑蒸干改用稀酸溶解后測(cè)移含量測(cè)定。5電感耦合等離子體光1.選擇的原則是盡可能把光譜干擾降到最低，目標(biāo)元素受基質(zhì)干擾最小，同時(shí)在測(cè)量范圍內(nèi)強(qiáng)度相對(duì)最強(qiáng)的波長(zhǎng)。2.必要時(shí)，可考慮多選一條譜線(xiàn)作為信度。一6的選擇常用工作條件及范圍：等離子體功率為1100-1300w,霧化氣流量是0.6-0.8L/min,1.當(dāng)待測(cè)定的元素含有易激發(fā)又易電離的堿金屬元素時(shí)，應(yīng)考慮選用較低的功率(750w-950w),而在測(cè)定較難激發(fā)的As、Sb、Bi等元素時(shí)，可考慮選用1350w或以上的功般選用較高的功率。3.一般情況，隨著功率增大譜線(xiàn)強(qiáng)度也增加，但是另一方面，背景強(qiáng)度也增大。ICP-OES能同時(shí)進(jìn)行多個(gè)元素分析，因需綜合各個(gè)分析元素的特性等因素的考慮選適合的功率。4.由于進(jìn)樣系統(tǒng)的霧化效果直接影響分析的靈敏度和精密度，霧化氣流量為影響ICP-OES的最主要和最敏感參數(shù)。當(dāng)樣品5.由于尾焰處理的設(shè)計(jì)和炬管材料等不同，不同的儀器生產(chǎn)商輔助氣流量的最佳設(shè)定有差異，建議參考儀器生產(chǎn)商的推薦設(shè)定，或者在推薦值的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化； 第29頁(yè)共80頁(yè)7電感耦合等離子體光1.同心霧化器具有更好的霧化效率和穩(wěn)定性，但易堵塞，須定期用霧化器專(zhuān)用清洗工具進(jìn)行清洗。切勿用金屬絲通堵塞的霧化器。2.霧化室要注意接口處的氣密性。和霧化室。如：OneNeb霧化器。 8電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)調(diào)諧參數(shù)的設(shè)定一般儀器可以自動(dòng)調(diào)諧，也可以手動(dòng)設(shè)定速度。1.不同儀器采樣深度、采樣水平位置和垂直位置差異較大，但2.低質(zhì)量數(shù)、中質(zhì)量數(shù)、高質(zhì)量數(shù)的靈敏度滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。3.氧化物、雙電荷的比率小于3%。4.分辨率小于0.1u。一9子干擾。擾的同位素、編輯干擾方程、選擇適合的碰撞一反應(yīng)模式。1.同量異位素干擾即質(zhì)譜重疊干擾，通常該干擾不能被四極桿質(zhì)譜分辨，如204Pb+對(duì)204Hg的干擾，擾同位素，可采編輯干擾方程方法來(lái)消除。2.氧化物干擾是由于樣品基體不完全解離或是在等離子體尾焰中解離元素再結(jié)合而產(chǎn)生的，其結(jié)果是在離子母體質(zhì)量(M)的M*16為最多，47Ti160+對(duì)63Cu的干擾，可采編輯干擾方程方法和碰撞一反應(yīng)模式的方式消除干擾。3.雙電荷干擾是由于某些元素的第二電離能低于Ar的第一電離測(cè)元素的離子強(qiáng)度，如136Ba2+對(duì)68Zn+、88Sr2+對(duì)44Ca+、54Fe2+對(duì)27Al*,可采編輯干擾方程方法和碰撞一反應(yīng)模式的4.多原子離子干擾是ICP-MS中最嚴(yán)重的干擾類(lèi)型，即由多個(gè)原子結(jié)合而成的短壽命復(fù)合離子，主要以氬化物、氫氧化物等形式出現(xiàn)。在ICP中，Ar+與許多離子結(jié)合擾，如豐度最大的40Ar與35Cl結(jié)合會(huì)嚴(yán)重干擾75As*。多干擾方程方法和碰撞一反應(yīng)模式的方式消除干擾。