微生物鑒定技術(shù)在藥品檢驗(yàn)及監(jiān)管中的應(yīng)用

上海市食品藥品檢驗(yàn)所2021年5月27徐偉東二樣品微生物的鑒定及同源性分析三微生物實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)四微生物污染監(jiān)管方式的思考五背景介紹一一、背景介紹在1993-1998年間，美國FDA報(bào)告的由微生物污染引起的召回案件到達(dá)1370件，占所有產(chǎn)品召回案件的36%我國藥品微生物污染的調(diào)查數(shù)據(jù)較少，但微生物污染仍居首位，近期披露的黑龍江完達(dá)山刺五加注射液受微生物污染的問題，已經(jīng)造成了十分嚴(yán)重后果和無法挽回的損失。藥品平安管理仍存在監(jiān)管漏洞，造成定性難、溯源難、應(yīng)變慢等問題，以及新的致病微生物或變異體的出現(xiàn)，導(dǎo)致藥品受到微生物污染我國各大城市不斷承辦國際大型體育賽事和國際會(huì)議尤其是2021年在我國召開的上海世界博覽會(huì)，也進(jìn)一步增強(qiáng)了對(duì)藥品的監(jiān)督管理水平的要求。對(duì)微生物分類水平較低，只能鑒定到“屬〞，鑒定微生物種類有限傳統(tǒng)微生物鑒定方法的局限分子方法傳統(tǒng)方法人類的土壤微生物已到達(dá)10萬種現(xiàn)在常用的微生物鑒定用生化反響只有20多種，實(shí)際經(jīng)過研究形成一致標(biāo)準(zhǔn)的、有意義的生化鑒定結(jié)果僅2000多種。微生物生化鑒定金標(biāo)準(zhǔn)的API鑒定系統(tǒng)——僅能鑒定550種細(xì)菌通過碳源利用進(jìn)行微生物鑒定的Biolog系統(tǒng)也僅能鑒定2000種微生物微生物變異能力強(qiáng)，生化反響準(zhǔn)確度不高，錯(cuò)檢漏檢現(xiàn)象普遍傳統(tǒng)微生物鑒定方法的局限生化反響鑒定主要是利用不同微生物自身所特有的不同酶系統(tǒng)，根據(jù)微生物利用分解底物的種類和營養(yǎng)來源進(jìn)行分類鑒定。在大多數(shù)情況下，同“屬〞微生物的酶系統(tǒng)根本相同，可以到達(dá)鑒定的目的微生物DNA突變能力強(qiáng)，如果這些突變點(diǎn)涉及到微生物酶系統(tǒng)的表達(dá)，就會(huì)造成酶活性降低甚至酶缺陷，導(dǎo)致鑒定失敗在現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)中，只有血漿凝固酶陽性反響才會(huì)被確證為金黃色葡萄球菌陽性，陰性反響的微生物那么被作為無害菌處理。然而，近幾年引起高度關(guān)注的血漿凝固酶陰性金黃色葡萄球菌的流行使得金黃色葡萄球菌被漏檢，血漿凝固酶陰性金黃色葡萄球菌往往含有腸毒素和其他毒素，是引起醫(yī)院感染、社區(qū)食物中毒的重要污染源。不能對(duì)微生物污染進(jìn)行準(zhǔn)確溯源分析傳統(tǒng)微生物鑒定方法的局限在進(jìn)化過程中生物DNA分子會(huì)形成大量DNA多態(tài)性區(qū)域和非編碼DNA序列。不會(huì)造成生物種屬歸類爭(zhēng)議也不會(huì)造成任何形態(tài)上或酶系統(tǒng)表達(dá)的改變通過生化鑒定方法無法對(duì)這類變化進(jìn)行有效的分析DNA位點(diǎn)變化卻包含大量重要的微生物所獨(dú)有的進(jìn)化信息，可以與其他來源的同種微生物相區(qū)別，也是微生物種內(nèi)差異的來源如常用于真菌種類鑒定的ITS基因ITS片段能保持相對(duì)穩(wěn)定的變異頻率親緣關(guān)系非常接近的2個(gè)種都能在ITS序列上表現(xiàn)出差異，顯示最近的進(jìn)化特征二樣品微生物的鑒定及同源性分析三微生物實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)四微生物污染監(jiān)管方式的思考五背景介紹一2.2方法比較2.2方法比較革蘭氏染色鏡鑒按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行傳統(tǒng)的生化反響鑒定API試劑條菌鑒定國際金標(biāo)準(zhǔn)半自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀〔ATBExpression〕

