保健食品原料 輔酶Q10 征求意見稿

3GB/TXXXX.3—XXXX保健食品原料輔酶Q10本文件規(guī)定了保健食品用原料輔酶Q10的質(zhì)量要求，包括技術(shù)要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則和標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存。本文件適用于經(jīng)微生物（酵母菌或類球紅細(xì)菌）發(fā)酵、提取、精制，或動物心臟經(jīng)提取、精制，或以茄尼醇為原料經(jīng)合成、精制等過程制得的保健食品用原料輔酶Q10的生產(chǎn)、檢驗(yàn)和銷售。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T602化學(xué)試劑雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB2760食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)的測定GB4789.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)GB4789.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB4789.10食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)GB4789.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測定GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB7718食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4化學(xué)名稱、分子式、結(jié)構(gòu)式和相對分子質(zhì)量4.1化學(xué)名稱2-[(全-E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-十甲基-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-四十癸烯基]-5,6-二甲氧基-3-甲基-p-苯醌。4.2分子式GB/TXXXX.3—XXXX4C59H90O4。4.3結(jié)構(gòu)式輔酶Q104.4相對分子質(zhì)量863.36（按照《中華人民共和國藥典：2020年版.二部》）。5技術(shù)要求5.1鑒別保健食品用原料輔酶Q10鑒別應(yīng)同時滿足以下要求：a）符合顯色反應(yīng)判別結(jié)果；b）色譜主峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號：303-98-0）一致；c）紅外光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號：303-98-0）一致。5.2感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1感官指標(biāo)5.3理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2理化指標(biāo)順式異構(gòu)體/%GB/TXXXX.3—XXXX5≤≤≤≤5.4微生物指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3微生物指標(biāo)霉菌和酵母/（CFU/g)≤金黃色葡萄球菌≤5.5標(biāo)志性成分指標(biāo)應(yīng)符合表4的規(guī)定。表4標(biāo)志性成分指標(biāo)5.6其他要求商品化原料輔酶Q10所用的輔料應(yīng)收錄于GB2760或《保健食品備案產(chǎn)品可用輔料名單》中，并應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)規(guī)定。6試驗(yàn)方法6.1鑒別按附錄A中A.2規(guī)定的方法執(zhí)行。6.2輔酶Q10按附錄A中A.3規(guī)定的方法測定。6.3感官要求取適量樣品，置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光下觀察色澤和狀態(tài)。嗅其氣味，用溫開水漱口，品其滋味。6.4有關(guān)物質(zhì)GB/TXXXX.3—XXXX6按附錄A中A.4規(guī)定的方法測定。6.5順式異構(gòu)體按附錄A中A.5規(guī)定的方法測定。6.6熾灼殘?jiān)锤戒汚中A.6規(guī)定的方法測定。6.7鉛按GB5009.12規(guī)定的方法測定。6.8總砷按GB5009.11規(guī)定的方法測定。6.9總汞按GB5009.17規(guī)定的方法測定。6.10菌落總數(shù)按GB4789.2規(guī)定的方法測定。6.11霉菌和酵母按GB4789.15規(guī)定的方法測定。6.12大腸菌群按GB4789.3中“MPN計(jì)數(shù)法”規(guī)定的方法測定。6.13沙門氏菌按GB4789.4規(guī)定的方法測定。