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第三節(jié)發(fā)酵工程及其應(yīng)用
青霉素是世界上第一個(gè)應(yīng)用于臨床的抗生素。早期科學(xué)家只能從青霉菌中提取少量,價(jià)格貴如金。隨著高產(chǎn)菌種的選育、發(fā)酵技術(shù)的發(fā)展等,青霉素步入了產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的道路。如今,一瓶規(guī)格160萬(wàn)單位青霉素注射劑的價(jià)格只要1元左右。那么,在工業(yè)上,青霉素究竟是怎樣生產(chǎn)的呢?選育高產(chǎn)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)配制培養(yǎng)基滅菌接種發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵分離、提純產(chǎn)物獲得產(chǎn)品發(fā)酵工程形成的條件隨著人們對(duì)發(fā)酵原理的認(rèn)識(shí),微生物純培養(yǎng)技術(shù)的建立,以及密閉式發(fā)酵罐的成功設(shè)計(jì),人們能夠在嚴(yán)格控制的環(huán)境條件下大規(guī)模生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品,發(fā)酵工程逐步形成。發(fā)酵工程的應(yīng)用發(fā)酵工程與農(nóng)業(yè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及其他工業(yè)生產(chǎn)有著密切的聯(lián)系。一、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)1、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)2、思考討論1、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)發(fā)酵工程一般包括菌種的選育,擴(kuò)大培養(yǎng),培養(yǎng)基的配制、滅菌,接種,發(fā)酵,產(chǎn)品的分離、提純等方面。在青霉素生產(chǎn)過(guò)程中如果有雜菌污染,某些雜菌會(huì)分泌青霉素酶,將青霉素分解掉。生產(chǎn)檸檬酸生產(chǎn)啤酒生產(chǎn)青霉素生產(chǎn)味精黑曲霉啤酒酵母黃青霉谷氨酸棒狀桿菌在菌種確定之后,要選擇原料制備培養(yǎng)基。在生產(chǎn)實(shí)踐中,培養(yǎng)基的配方要經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)才能確定。接種選育菌種制備培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)滅菌發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵分離、提純產(chǎn)物獲得產(chǎn)品性狀優(yōu)良的菌種可以從自然界中篩選出來(lái),也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得。工業(yè)發(fā)酵罐的體積一般為幾十到幾百立方米,接入的菌種總體積需要幾立方米到幾十立方米。所以,在發(fā)酵之前還需要對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵工程中所用的菌種大多數(shù)是單一菌種,一旦有雜菌污染,可能導(dǎo)致產(chǎn)量大大下降。因此,培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌?,F(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐均有計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng),能對(duì)發(fā)酵過(guò)程中的溫度、pH、溶解氧、罐壓、通氣量、攪拌、泡沫和營(yíng)養(yǎng)等進(jìn)行監(jiān)測(cè)和控制;還可以進(jìn)行反饋控制,使發(fā)酵全過(guò)程處于最佳狀態(tài)。電動(dòng)機(jī)排氣管pH計(jì)冷卻水排出口冷卻夾層發(fā)酵液攪拌葉輪生物傳感器裝置空氣入口放料管閥門(mén)培養(yǎng)物或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的加入口觀察孔取樣管溫度傳感器和控制裝置冷卻水進(jìn)入口
這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)酵過(guò)程中,要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量、產(chǎn)物的濃度等,以了解發(fā)酵進(jìn)程。還要及時(shí)添加必需的營(yíng)養(yǎng)組分,要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。
環(huán)境條件不僅會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖,而且會(huì)影響微生物代謝物的形成。如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身,可在發(fā)酵結(jié)束之后,采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥,即可得到產(chǎn)品。如果產(chǎn)品是代謝物,可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施來(lái)獲得產(chǎn)品。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)分析結(jié)合圖1-9,分析和討論以下問(wèn)題。1.微生物菌種資源豐富,選擇發(fā)酵工程用的菌種時(shí)需要考慮哪些因素?需要考慮的因素包括:在低成本的培養(yǎng)基上能迅速生長(zhǎng)繁殖;生產(chǎn)所需代謝物的產(chǎn)量高;發(fā)酵條件容易控制;菌種不易變異、退化等。2.怎樣對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行調(diào)控以滿足微生物的生長(zhǎng)需要?