DB15T 3609-2024黑土地土壤微生物肥力評價規(guī)范

15SpecificationforevaluationofsoilmicrobialfertilityinblacksoilI1黑土地土壤微生物肥力評價規(guī)范力評價指標(biāo)及測定，土壤微生物肥力評價方法土壤微生物肥力soilmicrobialfertility能對土壤的物理和化學(xué)特性起到促進(jìn)和維持作用的微生物，在生物過程中為植物生長發(fā)育提供所土壤呼吸強度soilrespirationintensity2土壤微生物取樣宜在植物生長旺盛期采樣。內(nèi)蒙古東北區(qū)采集時間宜選擇在7～8月初進(jìn)行，在野用定位儀確定采樣地點的地理位置(經(jīng)緯度),每個樣地面積原則上應(yīng)>1hm2,在平原區(qū)地形宜設(shè)置為100m×100m正方形，在丘陵山區(qū)狹長地帶宜選擇50m×200m的長方形。式、氣候條件、耕作以及施肥方式等將所評價樣地劃分為3個條件相對一致的采樣單元。的不銹鋼土鉆隨機采集15～20個0cm~20cm土層的土壤樣品，按四分法混合成一個土壤微生物樣品，以1kg左右為宜，若采集的樣品量過多時，可用四分法(按照NY/T1121.1的規(guī)定執(zhí)行)將多余的土壤棄去，最后保留1kg左右。每個樣地分別采集3個微生物混合樣作為重復(fù)。將采集土樣放入無菌袋中，并在袋上寫清采樣編號后立即放于4℃冷藏箱或者冰存有土樣的4℃冷藏箱或者冰袋在48h內(nèi)運回實驗室，并統(tǒng)一保存于4℃環(huán)境中。具體評價項目包括土壤微生物數(shù)量、微生物生物量碳氮、酶活性和微生物活性(微生物熵),其中3——微生物熵；5.2.1微生物數(shù)量測定5.2.2微生物生物量測定5.2.2.1微生物生物量碳5.2.2.2微生物生物量氮5.2.3土壤酶活性測定5.2.3.1纖維素酶活性5.2.3.2蔗糖酶活性蔗糖酶活性以蔗糖為底物，采用3,5-二硝基水楊酸比色法測定，具體方法見附錄B中的B.1。5.2.3.3脲酶活性5.2.3.4磷酸酶活性5.2.3.5過氧化氫酶活性5.2.3.6硝酸還原酶活性5.2.3.7多酚氧化酶活性））5.2.4土壤呼吸強度的測定4土壤呼吸強度測定按照LY/T1220的規(guī)定執(zhí)行。6土壤微生物肥力評價方法6.1確定各評價指標(biāo)權(quán)重參照表1規(guī)定的層次分析法，建立目標(biāo)層、準(zhǔn)則層和指標(biāo)層層次結(jié)構(gòu)，構(gòu)建判斷矩陣。經(jīng)層次單排序及其一致性檢驗、層次總排序、層次總排序的一致性檢驗，計算并確定所有評價指標(biāo)對黑土地微生物肥力(目標(biāo)層)相對重要性的排序權(quán)重值。具體方法按照GB/T33469的規(guī)定執(zhí)行。表1黑土地土壤微生物肥力評價因子總集目標(biāo)層多酚氧化酶活性6.2計算各指標(biāo)隸屬度6.2.1函數(shù)模型選擇及隸屬度計算土壤微生物數(shù)量、微生物生物量碳氮、微生物熵及酶活性均屬于S型隸屬函數(shù)，各評價因素的隸屬函數(shù)可簡化為公式(2):式中：f(u)——隸屬函數(shù)；uo——評價指標(biāo)的閾值上限值。6.2.2隸屬函數(shù)閾值上限的確定采用累積頻率曲線確定隸屬函數(shù)閾值上限，一組樣本u,u2,...un,給定某一閾值uo,不大于uo的樣本數(shù)為m,則稱m/n為不大于uo的累積頻率，計算得到累積頻率曲線。以所有被測指標(biāo)數(shù)據(jù)累積頻率為75%的指標(biāo)值作為隸屬函數(shù)的閾值上限。6.3土壤微生物肥力指數(shù)模型采用主成分分析法確定單項評價指標(biāo)的權(quán)重值Ci。根據(jù)作用效應(yīng)曲線，建立隸屬函數(shù)，計算各評價指標(biāo)的隸屬度Fi。