臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量手冊(cè)

目錄

試驗(yàn)室公正性闡明

修訂頁

第一章質(zhì)量方針

分子生物試驗(yàn)室組織構(gòu)造圖

分子生物試驗(yàn)室設(shè)置平面圖

第二章管理程序文獻(xiàn)

程序管理文獻(xiàn)編碼目錄JS-LJ-SMP0000-000

試驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理程序JS-LJ-SMPOOO1-000

試驗(yàn)室人員配置及培訓(xùn)程序JS-LJ-SMP0002-000

試驗(yàn)室質(zhì)量控制管理程序JS-LJ-SMP0003-000

儀器設(shè)備管理程序JS-LJ-SMP0004-000

臨床標(biāo)本『'J管理程序JS-LJ-SMP0005-000

試驗(yàn)室生物防護(hù)與安全管理程序JS-LJ-SMP0006-000

試驗(yàn)室文獻(xiàn)、記錄的管理程序JS-LJ-SMP0007-000

試驗(yàn)耗材購置、驗(yàn)收、儲(chǔ)放程序JS-LJ-SMP0008-000

埋怨處理程序JS-LJ-SMP0009-000

儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序JS-LJ-SMP0010-000

試驗(yàn)室檢測成果匯報(bào)程序JS-LJ-SMP0011-000

檢查過程中發(fā)生故障時(shí)的應(yīng)急處理程序JS-LJ-SMP0012-000

試驗(yàn)室清潔消毒程序JS-LJ-SMP0013-000

文獻(xiàn)修改程序JS-LJ-SMP0014-000

腫瘤分子檢測試驗(yàn)室原則操作規(guī)程文獻(xiàn)編碼目錄JS-LJ-S0P0000-000

石蠟包埋組織DNA提取原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0001-000

石蠟包埋組織樣本RXA提取原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0002-000

血液DNA提取原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0003-000

口腔拭子/唾液DNA提取原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0004-000

組織DNA提取原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0005-000

組織RNA提取原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0006-000

反轉(zhuǎn)錄原則操作流程JS-LJ-S0P0007-000

基因mRNA體現(xiàn)檢測原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0008-000

EGFR基因突變Q-PCR原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0009-000

KRAS基因突變Q-PCR原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0010-000

BRAF基因突變Q-PCR原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO11-000

PDGFRA基因突變Q-PCR原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0012-000

葉酸基因多態(tài)性Q-PCR原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0013-000

基因SNPQ-PCR原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO14-000

lpl9qLOH原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO15-000

MGMT甲基化原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO16-000

樣本脫包、分類、編號(hào)、登錄、發(fā)放原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO17-000

臨床標(biāo)本采集、驗(yàn)收、拒收原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO18-000

臨床標(biāo)本保留原則操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO19-000

試劑質(zhì)檢原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0020-000

試驗(yàn)成果有效性判斷原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0021-000

室內(nèi)質(zhì)量控制原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0022-000

室間質(zhì)曷評(píng)價(jià)原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0023-000

重要儀器使用、維護(hù)、校準(zhǔn)操作規(guī)程JS-LJ-S0P0024-000

試驗(yàn)室廢棄物處理程序JS-LJ-S0P0025-000

申請(qǐng)單必須信息JS-LJ-S0P0026-000

腫瘤個(gè)體化檢測樣本采集注意事項(xiàng)JS-LJ-S0P0027-000

葉酸基因檢測樣本采集注意事項(xiàng)JS-LJ-S0P0028-000

檢測匯報(bào)原則操作規(guī)程JS-LJ-S0P0029-000

修訂頁

修訂修訂勺

H簡要修訂內(nèi)容同意人同意日期

序號(hào)章節(jié)條款

質(zhì)量方針

題目：質(zhì)量方針起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-ZLC0001-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室是嚴(yán)格按照衛(wèi)生部、山東省臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室

規(guī)范化、原則化規(guī)定進(jìn)行管理與操作，我中心H勺質(zhì)量方針為：公正、科學(xué)、

精確、高效

我們的檢查工作必須做到：

行為公正一任何狀況下，不被多種利益所驅(qū)動(dòng)，客觀公正、獨(dú)立誠實(shí)

地開展檢查工作。

措施科學(xué)一遵守國家有關(guān)法律、法規(guī)，根據(jù)有關(guān)檢查原則規(guī)范。

數(shù)據(jù)精確一認(rèn)真執(zhí)行本中心工作程序，對(duì)檢查工作進(jìn)行全過程質(zhì)量控

制，保證檢查數(shù)據(jù)H勺精確性和可靠性。

辦事高效一在規(guī)定的工作日內(nèi)接受客戶委托，出具檢查匯報(bào)。

分子試驗(yàn)室組織構(gòu)造圖

題目：分子生物試驗(yàn)室組織構(gòu)造圖起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-ZLC0002-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

第二章

管

理

程

廳?1a

文

件

試驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理程序

題目：試驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理程序起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-SMPOOO1-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：防止試驗(yàn)室交叉污染，保證試驗(yàn)室的正常運(yùn)行，保證檢測成果的精確性和

試驗(yàn)人員H勺安全性。

2.合用范圍：本制度合用于PCR試驗(yàn)室及有關(guān)人員，明確試驗(yàn)室各分區(qū)H勺內(nèi)務(wù)工

作。

3.程序

3.1.試驗(yàn)室的設(shè)置和人流、物流管理

3.1.1.本中心在二樓大試驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室，即PCR試驗(yàn)室。

3.1.2.PCR試驗(yàn)室歐J設(shè)置分四個(gè)獨(dú)立工作區(qū)：PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)（一區(qū)）、PCR樣本處

理區(qū)（二區(qū)）、PCR擴(kuò)增區(qū)（三區(qū)）、PCR產(chǎn)物分析區(qū)（四區(qū)），各區(qū)設(shè)有專門的負(fù)責(zé)

人。各區(qū)門前有醒目的志，每個(gè)區(qū)都設(shè)置緩沖區(qū)，用于更換工作服、工作鞋及維持空

氣流向。進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域二作時(shí)，必須嚴(yán)格遵守單一方向次序：即從第一區(qū)的試劑

準(zhǔn)備區(qū)一-?第二區(qū)的J樣本處理區(qū)一-＞第三區(qū)的擴(kuò)增區(qū)一-＞第四區(qū)日勺產(chǎn)物分析區(qū)。嚴(yán)禁

誤入和逆向進(jìn)入各工作區(qū)。一、二區(qū)通過排風(fēng)裝置保持正壓，三、四區(qū)通過抽風(fēng)裝置

保持負(fù)壓。

3.1.3,各區(qū)配置專用H勺儀器、設(shè)備、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公和消毒用

品，并有明顯的區(qū)域標(biāo)示，須貼上不?樣顏色標(biāo)簽予以區(qū)別：第一區(qū)為藍(lán)色標(biāo)簽，第

二區(qū)為綠色標(biāo)簽，第三區(qū)為白色標(biāo)簽，第四區(qū)為粉色標(biāo)簽不得混用。

3.1.4.各區(qū)配有不一樣顏色工作服，第一區(qū)為藍(lán)色，第二區(qū)為綠色，第三區(qū)為白

色，第四區(qū)為粉色，進(jìn)入各區(qū)試驗(yàn)室，必須更換本室有顏色標(biāo)識(shí)的工作服，換上專用

鞋，帶上手套。

3.1.5.試驗(yàn)室的物流同樣嚴(yán)格遵守上述唯一流向制度，并通過傳遞窗進(jìn)行傳遞。

3.2試驗(yàn)室清潔消毒管理

3.2.1.試驗(yàn)室工作服應(yīng)每周由專人定期清洗和消毒。標(biāo)區(qū)制備區(qū)工作服必須先進(jìn)行消

毒。

3.2.2.試驗(yàn)結(jié)束后試驗(yàn)人員必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔消國，操作完畢后打開排氣

扇。桌面在工作結(jié)束后，必須立即用消毒液（2g/L有效氯含量或75%酒精等）擦拭，并

將可移動(dòng)紫外燈調(diào)至試驗(yàn)臺(tái)60-90cm內(nèi)照射消毒30-60mir.,室內(nèi)空氣紫外燈消毒

30-60min?

