義翹講堂《成藥性抗體開發(fā)：從抗原設(shè)計(jì)到功能活性評(píng)價(jià)的全流程解析》

成藥性抗體開發(fā)：從抗原設(shè)計(jì)到功能活性評(píng)價(jià)的全流程解析任為抗體開發(fā)首席科學(xué)家北京義翹神州科技股份有限公司功能活性親和力檢測(cè)表位分析生物安全檢測(cè)高通量/大規(guī)模生產(chǎn)穩(wěn)定株開發(fā)人源化改造親和力成熟蛋白免疫RNA免疫DNA免疫細(xì)胞免疫雜交瘤技術(shù)噬菌體技術(shù)流式分選技術(shù)Beacon?技術(shù)抗原制備及免疫抗體制備及篩選抗體工程化及生產(chǎn)抗體功能評(píng)價(jià)綜合性抗體開發(fā)平臺(tái)抗原制備和動(dòng)物免疫01HEK293/CHO膜蛋白InsectE.coli8,000+高質(zhì)量現(xiàn)貨蛋白85%真核細(xì)胞表達(dá)100%自主研發(fā)2,000多種生物活性檢測(cè)和分析方法CRO定制服務(wù)數(shù)量>15,000個(gè)覆蓋常見藥物靶點(diǎn)>80%好的抗原是成功的一半重組蛋白類免疫原高純度、高活性、高親和力重組蛋白，支持高質(zhì)量抗體的研發(fā)親和力HumanTROP-2(Cat:10428-H08H)KD:1.64nM活性EC50:1.6-4.8ng/mLHumanGSK3β(Cat:10044-H07B)SEC-HPLC純度>90%Claudin6(跨膜蛋白)KD:0.536nMEC50:5.4ng/mLCynoTROP-2(Cat:90893-C08H)親和力活性親和力活性EC50:1.3-3.9ng/mLKD:1.53nMEC50:0.8ng/mLMouseTROP-2Claudin18(跨膜蛋白)活性純度活性EC50:0.15-0.35μg/mL活性重組蛋白類免疫原多肽抗原制備特定表位抗體親水性、溶劑可及性免疫原性多肽二級(jí)結(jié)構(gòu)、柔韌性AlphaFold結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)多肽免疫成功開發(fā)特異性磷酸化抗體開發(fā)多肽設(shè)計(jì)軟件，有效提高抗體開發(fā)成功率多肽類抗原免疫效價(jià)好，更易獲得與天然構(gòu)象蛋白結(jié)合的抗體mRNA免疫支持膜蛋白抗體開發(fā)序列設(shè)計(jì)mRNA合成LNP包封動(dòng)物免疫抗體篩選僅需提供蛋白序列；RNA-LNP方式遞送，免疫應(yīng)答效果好;整體開發(fā)周期短、成本優(yōu)勢(shì)；適用于各類型單抗篩選平臺(tái)。mRNA-LNP免疫案例——GPRC5D靶點(diǎn)雜交瘤融合篩選獲得38株陽性克隆，其中含25株流式優(yōu)勢(shì)抗體mRNA免疫17000+不同類型抗原的免疫經(jīng)驗(yàn)佐劑儲(chǔ)備庫弗氏佐劑、鋁佐劑、MF59、QS21Titermax、Mn、MPL

