THPCIA 011-2024 化妝品用原料 光甘草定（Glabridin）

ICS71.100.70CCSY42HPCIA團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/HPCIA011—2024化妝品用原料光甘草定（Glabridin）Glabridinforcosmetics2024-09-30發(fā)布 2024-09-30實(shí)施廣州開發(fā)區(qū)黃埔化妝品產(chǎn)業(yè)協(xié)會(huì)??發(fā)布T/HPCIA011T/HPCIA011—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1基本情況 1技術(shù)要求 1試驗(yàn)方法 2檢驗(yàn)規(guī)則 2標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯藏和保質(zhì)期 3附錄A（規(guī)范性） 光甘草酚含量測定方法 4附錄B（規(guī)范性） 光甘草定生物安全性檢測方法 7前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由廣東省人民醫(yī)院提出。本文件由廣州開發(fā)區(qū)黃埔化妝品產(chǎn)業(yè)協(xié)會(huì)歸口。（廣州集團(tuán)有限公（廣州T/HPCIA011T/HPCIA011—2024PAGEPAGE1化妝品用原料光甘草定（Glabridin）范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于由光果甘草根提取的用于化妝品原料的光甘草定。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件?；瘖y品安全技術(shù)規(guī)范GB/T39665-2020含植物提取物類化妝品中55種禁用農(nóng)藥殘留量的測定QB/T4951-2016化妝品用原料光果甘草（Glycyrrhizaglabra）根提取物GB/T6678-2003化工產(chǎn)品采樣總則GB/T6680-2003液體化工產(chǎn)品采樣通則GB/T8170-2008數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB/T191-2016包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T6682-2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法T/HPCIA003—2022化妝品斑馬魚實(shí)驗(yàn)通用技術(shù)規(guī)范術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義?；厩闆r產(chǎn)品中文INCI名稱：光甘草定產(chǎn)品英文INCI名稱：Glabridin活性成分：光甘草定建議配方添加量：≤0.1%CAS：59870-68-7分子量：324.29光甘草定，一般是指以光果甘草根為原料通過提取純化得到的粉末提取物。技術(shù)要求符合表1的要求。表1 光甘草定質(zhì)量指標(biāo)要求項(xiàng)目BA理化指標(biāo)顏色與外觀棕黃色粉末白色粉末氣味無明顯氣味無明顯氣味表1 光甘草定質(zhì)量指標(biāo)要求（續(xù)）項(xiàng)目BA理化指標(biāo)溶解性溶于醇溶于醇光甘草定（%)≥80%≥95%光甘草酚（%)≤1%≤1%甲醇≤0.2%（僅限生產(chǎn)過程使用乙醇）安全性安全性評價(jià)符合附錄B-重金屬汞，mg/kg應(yīng)符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定砷，mg/kg鉛，mg/kg鎘，mg/kg微生物菌落總數(shù)CFU/mL霉菌和酵母菌總數(shù)CFU/mL耐熱大腸菌群菌銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌農(nóng)殘應(yīng)按照GB/T39665-2020《含植物提取物類化妝品中55種禁用農(nóng)藥殘留量的測定》執(zhí)行試驗(yàn)方法除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。顏色與外觀在非直射陽光條件下，取樣品進(jìn)行目測。氣味取樣品感官判定，不應(yīng)有異常氣味。光甘草定(Glabridin按QBT4951-2016《化妝品用原料光果甘草（Glycyrrhizaglabra）根提取物》規(guī)定操作。微生物菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》微生物檢驗(yàn)方法規(guī)定操作。