常用培養(yǎng)基的制備總結(jié)

常用培養(yǎng)基的制備總結(jié)一、液體培養(yǎng)基1、四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：胨5克，膽鹽1克，碳酸鈣10克，硫代硫酸鈉（含水）30克，蒸餾水1000毫升。（2）碘溶液：碘片6克，碘化鉀5克，蒸餾水20毫升。（3）制法：將基礎(chǔ)培養(yǎng)基的各種成分加入蒸餾水中，加熱溶解，根據(jù)需要分裝成瓶，分裝時(shí)應(yīng)隨時(shí)振搖，使其中的碳酸鈣混勻。121℃高壓滅菌15分鐘備用。臨用時(shí)每100ml基礎(chǔ)液加入碘溶液2ml，0.1％煌溶液1ml。2、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（1）成分：營養(yǎng)肉湯（市面有售）。（2）制法：稱取營養(yǎng)肉湯3克/100ml，根據(jù)需要可分裝成多種規(guī)格，加熱溶解，包裝滅菌，15磅壓力，30分鐘。3、緩沖蛋白胨水（BP）（1）成分：蛋白胨10克，氯化鈉5克，磷酸氫二鈉9克（無水3.57克），磷酸二氫鉀1.5克；蒸餾水1000ml。（2）制法：將上述成分混勻，加熱溶解，校正PH為7.2，分裝滅菌，15磅壓力下滅菌20分鐘，臨用時(shí)以無菌操作分裝試管或瓶中。4、0.9％氯化鈉溶液（1）成分：氯化鈉90克，蒸餾水1萬毫升。（2）制法：稱取氯化鈉90克，倒入裝有1萬毫升蒸餾水的溶液，攪拌溶解。用氫氧化鈉調(diào)PH7.0，分裝入瓶在15磅壓力下滅菌20分鐘。5、蒸餾水溶液將蒸餾水用氫氯化鈉調(diào)PH7.0，分裝入瓶，在15磅壓力下滅菌20分鐘。6、磷酸鹽緩沖液（PBS）（1）成分：氯化鈉8克，氯化鉀0.2克，磷酸二氫鉀0.2克，磷酸氫二鈉1.15克。（2）制法：將上述物質(zhì)混于水中，加熱溶解，混勻后分裝入瓶，10磅壓力，滅菌20分鐘備用。7、保存液（1）成分：葡萄糖20.5克，檸檬酸鈉8.0克，檸檬酸0.55克，氯化鈉4.2克，蒸餾水1000毫升。（2）制法：將上述各種物質(zhì)混于水中，加熱溶解，混勻后分裝入瓶，10磅壓力滅菌10分鐘，放冰箱備用。8、飽和鹽水（1）成分：氯化鈉、蒸餾水。（2）制法：在燒杯內(nèi)裝入氯化鈉（1000ml水中加入約400克氯化鈉）用水煮沸。直到食鹽不再溶解為止，在室溫下冷卻，裝瓶備用，如溶液中出現(xiàn)結(jié)晶沉淀，為飽和溶液。9、清潔液（弱）泡反應(yīng)板用（1）成分：重酪酸鉀1500克，硫酸2500毫升，水20公斤。（2）制法：先用1公斤水熱水，將重酪酸鉀溶解后，然后放入溫水19公斤即可。10、清潔液（強(qiáng)）泡玻璃器皿用（1）成分：重酪酸鉀1500克，硫酸15瓶（2500ml/瓶），開水3700毫升。（2）制法：先用開水3700毫升，將重酪酸鉀充分溶解，再緩緩的將硫酸倒入，邊倒邊攪勻，然后放入較為堅(jiān)固耐溶器內(nèi)。加入1m的氫氯化鈉搖動至PH值為7.4，溶至1000ml即可。二、固體培養(yǎng)基1、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（1）成分：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（市面有售）。（2）制法：稱得22.50克營養(yǎng)瓊脂，放入500ml的三角瓶中，混勻加熱溶解，15磅壓力下滅菌30分鐘。取出后放水浴鍋中待冷至50－55℃，傾注平板，涼后倒置備用。