全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀（VITEK2）微生物鑒定手段MiniVIDAS篩選系統(tǒng)免疫凝集/免疫沉淀實(shí)驗(yàn)微生物檢測(cè)手段熒光定量PCR(BAX)傳統(tǒng)篩選方法GenBankPCR基因分型分子雜交陽性菌分子水平上的鑒定12341.形態(tài)學(xué)鑒定3.核糖體水平上的鑒定APIVITEK16SrDNA序列分析分子雜交〔DupontRiboPrinter〕2.生化鑒定傅里葉紅外光譜Rep-PCR(DiversiLab)4.全基因組水平上的鑒定API試劑條——菌鑒定國際金標(biāo)準(zhǔn)無需專用儀器，標(biāo)準(zhǔn)化手工方法完成細(xì)菌的生化鑒定，為低本錢替代傳統(tǒng)手工細(xì)菌生化鑒定的最正確產(chǎn)品。特點(diǎn)：完整的鑒定譜：15種試條，可鑒定的細(xì)菌多于550種簡單方便：標(biāo)準(zhǔn)化方法，本錢低廉，判讀結(jié)果簡單快速結(jié)果：4-24小時(shí)。半自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀〔ATBExpression〕檢測(cè)工程：可鑒定由環(huán)境、原料及制成品別離出的菌種和藥敏試驗(yàn)〔包括：腸桿菌、非發(fā)酵G〔-〕桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、酵母菌、厭氧菌〕?？设b定770種細(xì)菌和分析近80種抗生素藥敏實(shí)驗(yàn)。原理：鑒定試條包含風(fēng)干底物的反響孔，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)濁度的菌液活化，于指定溫度培養(yǎng)4小時(shí)/24小時(shí)后即可。計(jì)算機(jī)根據(jù)閱讀器檢測(cè)到的結(jié)果自動(dòng)調(diào)用相應(yīng)試劑條數(shù)據(jù)庫，得出生化/同化結(jié)果和藥敏試驗(yàn)結(jié)果。系統(tǒng)將所得編碼跟數(shù)據(jù)庫的典型菌株生化譜比較，以客觀的2個(gè)參數(shù)〔鑒定百分率及T-值〕計(jì)算鑒定結(jié)果特點(diǎn)：速度快捷ATBExpression提供自動(dòng)化接種，閱讀及分析試條結(jié)果。準(zhǔn)確可靠的結(jié)果ID32及快速ID32試條由金牌標(biāo)準(zhǔn)API試條改進(jìn)而成，配合自動(dòng)化概念，結(jié)合成完整的細(xì)菌鑒定系統(tǒng)全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀〔VITEK2〕檢測(cè)工程：根據(jù)需要鑒定的微生物的種類的不同，設(shè)計(jì)了不同的鑒定卡片，比方革蘭氏陰性菌卡，革蘭氏陽性菌卡，酵母菌卡等?？设b定405種細(xì)菌，70多種藥物約50多種藥物組合的藥敏卡。原理：儀器的原理其實(shí)就是我們進(jìn)行細(xì)菌鑒定中使用的生化反響。儀器把30個(gè)對(duì)細(xì)菌鑒定必需的生化反響培養(yǎng)基固定到卡片上，然后通過培養(yǎng)后儀器對(duì)顯色反響進(jìn)行判斷，利用數(shù)值法進(jìn)行判定。特點(diǎn)：快速：鑒定結(jié)果平均只需4-6小時(shí)。對(duì)與快速生長細(xì)菌(大腸埃希氏、糞腸球菌、變形桿菌、克雷伯氏菌等)鑒定可提前到2小時(shí)。操作簡便：全部操作自動(dòng)化，簡單而方便資料處理：bioLIAISON軟件集中管理實(shí)驗(yàn)室資料獲得AOAC國際認(rèn)證：保證提供的微生物鑒定結(jié)果是公認(rèn)的全自動(dòng)熒光免疫分析儀(mini-VIDAS)