重金屬汞、砷，按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中氫化物原子熒光光度法規(guī)定操作。鉛、鎘，按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中火焰原子吸收分光光度法規(guī)定操作。光甘草酚按本標(biāo)準(zhǔn)附錄A的方法進(jìn)行檢測。安全性按本標(biāo)準(zhǔn)附錄B的方法進(jìn)行檢測。檢驗(yàn)規(guī)則出廠檢驗(yàn)光果甘草根提取物由生產(chǎn)廠質(zhì)量檢驗(yàn)部門取樣檢驗(yàn)，出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為:外觀、光甘草定含量、光甘草酚含量、重金屬、微生物，生產(chǎn)廠應(yīng)保證每批出廠的產(chǎn)品都符合本標(biāo)準(zhǔn)的要求。每一批出廠的產(chǎn)品都應(yīng)有一定格式的質(zhì)量證書，內(nèi)容包括出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目、產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)廠名稱、生產(chǎn)日期或批號、凈重、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)編號。型式檢驗(yàn)型式檢驗(yàn)每年不應(yīng)少于2次。型式檢驗(yàn)的項(xiàng)目為技術(shù)要求中的全部項(xiàng)目，有下列情況之一時(shí)，也應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn):當(dāng)原料、工藝和設(shè)備發(fā)生重大改變時(shí)；6出廠檢驗(yàn)結(jié)果與上次型式檢驗(yàn)有較大差異時(shí)；生產(chǎn)場所改變時(shí)；國家質(zhì)量監(jiān)督機(jī)構(gòu)提出進(jìn)行型式檢驗(yàn)的要求時(shí)。1GB/T6678、GB/T668040g，分別裝入兩個(gè)潔凈、干燥的玻璃瓶中，密封、貼上標(biāo)簽，一瓶供檢驗(yàn)，另一瓶作留樣備查。檢驗(yàn)結(jié)果的判定按GB/T817015標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯藏和保質(zhì)期標(biāo)志產(chǎn)品銷售包裝圖示標(biāo)志應(yīng)按GB/T191執(zhí)行，標(biāo)注內(nèi)容為：產(chǎn)品名稱、商標(biāo)(如有)、保質(zhì)期(用生產(chǎn)日期、保質(zhì)期或生產(chǎn)批號、限期使用日期等方式組合表示)、生產(chǎn)者名稱、地址、凈含量、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號以及根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)所應(yīng)標(biāo)注的其他內(nèi)容。包裝產(chǎn)品采用適宜包裝，根據(jù)用戶要求包裝。運(yùn)輸本產(chǎn)品屬于非危險(xiǎn)品，可采用任何運(yùn)輸工具，在運(yùn)輸時(shí)應(yīng)防火、防熱、防雨淋、防受潮。貯藏通風(fēng)處、干燥密封保存。保質(zhì)期在符合規(guī)定的運(yùn)輸和貯存條件下，產(chǎn)品在包裝完整和未啟封的情況下，保質(zhì)期按銷售包裝標(biāo)注執(zhí)行。規(guī)范性引用文件

附 錄 A（規(guī)范性）光甘草酚含量測定方法GB/T6682《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》原理試樣經(jīng)甲醇提取，用高效液相色譜儀測定，外標(biāo)法定量。試劑和材料水：GB/T6682，一級。甲醇：色譜純對照物質(zhì)光甘草酚，CAS：59870-65-4，純度≥98%。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1000μg/mL：準(zhǔn)確稱取適量（精確至0.0001g）對照物質(zhì)光甘草酚，用甲醇溶解并定容至10mL，于4℃下冷藏保存。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液10μL、50μL、100μL、500μL和1000μL于10mL容量瓶中，用甲醇定容，配制成濃度分別為1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、50μg/mL和100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。