KTB1910-CheKine™ 活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）在神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究中的應(yīng)用

KTB1910-CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）在神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究中的應(yīng)用摘要：本研究運(yùn)用CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法），對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)細(xì)胞及動(dòng)物模型中的活性氧含量進(jìn)行檢測(cè)，分析ROS水平與神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián)，為揭示神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制及尋找潛在治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明，該試劑盒可準(zhǔn)確檢測(cè)神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)樣本的ROS含量，為神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究提供有力支持。一、引言神經(jīng)系統(tǒng)疾病如阿爾茨海默病、帕金森病、腦缺血再灌注損傷等嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和認(rèn)知功能，其發(fā)病機(jī)制與氧化應(yīng)激密切相關(guān)。活性氧在神經(jīng)系統(tǒng)中異常積累可導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞損傷、凋亡，破壞神經(jīng)遞質(zhì)平衡，進(jìn)而引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙。準(zhǔn)確測(cè)定神經(jīng)系統(tǒng)中ROS含量對(duì)于深入研究神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）為神經(jīng)系統(tǒng)疾病氧化應(yīng)激研究提供了高效的檢測(cè)工具。二、材料與方法（一）材料CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y阿爾茨海默病小鼠模型、腦缺血再灌注損傷大鼠模型細(xì)胞培養(yǎng)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)設(shè)備熒光顯微鏡、活體成像系統(tǒng)（用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)）、酶標(biāo)儀（二）方法細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：將SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)后，給予神經(jīng)毒素（如Aβ1-42、MPP+）處理構(gòu)建細(xì)胞損傷模型，利用試劑盒檢測(cè)ROS含量，并檢測(cè)細(xì)胞凋亡、神經(jīng)遞質(zhì)釋放等指標(biāo)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：對(duì)阿爾茨海默病小鼠模型及正常小鼠，通過活體成像系統(tǒng)檢測(cè)大腦不同區(qū)域的ROS熒光信號(hào)強(qiáng)度。對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠模型，在再灌注不同時(shí)間點(diǎn)取腦組織，利用試劑盒檢測(cè)ROS含量，并進(jìn)行病理分析及相關(guān)蛋白表達(dá)檢測(cè)。三、結(jié)果（一）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果神經(jīng)毒素處理后的SH-SY5Y細(xì)胞ROS含量明顯升高，Aβ1-42處理24小時(shí)后，ROS熒光強(qiáng)度增加約4倍。同時(shí)，細(xì)胞凋亡率上升，神經(jīng)遞質(zhì)釋放異常，ROS含量與細(xì)胞凋亡率呈顯著正相關(guān)（r=0.82，P<0.01）。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果阿爾茨海默病小鼠大腦海馬區(qū)、皮質(zhì)等區(qū)域的ROS熒光信號(hào)強(qiáng)度顯著高于正常小鼠，且與β-淀粉樣蛋白沉積區(qū)域相關(guān)。腦缺血再灌注損傷大鼠在再灌注6小時(shí)后，腦組織ROS含量急劇升高，隨后逐漸下降，但仍高于正常水平，且ROS含量升高與神經(jīng)元損傷、炎癥因子表達(dá)增加相關(guān)。四、討論本研究利用CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）在細(xì)胞和動(dòng)物水平揭示了神經(jīng)系統(tǒng)疾病中ROS含量的變化規(guī)律及其與疾病相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系。該試劑盒在神經(jīng)系統(tǒng)樣本檢測(cè)中具有良好的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，能夠?yàn)樯窠?jīng)系統(tǒng)疾病氧化應(yīng)激研究提供可靠數(shù)據(jù)。但在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，樣本采集及處理過程較為復(fù)雜，需嚴(yán)格控制操作流程以保證結(jié)果準(zhǔn)確性。未來可結(jié)合基因編輯技術(shù)，進(jìn)一步研究特定基因?qū)ι窠?jīng)細(xì)胞ROS代謝的影響，深入揭示神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制。五、結(jié)論CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）在神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究中具有重要應(yīng)用價(jià)值，有助于深入理解神經(jīng)系統(tǒng)疾病的氧化應(yīng)激機(jī)制，為疾病治療提供新靶點(diǎn)。技術(shù)支持亞科因（武漢）