多種屬及品系可選小鼠（BALB/c，C57BL/6,SJL）【兔、羊駝、山羊、雞等】動(dòng)物數(shù)量根據(jù)項(xiàng)目難度綜合評(píng)估、靈活選擇免疫劑量根據(jù)免疫原性、抗原類型、親和力要求調(diào)整免疫途徑皮內(nèi)、皮下、腹腔、靜脈、淋巴結(jié)、脾內(nèi)免疫周期滿足不同時(shí)效項(xiàng)目要求常規(guī)（7~12周）、快速（3周、5周）免疫方案設(shè)計(jì)動(dòng)物免疫抗體開發(fā)和技術(shù)優(yōu)化02雜交瘤噬菌體展示文庫B細(xì)胞流式高質(zhì)量的候選抗體：數(shù)百個(gè)苗頭分子親和力達(dá)到nM-pM水平適用于不同應(yīng)用場景成藥性抗體制備技術(shù)平臺(tái)B細(xì)胞Beacon?抗體制備技術(shù)平臺(tái)介紹高效的抗體開發(fā)技術(shù)平臺(tái)：最全面的技術(shù)路線多種早期介入篩選方案分步的抗體開發(fā)技術(shù)優(yōu)化YYYYYYYYYYYYYYYYYSplenocytesMyelomaHybridomacellsScreeningAmplification&purification雜交瘤抗體開發(fā)技術(shù)技術(shù)路線成熟，成本優(yōu)勢(shì)；電融合技術(shù)大幅提升融合效率；上清介入多功能篩選，提高成功率；自主開發(fā)鼠單抗數(shù)量>20,000種700+技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)雜交瘤技術(shù)活性蛋白免疫細(xì)胞活性等多功能介入篩選13株亞克隆細(xì)胞穩(wěn)定株102株主克隆ELISA競爭抑制陽性(抽檢20株，6株細(xì)胞活性陽性）重組蛋白（細(xì)胞生物活性檢測(cè)EC502~8ng/mL）15株亞克隆ELISA競爭陽性40株細(xì)胞2~3輪有限稀釋835孔主克隆ELISA結(jié)合陽性融合后細(xì)胞接種42塊96孔細(xì)胞培養(yǎng)板10只小鼠高效價(jià)，挑選1只進(jìn)行融合Balb/c、C57BL/6小鼠各免疫5只抗體親和力達(dá)到E-10級(jí)別IL15中和抗體開發(fā)案例雜交瘤技術(shù)13株抗體均可抑制細(xì)胞，其中11株優(yōu)于對(duì)照抗體抗體親和E-10~E-11MKD(M)kon(1/Ms)kdis(1/s)2.29E-103.91E+058.94E-05Response(nm)Response(nm)MM03HMM11HMM12HResponse(nm)Positivecontrol雜交瘤技術(shù)IL15中和抗體開發(fā)案例KD(M)kon(1/Ms)kdis(1/s)2.47E-101.97E+054.88E-05KD(M)kon(1/Ms)kdis(1/s)8.78E-114.15E+053.64E-05雜交瘤融合&主克隆篩選陽性克隆有限稀釋提基因質(zhì)控交付：細(xì)胞株、抗體、序列亞克隆篩選表達(dá)純化生產(chǎn)純化周期節(jié)省20-30天20-30天14天7天7天新路線傳統(tǒng)路線技術(shù)路線對(duì)比新一代雜交瘤技術(shù)ID主克隆檢測(cè)亞克隆檢測(cè)主克隆提基因結(jié)果提基因與主克隆檢測(cè)對(duì)比1陽性-復(fù)測(cè)亞型為mIgM放棄mIgG1-陰性一致mIgM-陽性2非競爭，弱IgM,IgG弱交叉競爭非競爭，IgG弱交叉一致3非競爭，弱IgM,IgG弱交叉競爭非競爭，IgG弱交叉一致4非競爭，IgG弱交叉非競爭，IgG交叉非競爭，IgG弱交叉一致5非競爭，IgG弱交叉非競爭，IgG交叉非競爭，IgG弱交叉一致6非競爭，IgG交叉IgG無交叉非競爭，IgG弱交叉一致7非競爭，IgG弱交叉非競爭，IgG交叉非競爭，IgG弱交叉一致8ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致9ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致10ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致11ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致12ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致13ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致14ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致15ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致16ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致17ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陽性，流式陽性一致18非競爭，IgG弱交叉非競爭，IgG交叉ELISA陰性不一致19非競爭，IgG弱交叉二亞轉(zhuǎn)陰ELISA陰性不一致20ELISA陽性，流式陽性ELISA陽性，流式陰性ELISA陰性不一致21非競爭一亞轉(zhuǎn)陰ELISA陰性不一致21株有問題細(xì)胞，17株提基因結(jié)果與主克隆一致，成功率80%主克隆提基因驗(yàn)證案例新一代雜交瘤技術(shù)周期更短直接交付序列通量更高成功率更高比原有雜交瘤周期節(jié)省20-30天提基因替代有限稀釋，一次提取上百個(gè)克隆省去雜交瘤篩選后再提基因步驟，避免基因傳代丟失、污染等風(fēng)險(xiǎn)挽救亞克隆轉(zhuǎn)陰或與主克隆結(jié)果不一致的細(xì)胞克隆新一代雜交瘤技術(shù)平臺(tái)優(yōu)勢(shì)更好面向工業(yè)客戶藥篩客戶新一代雜交瘤技術(shù)篩選方法多樣：固相、液相、細(xì)胞篩選；篩選策略靈活：差減、競爭、交叉、夾心；克隆上清介入評(píng)價(jià)：流式、ELISA、交叉。3,000+株單抗產(chǎn)品；支持多種應(yīng)用：FACS、WB、IHC、IF抗體；保證高親和力、特異性抗體；新冠中和抗體親和力達(dá)E-12M，銷售總量＞800mg。建庫淘篩產(chǎn)品服務(wù)豐富的CRO服務(wù)經(jīng)驗(yàn)：500+服務(wù)；5~6周完成建庫、篩選和分子構(gòu)建；提供多種抗體服務(wù)：抗獨(dú)特型抗體、中和抗體、納米抗體、