6.14金黃色葡萄球菌按GB4789.10規(guī)定的方法測定。7檢驗(yàn)規(guī)則7.1組批同一批原料、相同生產(chǎn)工藝、連續(xù)生產(chǎn)或同一班次生產(chǎn)的同一規(guī)格的產(chǎn)品為一批。7.2抽樣7.2.1按表5規(guī)定隨機(jī)抽取樣本。表5輔酶Q10原料抽樣表7<5024>10067.2.2將抽取的樣品平均分裝2份置于兩個潔凈、干燥的容器中，密封，注明產(chǎn)品名稱、批號、取樣時間及地點(diǎn)、取樣人姓名等，其中1份供檢測用，另1份封存后保存以備復(fù)查。7.3出廠檢驗(yàn)出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為：感官、輔酶Q10含量、有關(guān)雜質(zhì)、順義異構(gòu)體、熾灼殘?jiān)?.4型式檢驗(yàn)檢驗(yàn)項(xiàng)目為本文件要求中規(guī)定的全部項(xiàng)目，一般情況下，型式檢驗(yàn)半年進(jìn)行一次。有下列情況之一時，也應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：a)原輔料有較大變化時；b)更改關(guān)鍵工藝或設(shè)備時；c)新試制的產(chǎn)品或正常生產(chǎn)的產(chǎn)品停產(chǎn)三個月后，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；d)出廠檢驗(yàn)與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時；e)生產(chǎn)場所發(fā)生變化時；f)國家行政主管機(jī)構(gòu)提出型式檢驗(yàn)要求時。7.5判定規(guī)則7.5.1所檢驗(yàn)項(xiàng)目全部合格，判定該批次產(chǎn)品合格。7.5.2檢驗(yàn)結(jié)果中有任何指標(biāo)不符合本文件規(guī)定時，可自同批產(chǎn)品中重新加倍取樣進(jìn)行復(fù)檢。若復(fù)檢結(jié)果仍不符合本文件規(guī)定,則判定該批產(chǎn)品不合格。微生物指標(biāo)不應(yīng)復(fù)檢。8標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存8.1標(biāo)志8.1.1標(biāo)簽或說明書中應(yīng)標(biāo)示產(chǎn)品分類。8.1.2包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191的要求。8.2標(biāo)簽8.2.1標(biāo)簽標(biāo)示內(nèi)容除應(yīng)符合GB7718的要求外，商品化原料還應(yīng)標(biāo)示所用輔料。8.3包裝8.3.1包裝容器應(yīng)整潔、無破損。8.4運(yùn)輸8.4.1運(yùn)輸工具應(yīng)清潔。8.4.2不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混裝、混運(yùn)，應(yīng)避免受潮、受壓、曝曬。裝卸時，應(yīng)輕拿輕放，不得直接鉤扎包裝。GB/TXXXX.3—XXXX88.5貯存8.5.1應(yīng)儲存在密封、避光、陰涼干燥、清潔的倉庫內(nèi)，嚴(yán)防曝曬雨淋，嚴(yán)禁火種。8.5.2不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混放。GB/TXXXX.3—XXXX9（規(guī)范性附錄）檢驗(yàn)方法A.1一般規(guī)定本方法中所用的水，在未注明其他要求時，應(yīng)符合GB/T6682中水的規(guī)格，所用試劑，在未注明其他規(guī)格時，均指分析純。分析中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明其它要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。A.2鑒別試驗(yàn)A.2.1顯色法A.2.1.1分析步驟按照A.3.3.1制備試樣，加入硼氫化鈉50mg，搖勻。A.2.1.2結(jié)果判別溶液黃色消失。A.2.2高效液相色譜法A.2.2.1分析步驟按照A.3中的步驟制備試樣與操作。A.2.2.2結(jié)果判別試樣溶液（A.3.3.1）主峰的保留時間應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品溶液（A.3.3.2）主峰的保留時間基本保持一致。輔酶Q10高效液相色譜圖見附錄B圖B.1。A.2.3紅外光譜法A.2.3.1操作步驟取適量樣品，與100mg光譜級溴化鉀充分混勻，壓片，置紅外光譜儀中掃描。A.2.3.2結(jié)果判別試樣紅外光吸收圖譜應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品的紅外光吸收圖譜一致。輔酶Q10紅外光吸收圖譜見圖B.2。A.3輔酶Q10含量的測定A.3.1試劑和材料A.3.1.1甲醇：色譜純。A.3.1.2無水乙醇：色譜純。