檢測(cè)工程：食品及環(huán)境中最常見致病性細(xì)菌〔李斯特菌屬、單核增生李斯特菌、彎曲菌屬、大腸桿菌O157、沙門氏菌屬、葡萄球菌腸毒素檢測(cè)〕的快速篩檢。熒光定量PCR微生物檢測(cè)限可能到達(dá)1CFU/mL以下，而且抗雜菌干擾能力強(qiáng)a)近紅外傅立葉光譜分析b)色譜分析物質(zhì)成分分析紅外傅立葉光譜分析德國Bruker公司微生物FT-IR分析用戶手冊(cè)主要采用1200-900ｃｍ-1，3000-2800ｃｍ-1，1500-1400ｃｍ-1譜段組合進(jìn)行微生物判別分析，這3個(gè)譜段分別主要代表了微生物細(xì)胞壁多聚糖、細(xì)胞膜脂肪酸以及細(xì)胞質(zhì)膜蛋白質(zhì)和類脂成分的信息。色譜分析微生物中含有的一些稱為生物標(biāo)志物的化學(xué)物質(zhì)，其含量或結(jié)構(gòu)具有種屬特征或與其分類位置密切相關(guān)通過分析微生物的化學(xué)組成鑒定微生物，開辟了一個(gè)微生物檢測(cè)和鑒定的新途徑高效液相色譜(High-performanceliquidchromatography，HPLC)氣相色譜(Gaschromatography，GC)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(Gaschromatography-massspectrometry，GC-MS)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS)建立各種生物標(biāo)志物在微生物中分布情況的數(shù)據(jù)庫及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)分析程序，仍然是色譜分析微生物的主要方向2.2方法比較各種鑒定方法的比較我所抗生素室通過比較分析近百種微生物的生化鑒定方法〔API和VITEK2鑒定〕和分子生物學(xué)方法鑒定方法，客觀準(zhǔn)確的多方面評(píng)價(jià)各種方法的優(yōu)劣二樣品微生物的鑒定及同源性分析三微生物實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)四微生物污染監(jiān)管方式的思考五背景介紹一3.1細(xì)菌鑒定3.2溯源分析3.1細(xì)菌鑒定3.2溯源分析3.1細(xì)菌鑒定3.2溯源分析二樣品微生物的鑒定及同源性分析三微生物實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)四微生物污染監(jiān)管方式的思考五背景介紹一

增強(qiáng)藥品中微生物檢驗(yàn)?zāi)芰?，做到?shù)據(jù)可信，國際認(rèn)可，為執(zhí)法、仲裁提供依據(jù)政府檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、藥廠微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境監(jiān)控，構(gòu)建環(huán)境微生物分布圖，提高檢測(cè)結(jié)果公信力與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌，監(jiān)控藥品生產(chǎn)環(huán)境，構(gòu)建藥品生產(chǎn)微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系應(yīng)用范圍廣，擴(kuò)展能力強(qiáng)，醫(yī)療器械、食品、醫(yī)院等領(lǐng)域廣泛運(yùn)用4.14.24.34.4