抗體親和力成熟。天然庫和免疫庫，多種免疫方案；多種屬：小鼠、兔子、羊駝、人；免疫庫的庫容高達(dá)109以上，序列插入正確率高達(dá)100%。噬菌體展示技術(shù)噬菌體展示技術(shù)篩選CAR-T靶點(diǎn)案例與天然構(gòu)象結(jié)合最好用蛋白+細(xì)胞免疫，噬菌體平臺(tái)更適合scFv(CAR)篩選Nalm-6cellsJurkatcellsHEK293cellsscFv-1scFv-2scFv-3部分scFv鑒定結(jié)果噬菌體展示技術(shù)蛋白+細(xì)胞免疫細(xì)胞淘洗ELSIA陽性127株Nalm-6強(qiáng)陽性48株與293過表達(dá)和Nalm-6均結(jié)合，與jurkat不結(jié)合篩選要點(diǎn)CH2CH3CH2CH3FR1FR2FR3FR4CDR1CDR2CDR3VHH

效價(jià)達(dá)到128K，陽性/blank>2倍

庫容達(dá)到109

插入率100%，測(cè)序正確率>90%噬菌體介入檢測(cè)ELISA、種屬交叉、FACS

至少交付20+獨(dú)特序列

親和力主要在10-8~10-9

cell-free表達(dá)，5天得到VHHBloodCollectionRT-PCRConstructalibraryBiopanningElutionExpressionSDSActivityAffinityVHHELISA納米抗體開發(fā)平臺(tái)噬菌體展示技術(shù)PD-L1納米抗體篩選親和力檢測(cè)

SampleIDIC50(μg/mL）EC50(μg/mL）Benchmark10.144260.38Benchmark20.14190.33Nh3940.083440.23Nh4840.107230.51SampleIDKD(M)Kon(1/MS)Koff(1/S)Benchmark16.60E-096.96E+044.59E-04Benchmark26.37E-101.82E+051.16E-04Nh3941.44E-091.01E+051.45E-04Nh4843.42E-091.75E+055.98E-04Benchmark1Benchmark2Nh394Nh484噬菌體展示技術(shù)活性檢測(cè)