3.2.3,各區(qū)配置專用清潔工具，并有明顯的區(qū)域標(biāo)示，不得混用。

試驗(yàn)室人員配置及培訓(xùn)程序

題目：試驗(yàn)室人員配置及培訓(xùn)起草：日期：

程序日期：

編號(hào)：JS-LJ-SNfP0002-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證試驗(yàn)室有足夠數(shù)量合格的工作人員，保證可以保質(zhì)保量完畢對(duì)應(yīng)的J工

作任務(wù)。

2.合用范圍：本程序合用于試驗(yàn)室人員配置、管理、培訓(xùn)及考核，所有工作人員均

應(yīng)熟知并遵守該程序。

3.程序

3.1.人員規(guī)定

3.1.1.試驗(yàn)室工作人員應(yīng)為醫(yī)學(xué)檢查專業(yè)或有關(guān)專業(yè)畢業(yè)，具有中級(jí)技術(shù)職稱或大

中專以上學(xué)歷。

3.1.2.試驗(yàn)室工作人員應(yīng)參與衛(wèi)生部或市臨檢中心舉行的PCR技術(shù)培訓(xùn)，并獲得合

格證。

3.1.3,對(duì)于新進(jìn)入本室H勺人員，應(yīng)在試驗(yàn)室有培訓(xùn)合格證的I上級(jí)技術(shù)人員H勺指導(dǎo)

下進(jìn)行試驗(yàn)工作，試驗(yàn)匯報(bào)日有資格的本室工作人員出具，并應(yīng)在最短的時(shí)間內(nèi)獲得

上崗培訓(xùn)合格證。

3.2.人員配置

3.2.1.試驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)工作需要配置足夠的工作人員，目前試驗(yàn)室操作人員4人，其

中2人已獲得培訓(xùn)合格證，視工作量的增長和業(yè)務(wù)發(fā)展需要，合適增長工作人員。

3.2.2,各級(jí)技術(shù)人員履行對(duì)應(yīng)H勺工作職責(zé)。

3.3.人員培訓(xùn)及考核

3.3.1.試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人（或技術(shù)負(fù)責(zé)人）定期參與衛(wèi)生部PCR室間質(zhì)評(píng)總結(jié)會(huì)。

3?3?2.試驗(yàn)室工作人員定期參與有關(guān)學(xué)術(shù)交流會(huì)議。

3.3.3.安排未獲得上崗培訓(xùn)合格證的工作人員在合適的時(shí)間內(nèi)參與技術(shù)培訓(xùn)。

3.4.人員管理

3.4.1試驗(yàn)室建立所有工蚱人員的技術(shù)檔案，包括：學(xué)歷、任職資格、刊登論文、

研究成果、培訓(xùn)等有關(guān)材料復(fù)印件。

3.4.2技術(shù)檔案包括文本當(dāng)案利電子檔案，文本檔案每年更新1次。

試驗(yàn)室質(zhì)量控制管理程序

題目：試驗(yàn)室質(zhì)量控制管理程起草：日期：

序日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0003-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：監(jiān)控本試驗(yàn)室常規(guī)工作的可靠性和有效性，確定檢測成果能否匯報(bào)。

2.合用范圍：本程序合用于試驗(yàn)室臨床檢測試驗(yàn)全過程，試驗(yàn)室工作人員均須熟知

并遵守本程序，并逐漸完善室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)工作。

3.程序

3.1.室內(nèi)質(zhì)控

3.1.1.由于核酸擴(kuò)增的高敏感性，為防止假陽性和假陰性，必須對(duì)DNA和RNA分析

的各步進(jìn)行質(zhì)量控制，以保證測定成果的精確性和反復(fù)性。室內(nèi)質(zhì)控包括標(biāo)本制備、

逆轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析中的每一步。

3.1.2.逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增：包括陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。對(duì)逆轉(zhuǎn)錄和核酸擴(kuò)增H勺質(zhì)控可使

用內(nèi)標(biāo)質(zhì)控措施也可采用外標(biāo)質(zhì)控措施。

3.1.3.在測定血清/血漿病原體如HBV-DNA.HCV-RNA等時(shí)，應(yīng)使用市臨檢中心統(tǒng)一

發(fā)放的質(zhì)控品作為質(zhì)控樣本，與待測臨床標(biāo)本等同處理提取核酸及擴(kuò)增，以判斷逆轉(zhuǎn)

錄及擴(kuò)增檢測的效果。

3.1.4.質(zhì)控樣本在擴(kuò)增時(shí)必須使用與患者的標(biāo)本相似的主反應(yīng)混合液。

3.1.5.每一種PCR反應(yīng)都必須設(shè)外加陰性質(zhì)控（污染監(jiān)測質(zhì)控）。

3.1.6.測定成果的評(píng)價(jià):

3.1.6.1.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測措施，在判斷成果時(shí)，應(yīng)先對(duì)擴(kuò)增的熒光信

號(hào)作出定性判斷，然后再進(jìn)行定量分析:防止某些非特異性熒光信號(hào)對(duì)成果分析的干

擾。

3.1.6.2.當(dāng)質(zhì)控標(biāo)本試驗(yàn)數(shù)據(jù)在控時(shí)，方可發(fā)出臨床標(biāo)本的檢測匯報(bào)。

3.1.6.3,每次試驗(yàn)的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)均要作記錄，如有失控現(xiàn)象應(yīng)及時(shí)分析失控原因并

采用措施，并做記錄。

3.2.室間質(zhì)評(píng)

3.2.1.參與山東省或衛(wèi)生部臨檢中心有關(guān)檢測的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)。

3.2.2.室間質(zhì)控樣本的接受和驗(yàn)收參見室間質(zhì)量原則操作規(guī)程。

3.2.3.質(zhì)控標(biāo)本的檢測按常規(guī)臨床標(biāo)本看待，檢測成果須在截止日期前上報(bào)。

3.2.4.對(duì)室間質(zhì)評(píng)的反饋成果進(jìn)行分析，確定工作中須修正的環(huán)節(jié)。查閱同行對(duì)有

關(guān)試劑盒H勺使用效果。

儀器設(shè)備管理程序

題目：儀器設(shè)備管理程序起草：日期：

日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0004-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證試驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善H勺管理。保證檢測質(zhì)量，保障儀器設(shè)備H勺使

用壽命。

2.合用范圍：本程序合用于基因擴(kuò)增檢查診斷室所有的儀器設(shè)備的購置、驗(yàn)收、使

用、校正和維護(hù)管理。

3.程序

3.1.儀器購置原則：根據(jù)中心日勺有關(guān)規(guī)定本著“質(zhì)優(yōu)價(jià)廉”進(jìn)行，所購儀器必須三

證齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊(cè)證、經(jīng)營執(zhí)照），并能與基因診斷試驗(yàn)室的工作條件相