2、血液瓊脂培養(yǎng)基（1）成分：榮立感應(yīng)培養(yǎng)基100ml，脫纖維綿羊血液10毫升。（2）制法：取滅菌營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基100毫升，加熱溶化，待冷至50℃時(shí)，以無菌手續(xù)加入脫纖血10毫升，輕輕搖勻，傾注于滅菌平皿中，經(jīng)無菌檢查后，即可放入冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｗ⒁猓涵傊瑴囟纫?0℃左右為宜，若溫度過高，血液變成暗褐色；溫度過低，瓊脂易凝固成塊。此外加入血液后，要輕輕搖勻，防止產(chǎn)生氣泡。3、麥康凱瓊脂（1）成分：麥康凱瓊脂（市面有售）。（2）制法：按5.2克/100ml比例，加入到蒸餾水中，混勻，加熱溶解。10磅壓力下滅菌20分鐘，待冷至50－60℃時(shí)，傾注平板。4、沙門氏菌志賀氏菌瓊脂（SS瓊脂）（1）成分：SS瓊脂（市面有售）6.5克，蒸餾水100毫升。（2）制法：將SS瓊脂放蒸餾水，混勻，加熱100℃，使其全部溶解。冷卻到60℃左右即可傾入平板凝固后，保存于冰箱備用。注意：用前倒置溫箱中約1小時(shí)，使表面水分干燥，便于劃線分離。本培養(yǎng)基均勻高壓滅菌或加熱時(shí)間過長。5、三糖鐵瓊脂（1）成分：三糖鐵瓊脂（市面有售）6.4克，蒸餾水1000ml。（2）制法：將上述成分混勻，加熱溶解，分裝試管5－7毫升，8磅壓力，滅菌20分鐘，趁熱制成使底層成柱狀，上層斜面，凝固后使用。6、高鹽甘露醇瓊脂（1）成分：蛋白胨10克，牛肉膏1克，氯化鈉75克，甘露醇10克，瓊脂20克，蒸餾水1000毫升，0.1％酚紅溶液25毫升。（2）制法：將蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、瓊脂和蒸餾水混合后加熱溶解，校正PH至7.4±0.1，趁熱加入甘露醇及酚紅溶液，充分混勻，分裝于三角瓶中，10磅滅菌15分鐘，待冷至55℃左右，傾注平板，凝固后冷藏備用。7、葡萄糖瓊脂（1）成分：市售葡萄糖瓊脂3.6，蒸餾水100ml。（2）制法：將3.6克葡萄糖瓊脂放入100ml蒸餾水中，加熱溶解，10磅壓力下滅菌20分鐘，待冷至55℃左右傾注平板。8、磷酸鹽瓊擴(kuò)板(PH=7.2)（1）成分：磷酸氫二鈉3.41克（有水8.6克），磷酸二氫鉀1.27克，瓊脂5.5克，氯化鈉40克，1％硫柳汞5ml。蒸餾水500毫升。（2）制法：先將瓊脂粉加入蒸餾水中，加熱溶解。趁熱放入磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉，校正PH為7.2，加入1％硫柳汞，攪拌均勻，冷至55℃－60℃，傾注平板。每板厚為3mm，20ml。9、磷酸鹽緩沖液板（PH=6.47）（1）成分：磷酸氫二鈉2.1克，磷酸二氫鉀48克，氯化鈉40克，瓊脂粉4克（即0.8％），蒸餾水500毫升，1％硫柳汞5ml。PH為6.47。制法：先將瓊脂粉放入蒸餾水中加熱溶解。趁熱放入磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、1％硫柳汞5ml，攪均后待冷至60℃傾注平板，每板20毫升，厚為3mm。10、硼酸鹽瓊脂板（BBS）（1）成分：四硼酸鈉4.4克，硼酸2.33克，瓊脂粉5克，1％硫柳汞5ml，PH值8.6。（2）制法：先將瓊脂粉放入蒸餾水中，加熱溶解。趁熱放入四硼酸鈉、硼酸、硫柳汞，攪均后待冷至60℃傾注平板，每板20ml，厚為3mm。三、生化用培養(yǎng)基4、尿素培養(yǎng)基（1）成分：蛋白胨0.5克，葡萄糖0.5克，氯化鈉2.5克，磷酸二氫鉀1克