增強(qiáng)藥品中微生物檢驗(yàn)?zāi)芰Γ龅綌?shù)據(jù)可信，國際認(rèn)可，為執(zhí)法、仲裁提供依據(jù)政府檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、藥廠微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境監(jiān)控，構(gòu)建環(huán)境微生物分布圖，提高檢測(cè)結(jié)果公信力與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌，監(jiān)控藥品生產(chǎn)環(huán)境，構(gòu)建藥品生產(chǎn)微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系應(yīng)用范圍廣，擴(kuò)展能力強(qiáng)，醫(yī)療器械、食品、醫(yī)院等領(lǐng)域廣泛運(yùn)用4.14.24.34.4微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)首先確保實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和環(huán)境不會(huì)對(duì)檢驗(yàn)過程帶來微生物污染只有排除檢測(cè)過程中的微生物污染，才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，才能有足夠的理由相信，樣品污染來自藥品本身，而不在檢驗(yàn)過程中被污染的對(duì)檢測(cè)機(jī)構(gòu)而言，自身檢測(cè)環(huán)境的控制要比樣品檢測(cè)更加重要公正準(zhǔn)確科學(xué)高效加強(qiáng)檢測(cè)的“過程控制〞建立實(shí)驗(yàn)室環(huán)境微生物信息庫、動(dòng)態(tài)監(jiān)控環(huán)境微生物的變化、建立環(huán)境微生物污染趨勢(shì)分析圖，預(yù)測(cè)微生物污染方向，從被動(dòng)的排查污染措施上升到主動(dòng)的預(yù)防、預(yù)警。如果樣品檢驗(yàn)過程中不合格，別離鑒定樣品中的微生物，與環(huán)境微生物數(shù)據(jù)庫比較、分析微生物污染來源，出具客觀的檢測(cè)報(bào)告，杜絕實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽性和假陰性的發(fā)生樣品接收樣品擺放樣品分發(fā)環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告①登記樣品名稱，檢查是否具有唯一性標(biāo)識(shí)，并檢查是否與運(yùn)轉(zhuǎn)表內(nèi)容一致②看樣品外包裝是否完整、密封,是否能保持無菌狀態(tài)符合檢驗(yàn)要求③樣品數(shù)量是否符合檢驗(yàn)要求樣品接收原始記錄原始記錄審核檢測(cè)過程控制樣品分發(fā)環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告①根據(jù)樣品的貯存條件進(jìn)行冷藏、冷凍或常溫放置②將樣品分區(qū)域〔在檢、待檢、檢畢〕擺置③冰箱和冰柜的溫度記錄樣品擺放樣品擺放樣品接收原始記錄原始記錄審核檢測(cè)過程控制環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告①環(huán)境和設(shè)施等的質(zhì)量管理②儀器狀態(tài)是否正?！彩欠裨谟?jì)量標(biāo)志的有效期內(nèi)〕③做好儀器使用記錄儀器設(shè)施環(huán)境樣品接收樣品擺放樣品分發(fā)原始記錄原始記錄審核檢測(cè)過程控制樣品分發(fā)環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告實(shí)驗(yàn)過程樣品接收樣品擺放原始記錄原始記錄審核檢測(cè)過程控制樣品分發(fā)環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告①完全按SOP書寫，所寫即所做的內(nèi)容②統(tǒng)一原始記錄的格式和內(nèi)容③按既定期限完成原始記錄的書寫④按不同來源分別輸入結(jié)果原始記錄樣品接收樣品擺放原始記錄原始記錄審核檢測(cè)過程控制樣品分發(fā)環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告①原始記錄的完整性②檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的正確性③結(jié)果判斷的合理性原始記錄審核樣品接收樣品擺放原始記錄審核原始記錄檢測(cè)過程控制樣品分發(fā)環(huán)境設(shè)施儀器實(shí)驗(yàn)過程結(jié)果報(bào)告陰性結(jié)果直接報(bào)告陽性結(jié)果→鑒定結(jié)果報(bào)告樣品接收樣品擺放原始記錄原始記錄審核檢測(cè)過程控制建立環(huán)境微生物菌株信息庫實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境微生物監(jiān)控頭狀葡萄球菌〔Staphylococcus

capitis〕溶血葡萄球菌〔Staphylococcus

haemolyticus〕緩癥鏈球菌〔Streptococcus

mitis〕科氏葡萄球菌〔Staphylococcus

cohnii〕藤黃微球菌〔Micrococcus

luteus〕常見潔凈環(huán)境微生物污染

實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境微生物監(jiān)控建立實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)采樣方案?醫(yī)藥工業(yè)潔凈室〔區(qū)〕懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法?〔GB/T16292~16294—1996〕?藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)?〔1998〕以一個(gè)月為周期，連續(xù)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境不定期對(duì)無菌室潔凈環(huán)境進(jìn)行抽樣調(diào)查，積累潔凈環(huán)境微生物種群和分布數(shù)據(jù)檢查內(nèi)容包括沉降菌檢測(cè)、浮游菌檢測(cè)、表面微生物檢測(cè)和操作人員衛(wèi)生檢測(cè)等在實(shí)驗(yàn)環(huán)境中以葡萄球菌屬〔Staphylococcus〕別離數(shù)目最多為34%微球菌屬〔Micrococcus〕和芽孢桿菌屬〔Bacillus〕次之，分別為19.15%和17.04%假單胞菌屬〔Micrococcus〕、莫拉菌群〔Moraxella〕、短波單胞菌屬〔Brevundimonas〕占4.26%短桿菌屬〔Brevibacterium〕、不動(dòng)桿菌屬〔Acinetobacter〕、鞘氨醇單胞菌屬〔Sphingomonas〕、泛菌屬〔Pantoea〕等所占比例歸于其他項(xiàng)中收集的環(huán)境微生物中酵母菌占8.51%，主要為近平滑假絲酵母〔Candidaparapsilosis〕和粘紅酵母〔Rhodotorulamucilaginosa〕霉菌等絲狀真菌占4.26%，主要為青霉菌屬