符外包裝：廠名廠址、檢測、同意文號(hào)、批號(hào)和有效期等。

3.2.儀器購置程序

3.2.1.儀器廠家確實(shí)定：先由試驗(yàn)操作人員提出初步意見，提供2家或2家以上（特

殊狀況1家亦可）試劑廠家的有關(guān)儀器信息，提交中心儀器審核組討論。

3.2.2.儀器的購置：由物流部負(fù)責(zé)與供貨商聯(lián)絡(luò)供貨，交儀器審核組討論決定。

3.3.儀器的驗(yàn)收：供貨商送來儀器后由物流部人員和試驗(yàn)操作人員共同驗(yàn)收，在廠

家的供貨清單上簽字。

3.4.儀器的放置：根據(jù)儀器自身H勺規(guī)定及基因診斷試驗(yàn)室各區(qū)H勺規(guī)定安放儀器。

3.5.基因診斷試驗(yàn)室的重要儀器設(shè)備均需建立檔案，檔案內(nèi)容包括：設(shè)備H勺名稱及

型號(hào)、制造商名稱、設(shè)備編號(hào)、啟用日期、目前放置地點(diǎn)、設(shè)備負(fù)責(zé)人，并應(yīng)有儀器

的原則操作SOP或其他技術(shù)資料復(fù)印件。

3.6.常規(guī)儀器設(shè)備的操作使用程序

3.6.1.儀器設(shè)備的使用授權(quán)

3.1.6.1.僅有本試驗(yàn)室工作人員有權(quán)使用試驗(yàn)室H勺儀器設(shè)備。

3.1.6.2.儀器設(shè)備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設(shè)備的操作使用程序并經(jīng)

中心主任考核承認(rèn)。

3.1.6.3.PCR試驗(yàn)室既有工作人員均經(jīng)工程師操作培訓(xùn)，共同完畢試驗(yàn)室檢測系

統(tǒng)的建立，管理文獻(xiàn)的撰寫工作。

3.6.2.儀器的使用

3.6.2.1,儀器設(shè)備的使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用管理。

3.6.2.2.儀器設(shè)備的使用必須嚴(yán)格遵照儀器設(shè)備日勺原則操作規(guī)程。

3.7.常規(guī)儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)程序

3.7.1.儀器設(shè)備應(yīng)定期校準(zhǔn)，詳細(xì)參照“儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序”。

3.7.2.儀器出現(xiàn)故障應(yīng)作三錄和處理意見，如不能正常使用，應(yīng)填寫維修申請(qǐng)單，

交儀器部設(shè)備維修人員或有關(guān)專門維修單位進(jìn)行處理。

3.8.儀器應(yīng)有工作狀態(tài)標(biāo)識(shí)，正常運(yùn)行日勺各區(qū)儀器應(yīng)貼有對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽（綠色）以表明

其狀態(tài)。待維護(hù)的J儀器用黃色標(biāo)簽。有故障待修暫停儀器用紅色標(biāo)簽。需定期作校準(zhǔn)

或檢定H勺儀器應(yīng)有校準(zhǔn)或檢定日期及下次校準(zhǔn)或檢定日期的記錄。

3.9.儀器設(shè)備的報(bào)廢經(jīng)提出申請(qǐng)后，由中心有關(guān)人員統(tǒng)一處理。

3.10.本試驗(yàn)室所有儀器、設(shè)備均為專用小外借。

臨床標(biāo)本的管理程序

題目：臨床標(biāo)本H勺管理程序起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-SMP0005-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：加強(qiáng)標(biāo)本采集、運(yùn)送、貯存、廢棄的管理，保證檢查成果精確性與有效

性。

2.合用范圍：本程序合用于各類臨床標(biāo)本H勺管理。

3.程序

3.1.標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)：標(biāo)識(shí)構(gòu)成——中心代碼、病人姓名、標(biāo)本采集日期、檢

測、該檢測批次口勺標(biāo)本序號(hào)，無間隔符號(hào)。標(biāo)本口勺唯一性標(biāo)識(shí)須字跡清晰明了，不得

隨意作任何涂改；必須時(shí)，在舊標(biāo)識(shí)上劃雙線更改，更改后應(yīng)保持舊標(biāo)識(shí)可辨識(shí)。詳

細(xì)見“標(biāo)本唯一標(biāo)識(shí)編號(hào)操作規(guī)程”。外包裝：廠名廠址、檢測、同意文號(hào)、批號(hào)和

有效期等。

3.2.標(biāo)本的采集、驗(yàn)收、拒收：本試驗(yàn)室檢測標(biāo)本為血清，規(guī)定用真空采血管采集

血液標(biāo)本；接受標(biāo)本時(shí)應(yīng)查對(duì)標(biāo)本與檢查申請(qǐng)單H勺一致性。標(biāo)本接受人須檢查標(biāo)本狀

態(tài)：標(biāo)本合乎規(guī)定，須在標(biāo)太記錄上注明合格，作深入處理；標(biāo)本不合格，工作人員

有權(quán)拒受標(biāo)本，其他后續(xù)處理過程中發(fā)現(xiàn)的不合格，應(yīng)記錄其狀態(tài)并告知有關(guān)醫(yī)院重

新送檢"詳細(xì)見“臨床標(biāo)本鳧集、驗(yàn)收、拒收操作規(guī)程”“

3.3.臨床標(biāo)本的保留：當(dāng)口不檢測的標(biāo)本可經(jīng)離心后吸取血清及時(shí)放置于-20℃保

留。詳細(xì)見“臨床標(biāo)本保留操作規(guī)程”。

3.4.標(biāo)本H勺安全處理：試驗(yàn)室所有的廢棄標(biāo)本、使用過的耗材等均應(yīng)放入含對(duì)應(yīng)濃

度的有效氯消毒液中，然后再作對(duì)應(yīng)的處理。所有標(biāo)本均也許具有傳染性，須嚴(yán)格遵

守檢查中心有關(guān)院內(nèi)感染及醫(yī)用垃圾的管理和處理規(guī)定，工作人員須注意保持并隨時(shí)

檢查容器的完整和無標(biāo)本外泄發(fā)生。詳細(xì)見“試驗(yàn)室廢棄物處理程序”和“試驗(yàn)室生

物防護(hù)和安全管理程序”。

試驗(yàn)室生物防護(hù)與安全管理程序

題目：試驗(yàn)室生物防護(hù)與安全起草:日期：

管理程序日期：

編號(hào)：JS-LJ-SMP0006-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證試驗(yàn)室、試驗(yàn)人員和外部環(huán)境H勺安全。

2.合用范圍：本程序合用于整個(gè)臨床基因診斷試驗(yàn)室。

3.程序：根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》，參照《微生物和生物醫(yī)學(xué)試驗(yàn)室生

物安全通用準(zhǔn)則》以及山東省臨床檢查中心下發(fā)口勺《山東省臨床檢查專業(yè)質(zhì)控督查基本

內(nèi)容和規(guī)定》，對(duì)本試驗(yàn)室中多種危險(xiǎn)原因采用有效H勺控制措施，防止試驗(yàn)室中存在的

污染源對(duì)試驗(yàn)室、試驗(yàn)人員和環(huán)境的J污染，詳細(xì)內(nèi)容詳見中心文獻(xiàn)“生物安全手

加nrTt”°

3.1.嚴(yán)格執(zhí)行生物防護(hù)和安全制度，監(jiān)控多種危險(xiǎn)原因，采用有效控制措施，注意個(gè)

人生物安全防護(hù)，試驗(yàn)中嚴(yán)格按照多種原則操作程序操作外包裝：廠名廠址、檢測、

同意文號(hào)、批號(hào)和有效期等。

3.2.每天更換廢液缸的2g/L有效氯含量消毒液，并保證2g/L有效氯含量消毒液用量為

廢液缸內(nèi)總液量的1/5左右。對(duì)的配置使用消毒液。如不妥使用消毒液也能散布污染通

過空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和弱陽性（低拷貝數(shù)）對(duì)照進(jìn)行質(zhì)控。

