TNAIA 0363-2025 青貯玉米中中性洗滌纖維的測定

ICS65.020CCSA011

T/NAIA團 體 標 準T/NAIA0363-2025青貯玉米中中性洗滌纖維的測定DeterminationofneutraldetergentfiberinSilagecorn2025-01-14發(fā)布 2025-01-31實施寧夏化學分析測試協(xié)會 發(fā)布T/NAIA0363-2025T/NAIA0363-2025II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由由寧夏化學分析測試協(xié)會提出并歸口。所。本文件主要起草人：李彩虹、葛謙、牛艷、趙子丹、趙丹青、陳翔、王曉靜、楊春霞、吳燕、楊靜、張維軍、趙健、王曉菁。T/NAIA0363-2025T/NAIA0363-2025PAGEPAGE1青貯玉米中中性洗滌纖維的測定范圍本文件規(guī)定了測定青貯玉米中中性洗滌纖維（NDF）的樣品制備、檢測方法（重量法）和技術要點。本文件適用于青貯玉米中中性洗滌纖維（NDF）的測定。規(guī)范性引用文件（有的修改單）適用于本文件。GB/T6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T14699.1飼料采樣GB/T20195動物飼料試樣的制備GB/T20806飼料中中性洗滌纖維（NDF）的測定術語和定義3.1青貯玉米Silagecorn在玉米乳熟后期至臘熟期間，收獲包括果穗在內(nèi)的地上部整個植株，作為青貯飼料原料的玉米。3.2中性洗滌纖維（NDF）neutraldetergentfiber總稱。原理用熱穩(wěn)定α-淀粉酶和中性洗滌溶液消化、洗滌，除去試樣中容易消化的蛋白質(zhì)、脂類、取樣及試樣制備取樣GB/T14699.1抽取具有代表性的樣品，在運輸和貯存過程中避免發(fā)生損壞和變質(zhì)。5cm～10cm，包括果穗、葉片、莖稈等地面上完整植株。樣品制備（15%T20195制備樣品，粉碎至全部通過1mm孔篩（GB/T6003.1），混勻裝于密封容器，備用。試劑或材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。無水亞硫酸鈉（Na2SO3）。乙二胺四乙酸二鈉（C10H11N2O8Na2·2H2O）。無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4）四硼酸鈉（Na2B4O7·10H2O）十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S）二縮三乙二醇（C6H14O4）α-a-A對熱穩(wěn)定α-淀粉酶進2mLα-0.5g中性洗滌溶液：量取500mL1000mL18.6g乙二胺四乙酸二鈉（6.2）、4.56g無水磷酸氫二鈉（6.3）6.81g四硼酸鈉（6.4），加熱溶解，混勻，置于30g10mL（6.6）950mLpH6.95～7.051000ml。室溫保存。儀器設備7.1 0.01g、0.0001g。纖維測定儀。40μm~100μm26mL~30mL。干燥箱：控溫精度±2℃。馬弗爐:20℃。試驗步驟砂芯坩堝準備將潔凈的砂芯坩堝（7.3）置于105℃±2℃干燥2h，取出，置于干燥器中冷卻30min，稱量（精確至0.0001g)。消煮、洗滌0.5g～0.8g（0.0001g）0.5g無水亞硫酸鈉50mL中性洗滌溶液2a-60min±1minmL2mLa-淀粉酶溶液（6.7）60s，真空抽干后，用水沖洗坩堝中的樣品，直至無泡沫。干燥將砂芯坩堝置于干燥箱中，105℃±2℃430min0.0001g，直至恒重（20.002g）。結果與表達試樣中中性洗滌纖維（NDF）的含量X以質(zhì)量分數(shù)計，數(shù)值以質(zhì)量分數(shù)（%）表示，按式（1）計算。??=??2???1×100 ········································(1)??式中：m1——試樣測定用砂芯坩堝質(zhì)量，單位為克（g）；m2——試樣和砂芯坩堝經(jīng)消煮干燥后的總質(zhì)量，單位為克（g）；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。測定結果以平行測定的算術平均值表示，結果保留至小數(shù)點后1位。