GB/TXXXX.3—XXXXA.3.1.3輔酶Q10標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號：303-98-0）：純度不低于99%，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予證書的標(biāo)準(zhǔn)品。A.3.1.4輔酶Q9標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號：303-97-9）：純度不低于99%，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予證書的標(biāo)準(zhǔn)品。A.3.2儀器和設(shè)備A.3.2.1恒溫水浴鍋。A.3.2.2高效液相色譜儀：配有紫外檢測器或相當(dāng)者。A.3.2.3電子天平：感量0.1mg。A.3.2.4色譜參考條件色譜參考條件如下：a）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（粒徑5μm，4.6mm×150mm），或等效色譜柱；b）流動相：甲醇-無水乙醇（50：50，體積分?jǐn)?shù)）；c）柱溫：35℃;d）檢測波長：275nm；e）進(jìn)樣量：20μL。A.3.3分析步驟A.3.3.1試樣溶液的制備避光操作。稱取輔酶Q10原料約20mg（精確至0.1mg加入無水乙醇（A.3.1.2）40mL，在50℃水浴中振搖至溶解，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用無水乙醇（A.3.1.2）稀釋定容至刻度，搖勻，制成濃度約為0.2mg/mL的試樣溶液。A.3.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備避光操作。稱取輔酶Q10標(biāo)準(zhǔn)品（A.3.1.3）約20mg（精確至0.1mg），加入無水乙醇（A.3.1.2）40mL，在50.0℃水浴中振搖至溶解，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用無水乙醇（A.3.1.2）稀釋定容至刻度，搖勻，制成濃度約為0.2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。A.3.3.3系統(tǒng)適用性溶液的制備溶解并稀釋制成輔酶Q10和輔酶Q9濃度都約為0.2mg/mL的系統(tǒng)適用性溶液。A.3.3.4測定將標(biāo)準(zhǔn)溶液（A.3.3.2）和試樣溶液（A.3.3.1）依次注入高效液相色譜儀，得到相應(yīng)峰面積（輔酶Q10高效液相色譜圖見圖B.1），外標(biāo)法計(jì)算試樣中輔酶Q10的含量。A.3.3.5系統(tǒng)適用性要求將系統(tǒng)適用性溶液（A.3.3.3）注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。輔酶Q9峰和輔酶Q10峰的分離度應(yīng)大于6.5，理論板數(shù)按輔酶Q10峰計(jì)算不低于3000。GB/TXXXX.3—XXXXA.3.4結(jié)果計(jì)算輔酶Q10含量按式（A.1）計(jì)算：式中：W——輔酶Q10的含量，%；Au——試樣溶液的峰面積；CS——標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL)；V——試樣溶液的定容體積，單位為毫升（mL）；As——標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積；m——試樣的稱樣量，單位為毫克（mg）。計(jì)算結(jié)果保留一位小數(shù)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的2%。A.4有關(guān)物質(zhì)的測定A.4.1試劑和材料A.4.1.1甲醇：色譜純。A.4.1.2無水乙醇：色譜純。A.4.1.3輔酶Q10標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號：303-98-0）：純度不低于99%，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予證書的標(biāo)準(zhǔn)品。A.4.1.4輔酶Q9標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號：303-97-9）：純度不低于99%，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予證書的標(biāo)準(zhǔn)品。A.4.2儀器和設(shè)備A.4.2.1電子天平：感量0.1mg。A.4.2.2恒溫水浴鍋。A.4.2.3高效液相色譜儀。A.4.3色譜條件色譜參考條件如下：a）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（粒徑5μm，4.6mm×150mm），或等效色譜柱；b）流動相：甲醇-無水乙醇（50：50，體積分?jǐn)?shù)）；c）柱溫：35℃;d）檢測波長：275nm；e）進(jìn)樣量：20μL。