我所實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境微生物監(jiān)控

我所環(huán)境微生物菌株信息庫的建立我們連續(xù)三個(gè)月對(duì)實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境中局部環(huán)境微生物進(jìn)行追蹤，并進(jìn)行同源性分析以葡萄球菌屬為例，本實(shí)驗(yàn)室共收集到16株葡萄球球菌屬細(xì)菌。7、8月分別收集到的細(xì)菌239與250和232與246之間同源性較高，歸在一個(gè)子類中，屬于同源污染。說明7月和8月之間的消毒滅菌過程不徹底，存在消毒漏洞。經(jīng)過消毒，在9月份監(jiān)測(cè)過程中收集到的葡萄球菌中未發(fā)現(xiàn)有和前兩月同源的菌株，說明前期的污染已經(jīng)消除，9月份收集到的局部葡萄球菌為新進(jìn)入環(huán)境的微生物。同一株菌反復(fù)污染潔凈環(huán)境要引起檢驗(yàn)人員高度重視僅靠潔凈室內(nèi)部消毒措施很可能起不到排除污染的作用要對(duì)潔凈室送風(fēng)系統(tǒng)和檢驗(yàn)人員攜帶污染進(jìn)行全面調(diào)查建立環(huán)境微生物污染趨勢(shì)分析圖，預(yù)測(cè)微生物污染方向，從被動(dòng)的排查污染措施上升到主動(dòng)的預(yù)防、預(yù)警。將污染信息并與歷史污染物比對(duì)，回憶調(diào)查，幫助質(zhì)量體系的改進(jìn)。微生物進(jìn)行鑒定菌株來源共241株

增強(qiáng)藥品中微生物檢驗(yàn)?zāi)芰?，做到?shù)據(jù)可信，國際認(rèn)可，為執(zhí)法、仲裁提供依據(jù)政府檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、藥廠微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境監(jiān)控，構(gòu)建環(huán)境微生物分布圖，提高檢測(cè)結(jié)果公信力與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌，監(jiān)控藥品生產(chǎn)環(huán)境，構(gòu)建藥品生產(chǎn)微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系應(yīng)用范圍廣，擴(kuò)展能力強(qiáng)，醫(yī)療器械、食品、醫(yī)院等領(lǐng)域廣泛運(yùn)用4.14.24.34.4

在藥品微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用在細(xì)菌污染檢查中的應(yīng)用分離純化得到單菌落菌落形態(tài)檢驗(yàn)DNA提取構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹分子生物學(xué)鑒定通用引物擴(kuò)增細(xì)菌16SrDNA

序列16SrDNA序列分析鑒定結(jié)論樣品接收革蘭氏染色API鑒定形態(tài)鑒定生化鑒定VITEK鑒定細(xì)菌的鑒定流程圖

在真菌污染檢查中的應(yīng)用

在真菌污染檢查中的應(yīng)用現(xiàn)行國標(biāo)僅能夠?qū)η箤伲嗝箤?，鐮刀菌屬等少?shù)幾個(gè)種屬的霉菌進(jìn)行鑒定。我國的食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)國家標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)于青霉菌的鑒定需要在別離純化后培養(yǎng)12-14天，再對(duì)其孢子及菌絲進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。真菌孢子易于在空氣中飄散，難以殺滅，對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和檢驗(yàn)人員平安具有潛在污染風(fēng)險(xiǎn)。分子生物學(xué)鑒定技術(shù)有效的解決了區(qū)分污染來源的問題。該方法不需要使用選擇性培養(yǎng)基，純化后即可進(jìn)行菌種鑒定。對(duì)真菌的菌絲體和孢子均能夠進(jìn)行DNA的提取，避免霉菌產(chǎn)生的大量孢子對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境帶來的潛在污染危害真菌的鑒定流程圖分離純化得到真菌樣品的單菌落真菌菌落形態(tài)觀察真菌DNA的提取構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹分子生物學(xué)評(píng)價(jià)通用引物擴(kuò)增真菌ITS序列ITS序列在GenBank中進(jìn)行Blast分析鑒定結(jié)論

增強(qiáng)藥品中微生物檢驗(yàn)?zāi)芰?，做到?shù)據(jù)可信，國際認(rèn)可，為執(zhí)法、仲裁提供依據(jù)政府檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、藥廠微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境監(jiān)控，構(gòu)建環(huán)境微生物分布圖，提高檢測(cè)結(jié)果公信力與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌，監(jiān)控藥品生產(chǎn)環(huán)境，構(gòu)建藥品生產(chǎn)微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系應(yīng)用范圍廣，擴(kuò)展能力強(qiáng)，醫(yī)療器械、食品、醫(yī)院等領(lǐng)域廣泛運(yùn)用4.14.24.34.4對(duì)藥廠生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)管和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估上應(yīng)用上海某藥業(yè)產(chǎn)品受微生物潛在污染風(fēng)險(xiǎn)上海某藥業(yè)無菌產(chǎn)品微生物污染溯源某醫(yī)療器材滅菌方法研究對(duì)藥廠生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)管和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估上應(yīng)用某制藥廠沉降菌同源性分析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室微生物信息庫制藥企業(yè)微生物信息庫同源性分析比對(duì)污染源是否鑒定