3.3.試驗(yàn)臺(tái)面平常清潔時(shí)使用75%的J酒精擦拭。每區(qū)每天試驗(yàn)前后紫外燈照射3060

min,如有需要可延長照射時(shí)間，對(duì)工作臺(tái)面試驗(yàn)前后也要用紫外燈照射30—60min,

并作好記錄。

3.4.標(biāo)本采集、運(yùn)送過程中，應(yīng)保持容器完好，無泄漏。工作桌面或地面一旦有標(biāo)本

污染時(shí)，應(yīng)及時(shí)用含氯消毒液清潔，再用75糊勺酒精清潔桌面。

3.5.試驗(yàn)廢棄物、患者樣本均也許具有傳染性，應(yīng)按照生物傳染性質(zhì)看待，應(yīng)嚴(yán)格按

照試驗(yàn)室廢棄物處理制度處理。

3.6.有下列狀況之一者，還需此外消毒：手接觸有傳染性的微生物；水龍頭、水池肥

皂、工作服也許同步被大量細(xì)菌污染者。消毒劑可用2g/L有效氯含量消毒液。

3.7.其他安全措施：

3.7.1.在基因擴(kuò)增檢杳試臉室門上需貼上生物危害標(biāo)志，非工作需要，其他人員不

得入內(nèi)。與試驗(yàn)無關(guān)日勺任何私人物品嚴(yán)禁入內(nèi)。

3.7.2.試驗(yàn)室工作人員應(yīng)登受生物安全有關(guān)培訓(xùn)，理解病原體感染的途徑和防止措

施。

3.7.3.接觸感染性物質(zhì)H勺試驗(yàn)室人員必須作好個(gè)人防護(hù)，戴好手套、口罩和帽子，

嚴(yán)禁裸手接觸任何物質(zhì)，不要戴著手套觸摸皮膚。

3.7.4.試驗(yàn)使用后的廢物按照不一樣的處理規(guī)定進(jìn)行處理。

3.7.5.試驗(yàn)人員進(jìn)入PCR拭驗(yàn)工作區(qū)，應(yīng)換上各區(qū)時(shí)專用工作服，離開時(shí)脫下該區(qū)

的工作服，并掛在指定H勺地方。工作結(jié)束后，立即洗手才可離開。

3.7.6.試驗(yàn)結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔消毒。桌面在工作結(jié)束后，必須立即

用消毒液（2g/L有效氯含量消毒液或75%酒精等）擦拭，并將可移動(dòng)紫外燈調(diào)至距試驗(yàn)

臺(tái)60-90cm內(nèi)照射消毒30-60mino

3.7.7.保證試驗(yàn)室所用H勺試驗(yàn)消耗品均通過高壓滅菌處理。

3.7.8.制定防火、防盜措施：①及時(shí)檢查電線與否老化，發(fā)現(xiàn)隱患應(yīng)及時(shí)排除；②

防盜措施：設(shè)內(nèi)保安全機(jī)制，由PCR室工作人員為安全員，負(fù)責(zé)工作完畢后檢查門窗。

3.7.9.要嚴(yán)格執(zhí)行以上各項(xiàng)措施，并定期由室負(fù)責(zé)人對(duì)以上措施H勺貫徹狀況予以調(diào)

查。如調(diào)查不合格，對(duì)對(duì)應(yīng)負(fù)責(zé)人進(jìn)行懲罰，并限期整改。

4.應(yīng)急措施：

4.1.工作人員在試驗(yàn)過程中懷疑被感染、發(fā)生重大生物污染時(shí)，應(yīng)立即停止試驗(yàn)并匯

報(bào)上級(jí)，并臨時(shí)關(guān)閉試驗(yàn)室，進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，并根據(jù)實(shí)際狀況，采用對(duì)應(yīng)有效措施

防止感染的發(fā)生或蔓延。如遇試驗(yàn)中手指被劃破，應(yīng)立即用水沖洗、消毒包扎傷口，

如此標(biāo)本為陽性，應(yīng)立即接種疫苗，同步上報(bào)山東省臨檢中心，提請(qǐng)?jiān)俅螌徍怂泸?yàn)室

消毒隔離狀況。

4.2.在此期間，為了保證匯報(bào)的及時(shí)，將病人標(biāo)本送往其他經(jīng)衛(wèi)生部審批時(shí)試驗(yàn)室檢

測。

試驗(yàn)室文獻(xiàn)、記錄的管理程序

題目：試驗(yàn)室文獻(xiàn)、記錄的I管起草：日期：

理程序日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0007-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證資料的記錄、保留狀態(tài)在控。

2.合用范圍：本程序合用于試驗(yàn)過程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)、文本資料的J記錄和保留的整個(gè)

過程，重要有：病人和標(biāo)本信息、試驗(yàn)操作記錄、試驗(yàn)檢測成果、原始檢測申請(qǐng)

單和出具的檢測匯報(bào)單、儀器使用記錄等。

3.程序

3.1.病人和標(biāo)本信息：或受標(biāo)本后，在標(biāo)本登記表中登記病人和標(biāo)本信息，包

括：病人姓名、性別、年齡、檢測、標(biāo)本類型、標(biāo)本狀態(tài)、送檢日期、標(biāo)本接受人

等，對(duì)不符合檢測規(guī)定的標(biāo)本在“拒收標(biāo)本登記表”上記錄，并及時(shí)告知送檢單位。

當(dāng)日工作結(jié)束后將以上表格分類保留于標(biāo)本接受間外包裝：廠名廠址、檢測、同意文

號(hào)、批號(hào)和有效期等。

3.2.檢測過程中的試驗(yàn)記錄：在專用試驗(yàn)記錄簿上記載，不一樣試驗(yàn)區(qū)H勺記錄

簿不得混用。試劑準(zhǔn)備和貯存區(qū)應(yīng)記錄檢測所用的試劑盒狀況（名稱、批號(hào)、數(shù)量）；

標(biāo)本制備區(qū)記錄檢測標(biāo)本數(shù)及在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的操作過程；在擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)記錄質(zhì)

控成果和分析.

3.3.PCR儀運(yùn)行結(jié)束，運(yùn)行和成果文獻(xiàn)應(yīng)保留在專門的數(shù)據(jù)文獻(xiàn)夾中。文獻(xiàn)名

應(yīng)保持唯一性，前面英文字母為試驗(yàn)，背面六位數(shù)字為試驗(yàn)日期，如HBV020710。

3.4.將病例資料、樣品資料、檢測成果錄入?yún)R報(bào)系統(tǒng)，產(chǎn)生成果匯報(bào)單，經(jīng)試

驗(yàn)室主任審核簽名；檢杏申請(qǐng)單、檢杏成果記錄（包括病例資料）裝訂保留于擴(kuò)增區(qū)

工作臺(tái)抽屜里，統(tǒng)一建檔封存，至少保留2年以上。

3.5.試驗(yàn)記錄要真實(shí)，不得隨意涂改，如確需更改，應(yīng)在所需更改內(nèi)容上劃雙

紅線，填上新內(nèi)容，闡明更改原因并簽名。

3.6.試驗(yàn)記錄須妥善保留，波及醫(yī)療糾紛及特殊狀況外，本室無義務(wù)提供應(yīng)他

人借閱或復(fù)印通過空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和弱陽性（低拷貝數(shù)）對(duì)照進(jìn)行質(zhì)

控。

試驗(yàn)耗材購置、驗(yàn)收、儲(chǔ)放程序

題目：試驗(yàn)耗材購置、驗(yàn)收、儲(chǔ)起草：日期：

放程序日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0008-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：規(guī)定試劑購置原則、驗(yàn)收H勺程序和試劑的對(duì)的貯存。