精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的6％。技術要點α-淀粉酶溶液（6.7）2℃～85d。11..2在配制中性洗滌溶液（6.8）時，如果pH偏離超過0.5，則舍棄該溶液，重新配制。如果溶液出現(xiàn)沉淀，使用前加熱至25℃，并重新調(diào)節(jié)pH至6.95~7.05。11..3新砂芯坩堝使用前檢查過濾速度，每個砂芯坩堝裝滿50mL水（纖維測定儀砂芯坩25180s±60s（75s±30s)。如果排干時間＜120s（纖維測定儀用砂芯坩堝排干時間＜30用。如果排干時間＞240s（纖維測定儀用砂芯坩堝排干時間＞105s），采用酸性或者堿性清洗液進行清洗。如果清洗后排干時間仍不能滿足要求，則舍棄不用。新砂芯坩堝使用前洗干凈，520℃±201h。砂芯坩堝每次使用后洗干凈，520℃±2031030min。試樣第一次加入中性洗滌溶液和熱穩(wěn)定α-淀粉酶溶液（6.7）煮沸時，期間防止在回1min～2min產(chǎn)生大量泡α-5min～10min后，根據(jù)需要用最少量的中性洗滌溶液（6.8）2次。在過濾時（8.2），不能過度抽真空和過度干燥，否則會導致試樣殘渣堵塞砂芯坩堝，以至于無法清洗。附錄A（規(guī)范性）熱穩(wěn)定α-淀粉酶的校準和稀釋試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。水：GB/T6682，三級。中性洗滌溶液：量取500mL水于1000mL燒杯中，加入18.6g乙二胺四乙酸二鈉(C10H11N2O8Na2·2H2O)）、4.56g無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4）和6.81g四硼酸鈉（Na2B4O7·10H2O)，加熱溶解，混勻，置于通風櫥中。加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S)，溶解后加入10mL二縮三乙二醇（(C6H14O4)消除泡沫，加水至約950mL，攪拌均勻，用濃鹽酸或氫氧化鈉將pH調(diào)至6.95～7.05，用水稀釋至1000mL。室溫保存。碘溶液：稱取2g碘化鉀、1g碘，溶于100mL水，混勻，貯存于棕色瓶中。生玉米粉：取約100g水分含量低于14％的生玉米，粉碎使其全部通過1.00mm分析篩，混勻，裝入密閉容器中，備用。玻璃纖維。儀器設備分析天平：精度0.0001g。回流消煮裝置：配有600mL燒杯、獨立加熱單元和適配600mL燒杯的水冷凝器。冷水?。嚎杀３衷?℃及以下。恒溫水?。嚎杀３譁囟葹?0℃±0.5℃。pH計：精度0.01。試驗步驟A.3.1 稱取0.5g±0.005g650mL中性洗滌溶液（A.1.2），搖勻。量取50mL中性洗滌溶液（A.1.2），置于100mL燒杯中，加入0.10mL熱穩(wěn)定α-淀粉酶，搖勻，作為試劑空白。將6個燒杯（A.2.2）連接到回流消煮裝置上，加熱，5min內(nèi)煮沸，向6個燒杯（A.2.2）中分別加入0mL、0.025mL、0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL熱穩(wěn)定α-淀粉酶，回流消煮10min，1min內(nèi)全部取下，分別再次加入0mL、0.025mL、0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL熱穩(wěn)定α-淀粉酶，搖勻，用最少量的中性洗滌溶液（A.1.2）沖洗燒杯壁，讓熱穩(wěn)定α-淀粉酶反應60s，消煮液通過玻璃纖維（A.1.5）過濾至100mL燒杯。將6個消煮液放入冷水浴中，冷卻，5min后取出，置于20℃±0.5℃水浴中，當消煮液達到20℃±0.5℃α-淀粉酶劑量的順序排列在試劑空白和6個消煮液中快速加入0.5mL碘溶液（A.1.3），混勻，90s觀察燒杯中溶液的顏色，按下述規(guī)定對每種溶液的顏色快速作出判斷：——溶液呈紫色表示酶的量嚴重不足；——溶液呈淺琥珀色或琥珀色表示酶的量仍然不夠；——溶液呈淺黃色則表示酶的量足夠，記錄與之對應的A.3.2添加的熱穩(wěn)定α-淀粉酶體積。注：用空白作為對照，熱穩(wěn)定α淀粉酶溶液的棕色不與淺琥珀色或琥珀色混淆。20℃±0.5℃A.3.3和A.3.4α-改變添加熱穩(wěn)定α-淀粉酶體積和梯度，重新校準。新的熱穩(wěn)定α-α-使用前按照表A.1稀釋熱穩(wěn)定α-淀粉酶，保證稀釋后的2mL熱穩(wěn)定α