增強(qiáng)藥品中微生物檢驗(yàn)?zāi)芰?，做到?shù)據(jù)可信，國際認(rèn)可，為執(zhí)法、仲裁提供依據(jù)政府檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、藥廠微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境監(jiān)控，構(gòu)建環(huán)境微生物分布圖，提高檢測(cè)結(jié)果公信力與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌，監(jiān)控藥品生產(chǎn)環(huán)境，構(gòu)建藥品生產(chǎn)微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系應(yīng)用范圍廣，擴(kuò)展能力強(qiáng)，醫(yī)療器械、食品、醫(yī)院等領(lǐng)域廣泛運(yùn)用4.14.24.34.44.4應(yīng)用范圍廣，擴(kuò)展能力強(qiáng)，可進(jìn)行產(chǎn)品真?zhèn)舞b別和致敏原檢測(cè)二樣品微生物的鑒定及同源性分析三微生物實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)四微生物污染監(jiān)管方式的思考五背景介紹一企業(yè)自查政府監(jiān)管微生物樣本的采集微生物菌株鑒定企業(yè)環(huán)境控制及污染溯源能力新型監(jiān)管模式的建立構(gòu)建微生物分布圖建立菌種信息庫

A類企業(yè)：分子水平B類企業(yè)：生化水平C類企業(yè)：境檢、API水平企業(yè)－－微生物鑒定到“屬〞藥檢所－－－鑒定到“種〞“菌珠〞五、上海醫(yī)藥企業(yè)微生物污染的監(jiān)督、管理和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估新模式的建立－－－新的監(jiān)管模式流程圖

新的監(jiān)管模式流程圖食品藥品監(jiān)督管理局科學(xué)規(guī)劃企業(yè)內(nèi)部自查局各職能部門外部督察

上海醫(yī)藥企業(yè)微生物污染的信息庫監(jiān)督、管理和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估完善對(duì)制藥企業(yè)的風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)監(jiān)管建立和健全日常監(jiān)督檢查方法強(qiáng)化企業(yè)微生物風(fēng)險(xiǎn)管理意識(shí)建立藥品污染源通報(bào)、追蹤平臺(tái)，完善藥品召回機(jī)制5.15.25.35.4幫助企業(yè)改進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量，打造醫(yī)藥平安公共研發(fā)平臺(tái)5.5五、上海醫(yī)藥企業(yè)微生物污染的監(jiān)督、管理和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估新模式的建立5.1完善對(duì)制藥企業(yè)的風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)監(jiān)管對(duì)制藥企業(yè)分級(jí)管理往往依據(jù)藥品的產(chǎn)量、使用頻次及以往的污染事件嚴(yán)重性，對(duì)生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)環(huán)境缺乏有效的數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)，容易忽略潛在的微生物污染危害要是對(duì)文件資料的審查和經(jīng)驗(yàn)性的對(duì)加工條件和過程的評(píng)判，缺乏對(duì)微生物污染進(jìn)行監(jiān)控和調(diào)查的手段，僅能對(duì)生產(chǎn)環(huán)境和終產(chǎn)品的細(xì)菌總數(shù)和控制菌進(jìn)行檢查，缺乏量化的評(píng)價(jià)指標(biāo)傳統(tǒng)監(jiān)管方法新監(jiān)管方法上海共有制藥企業(yè)約200家上海地區(qū)被列為重點(diǎn)監(jiān)控對(duì)象的注射劑、生物制品和特殊藥品三類高風(fēng)險(xiǎn)品種的生產(chǎn)企業(yè)僅有58家將臨時(shí)性的整頓深化為常態(tài)性的管理，可以使監(jiān)管部門快速應(yīng)對(duì)微生物性污染突發(fā)事件，為有效評(píng)估污染源的危害和范圍提供詳盡的第一手分析資料這些品種涉及范圍廣、產(chǎn)品使用頻繁，且容易發(fā)生微生物性藥品污染事件。逐步提高上海地區(qū)