有機(jī)濾膜孔徑0.22μm，材質(zhì)為尼龍。儀器設(shè)備高效液相色譜儀（HPLC）配二極管陣列檢測器（DAD）或紫外檢測器（UV）。分析天平感量為0.0001g。渦旋振蕩器超聲波清洗儀功率不低于250W。測定步驟試樣制備稱取試樣約0.1g（精確至0.0001g）于10mL具塞比色管中，加入甲醇至近刻度，渦旋30s，超聲提取20min0.22μm測定參考條件色譜柱：C18250mm4.6mm（內(nèi)徑），5μm，或相當(dāng)者；流動(dòng)相：A：水，BA.1；流速：1.0mL/min；d) 柱溫：30℃；進(jìn)樣體積：10μL；檢測波長：285nm。表A.1高效液相色譜梯度洗脫程序時(shí)間min流動(dòng)相A%流動(dòng)相B%02575145951559515.52575202575標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制光甘草酚的高效液相色譜圖參見圖A.1。圖A.1光甘草酚的高效液相色譜圖（10μg/mL）空白試驗(yàn)除不加入試樣外，均按A.5.1~A.5.3進(jìn)行測定。檢出限和定量限本方法在取樣量為0.1g時(shí)，對于光甘草酚的方法檢出限為0.003%，定量限為0.01%。結(jié)果計(jì)算試樣中光甘草酚的含量按式（A.1）計(jì)算獲得：?=?×?×10?6×100% (A.1)?式中： 試樣中光甘草酚的含量，單位為質(zhì)量百分比（%）； 上機(jī)溶液中光甘草酚的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；V 試樣的定容體積，單位為毫升（mL）；106

——單位轉(zhuǎn)換系數(shù)；m ——試樣的稱樣量，單位為克（g）。方法原理

附 錄 B（規(guī)范性）光甘草定生物安全性檢測方法映其LCL生物安全性風(fēng)險(xiǎn)。生物模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型及維護(hù)要求應(yīng)符合T/HPCIA003—2022《化妝品斑馬魚實(shí)驗(yàn)通用技術(shù)規(guī)范》要求。材料試劑斑馬魚胚胎推薦使用野生型AB品系斑馬魚的魚卵。斑馬魚交配盒實(shí)驗(yàn)用水采用符合GB/T6682規(guī)定的一級水。緩沖水Holt-BufferE3BufferB.3.4.1B.3.4.2。Holt-Buffer按照（B.1）2L2000mL。表B.1Holt-Buffer配方表配方成分添加量NaCl7.000gNaHCO30.400gKCl0.100gCaCl20.235g使用真空過濾器（孔徑：0.2μm）過濾。使用高壓滅菌鍋滅菌，常溫保存，備用。E3Buffer60×母液：按照（B.2）2L2000mL。配方成分添加量NaCl34.800gCaCl2·2H2O5.800gKCl1.600gCaCl20.235gpH7.2。1×E3Buffer16.5mL601L。二甲基亞砜（DMSO）分析純，CAS號：67-68-5光甘草定對照品純度≥99%，CAS號：59870-68-7儀器設(shè)備斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)生化培養(yǎng)箱分析天平精密度為0.0001g。移液器光學(xué)顯微鏡放大倍數(shù)不低于50倍（如連續(xù)變焦體式顯微鏡、熒光顯微鏡等）。實(shí)驗(yàn)室一般常見器材實(shí)驗(yàn)過程樣品前處理精確稱量光甘草定對照品與測試樣品，使用DMSO溶解將其溶解為10g/L母液。實(shí)驗(yàn)前，使用DMSO將對照品及測試樣品母液稀釋為600、500、450、400、300、200mg/L溶液，再分別使用緩沖水稀釋100倍至654.5432mg/LDMSO斑馬魚胚胎的獲取實(shí)驗(yàn)前1天下午喂食后11128.5±0.5T/HPCIA003—2022《化妝品斑馬魚實(shí)驗(yàn)通用技術(shù)規(guī)范》要求。實(shí)驗(yàn)方法試驗(yàn)分組本試驗(yàn)根據(jù)以下方法進(jìn)行分組：空白對照組：含斑馬魚胚胎和緩沖水。1DMSO。試樣測試組：含斑馬魚胚胎和不同濃度試樣溶液。光甘草定對照組：含斑馬魚胚胎和不同濃度光甘草定對照溶液。受試物處理隨機(jī)挑選正常發(fā)育的野生型斑馬魚24hpf（Prim-5stage）胚胎于96孔板，每孔1枚胚胎，每個(gè)濃度設(shè)24200μL28.5±0.5℃生化培養(yǎng)箱中避光孵育48小時(shí)（發(fā)育至72hpf）。在光學(xué)顯微鏡下觀察和記錄胚胎的死亡和畸形情況，計(jì)算存活率和LC50。以心跳停止