要對(duì)溫度、pH、溶解氧等發(fā)酵條件進(jìn)行嚴(yán)格控制,使其最適合微生物的生長(zhǎng)繁殖,同時(shí)及時(shí)添加必要的營(yíng)養(yǎng)組分。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)分析結(jié)合圖1-9,分析和討論以下問(wèn)題。3.在產(chǎn)物分離和提純方面,發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比有哪些改進(jìn)之處?傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)獲得的產(chǎn)物一般不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物,很多時(shí)候不會(huì)再對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分離和提純處理,或者僅采用簡(jiǎn)單的沉淀、過(guò)濾等方法來(lái)分離和提純產(chǎn)物。在發(fā)酵工程中使用的分離和提純產(chǎn)物的方法較多。在產(chǎn)物的初分離階段,常采用沉淀、萃取、膜分離、吸附和離子交換等方法;在進(jìn)一步純化階段,會(huì)采用液相層析法、結(jié)晶法等方法。發(fā)酵工程產(chǎn)物無(wú)論是代謝物還是菌體本身,都需要進(jìn)行質(zhì)量檢查,合格后才能成為正式產(chǎn)品。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)分析結(jié)合圖1-9,分析和討論以下問(wèn)題。4.在進(jìn)行發(fā)酵時(shí),排出的氣體和發(fā)起培養(yǎng)液等能直接排放到外界環(huán)境中嗎?為什么?不能。因?yàn)樵谶M(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)時(shí),微生物及其代謝物中都可能含有危害環(huán)境的物質(zhì)。為了減少或避免污染物的產(chǎn)生和排放,實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn),應(yīng)該對(duì)排出的氣體和廢棄培養(yǎng)液進(jìn)行二次清潔或滅菌處理。旁欄思考(p22):某鎮(zhèn)特產(chǎn)一種美酒,以下是對(duì)該鎮(zhèn)環(huán)境的描述:四面環(huán)山,地勢(shì)低洼,氣候炎熱,具有獨(dú)特的微生物種群,因?yàn)榕c外界的空氣對(duì)流循環(huán)較緩慢,所以微生物種群較穩(wěn)定。這對(duì)你理解發(fā)酵工程中菌種選育的重要性有什么啟示?提示:我國(guó)幅員遼闊,地理生態(tài)環(huán)境多樣,為各種微生物的生長(zhǎng)繁殖提供了條件,這有利于發(fā)酵工程選育菌種。優(yōu)良的菌種不僅具有健壯,不易退化,其發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量高、質(zhì)量穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),它往往還會(huì)賦予發(fā)酵產(chǎn)品獨(dú)特的風(fēng)味,因此菌種選育環(huán)節(jié)很大程度上決定了生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品的成敗。二、發(fā)酵工程的應(yīng)用1、發(fā)酵工程的特點(diǎn)2、在食品工業(yè)上的應(yīng)用3、在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用4、在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用5、在其他方面的應(yīng)用(1)生產(chǎn)條件溫和。(2)原料來(lái)源豐富且價(jià)格低廉。(3)產(chǎn)物專(zhuān)一。(4)廢棄物對(duì)環(huán)境的污染小以及容易處理。1、發(fā)酵工程的特點(diǎn)第一,生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵食品。例如,用大豆來(lái)生產(chǎn)醬油產(chǎn)品;谷物或水果生產(chǎn)各種酒類(lèi)。2、在食品工業(yè)上的應(yīng)用大豆(蛋白質(zhì))黑曲霉(蛋白酶)小分子的肽和氨基酸醬油淋洗、調(diào)制谷物或水果釀酒酵母酒類(lèi)第二,生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑。食品添加劑不僅可以增加食品的營(yíng)養(yǎng),改善食品的口味、色澤和品質(zhì),有時(shí)還可以延長(zhǎng)食品的保存期。許多食品添加劑都通過(guò)發(fā)酵工程生產(chǎn)。實(shí)例,檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑,可以通過(guò)黑曲霉的發(fā)酵制得;由谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵可以得到谷氨酸,谷氨酸經(jīng)過(guò)一系列處理就能制作味精。2、在食品工業(yè)上的應(yīng)用添加劑類(lèi)型舉例酸度調(diào)節(jié)劑L-蘋(píng)果酸、檸檬酸、乳酸增味劑5-肌苷酸二鈉、谷氨酸鈉著色劑β-胡蘿卜素、紅曲黃色素增稠劑黃原膠、β-環(huán)狀糊精、結(jié)冷膠防腐劑乳酸鏈球菌素、溶菌酶第三,生產(chǎn)酶制劑。常用的酶制劑如α-淀粉酶、β-淀粉酶、果膠酶、氨基肽酶和脂肪酶等。目前,已有50多種酶制劑成功用于食品的直接生產(chǎn)、改進(jìn)生產(chǎn)工藝、簡(jiǎn)化生產(chǎn)過(guò)程、改善產(chǎn)品的品質(zhì)和口味、延長(zhǎng)食品儲(chǔ)存期和提高產(chǎn)品產(chǎn)量等方面。這些酶制劑除少數(shù)由動(dòng)植物生產(chǎn),絕大多數(shù)通過(guò)發(fā)酵工程生產(chǎn)。2、在食品工業(yè)上的應(yīng)用啤酒的工業(yè)化流程選擇培養(yǎng)基配方的設(shè)計(jì)
討論:
1.與傳統(tǒng)的手工發(fā)酵相比,在下面啤酒的發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中,哪些工程手段使啤酒的產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高?