A.4.4分析步驟A.4.4.1試樣溶液的制備避光操作。精密稱取輔酶Q10原料約20mg，加無水乙醇（A.4.1.2）40mL，在50℃水浴中振搖溶解，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用無水乙醇（A.4.1.2）稀釋定容至刻度，搖勻，制成濃度約為0.2mg/mL的試樣溶液。A.4.4.2對照溶液的制備避光操作。精密量取試樣溶液（A.4.4.1）1mL，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋定容至刻度，搖勻，制成濃度約為2μg/mL的對照溶液。A.4.4.3系統(tǒng)適用性溶液的制備避光操作。精密稱取輔酶Q10標(biāo)準(zhǔn)品（A.4.1.3）和輔酶Q9標(biāo)準(zhǔn)品（A.4.1.4）適量，用無水乙醇溶解并稀釋制成輔酶Q10和輔酶Q9濃度都約為0.2mg/mL的系統(tǒng)適用性溶液。A.4.4.4靈敏度溶液的制備避光操作。精密量取對照溶液（A.4.4.2）1mL，轉(zhuǎn)移至20mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋定容至刻度，搖勻，制成濃度0.1μg/mL的靈敏度溶液。A.4.4.5測定將上述溶液依次注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍，分別測量靈敏度溶液（A.4.4.4）、對照溶液（A.4.4.2）色譜圖中的主峰面積和試樣溶液（A.4.4.1）色譜圖中所有峰的面積。。試樣溶液色譜圖中單個雜質(zhì)峰面積不應(yīng)大于對照溶液主峰面積的0.5倍（0.5%），各雜質(zhì)峰面積之和不應(yīng)大于對照溶液的主峰面積（1.0%）。試樣溶液色譜圖中小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計(jì)。A.4.4.6系統(tǒng)適用性要求將系統(tǒng)適用性溶液（A.4.4.3）注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。輔酶Q9峰和輔酶Q10峰的分離度應(yīng)大于6.5，理論板數(shù)按輔酶Q10峰計(jì)算不低于3000。A.4.4.7靈敏度要求取靈敏度溶液（A.4.4.4）注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。主成分色譜峰高的信噪比不小于10。A.4.4.8結(jié)果計(jì)算樣品中單個雜質(zhì)含量按式（A.2）計(jì)算；樣品中總雜質(zhì)含量按式（A.3）計(jì)算：式中：W——單個雜質(zhì)的含量，單位為%；Au——試樣溶液中（除去主峰）單個雜質(zhì)的峰面積；As——對照溶液的主峰面積；F——稀釋倍數(shù)為100。式中：GB/TXXXX.3—XXXXW——總雜質(zhì)的含量，單位為%；An——試樣溶液中（除去主峰）各雜質(zhì)的峰面積和；As——對照溶液的主峰面積；F——稀釋倍數(shù)為100。計(jì)算結(jié)果保留一位小數(shù)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值應(yīng)不超過其算術(shù)平均值的2%。A.5順式異構(gòu)體的測定A.5.1試劑和材料A.5.1.130%過氧化氫溶液。A.5.1.2正己烷：色譜純。A.5.1.3乙酸乙酯：色譜純。A.5.2儀器和設(shè)備A.5.2.1電子天平：感量0.1mg。A.5.2.2光照箱。A.5.2.3高效液相色譜儀。A.5.3色譜條件色譜參考條件如下：a）色譜柱：C18柱（粒徑5μm，4.6mm×250mm），或等效色譜柱；b）流動相：正己烷-乙酸乙酯（97:3，體積分?jǐn)?shù)）；c）流速：2.0mL/min；d）檢測波長：275nm；e）進(jìn)樣量：20μL。A.5.4分析步驟A.5.4.1試樣溶液的制備避光操作。精密稱取輔酶Q10原料，加正己烷溶解，稀釋制成濃度約為1mg/mL的試樣溶液。A.5.4.2對照溶液的制備避光操作。精密量取試樣溶液（A.5.4.1）1mL，轉(zhuǎn)移至200mL容量瓶中，用正己烷稀釋制成濃度約為5μg/mL的對照溶液。臨用現(xiàn)配。避光操作。A.5.4.3系統(tǒng)適用性溶液的制備避光操作。精密稱取輔酶Q10原料樣品約10mg，加正己烷溶解并稀釋制成濃度約為1mg/mL的溶液，加入30%過氧化氫溶液2μL，置光照箱（溫度30℃,LX2000）下放置4小時，搖勻，作為系統(tǒng)適用性溶液。臨用現(xiàn)配。GB/TXXXX.3—XXXXA.5.4.4測定將上述對照溶液（A.5.4.2）和試樣溶液（A.5.4.1）依次注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。分別測量對照溶液的主峰面積和試樣溶液色譜圖中順式異構(gòu)體的峰面積。試樣溶液色譜圖中如有與順式異構(gòu)體保留時間一致的色譜峰，其峰面積不得大于對照溶液的主峰面積（0.5%）。A.5.4.5系統(tǒng)適用性要求將系統(tǒng)適用性溶液（A.5.4.3）注入高效液相色譜儀，輔酶Q10