采用碰撞一反應(yīng)模式和編輯干擾方程方法來(lái)消除質(zhì)譜干擾。第30頁(yè)共80頁(yè)電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)ICP-MS工作條件的選擇試樣提升速度：0.10rps1.RF功率、等離子氣流量、ICP發(fā)射功輔助氣流量、霧化氣流量和試樣提升速度都將影響質(zhì)譜靈敏度和精密度。2.隨著ICP發(fā)射功率升高，樣品停留在ICP中的溫度越高，同3.載氣和輔助氣使用的氬氣中含的O2、N較少，ICP溫度就維持的相對(duì)較高，雙電荷產(chǎn)率越大，而氧化物產(chǎn)率越少。4.霧化氣流量可以改變進(jìn)入ICP的溶劑蒸汽量，進(jìn)而對(duì)ICP負(fù)少因H、O產(chǎn)生的質(zhì)譜干擾，同時(shí)降低對(duì)ICP熱量的損速度降低電離率。 陽(yáng)極材料(靶材),1.商業(yè)用途常使用銠Rh作為靶材電流；而重元素選擇高電壓，低電3.3.在能量5~10KeV的能量譜段，10~25KeV譜段范圍，Ag濾光片較為合適。1.不同的靶材適合測(cè)試不同的原子序數(shù)的元素，靶材選擇適當(dāng)，有助于提高分析靈敏度和分析效率。一般性原則，高原子系素靶材。2.若測(cè)定多個(gè)元素，通常只需設(shè)定兩到三種電流和電壓，分別滿(mǎn)足輕、重元素的測(cè)定即可。 擇1.對(duì)于非金屬成分基質(zhì)的樣品，或者有足夠建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的系列同材質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，一般選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法；如待測(cè)樣品為金屬成分基質(zhì)，有一致或接近的基質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(一個(gè)或多個(gè)),金屬樣品也可選擇校準(zhǔn)曲線(xiàn)方法。—主要特征譜線(xiàn)，這些譜線(xiàn)在各自譜線(xiàn)系列中是強(qiáng)線(xiàn)。過(guò)對(duì)結(jié)果的譜線(xiàn)干擾校正予以解決。1.可查核資料了解可能的干擾元素，盡量避免樣品中基體元素譜線(xiàn)干擾；2.采用含有干擾物的空白樣品進(jìn)行測(cè)試，獲得各譜線(xiàn)干擾情況；3.可根據(jù)其他濕化學(xué)定量檢測(cè)方法如ICP-OES,AAS的測(cè)試結(jié)果，或帶證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)試結(jié)果，來(lái)識(shí)別目標(biāo)譜線(xiàn)是否存在干擾。 第31頁(yè)共80頁(yè)1.測(cè)試時(shí)間的延長(zhǎng)，可以降低檢出限。采用不同的測(cè)量時(shí)按檢出限評(píng)估的方式進(jìn)行。一數(shù)或盡量選擇大的光斑的面積。1.光斑小時(shí)需要的試樣面積也比較小，也可以避免測(cè)試區(qū)域周?chē)母蓴_，但強(qiáng)度減少降低了靈敏度，方法的檢出限，精密2.光斑大時(shí)射線(xiàn)能量更強(qiáng)，但需要更多的樣品面積或樣品一流量比例等?；鹧娣N類(lèi)選擇是影響原子化效率主要因宜選笑氣-乙炔火焰，提高火焰溫度。1.分析波長(zhǎng)及狹縫寬度：一般按照推薦波長(zhǎng)，濃度很高的待測(cè)元素，可以選擇次靈敏線(xiàn)作為分析波長(zhǎng)。一般可2.