2.合用范圍：本程序合用于試驗(yàn)室所購的診斷試劑盒、試驗(yàn)耗材。

3.程序

3.1.試劑的購置和管理

3.1.1.試劑購置原則：PCR檢測試劑選用原則“質(zhì)優(yōu)價(jià)廉”并與ABI7500儀器配

套，所購試劑必須三證齊全。（三證包括：）

3.1.2.試劑購置程序

3.1.2.1試劑廠家確實(shí)定：先由詳細(xì)檢測人員提供2家或2家以上（特殊狀況1家亦

可）試劑生產(chǎn)廠家口勺有關(guān)試劑信息，提交試劑審核組討論并確定第一試劑商和第二試劑

供貨商，將申請(qǐng)單交物流部與供貨商確定試劑價(jià)格。

3.1.2.2試劑的購置：操作人員提前1周以上填寫請(qǐng)購單，交由物流部與供貨商聯(lián)絡(luò)

供貨。

3.1.2.3試劑生產(chǎn)廠商口勺變更：為保證試劑使用的穩(wěn)定性，原則上一年內(nèi)不變更試劑

生產(chǎn)廠商，如在使用過程中發(fā)現(xiàn)質(zhì)量問題，操作人員及時(shí)向試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)，必要

時(shí)提出更換試劑生產(chǎn)廠家的規(guī)定，交試劑審核組討論決定。

3.1.3.試劑驗(yàn)收:

3.L3.1物流部專門人員負(fù)責(zé)查對(duì)試劑品名、數(shù)量和價(jià)格，并在供貨清單上簽字。

3.1.3.2操作人員負(fù)責(zé)試劑質(zhì)量驗(yàn)收（內(nèi)外包裝驗(yàn)收）：

3.1.3.2.1.外包裝規(guī)定：包裝完整無損、標(biāo)識(shí)清晰齊全（品名、廠家、同意文號(hào)、生

產(chǎn)日期、效期）、所購試劑需保證至少仍有三個(gè)月以上效期；

3.1.3.2.2.內(nèi)包裝規(guī)定：內(nèi)包裝完好無損、無泄漏，試劑各部分、闡明書齊全。供

貨清單由試劑管理人員保管，試劑驗(yàn)收后登記存儲(chǔ)。

3.1.4.試劑儲(chǔ)存：試劑盒保留按照闡明書規(guī)定進(jìn)行。PCR檢測試劑分區(qū)保留：擴(kuò)增

反應(yīng)體系試劑保留于試劑儲(chǔ)存區(qū)；對(duì)照品、定量校準(zhǔn)品、核酸提取試劑儲(chǔ)存于樣品處

理區(qū)。

3.1.5.試劑質(zhì)檢：按照試劑質(zhì)檢原則操作程序操作。

3.1.6.試劑出現(xiàn)質(zhì)量問題，立即書面告知試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員，在其知情同意下，書面

告知物流部辦理退換貨手續(xù)。

3.2.試驗(yàn)耗材的購置和管理

3.2.L購置：由試驗(yàn)室工蚱人員填寫申請(qǐng)，按需提出所購耗材的品名、規(guī)格、數(shù)

量，由試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人簽字同意后交物流部購置。

3.2.2,驗(yàn)收：消耗品購進(jìn)后由物流部有關(guān)人員查對(duì)數(shù)量、規(guī)格，查驗(yàn)外包裝與否破

損，如發(fā)生破損或其他質(zhì)量問題，予以退回。由試驗(yàn)室工作人員負(fù)責(zé)進(jìn)行質(zhì)量驗(yàn)收。

3.3.試驗(yàn)操作人員對(duì)庫存試劑定期每月檢查，并填寫試劑使用登記表，不使用過期

試劑，并杜絕揮霍現(xiàn)象。

3.4.試劑外借必須征得試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員同意，并履行中心有關(guān)借出手續(xù)。

埋怨處理程序

題目：埋怨處理程序起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-SMP0009-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：“埋怨”往往提醒試驗(yàn)室存在著尚未得到認(rèn)識(shí)的漏洞或問題。為對(duì)的處理好

“埋怨”，鞏固和完善試驗(yàn)室質(zhì)量體系，特制定本程序。

2.合用范圍：本程序合用于來自于患者，臨床醫(yī)護(hù)人員或試臉室工作人員針對(duì)檢測成

果質(zhì)量、服務(wù)質(zhì)量或試驗(yàn)室管理等問題的投訴。每個(gè)試臉室工作人員均有責(zé)任接待

申訴者，試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)埋怨進(jìn)行處理，如超過室負(fù)責(zé)人職權(quán)范圍，應(yīng)經(jīng)中心負(fù)責(zé)

人處理。

3.程序

3.1.接到埋怨

3.2.記錄埋怨

3.3.提出針對(duì)詳細(xì)埋怨的處理措施

3.4.將不在《常見埋怨處理方式》范圍內(nèi)的I處理措施交室負(fù)責(zé)人審核

3.5.征求埋怨方對(duì)處理措施口勺意見

3.6.執(zhí)行處理方案

3.7.記錄最終的處理成果

4.處理措施：

4.1.針對(duì)客戶對(duì)服務(wù)態(tài)度埋怨的I處理措施

4.1.1.接到埋怨后，由室負(fù)責(zé)人責(zé)成有關(guān)人員向客戶致歉。

4.1.2.對(duì)患者提出的合理規(guī)定及時(shí)進(jìn)行處理。

4.1.3.調(diào)查事情原委，根據(jù)調(diào)查成果對(duì)有關(guān)負(fù)責(zé)人進(jìn)行懲罰。

4.1.4.記錄埋怨及其處理成果。

4.2.針對(duì)客戶對(duì)成果精確性埋怨的處理措施

4.2.1.為客戶展示原始試臉數(shù)據(jù)。

4.2.2.向客戶解釋有關(guān)試驗(yàn)程序和也許臨床狀況，協(xié)助客戶解除疑慮。

4.2.3.如確有試驗(yàn)成果不符合有效性規(guī)定或出現(xiàn)錯(cuò)誤，則應(yīng)及時(shí)糾正錯(cuò)誤，重新試

驗(yàn)以得到精確成果。同步由室負(fù)責(zé)人向客戶致歉以爭獲得到其諒解，按有關(guān)條例對(duì)負(fù)責(zé)

人進(jìn)行對(duì)應(yīng)懲罰，并記錄。

4.3.針對(duì)客戶對(duì)檢測成果和臨床診斷的符合率埋怨口勺處理措施

4.3.1.針對(duì)客戶埋怨的檢查進(jìn)行從試驗(yàn)前到試驗(yàn)后的全程調(diào)查，查找與否存在影響

成果日勺原因，并形成書面匯報(bào)，

4.3.2.就調(diào)查發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行針對(duì)性處理.