競爭活性

細(xì)胞活性單B細(xì)胞技術(shù)路線種屬適用范圍廣天然抗體對(duì)抗體多樣性高開發(fā)周期短抗體親和力高操作要求高

依賴大型設(shè)備VHDJHCY1VKJKCK單個(gè)B細(xì)胞技術(shù)Beacon?BDFACSAriaIIISplenocytes&PBMCSingleBCellSortingRT-PCR&InsertVectorExpressionFunctionAssayBCellCulture流式分選單B細(xì)胞技術(shù)VH/VL配對(duì)成功率達(dá)業(yè)內(nèi)領(lǐng)先水平兔單B細(xì)胞培養(yǎng)陽性率高天然抗體序列抗體多樣性好可進(jìn)行全人源抗體篩選Starkie,D.O.,etal.PLoSONE,2016,11(3):e0152282.Wilson,J.R.,Virology,2014,458-459:114–124.SeeberS.,etal.PLoSONE,2014,9(2):e86184.Chen,Y.,etal.EmergingMicrobes&Infections,2021,10(1),1390–1403.流式分選單B細(xì)胞技術(shù)BCellLysis成藥性抗體開發(fā)案例流式分選單B細(xì)胞技術(shù)靶點(diǎn)蛋白與多個(gè)因子相互作用并參與三個(gè)不同信號(hào)通路調(diào)控，篩選難度大篩選目標(biāo)通路1通路2通路3靶點(diǎn)蛋白靶點(diǎn)蛋白靶點(diǎn)蛋白因子A因子C因子D因子E因子F因子B人猴交叉三個(gè)信號(hào)通路上同時(shí)阻斷六個(gè)細(xì)胞因子與靶點(diǎn)蛋白結(jié)合的抗體阻斷活性好于對(duì)照藥物24技術(shù)路線免疫原制備對(duì)照抗體表達(dá)純化、細(xì)胞系制備、細(xì)胞活性方法建立血清效價(jià)檢測(cè)（ELISA、FACS、競爭活性）流式單B分選分選階段：熒光標(biāo)記抗原結(jié)合；培養(yǎng)上清：抗原/細(xì)胞結(jié)合、種屬交叉檢測(cè)質(zhì)控階段：抗原結(jié)合、細(xì)胞結(jié)合、細(xì)胞活性、親和力檢測(cè)兔子免疫

常規(guī)免疫淋巴結(jié)鋁佐劑人鼠猴混合免疫人鼠交叉免疫人鼠猴交叉長周期免疫血清效價(jià)>62.5萬√√√√√√兔子免疫IgGFSC抗原抗原IgMSSC同時(shí)開展>6種免疫方案，有效增加抗體的多樣性多只動(dòng)物效價(jià)良好，可滿足分選要求分選陽性細(xì)胞比例流式分選單B細(xì)胞技術(shù)成藥性抗體開發(fā)案例免疫原再刺激注：紅色箭頭指陽性對(duì)照抗體免疫原再刺激親和力檢測(cè)Ligandka(1/Ms)kd(1/s)KD(M)Chi2(RU2)U-value對(duì)照抗體9.631E+055.337E-055.542E-110.06991R04018.083E+051.022E-041.265E-100.1211R03897.810E+057.231E-059.259E-110.08241R03711.095E+065.356E-054.893E-110.161R03668.800E+053.043E-053.458E-110.05272R03221.77E+069.31E-055.27E-110.05251對(duì)照抗體R0401R0389R0371R0366R0322流式分選單B細(xì)胞技術(shù)與人細(xì)胞結(jié)合與猴細(xì)胞結(jié)合成藥性抗體開發(fā)案例注：紅色箭頭指陽性對(duì)照抗體流式分選單B細(xì)胞技術(shù)成藥性抗體開發(fā)案例SampleIC50(ng/mL)R0322/R037121R036616R038939R040139對(duì)照抗體

24SampleIC50(ng/mL)R0322/R037154R036619R038981R040174對(duì)照抗體

37SampleIC50(ng/mL)R04151106R0411562R0408/R0389157R0366186對(duì)照抗體

459成功篩選到在三個(gè)信號(hào)通路上活性均不低于對(duì)照抗體、且親和力好的單抗分子SampleIC50(ng/mL)R032230R037145R036624R038958R040173對(duì)照抗體

