玉竹脫毒種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1DB43/TXXXXX—2022玉竹脫毒苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了玉竹脫毒種苗生產(chǎn)技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適于湖南省玉竹脫毒種苗的生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB15618《土壤質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》GB3095《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》GB5084《農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》GB/T8321《農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則》《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量安全管理規(guī)范（試行）》《中華人民共和國(guó)藥典》（2015年版第一部）3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1外植體由活植物體上切取下來(lái)用于組織培養(yǎng)的組織或器官。3.2脫毒原原種苗利用組織培養(yǎng)等途徑獲得的試管苗，經(jīng)檢測(cè)確認(rèn)不攜帶規(guī)定檢測(cè)病毒且移栽成活后的植株。用于繁育原種苗。3.3脫毒原種苗用脫毒原原種苗，在隔離網(wǎng)條件下繁殖出的第一代苗。此過(guò)程也可以省去，用脫毒原原種苗直接在自然隔離的條件下生產(chǎn)脫毒生產(chǎn)種苗。3.4脫毒生產(chǎn)種苗用脫毒原種（或原原種）苗，在自然隔離條件下繁殖出的直接用于大田生產(chǎn)的種苗。4玉竹脫毒原原種苗的生產(chǎn)2DB43/TXXXXX—20224.1品種選擇根據(jù)當(dāng)?shù)卦耘喾绞胶褪袌?chǎng)需求選擇品種。促成或半促成早熟栽培選擇休眠淺的品種，露地栽培選擇休眠深的品種。4.2玉竹脫毒方法主要采用莖尖組織培養(yǎng)與物理方法相結(jié)合進(jìn)行。4.2.1莖尖組織培養(yǎng)4.2.1.1培養(yǎng)基配置滅菌使用MS基本培養(yǎng)基配方附加不同種類和數(shù)量的激素，pH值5.8～6.0。將制備好的培養(yǎng)基溶液分裝于培養(yǎng)瓶，每瓶10ml～15ml，用硫酸紙、鋁箔或耐高溫塑膜扎緊，在1.2kgf/cm高壓鍋中消毒15min～20min，冷卻后備用。4.2.1.2采集外植體采樣最佳時(shí)間為4月～6月份晴天的上午，選擇無(wú)病蟲(chóng)、品種純正的健壯植株，切取莖尖2cm～3cm，流水沖洗1h～2h。4.2.1.3剝?nèi)∏o尖組織將表面清洗過(guò)的外植體置于超凈工作臺(tái)上，用70％乙醇表面消毒數(shù)秒后，用1.0％次氯酸鈉消毒10min～30min或0.1％升汞消毒8min～10min，之后用無(wú)菌水沖洗3～5次后接種。在無(wú)菌接種箱中的解剖鏡下用解剖刀挑取0.2mm～0.3mm的莖尖，接種于莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)基（MS+6-BA0.5~1.0mg/L+NAA0.1mg/L）中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶接種一個(gè)莖尖。4.2.1.4培養(yǎng)條件溫度23℃~25℃,光照強(qiáng)度2000lx～3000lx，每天照光10h～12h。4.2.2繼代培養(yǎng)在無(wú)菌條件下，對(duì)確認(rèn)的無(wú)病毒株系進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)基為MS+6-BA（0.3～0.5）mg/L+IBA0.1mg/L,培養(yǎng)條件同4.2.1.4增殖培養(yǎng)每20d～30d繼代一次，繁殖系數(shù)3～5倍。4.2.3生根培養(yǎng)選2cm～3cm高的小苗轉(zhuǎn)入1/2MS生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)條件同4.2.1.4。生根培養(yǎng)4片葉以上，苗高4cm～6cm，根長(zhǎng)3.0cm，5條根以上，可進(jìn)行煉苗。4.2.4煉苗移栽4.2.4.1煉苗在煉苗間內(nèi)，打開(kāi)生根苗瓶口，自然環(huán)境條件下放置2～3天。4.2.4.2洗苗將培養(yǎng)瓶中經(jīng)過(guò)煉苗處理的試管苗取出，清水小心洗凈根上的培養(yǎng)基。4.2.4.3基質(zhì)配制3DB43/TXXXXX—2022基質(zhì)采用沒(méi)有被使用過(guò)的蛭石、草炭按1：1配制，同時(shí)添加10％的有機(jī)肥，pH值5.5～6.5。4.2.4.4移栽移栽時(shí)間在10～11月份，在隔離網(wǎng)棚采用育苗床或營(yíng)養(yǎng)缽、穴盤等育苗容器進(jìn)行移栽。移栽初期溫度保持在18℃~25℃,濕度8590基質(zhì)含水量7080適當(dāng)遮蔭，2周后轉(zhuǎn)入正常管理，即為脫毒原原種苗。2～3個(gè)月后可移栽定植到大棚，進(jìn)行原種苗繁育。5玉竹脫毒原種苗的繁育5.1產(chǎn)地環(huán)境5.1.1產(chǎn)地環(huán)境質(zhì)量玉竹苗生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境條件應(yīng)符合GB15618和GB3095的規(guī)定。5.1.2土壤條件土層深厚，地形平坦，排灌方便，結(jié)構(gòu)疏松肥沃的微酸性或中性壤土田塊，3年內(nèi)未種植過(guò)玉竹。5.3整地施肥5.3.1施肥原則施用的肥料應(yīng)是在農(nóng)業(yè)行政主管部門已經(jīng)登記或免于登記的肥料和各種農(nóng)家肥。限制使用含氯復(fù)合肥。不準(zhǔn)施用未經(jīng)無(wú)害化處理的城市廢棄物制成的肥料。5.3.2施肥每667m2施農(nóng)家肥4000kg～5000kg，過(guò)磷酸鈣肥30kg或有機(jī)復(fù)合肥20kg，深翻20cm。5.4玉竹脫毒原種苗定植5.4.1種苗選擇使用品種純正、健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的脫毒草莓原原種苗。5.4.2定植時(shí)間春季3～4月份，當(dāng)日平均氣溫達(dá)到10℃以上時(shí)定植。5.4.3定植方式按行距30cm～40cm開(kāi)溝，按株距15cm～20cm定植。6田間管理6.1中耕除草玉竹苗高20cm左右進(jìn)行除草管理6.2肥水管理4DB43/TXXXXX—2022保持土壤濕潤(rùn)，并及時(shí)清溝瀝水，出齊苗后，分別在苗期、旺長(zhǎng)期、現(xiàn)蕾期每畝施用腐熟的家禽糞水600kg或復(fù)合肥45kg。6.3冬季管理每年12月～翌年2月割除雜草及玉竹地上部分，徹底清園。畦面撒施800kg/畝左右腐熟農(nóng)家肥，20kg/畝左右復(fù)合肥，蓋土厚度1cm～2cm,并蓋稻草或玉米秸稈。7檔案管理7.1資料記錄玉竹脫毒種苗生產(chǎn)全過(guò)程應(yīng)按《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量安全管理規(guī)范（試行）》規(guī)定詳細(xì)記錄，見(jiàn)附錄A。7.2檔案管理所有基礎(chǔ)資料及產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)管理記錄均應(yīng)建立檔案，并專管，具備條件的應(yīng)建立計(jì)算機(jī)檔案管理。5DB43/TXXXXX—2022（資料性性）玉竹脫毒苗栽培管理登記表編號(hào)栽植地點(diǎn)海拔緯度經(jīng)度坡向坡度面積土壤類型整地方式種植時(shí)間種植密度底肥追肥病蟲(chóng)害防治采收時(shí)間根莖重