利用累加法建立土壤微生物肥力指數(shù)模型，將所選的單個指標(biāo)的評價結(jié)果轉(zhuǎn)換為由各評價指標(biāo)構(gòu)成的土壤微生物肥力綜合評價。土壤微生物肥力指數(shù)模型如公式(3):5MIF=∑(×)(3)——第i個評價指標(biāo)的組合權(quán)重；——第i個評價指標(biāo)的隸屬度。根據(jù)6.2.2確定的閾值上限，利用公式(2)計算各個土壤樣品的隸屬度值。然后應(yīng)用公式(3)中所建6A.1.1方法原理A.1.2試劑配制A.1.3儀器設(shè)備A.1.4水分測定A.1.5樣品測定7A.1.6熏蒸），在熏蒸的同時，另稱取等量的土壤3份，置于另一干燥器中，除不加A.1.7浸提），A.1.8測定的重鉻酸鉀，溶液的變色過程是橙黃-藍(lán)綠-棕紅，即為終點。記錄硫酸亞鐵滴定量。A.1.9結(jié)果計算8A.1.10精密度A.2.1方法原理A.2.2試劑配制A.2.2.1去乙醇氯仿（CHCl3同A.1.2中的去乙醇氯仿制備。A.2.3儀器設(shè)備），A.2.4水分測定9同A.1.4。A.2.5樣品測定同A.1.5。A.2.6熏蒸同A.1.6。A.2.7浸提同A.1.7。A.2.8消化A.2.9測定A.2.10結(jié)果計算A.2.11精密度B.1.1方法原理土壤蔗糖酶將蔗糖酶促水解為還原糖，還原糖與3,5-二硝基水楊酸在沸水浴中反應(yīng)而生成橙色的3-氨基-5-硝基水楊酸，顏色深度與還原糖量呈正相關(guān)，因而B.1.2試劑配制）：B.1.3儀器設(shè)備B.1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制），B.1.5測定步驟B.1.5.1水分測定B.1.5.2樣品測定注意事項:c)如果樣品吸光值超過標(biāo)曲的最大值，則應(yīng)該增加分取倍數(shù)或減少培養(yǎng)的土樣。B.1.6結(jié)果計算=…………………(B.1)B.1.7精密度B.2.1方法原理B.2.2試劑配制B.2.2.6次氯酸鈉溶液：根據(jù)市售次氯酸鈉溶液濃度稀釋試劑，至活性氯的濃度為0.9%。B.2.3儀器設(shè)備B.2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制B.2.5測定步驟B.2.5.1水分測定B.2.5.2樣品測定注意事項:c)如果樣品吸光值超過標(biāo)曲的最大值，則應(yīng)該增加分取倍數(shù)或減少培養(yǎng)的土樣。B.2.6結(jié)果計算X=…………………(B.2)f——表示土壤樣品干物質(zhì)含量，單位為百分含量表示（%B.2.7精密度B.3.1方法原理劑反應(yīng)生成藍(lán)色，顏色深度與酚含量呈正相關(guān)，用比色法測定游離的酚含量來表示磷酸酶的活B.3.2試劑配制7·4)3）：）：）：）：B.3.3儀器設(shè)備B.3.4標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制B.3.5測定步驟B.3.5.1水分測定B.3.5.2樣品測定B.3.6結(jié)果計算X=…………………(B.3)f——表示土壤樣品干物質(zhì)含量，單位為百分含量表示（%B.3.7精密度B.4.1方法原理B.4.2試劑配制B.4.2.4高錳酸鉀（K2B.4.3儀器設(shè)備B.4.4測定步驟B.4.4.1水分測定B.4.4.2樣品測定色為終點。根據(jù)空白和樣品的滴定差，求出相當(dāng)于分解過氧化氫的量所消耗的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。B.4.5結(jié)果計算X=…………(B.4)f——表示土壤樣品干物質(zhì)含量，單位為百分含量表示（%B.4.6精密度B.5.1方法原理2-。B.5.2試劑配制B.5.2.4鋁鉀礬飽和溶液。B.5.3