27SampleIC50(ng/mL)R03229R037124R036612R038928R040153對(duì)照抗體

18SampleIC50(ng/mL)R032212R037131R036626R038966R040168對(duì)照抗體

21信號(hào)通路1因子A與靶蛋白的阻斷活性信號(hào)通路1因子B與靶蛋白的阻斷活性信號(hào)通路2因子C與靶蛋白的阻斷活性信號(hào)通路3因子D與靶蛋白的阻斷活性信號(hào)通路3因子E與靶蛋白的阻斷活性信號(hào)通路3因子F與靶蛋白的阻斷活性27Beacon?光導(dǎo)單B細(xì)胞克隆技術(shù)ImmunizationandASCEnrichmentNanopenLoadOEPGravityIn-ChannelFluorescent”Bloom”AssayOEPNanopenExportVH/VLrecovery,cloning,expression30-60minutes30-60minutes3-4minutesperNanopenImportExport天然抗體序列；抗體多樣性好；實(shí)驗(yàn)周期短，節(jié)省研發(fā)時(shí)間；高效篩選，1天內(nèi)可完成高達(dá)5種功能檢測(cè)；非競爭競爭非競爭競爭通過技術(shù)優(yōu)化，有效提高beacon?競爭檢測(cè)靈敏度競爭方法優(yōu)化Beacon?光導(dǎo)單B細(xì)胞克隆技術(shù)編號(hào)人蛋白猴蛋白EC50(ng/mL)M010135.1334.39M0121154.33110.37M01667.326.51NBL-02028.506.08LBL-01920.107.73編號(hào)IC50(ng/mL)M0101357.14M01211644.20M016667.42NBL-020169.44TNFR2成藥性抗體篩選1.克隆M0166結(jié)合活性和競爭活性均好于對(duì)照抗體Beacon?光導(dǎo)單B細(xì)胞克隆技術(shù)與人TNFR2結(jié)合競爭活性與猴TNFR2結(jié)合編號(hào)細(xì)胞活性ED50(μg/mL)ADCC活性ED50(ng/mL)M01011.321.53M01211.113.26M01660.73.96NBL-0201.25.84LBL-0191.319.752.克隆M0166細(xì)胞活性和ADCC均好于對(duì)照抗體編號(hào)蛋白KD(M)kon(1/Ms)kdis(1/s)M0101人蛋白3.68E-092.70E+059.93E-04M01216.84E-092.70E+051.85E-03M01665.35E-091.74E+059.33E-04NBL-0207.73E-092.69E+052.08E-03M0101猴蛋白3.18E-093.90E+051.24E-03M01216.39E-094.30E+052.75E-03M01663.75E-092.79E+051.05E-03NBL-0205.22E-094.39E+052.30E-033.克隆M0166親和力檢測(cè)結(jié)果Beacon?光導(dǎo)單B細(xì)胞克隆技術(shù)細(xì)胞活性ADCC活性GPRC5D-NanoDisc蛋白篩選抗體GPRC5D結(jié)構(gòu)VLP平臺(tái)Nanodisc平臺(tái)Beacon?光導(dǎo)單B細(xì)胞克隆技術(shù)VLP平臺(tái)Nanodisc平臺(tái)EC50:3-10ng/mLEC50:20.6ng/mLEC50(ng/mL)M0165M0173對(duì)照抗體GPRC5D-VLP1.682.736.88GPRC5D-Disc2.233.535.33細(xì)胞結(jié)合1.5472.1682.835ADCC0.550.831.51.在與GPRC5D-VLP和GPRC5D-Disc的結(jié)合檢測(cè)上，M0165和M0173結(jié)合活性均優(yōu)于對(duì)照抗體2.M0165和M0173細(xì)胞結(jié)合和ADCC殺傷活性均優(yōu)于對(duì)照抗體IDkon(1/Ms)kdis(1/s)KD(M)對(duì)照抗體4.91E+055.24E-041.07E-09M01651.98E+062.85E-041.44E-10R01734.03E+054.15E-041.03E-093.M0173親和力與對(duì)照抗體親和力水平相當(dāng)，M0165親和力比對(duì)照抗體約高10倍細(xì)胞結(jié)合ADCCBeacon?光導(dǎo)單B細(xì)胞克隆技術(shù)GPRC5D-VLP結(jié)合GPRC5D-Disc結(jié)合生物活性(EC50)親和力檢測(cè)抗體生產(chǎn)和工程化改造03優(yōu)勢(shì)：方法成熟，臨床療效良好問題：仍有親和力降低或潛在的免疫原性抗體人源化方法