燃燒頭旋轉(zhuǎn)角度：一般是0度(燃燒頭和觀(guān)察者垂直90度),轉(zhuǎn)角度對(duì)結(jié)果影響比較大。觀(guān)察高度：一般4.不同燈有不同的使用燈電流范圍，一般在最大工作電流的40%～60%附近，長(zhǎng)期使用最大工作電流，5.溶液提升速率：一般用(3～6)mL/min,按照吸光度最大原升速率。6.不同火焰類(lèi)型有各自適用的燃燒頭，不能混用。常與氫化物發(fā)生器聯(lián)用物元素。主要因數(shù)。1.分析波長(zhǎng)及狹縫寬度、燈電流和電壓等條件選擇同火焰法。和高溫凈化四個(gè)階段，干燥一般100℃,對(duì)于10~100uL的樣，可繪制吸光度和灰化溫度的關(guān)系曲線(xiàn)，找到最最佳原子化溫度。種選擇：無(wú)機(jī)改進(jìn)劑、有機(jī)改進(jìn)劑、活性氣體改進(jìn)劑。一般選擇標(biāo)品基體比較復(fù)雜時(shí)選用標(biāo)準(zhǔn)加入法。第32頁(yè)共80頁(yè)原子吸收光譜譜線(xiàn)相對(duì)簡(jiǎn)單，通常干擾主對(duì)干擾進(jìn)行校正。1.物理干擾：考慮電離干擾(降低火焰溫度或加入消電離劑消除)、背景干擾(可采用氘燈校正背景，塞曼效應(yīng)校正背景消除干擾)。2.化學(xué)干擾：改變火焰溫度、加入釋放劑、加入保護(hù)絡(luò)合劑、 常用工作條件包括：負(fù)高壓、燈電流、原流及濃度等。一般負(fù)高壓和燈電流、載氣流量、屏蔽氣流量為對(duì)結(jié)果影響主要因素。1.負(fù)高壓：一般220V~300V,負(fù)高壓越大，熒光信號(hào)越強(qiáng)，但2.燈電流選擇類(lèi)似原子吸收光譜法，生自吸現(xiàn)象。3.原子化器溫度及觀(guān)察高度：原子化器溫度即石英爐芯內(nèi)溫度(預(yù)加熱溫度),一般200℃,觀(guān)察高度一般最佳高度8mm~4.載氣流量、屏蔽氣流量：過(guò)大或小的流量都穩(wěn)定或熒光信號(hào)弱，一般可以在300～800mL/min優(yōu)化。5.樣品流速：一般1mL/min左右。6.還原劑和載流及濃度：一般低濃度的鹽酸或硝酸，濃度越大，空白越高。一般熒光強(qiáng)度隨還原劑濃度增大而增大，但當(dāng)還原劑的濃度過(guò)大時(shí)，會(huì)產(chǎn)生過(guò)多的氫氣，稀釋了原子化器中測(cè)定原子的瞬時(shí)濃度，造成氣相干擾，信號(hào)下降。7.測(cè)定汞可以選擇冷原子熒光法，無(wú)須點(diǎn)火。 分離，消除樣品基體干擾，但仍存在一定的液相干擾和氣相干擾非光譜干擾。1.液相干擾可采用增加氫化反應(yīng)酸度、加入絡(luò)合劑掩蔽干擾離2.氣相干擾優(yōu)化原子化條件、消除傳輸干擾等方式消 一般選擇峰面積積分，也可以選擇峰高積分。 第33頁(yè)共80頁(yè)理(適用于HPLC、測(cè)定方法)1.固體樣品采用簡(jiǎn)單工具剪碎或各種粉碎儀器粉碎。2.液體樣品攪拌均勻。1.一般來(lái)說(shuō)，采用溶劑抽提的方式提取樣品中的難揮發(fā)性待測(cè)有機(jī)物時(shí)，樣品尺寸越小，越有利于增大樣品與提取溶劑的2.對(duì)于采用固態(tài)樣品直接頂空-氣相色譜或固態(tài)樣品寸并非越小越好，因?yàn)榇龣z測(cè)的揮發(fā)性有機(jī)物可能在樣品破延長(zhǎng)、粒徑繼續(xù)減小、比表面積繼續(xù)增大，仍然有可能因散格的試驗(yàn)確定。制備處理。4.注意避免樣品交叉污染，如使用粉碎機(jī)時(shí)應(yīng)注意樣品之間的 提取(溶劑提取，超聲提取)和凈化(固相萃取凈化)1.