●菌種的選育、對(duì)原材料的處理、發(fā)酵過(guò)程的控制,產(chǎn)品的消毒等,都有助于提高啤酒的產(chǎn)量和品質(zhì)。討論:2.現(xiàn)在市面上流行一種“精釀”啤酒,它的制作工藝與普通啤酒有所不同,如一般不添加食品添加劑、不進(jìn)行過(guò)濾和消毒處理等。有人認(rèn)為飲用“精釀”啤酒比飲用“工業(yè)”啤酒更健康,你怎么看待這個(gè)問(wèn)題?“精釀”啤酒是小規(guī)模釀造產(chǎn)品,發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng)、產(chǎn)量低和價(jià)格高,卻依然有著市場(chǎng)需求,我們?nèi)绾无q證地看待大規(guī)模生產(chǎn)與小規(guī)模制作?●應(yīng)該辯證地看待這一產(chǎn)品。一方面,這類(lèi)產(chǎn)品具有多樣化的特點(diǎn),能夠滿足一些人對(duì)獨(dú)特口感的需求,或者滿足一些人的時(shí)尚追求。另一方面,這類(lèi)產(chǎn)品是手工作坊式生產(chǎn)的,存在啤酒品質(zhì)不穩(wěn)定、價(jià)格昂貴的問(wèn)題。選擇培養(yǎng)基配方的設(shè)計(jì)3、在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用近些年來(lái),基因工程、蛋白質(zhì)工程等的廣泛應(yīng)用給發(fā)酵工程制藥領(lǐng)域的發(fā)展注入了強(qiáng)勁動(dòng)力。采用基因工程的方法,將植物或動(dòng)物的基因轉(zhuǎn)移到微生物中,獲得具有某種藥物生產(chǎn)能力的微生物;或者直接對(duì)菌種進(jìn)行改造,再通過(guò)發(fā)酵技術(shù)大量生產(chǎn)所需要的產(chǎn)品。如利用工程菌發(fā)酵生產(chǎn)生長(zhǎng)激素釋放抑制激。未來(lái)可能用微生物生產(chǎn)過(guò)去只能從植物中分離提取的紫杉醇、青蒿素前體等。3、在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用利用基因工程將病原體的抗原基因轉(zhuǎn)入微生物細(xì)胞,制成生物疫苗。如一種生產(chǎn)乙型肝炎疫苗的方法就是將乙型肝炎病毒的抗原基因傳入酵母菌,再通過(guò)發(fā)酵生產(chǎn)。第一,生產(chǎn)微生物肥料。利用了微生物在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等來(lái)增進(jìn)土壤肥力,改良土壤結(jié)構(gòu),促進(jìn)植物生長(zhǎng),常見(jiàn)的有根瘤菌肥、固氮菌肥等。有的微生物肥料還可以抑制土壤中病原微生物的生長(zhǎng),從而減少病害的發(fā)生。4、在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用第二,生產(chǎn)微生物農(nóng)藥。與傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥不同,微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來(lái)防治病蟲(chóng)害的。如:利用蘇云金桿菌防治多種農(nóng)林蟲(chóng)害;利用白僵菌防治玉米螟和松毛蟲(chóng);一種放線菌產(chǎn)生的抗生素-井岡霉素可防治水稻枯紋病。微生物農(nóng)藥作為生物防治的重要手段。將在農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展方面發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。4、在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用第三,生產(chǎn)微生物飼料。微生物含有豐富的蛋白質(zhì),如細(xì)菌的蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞干重的60%~80%,而且細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖速度很快。以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料,通過(guò)發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體。即單細(xì)胞蛋白。用酵母菌等生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白可以作為食品添加劑使家畜、家禽增重快;用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料,能使家禽或家畜產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高。在青貯飼料中添加乳酸菌,可以提高飼料的品質(zhì),使飼料保鮮,動(dòng)物食用后還能提高免疫力。4、在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用5、在其他方面的應(yīng)用(1)解決資源短缺與環(huán)境污染問(wèn)題隨著對(duì)纖維素水解研究的不斷深入,利用纖維廢料發(fā)酵生產(chǎn)酒精、乙烯等能源物質(zhì)已取得成功。(2)將極端微生物應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐自然界中還存在著一定數(shù)量的極端微生物,它們能在極端惡劣的環(huán)境(高溫、高壓、高鹽和低溫等環(huán)境)中正常生活。例如嗜熱菌、嗜鹽菌可以用來(lái)生產(chǎn)洗滌劑,嗜低溫菌有助于提高熱敏性產(chǎn)品的產(chǎn)量。發(fā)酵工程正滲透到幾乎所有的工農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,在助力解決糧食、環(huán)境、健康和能源等方面的重大問(wèn)題上,作出了越來(lái)越大的貢獻(xiàn)。
到社會(huì)中去1.列出你昨天一天的食譜,看看那些食品是直接由微
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