4.3.3.與客戶建立定期交流機(jī)制，定期理解臨床使用狀況和對(duì)臨床作出

解釋。

4.4.針對(duì)客戶對(duì)成果發(fā)放時(shí)效性埋怨的I處理措施

4.4.1.嚴(yán)格按承諾時(shí)間發(fā)放臨床匯報(bào)。

4.4.2.在與客戶交流會(huì)上就匯報(bào)發(fā)放過程及時(shí)間作出解釋，獲取臨床對(duì)成果匯報(bào)時(shí)

效性的理解。

5.埋怨處理的原則

5.1.所有試驗(yàn)室工作人員要認(rèn)真看待客戶及其他部門人員就試驗(yàn)室工作所提出的埋

怨，對(duì)提出埋怨的人員要做到語言文明，熱情接待。

5.2.由試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)貢對(duì)埋怨申訴進(jìn)行處理，試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人不在時(shí)由其委托人處

理，試驗(yàn)室所有工作人員均有責(zé)任接待申訴者。

5.3.對(duì)埋怨和投訴均應(yīng)進(jìn)行對(duì)應(yīng)記錄，包括日期、申訴人、申訴內(nèi)容、處理措施、處

理者、聯(lián)絡(luò)方式等。

5.4.對(duì)于當(dāng)時(shí)能處理的申訴應(yīng)及時(shí)處理，當(dāng)時(shí)不能處理啊，要限時(shí)處理，并明確告知

申訴者。

5.5.如埋怨波及到試驗(yàn)室操作程序與否符合《臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室管理暫行措施》、

《臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室工作規(guī)范》等，試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)召集試驗(yàn)室工作人員討論，如試

驗(yàn)室的I操作程序確實(shí)不符合有關(guān)規(guī)定，應(yīng)重新修訂操作規(guī)程后執(zhí)行。

5.6.當(dāng)試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人無法滿意處理報(bào)怨時(shí)，應(yīng)將有關(guān)材料遞交中心，由中心處理。

儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序

題目：儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序起草：日期：

日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0010-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證試驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善H勺管理，保證檢測質(zhì)量。

2.合用范圍：本程序合用于合用于試驗(yàn)室所有口勺儀器設(shè)備。

3.程序

3.1.校準(zhǔn)措施：

3.1.1.定量擴(kuò)增儀、生物安全柜、冷凍高速離心機(jī)功能性儀器由各生產(chǎn)廠家每年進(jìn)

行一次維修檢測，并將此作為校準(zhǔn)根據(jù)。各儀器口勺校準(zhǔn)單位（即生產(chǎn)廠家）見重要儀器

一覽表。

3.1.2.移液器校準(zhǔn)外送專業(yè)機(jī)構(gòu)專業(yè)人員進(jìn)行校準(zhǔn)。

3.1.3.干式恒溫器使用經(jīng)質(zhì)量檢定的溫度計(jì)進(jìn)行自行校準(zhǔn)。

3.1.4.溫濕度計(jì)校準(zhǔn)以通過質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督局校準(zhǔn)過的I其他溫度計(jì)和濕度計(jì)進(jìn)行校

準(zhǔn)。

3.1.5.移動(dòng)紫外線消毒車由檢查中心儀器部專門人員每六個(gè)月對(duì)紫外燈管口勺紫外線

進(jìn)行測試。新燈管規(guī)定紫外線強(qiáng)度不小于或等于90UW/cm2,舊燈管紫外線強(qiáng)度不小于或

等于70UW/cm\每年聯(lián)絡(luò)生產(chǎn)廠家進(jìn)行一次維護(hù)和檢測，并將此作為校準(zhǔn)根據(jù)。

3.2.校準(zhǔn)計(jì)劃

3.2.1.啟用校準(zhǔn)：設(shè)備在沒入使用時(shí)實(shí)行啟用校準(zhǔn)。

3.2.2.周期校準(zhǔn)：設(shè)備在發(fā)人使用后，每年實(shí)行一次校準(zhǔn)。

3.2.3.維修后校準(zhǔn)：設(shè)備在維修后須經(jīng)校準(zhǔn)方可重新投入使用。

3.2.4.校準(zhǔn)計(jì)劃外的校準(zhǔn)：如在檢測及EQA,IQC活動(dòng)中發(fā)現(xiàn)存在成果漂移或偏差及

其他可疑狀況時(shí)，通過度析對(duì)可疑設(shè)備及時(shí)實(shí)行校準(zhǔn)。

3.2.5.移液器的校準(zhǔn)次序：按照單一流向規(guī)定，對(duì)移液器的校準(zhǔn)首先校準(zhǔn)試劑準(zhǔn)備

區(qū)，然后依次為樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)。每校準(zhǔn)完一種區(qū)的移液器，將其放回原處

后，再取下一種區(qū)的移液器進(jìn)行校準(zhǔn)。

3.2.6.校準(zhǔn)安排在不進(jìn)行降本檢測的日期完畢。

3.2.7.校準(zhǔn)的有效標(biāo)識(shí)：經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備加貼綠色標(biāo)簽，標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)明本次校準(zhǔn)時(shí)日

期和成果及下次校準(zhǔn)的計(jì)劃預(yù)定日期。

3.2.8.試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員每年應(yīng)制定書面的各儀器設(shè)備的校準(zhǔn)計(jì)劃，經(jīng)試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人

同意后由各儀器設(shè)備負(fù)責(zé)人按計(jì)劃實(shí)行。

3.3.校準(zhǔn)成果H勺審批及記錄保留：每次校準(zhǔn)的成果須及時(shí)送交中心質(zhì)量負(fù)責(zé)人審閱簽

字。校準(zhǔn)記錄須妥善保留于PCR試驗(yàn)室三區(qū)直至設(shè)備報(bào)廢。

試驗(yàn)室檢測成果匯報(bào)程序

題目：試驗(yàn)室檢測成果匯很程序起草：日期：

日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0011-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：檢測匯報(bào)是過程的最終輸出，為使匯報(bào)的生成、發(fā)放、管理受控，特制定本程

序。

2.合用范圍：本程序合用于本基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室所有臨床檢測的成果匯報(bào)，只有經(jīng)PCR

培訓(xùn)并獲得上崗證的工作人員才有權(quán)審核和簽發(fā)匯報(bào)單。

3.程序

3.1.檢測成果H勺匯報(bào)應(yīng)精確、清晰、明確、客觀和及時(shí)，杜絕虛假匯報(bào)。

3.2.實(shí)時(shí)熒光PCR測定期，其檢測數(shù)據(jù)要通過度析，防止因非特異性熒光而導(dǎo)致假陽性成

果。根據(jù)質(zhì)控品判斷PCR擴(kuò)增的）有效性，只有當(dāng)質(zhì)控品口勺試驗(yàn)數(shù)據(jù)在控時(shí)，才可發(fā)出匯報(bào)，否

則應(yīng)重新測定。

3.3.定量成果匯報(bào)以每亳升拷貝數(shù)（拷貝數(shù)/ml）匯報(bào)，如成果高于測定措施線性范圍上限，

則對(duì)樣本稀釋后再測，成果乘上稀釋倍數(shù)；如成果低于措施的線性范圍下限，則匯報(bào)不不小于

檢測下限。

3.4.病人檔案及測定成果及病人檔案一并登記到試驗(yàn)成果登記表中，由室負(fù)責(zé)人管理所有

病人資料。每份匯報(bào)均應(yīng)由我試驗(yàn)室出具；匯報(bào)內(nèi)容至少應(yīng)包括：病人姓名、性別、年齡、樣

本號(hào)、標(biāo)本特性、標(biāo)本狀態(tài)、標(biāo)本接受日期及測定、測定措施、成果、參照范圍以及操作者和

審核者日勺簽名和檢測H期等內(nèi)容，否則視為尢效或虛假匯報(bào)單。以上記錄實(shí)行完整保留，至少

保留2年以上。

3.5.匯報(bào)單應(yīng)及時(shí)發(fā)出。由送化驗(yàn)單人員負(fù)責(zé)送往各送檢醫(yī)院。

3.6.打印當(dāng)日檢測匯報(bào)匯總表，存檔，妥善保留2年以上

3.7.當(dāng)臨床科室醫(yī)生規(guī)定匯報(bào)成果時(shí)，應(yīng)先確認(rèn)對(duì)方身份，查對(duì)其所查詢的J病人姓名、

病區(qū)床號(hào)等狀況，方可匯報(bào)，并明確告知對(duì)方，試驗(yàn)H勺最終止果以檢測匯報(bào)單為準(zhǔn)。

3.8.當(dāng)患者規(guī)定匯報(bào)成果時(shí)，應(yīng)讓患者提供病人基本信息后由送檢醫(yī)院科室負(fù)責(zé)人出面

告知對(duì)方其檢測成果，并需明確告知對(duì)方，試驗(yàn)H勺最終止果以檢測匯報(bào)單為準(zhǔn)。

檢查過程中發(fā)生故障時(shí)的應(yīng)急處理程序

題目：檢查過程中發(fā)生故障時(shí)的J起草：日期：

應(yīng)急處理程序日期：

編號(hào):JS-LJ-SMPOO12-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：為防止因儀器設(shè)備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質(zhì)量問題而影響到臨床檢測匯報(bào)H勺