根據(jù)目標(biāo)物的化學(xué)特性(如：分離物質(zhì)的極性)和樣品基質(zhì)良好的溶解性能，對(duì)基體材料有好的滲透性能或者能完全溶解基體材料；再通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較確定提取溶劑的種類(lèi)和用量。2.一般考慮采用超聲提取方式，通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較確定提取時(shí)間、化和平衡操作，通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較確定凈化條件(包括上樣條件、4.當(dāng)樣品溶劑體積過(guò)大或靈敏度不夠，則需倍數(shù)。 第34頁(yè)共80頁(yè)1.色譜柱：C18色譜柱是最常用的色譜柱，一有保留或保留極強(qiáng)，則可以再考慮選用其他色譜柱。和緩沖鹽及其不同pH值等，對(duì)于極性強(qiáng)而如果等度洗脫無(wú)法獲得滿(mǎn)足要求的靈敏度和分離度(與雜質(zhì)之間的)時(shí)，則應(yīng)采用梯度洗脫；對(duì)于多個(gè)目標(biāo)分析物，一般采用梯度洗脫。4.儀器工作條件：對(duì)于常規(guī)液相色譜，流速一般為1.0mL/min,柱溫多設(shè)為30℃或35℃,進(jìn)樣量為10μL-2以通過(guò)優(yōu)化柱溫來(lái)微調(diào)目標(biāo)分析物的分離度；可以通過(guò)調(diào)整進(jìn)樣量來(lái)獲得所需的靈敏度。 的最大紫外吸收波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)，當(dāng)最大紫外吸收波長(zhǎng)有干擾時(shí)，在滿(mǎn)足檢測(cè)靈敏度的前提下，可以選擇其他紫外吸收波長(zhǎng)。 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC-MS)2.流動(dòng)相：有機(jī)相常用甲醇或乙腈；水相種類(lèi)常用水、0.1%甲酸水、0.05%氨水，且在質(zhì)譜正模式下多采用0.1%甲酸水，在質(zhì)譜負(fù)模式下多采用水或0.05%氨水，不鹽等不揮發(fā)性酸和鹽，不能使用離子對(duì)試劑。3.洗脫程序：同HPLC。但質(zhì)譜的采集檢測(cè)原理與HPLC不同，度問(wèn)題。 第35頁(yè)共80頁(yè)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC-MS)1.大多數(shù)化合物可以采用ESI離子源。能等參數(shù)。3.不同品牌儀器的質(zhì)譜電壓等參數(shù)不同，使用不同品牌儀器時(shí)需要重新優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)。 氣相色譜法(GC)初步試驗(yàn)，一般可先選用30米柱長(zhǎng)、試1.根據(jù)目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)特性，選擇合適的色譜柱(固定相極間越長(zhǎng)。3.根據(jù)目標(biāo)化合物的數(shù)量和基體材料的復(fù)雜程度，選擇合適的—一般可先將分流比設(shè)置為50:1,一般進(jìn)行初試時(shí)，可將起始溫度設(shè)置為45℃,溫，最高溫度升至高于目標(biāo)物沸點(diǎn)20℃以上。必要時(shí)對(duì)升溫程序進(jìn)行再優(yōu)化。 常用檢測(cè)器有FID、ECD、NPD檢測(cè)器化合物。1.一般來(lái)說(shuō)，檢測(cè)器溫度應(yīng)不低于柱溫程序升溫的最高溫2.FID檢測(cè)器的靈敏度與氫氣、空氣、氮?dú)馊咧g的流量比例有關(guān)。