–CDR移植CDR移植FR替換核心氨基酸保留CDR親本抗體FR人源抗體FR核心氨基酸抗體人源化TargetIDConc.(mg/L)HumannessSars-Cov2-SpikeMM57-C1-mAb249.5/MM57-C2-chAb141/MM57-436597%MM57-624897.4%MM57-1316596.10%MM57-1419097%MM57-1519897.4%MM57-1810097%MM57-2510697.8%MM57-3017397.8%MM57-3418497.8%MM57-3826797.8%mAb_humanized_VLmAb_humanized_VH抗體人源化鼠抗人源化案例表達(dá)量和同源性MM57-C1-mAb:親本鼠抗；MM57-C2-chAb:人鼠嵌合抗體。mAb_VLmAb_VHTargetIDInhibition(%)IC50(μg/ml)(Pseudovirus)Sars-Cov2-SpikeMM57-C1-mAb87%0.548MM57-C2-chAb85%0.341MM57-487%0.268MM57-685%0.685MM57-1381%<0.1MM57-1480%0.41MM57-1581%0.375MM57-1876%0.148MM57-2572%0.458MM57-3074%0.784MM57-3474%0.307MM57-3875%0.438鼠抗人源化案例抗體人源化中和活性檢測(cè)MM57-C1-mAb:親本鼠抗；MM57-C2-chAb:人鼠嵌合抗體。TargetIDKD(M)Kon(1/Ms)Koff(1/s)Sars-Cov2-SpikeMM57-C1-mAb1.74E-103.30E+055.74E-05MM57-C2-chAb2.51E-112.79E+056.99E-06MM57-47.52E-122.01E+051.51E-06MM57-6<1.0E-121.91E+05<1.0E-07MM57-13<1.0E-121.91E+05<1.0E-07MM57-14<1.0E-121.89E+05<1.0E-07MM57-154.31E-112.16E+059.30E-06MM57-182.83E-111.73E+054.89E-06MM57-254.85E-112.17E+051.05E-05MM57-301.38E-101.92E+052.65E-05MM57-349.54E-112.07E+051.98E-05MM57-388.53E-111.98E+051.69E-05抗體人源化鼠抗人源化案例親和力檢測(cè)MM57-C1-mAb親本鼠抗MM57-C2-chAb嵌合抗體MM57-4MM57-6MM57-13MM57-14MM57-15MM57-18MM57-25MM57-34MM57-38MM57-30納米抗體人源化案例ELISAEC50FACSEC50抗體人源化結(jié)合活性和細(xì)胞活性檢測(cè)Ligandka

(1/Ms)kd

(1/s)KD

(M)SJ-2-14.835E+058.440E-041.746E-09SSJ8-H-24.043E+058.550E-042.114E-09SSJ8-H-33.900E+059.460E-042.426E-09SSJ8-H-84.368E+058.290E-041.898E-09SSJ8-H-94.255E+058.140E-041.913E-09SSJ8-H-104.206E+058.440E-042.006E-09SSJ8-H-154.483E+058.540E-041.905E-09SSJ8-H-164.641E+058.820E-041.901E-09SJ-2-1SSJ8-H-2SSJ8-H-3SSJ8-H-8SSJ8-H-9SSJ8-H-10SSJ8-H-15SSJ8-H-16抗體人源化親和力檢測(cè)納米抗體人源化案例納米抗體親和力成熟······GSTSSEDAMG······AISWTHNMEPYYAD······YSSPLIEYGY······VHH“l(fā)ying”ratherthan“onto”theepitopeVHHresidueswithin5AfromtheantigenarehighlightedResiduesthatareclosetotheantigenbutnotyetestablishedinteractionshavethepotentialtoincreasebindingaffinity.要求：親和力提升5~10倍抗體親和力成熟CDR-H126