及時(shí)性和精確性，特制定本程序，

2.合用范圍：本程序合用于也許影響到檢測匯報(bào)發(fā)出的儀器設(shè)備和試劑等，對(duì)于潛在

著一定口勺也許影響檢測質(zhì)量的不確定原因，一旦發(fā)生，作為對(duì)應(yīng)措施，試驗(yàn)室應(yīng)有一套對(duì)

應(yīng)H勺應(yīng)急處理程序，室負(fù)責(zé)人有賁任組織并直按監(jiān)督本程序日勺實(shí)行。

3.程序

3.1.試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人接到儀器設(shè)備故障的I報(bào)警后，立即現(xiàn)場確認(rèn)異常狀況的性質(zhì)和故障

程度。

3.2.儀器設(shè)備故障本室不能處理的J,應(yīng)及時(shí)告知有關(guān)設(shè)備維修人員或供應(yīng)商，詳細(xì)程

序見儀器設(shè)備管理程序。對(duì)于發(fā)生故障的儀器設(shè)備，及時(shí)維修口勺同步，采用如下處理措

施。

3.2.1.有滿足使用規(guī)定的J替用設(shè)備歐I,啟用替用設(shè)備。

3.2.2.可借用其他部門儀器設(shè)備時(shí)，核算該設(shè)備H勺使用狀態(tài)良好后可借用。

3.2.3.替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量規(guī)定的同步，必須同步滿足試驗(yàn)室管埋

措施（尤其是防污染）H勺規(guī)定。

3.3.試劑盒質(zhì)量發(fā)生問題，經(jīng)核算后，及時(shí)告知供貨商更換另一批次試劑，使用前需

先作質(zhì)量檢測，合格后方可使用,

3.4.當(dāng)有樣本或反應(yīng)管破裂，并泄露于離心機(jī)內(nèi)或擴(kuò)增儀時(shí)，應(yīng)停止工作，立即用浸

有75%的乙醇消毒液的棉簽梯拭離心機(jī)或擴(kuò)增儀，然后紫外燈照射30min；將該破管的原

始標(biāo)本按規(guī)定保留好與下一批標(biāo)本一起檢測。

3.5.當(dāng)有樣本破裂,并泄露于工作臺(tái)面時(shí),應(yīng)用棉簽吸干血清,并用浸有2g/L有效氯消

毒液的毛巾覆蓋30min后，清水擦干再用紫外線燈照射30irin。

3.6,若質(zhì)控品出現(xiàn)問題，應(yīng)更換其他批次的質(zhì)控品。

3.7.假如試劑配制與標(biāo)本處理過程中碰到停電狀況，把試劑、標(biāo)本先保留在冰箱里，

等待電源來時(shí)再繼續(xù)操作。假如在擴(kuò)增過程中碰到停電，試驗(yàn)室內(nèi)部UPS將運(yùn)用電池組供

電，使PCR試驗(yàn)操作完畢。

3.8.儀器設(shè)備故障或試劑質(zhì)景問題不能得到處理，預(yù)期將會(huì)影響到檢測匯報(bào)的及時(shí)發(fā)

出，可將標(biāo)本送至其他試驗(yàn)室檢查（該試驗(yàn)室同樣應(yīng)為獲同類認(rèn)準(zhǔn)液JPCR檢測試驗(yàn)室）；

如已影響到匯報(bào)的及時(shí)發(fā)出，應(yīng)向有關(guān)醫(yī)院公告，獲得病人和醫(yī)生的諒解。

3.9.影響到檢測匯報(bào)發(fā)出的狀況，應(yīng)在“應(yīng)急處理登記表”作記錄。

試驗(yàn)室清潔消毒程序

題目：試驗(yàn)室清潔消毒程序起草：日期：

日期：

編號(hào):JS-LJ-SMP0013-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

1.目的：保證試驗(yàn)室環(huán)境的整潔，防止污染。

2.合用范圍：適于試驗(yàn)室工作環(huán)境、試驗(yàn)臺(tái)面、工作服、移液器等口勺清潔消毒工

作。所有試驗(yàn)室工作人員應(yīng)熟知并遵守本程序，清潔工作可由試驗(yàn)室指定人員進(jìn)行。

3.操作程序

3.1.消毒液配制

3.1.1.配制2g/L有效氯消毒液：參照消毒劑闡明書配制終濃度為2g/L有效氯消毒

液。

3.1.2,各試驗(yàn)區(qū)的I清潔消毒工具均專用，不可混用。所配制的消毒液只限在當(dāng)日內(nèi)

使用，隔夜如使用時(shí)應(yīng)根據(jù)本SOP重新配制。

3.2.紫外消毒

3.2.1.紫外消毒須根據(jù)需要設(shè)定期間，一般為30min,根據(jù)需要合適延長時(shí)間。

3.2.2.消毒結(jié)束后，關(guān)閉電源開關(guān)。

3.3.試驗(yàn)室消毒清潔程序

3.3.1,每次試驗(yàn)前一天和試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)各區(qū)進(jìn)行全面消毒。包括試驗(yàn)臺(tái)面、傳遞

窗、地板。

3.3.2.試驗(yàn)過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，應(yīng)立即用含2g/L有效氯消毒液濕布覆蓋

污染處30min,再進(jìn)行擦拭，隨即用清水擦洗，并作記錄。

3.3.3.試驗(yàn)結(jié)束后用含2g/L有效氯消毒液對(duì)臺(tái)面進(jìn)行清潔，紫外燈照射30min。

3.3.4.試驗(yàn)結(jié)束后，用移動(dòng)紫外消毒車對(duì)工作臺(tái)面進(jìn)行紫外照射30min,并將傳遞

窗紫外燈打開照射30min。

3.3.5.試驗(yàn)結(jié)束后，啟動(dòng)室內(nèi)紫外燈對(duì)試驗(yàn)室進(jìn)行紫外照射消毒至少30min。

3.3.6.試驗(yàn)結(jié)束后，用含2g/L有效氯消毒液對(duì)各區(qū)所有儀器設(shè)備進(jìn)行擦拭清潔。

3.3.7,每次對(duì)使用過的移液器、保子用75%酒精棉球進(jìn)行擦拭。

3.3.8.每周將待清潔工作服高壓滅菌后洗滌消毒，不一樣試驗(yàn)區(qū)H勺工作服隔天洗

滌。

題目：文獻(xiàn)修改程序起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-SMPOO14-0。0日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

文獻(xiàn)修改程序

1.目的：保證文獻(xiàn)完整性和有效性。

2.合用范圍：本試驗(yàn)室管理體系的所有文獻(xiàn)。

3.程序：

3.1.使用文獻(xiàn)的操作人員在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)某個(gè)文獻(xiàn)不適合實(shí)際T作,應(yīng)書而向室負(fù)責(zé)

人提出申請(qǐng)。

3.2.申請(qǐng)?jiān)谥行臅?huì)議上通過，文獻(xiàn)即可修改。

3.3.文獻(xiàn)修改由原撰寫人執(zhí)行。

3.4.文獻(xiàn)初次發(fā)行為第一版，當(dāng)文獻(xiàn)有修改后，修改狀態(tài)用阿拉伯?dāng)?shù)字表達(dá)，按1、2、