一般來(lái)說(shuō)，三者之間流量比應(yīng)接近于1:可設(shè)置為氫氣30-40ml/min、空氣300-400ml/min、氮?dú)?0-40ml/min,然后在此基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化。3.ECD檢測(cè)器在使用時(shí)必須嚴(yán)格保證系統(tǒng)中沒(méi)有氧氣進(jìn)入，否則會(huì)嚴(yán)重影響靈敏度，而且會(huì)損壞檢測(cè)器。使用時(shí)的溫度不應(yīng)低于250℃。4.NPD檢測(cè)器的載氣必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格脫水。使用時(shí)盡量避免樣品中含有二氯甲烷等氯代烴類(lèi)溶劑，若必須使用時(shí)，應(yīng)在溶劑峰通過(guò)檢測(cè)器時(shí)關(guān)閉氫氣流量和銣珠電流。 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法初試時(shí)可先選用DB-5MS或相當(dāng)類(lèi)型的色譜柱，一般可用30米柱長(zhǎng)、0.25mm內(nèi)選擇滿(mǎn)足質(zhì)譜使用要求的色譜柱，通常色譜柱代樣 一般可先將分流比設(shè)置為50:1進(jìn)行初試。1.一般進(jìn)行初試時(shí)，可將起始溫度設(shè)置為45℃,以10℃/min程序升溫，最高溫度升至高于目標(biāo)物沸點(diǎn)20升溫程序進(jìn)行再優(yōu)化。染—第36頁(yè)共80頁(yè)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法四級(jí)桿質(zhì)譜根據(jù)目標(biāo)化合物的分子量選擇質(zhì)量掃描范圍， 紫外-可見(jiàn)分光光度法(UV-VIS)擇應(yīng)。顯色反應(yīng)的一般應(yīng)：1.靈敏度高：選擇摩爾吸收系數(shù)大(10?以上)的顯色反應(yīng)，避免共存組分的干擾；2.選擇性好：顯色劑只與被測(cè)組分反應(yīng)；3.有色物的組成固定；4.有色物穩(wěn)定性高；5.顯色過(guò)程易于控制，而且有色化合物和顯色劑之間的顏色差 響及消除方法當(dāng)溶液中的其他組分影響被測(cè)組分吸光身有顏色，干擾物質(zhì)與試劑生成有色物質(zhì)等。消除干擾常用的方法：控制酸度、加入與蔽劑、分離干擾物質(zhì)等。1.控制酸度使得待測(cè)物質(zhì)顯色，而干擾物質(zhì)不生成有色化合物，掩蔽劑與干擾組分的反應(yīng)產(chǎn)物不干擾待測(cè)組分的測(cè)定。 將不同波長(zhǎng)的光依次通過(guò)某固定濃度和厚度的有色溶液，測(cè)量對(duì)應(yīng)的吸光度，以圖，可得吸收曲線(xiàn)A~λ。一般選擇被測(cè)物質(zhì)最大吸收波長(zhǎng)λmax。λmax有干擾時(shí)，應(yīng)考慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長(zhǎng)(應(yīng)選曲線(xiàn)較平坦處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng))一測(cè)量范圍不同厚度的吸收池來(lái)調(diào)整。 增加狹縫寬度一般可以增加入射光的強(qiáng)度，吸的狹縫寬度，入射光的單色性變差，產(chǎn)生干擾。一參比溶液的選擇原則應(yīng)選擇能抵消樣品比，當(dāng)試樣和試劑都沒(méi)有吸收，可用溶劑空白作參比。如果試樣本身有顏色干擾，而試劑無(wú)吸收，可采用不加顯色試劑的一第37頁(yè)共80頁(yè)