G27

S28T29S30S31E32D33A34M35G-

PTAINDRKEQASFNHGWKQ-AE----ACDR-H250A51I52S52AW52BT53H54N55M56E57P58Y59Y60A61D---INDHYSPTAEQEQFLNHYQ----S

-CDR-H394Y95S96S97P98L99I100E100AY101G102Y---ARKESTDEAVGQ----······GSTSSEDAMG······AISWTHNMEPYYAD······YSSPLIEYGY

······組合突變建庫抗體親和力成熟親和力檢測(cè)結(jié)果IDKD(M)byBLI(HEK293)AffinityincreaseSAF51-N0631.22E-099.7foldSAF51-N0832.00E-095.9foldSAF51-N0532.11E-095.6foldSAF51-N0942.46E-094.8foldSAF51-C22.52E-094.7foldSAF51-N0932.61E-094.5foldSAF51-N0452.98E-094.0foldSAF51-N0883.29E-093.6foldSAF51-N2394.01E-092.9foldSAF51-N0234.54E-092.6foldSAF51-N2694.50E-092.6foldWT1.18E-08-抗體親和力成熟哺乳動(dòng)物細(xì)胞高通量瞬轉(zhuǎn)表達(dá)抗體抗體序列引物載體構(gòu)建293/CHO瞬時(shí)表達(dá)抗體純度>90%放大生產(chǎn)新冠康復(fù)病人B細(xì)胞測(cè)序表達(dá)>1000抗體14株中和抗體結(jié)構(gòu)解析動(dòng)物實(shí)驗(yàn)活性驗(yàn)證GeniRobot“全自動(dòng)分子構(gòu)建平臺(tái)”親和純化中和活性驗(yàn)證放大生產(chǎn)自主研發(fā)的無血清培養(yǎng)基高通量：每周>1000個(gè)抗體/項(xiàng)目的生產(chǎn)覆蓋不同規(guī)模：0.1mg-千克級(jí)抗體生產(chǎn)高通量瞬轉(zhuǎn)表達(dá)抗體構(gòu)建和表達(dá)技術(shù)優(yōu)化線性表達(dá)框制備96孔板培養(yǎng)抗體表達(dá)上清活性檢測(cè)不需要質(zhì)粒構(gòu)建、測(cè)序、質(zhì)粒提取可保持所表達(dá)抗體的功能活性2天快速完成線性框制備工作高通量的抗體表達(dá)初篩成功合成細(xì)胞無法表達(dá)的抗體片段活性與細(xì)胞表達(dá)相當(dāng)3個(gè)小時(shí)完成VHH&scFv合成高通量的抗體表達(dá)初篩抗體構(gòu)建和表達(dá)線性表達(dá)框制備抗體無細(xì)胞表達(dá)平臺(tái)Top3minipool1-2萬個(gè)cells/孔生長培養(yǎng)基生長培養(yǎng)基表達(dá)量評(píng)估0.5個(gè)cells/孔克隆培養(yǎng)基克隆培養(yǎng)基克隆培養(yǎng)基補(bǔ)料表達(dá)量評(píng)估細(xì)胞成像篩選擴(kuò)增單克隆60個(gè)PDL傳代穩(wěn)定性測(cè)試PCB表達(dá)量評(píng)估表達(dá)量評(píng)估電轉(zhuǎn)染篩選擴(kuò)增MSX加壓MSX加壓表達(dá)量評(píng)估表達(dá)量評(píng)估CHO-K1來自英國衛(wèi)生局完整的運(yùn)送追蹤支持文件合規(guī)完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和原始記錄生產(chǎn)用CHO-K1穩(wěn)定株穩(wěn)定株開發(fā)服務(wù)上、下游工藝開發(fā)和放大擁有完善的細(xì)胞培養(yǎng)工藝開發(fā)平臺(tái)，通過DOE軟件對(duì)工藝開發(fā)方案輔助設(shè)計(jì)。有豐富的瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)工藝開發(fā)和放大經(jīng)驗(yàn)。上游工藝開發(fā)/放大具備完善的蛋白質(zhì)純化工藝開發(fā)技術(shù)平臺(tái)，多套國際一流的工藝設(shè)備?？商峁┬≡嚬に嚨街性嚪糯蠊に囯A段的技術(shù)服務(wù)，滿足客戶在藥物開發(fā)和產(chǎn)品申報(bào)各階段的需求。下游工藝開發(fā)/放大Applikon8聯(lián)罐反應(yīng)器Applikon15L反應(yīng)器全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀生化分析儀STR200一次性反應(yīng)器AKTApure150德國L?ser冰點(diǎn)滲透壓儀Thermo紫外檢測(cè)儀上、下游放大生產(chǎn)原核車間真核車間5000多平米的GMP潔凈車間，同時(shí)擁有原核、真核生產(chǎn)車間GMP級(jí)別生產(chǎn)抗體功能性、安全性評(píng)價(jià)04?抗體與抗原?抗體與FcγRs/FcRn/C1q?蛋白與蛋白?蛋白與小分子?親和力排序?表位分析廣泛的檢測(cè)范圍豐富的產(chǎn)品支持親和力檢測(cè)SPR案例展示BLI案例展示OCTETBiacore8KBiacoreT200JToxicolPathol.2015Jul;28(3):133–139.中和活性ADCC(ADCP)CDC內(nèi)吞活性報(bào)告基因酶活因子釋放增殖抑制分化凋亡趨化粘附體外藥效評(píng)價(jià)Anti-CD38抗體酶活抑制檢測(cè)Anti-Nectin4抗體內(nèi)化Anti-OX40誘導(dǎo)CD4+T分泌IL2檢測(cè)細(xì)胞遷移抑制試驗(yàn)血管生成