3、4次序遞增，標(biāo)示在版號(hào)后。

3.5.修改的文獻(xiàn)經(jīng)中心負(fù)責(zé)人審核同意、所有規(guī)定的授權(quán)簽字均己履行后，文獻(xiàn)即為正

式公布，并同步生效執(zhí)行，原文獻(xiàn)同步作廢。

3.6.文獻(xiàn)修改內(nèi)容的有關(guān)記錄由試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人保留。

題目：石蠟包埋組織DNA提取原則操作規(guī)程起草：日期：

日期：

編號(hào)：JS-LJ-SOPOOOl-OOl日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期:

分發(fā)部門：技術(shù)部

石蠟包埋組織DNA提取原則操作規(guī)程

1.目的：采用細(xì)胞裂解和血紅素/蛋白沉淀技術(shù)，結(jié)合DNA制備膜選擇性地吸附

DNA,以從石蠟包埋組織中提取高質(zhì)量H勺基因組DNA。

2.合用范圍：本程序合用于所有石蠟包埋組織樣品的DNA提取。

3.措施原理：運(yùn)用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞核釋放基因絹DNA,由硅膠膜柱可逆吸附基因

組DNA,經(jīng)蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白質(zhì)、脂質(zhì)以及多糖等雜質(zhì)后，用純化液洗

脫獲得基因組DNA。

4.試驗(yàn)準(zhǔn)備：

4.1.儀器和試劑：水浴鍋，小型常溫高速離心機(jī)，細(xì)胞/組織基因組DNA（離心柱）提

取試劑盒（百泰克），1.5血離心管，20-200用移液器及槍頭，100-1000?移液器及

槍頭。

4.2.預(yù)備：試驗(yàn)前10min打開水浴鍋，調(diào)至56C；另一水浴鍋調(diào)制90C；本試驗(yàn)操

作過程在抽提專用試驗(yàn)臺(tái)進(jìn)行，穿試驗(yàn)服，戴乳膠手套及口罩。漂洗液WB使用前確認(rèn)

加入無水乙醇，用記號(hào)筆在瓶上標(biāo)識(shí)。其他溶液TL或CB假如有結(jié)晶或者沉淀，請(qǐng)于

37℃水浴重新溶解，并混勻。

4.3.樣本確認(rèn)：根據(jù)樣本登記表的信息對(duì)樣本進(jìn)行確認(rèn)，并確認(rèn)樣本抽提類型、樣本

質(zhì)量及與否足量等。

5.試驗(yàn)環(huán)節(jié):

5.1.組織脫蠟：啟動(dòng)通風(fēng)櫥；在通風(fēng)處內(nèi)啟動(dòng)1.5ml離心管管蓋，用移液槍加入1ml

二甲苯，用刀片將5-8片10um厚的石蠟生物組織切片［蠟塊組織處理：在石蠟包埋

組織樣品表面輕輕刮去不含組織的石蠟表層，再刮取5TC，um厚的|薄片，并保證剩余樣

本表面平整，嚴(yán)禁使用摳取，粉碎，切除等操作破壞組織樣本；若是蠟卷，則直接用

潔凈H勺槍頭挑取適量樣本）輕輕刮入1.5ml離心管，密蓋，振蕩器振蕩30s；于離心

機(jī)內(nèi)12023rpm離心2min,棄上清至專用廢液缸。注意不要棄掉沉淀。再加入1ml

無水乙醇，密蓋,再用振蕩器充足振蕩混勻；于離心機(jī)內(nèi)12023中.離心？！!!^,棄上

清專用廢液缸。打開管蓋，于室溫或37℃干燥10T5min,至酒精完全揮發(fā)，備用。過

程使用槍頭為一次性耗用物，不得反復(fù)使用。

5.2.消化：加入200用裂解液TL,重懸沉淀，加入30用蛋白酸K,混勻。置于64℃

水浴鍋水浴lh（或直至樣品完全溶解），90C水浴鍋水浴30min,短暫離心，試管壁上

口勺溶液搜集到管底。

5.3.加入200m結(jié)合液CB,渦旋混勻，再加入100M異丙醇，漩渦震蕩充足混勻。

短暫離心，試管壁上的溶液搜集到管底。

5.4.轉(zhuǎn)移溶液：將所有的溶液（不要沉淀）都轉(zhuǎn)移到一種吸附柱中，12023rpm離心

30s,倒去搜集管中廢液。重新將吸附柱放回搜集管中。

5.5.洗滌：向吸附柱內(nèi)加入500M克制物清除劑I吸棄槍頭，12023rpm離心30s,

倒掉搜集管中廢液。

5.6.向吸附柱內(nèi)加入700gl漂洗液WB,12023rpm,離心30s,倒掉搜集管中廢液，

加500用漂洗液WB,12023rpm,離心30s,倒掉搜集管中廢液。

5.7.晾干吸附柱：空轉(zhuǎn)12023rpm2min,將吸附柱放入新於H.5ml離心管中,打開

吸附柱蓋子，室溫放置2min或以上以徹底晾干吸附材料中殘存的|酒精。

5.8.洗脫：向吸附膜中間加入65川的洗脫緩沖液EB（65℃預(yù)熱），室溫放置2-3min,

12023rpm離心hnin,離心管中的液體即為抽提的基因組DNA。

5.8.濃度測量：用分光光度計(jì)測量DNA濃度。

6.質(zhì)控原則:DNA濃度高于20ng/m,0D260/0D280約為1.6-2.0則認(rèn)為DNA可用,可

直接用于PCR等后續(xù)試驗(yàn)，否則需重新抽提。若抽提好的DNA臨時(shí)不用，可置于-20C保

留備用。

7.關(guān)機(jī)及試驗(yàn)臺(tái)整頓：試驗(yàn)完畢后，關(guān)閉水浴鍋，所有用過的I移液器調(diào)至最大量程，

擺放整潔，所有用過H勺東西歸回原位。最終用75%酒精噴酒試驗(yàn)臺(tái)面，2min后擦拭潔

凈。

8.注意事項(xiàng)：試劑盒在第一次使用前請(qǐng)按試劑瓶標(biāo)簽闡明在漂洗液帕中加入無水乙

醇，并做好標(biāo)識(shí)；溶液使用后，應(yīng)防止長期暴露于空氣中，用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。剩

余石蠟標(biāo)本在下次接受樣本時(shí)返還客服部，并由客服簽字確認(rèn)。

9.參照文獻(xiàn)：細(xì)胞、組織基因組DMA提取試劑盒闡明書。（百泰克）

題目：石蠟包埋組織樣本RNA提取原則操作起草：日期：

規(guī)程日期：

編號(hào)：JS-LJ-SOP0002-000日期：

頒發(fā)部門：技術(shù)部生效日期：

分發(fā)部門：技術(shù)部

石蠟包埋組織樣本RNA提取原則操作規(guī)程

1.目的：柱提法從石蠟包埋組織樣本中提取高質(zhì)量的RNA。

2.合用范圍：本程序合用于所有石蠟包埋組織樣品的RNA提取。

3.措施原理：改善口勺異硫制酸服/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA,然后總RNA在高離序

鹽狀態(tài)下選擇件吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列迅速的J漂洗離心的環(huán)節(jié),漂

洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)清除，最終低鹽"勺R(shí)'asefree'愴ler將純凈RNA從硅

基膜上洗脫。

4.試驗(yàn)準(zhǔn)備：

4.1.儀器和試劑：通風(fēng)櫥，小型高速冷凍離心機(jī)；固定紂織基因組RNA（離心柱）提

取試劑盒（百泰克）溶液PTL,蛋白酶K,裂解液MRL,去蛋白液RE,漂洗液RW,

RNase-free70%乙醇，RNase-free吸附柱，氯仿，搜集管，移液器及槍頭。

注意：所有接觸樣品的試劑