廣西《菠蘿品種SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)規(guī)程》編制說明

廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《菠蘿品種SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)規(guī)程》（征求意見稿）編制說明一、任務(wù)來源、起草單位、主要起草人（姓名、單位、職務(wù)/職稱、參與編制標(biāo)準(zhǔn)分工情況）等任務(wù)來源根據(jù)廣西壯族自治區(qū)市場監(jiān)督管理局下達(dá)通知文件桂市監(jiān)函[2021]2199號(hào)“廣西壯族自治區(qū)市場監(jiān)督管理局關(guān)于下達(dá)2021年第二批廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知”（本標(biāo)準(zhǔn)制定項(xiàng)目計(jì)劃序號(hào)為2021-2080）精神進(jìn)行制定。2.起草單位“菠蘿品種SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)規(guī)程”是由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出，經(jīng)廣西壯族自治區(qū)市場監(jiān)督管理局批準(zhǔn)，擬由廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所承擔(dān)起草。廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所（下稱廣西熱作所）是始建于1952年的公益型農(nóng)業(yè)綜合性科學(xué)研究機(jī)構(gòu)，隸屬于廣西農(nóng)科院，主要從事木薯、芒果、澳洲堅(jiān)果、劍麻、甘蔗、茶葉、花卉等熱帶、亞熱帶作物種質(zhì)資源收集保存、良種選育、豐產(chǎn)栽培、環(huán)境與植物保護(hù)，農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮及加工技術(shù)研發(fā)中試示范、質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試及安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等。全所現(xiàn)有職工272人，其中科研人員230人，博士7人，碩士134人；正高級(jí)職稱17人，副高級(jí)職稱72人。先后獲得國務(wù)院特殊津貼7人，第一批廣西高層次人才D、E層次5人，廣西有突出貢獻(xiàn)科技人員2人，廣西優(yōu)秀專家、廣西杰出工程師獎(jiǎng)各1人，國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系崗位科學(xué)家1人及試驗(yàn)站站長2人，廣西芒果產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)首席專家、廣西香蕉產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)首席專家、廣西芒果產(chǎn)業(yè)團(tuán)隊(duì)采后技術(shù)與質(zhì)量安全崗位專家各1人，廣西特聘崗位專家1人，柔性引進(jìn)國內(nèi)外知名專家30余人。廣西熱作所設(shè)有廣西木薯研究所、芒果研究中心、堅(jiān)果研究中心等10個(gè)科研部門。建有一大批高水平的科研平臺(tái)：國家非糧生物質(zhì)能源工程技術(shù)研究中心木薯研究室3個(gè)，科技部國際科技合作基地，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部亞熱帶果品蔬菜質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心，國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系木薯、劍麻綜合試驗(yàn)站，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部亞熱帶果品蔬菜質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部亞熱帶水果貯藏保鮮加工技術(shù)科研試驗(yàn)基地，廣西壯族自治區(qū)芒果產(chǎn)業(yè)綠色高效發(fā)展工程研究中心等。建設(shè)有熱帶、亞熱帶作物種質(zhì)資源圃及試驗(yàn)基地100多公頃，引進(jìn)收集和保存各類作物品種資源4100多份，是我國熱帶、亞熱帶作物種質(zhì)資源最重要的保存基地之一，同時(shí)也是全國熱帶作物科普教育基地和廣西科普教育基地。建所以來，獲科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)勵(lì)116項(xiàng)，其中獲國家級(jí)4項(xiàng)（次），省部級(jí)二等獎(jiǎng)15項(xiàng)（次）、三等獎(jiǎng)33項(xiàng)（次）;育成并推廣農(nóng)作物新品種41個(gè)，其中木薯GR891、GR911、桂熱10號(hào)，芒果桂熱芒82號(hào)、桂熱芒120號(hào)，桂香龍眼，澳洲堅(jiān)果桂熱3號(hào)，甘蔗桂熱2號(hào)等一大批優(yōu)良品種具有較高的社會(huì)影響力。主辦有刊物《農(nóng)業(yè)研究與應(yīng)用》。3.主要起草人（姓名、單位、職務(wù)/職稱、參與編制標(biāo)準(zhǔn)分工情況）等楊祥燕高級(jí)農(nóng)藝師果樹生理與分子生物學(xué)廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所主持，全程參與規(guī)程的編寫工作蔡元保高級(jí)農(nóng)藝師果樹分子生物學(xué)與遺傳育種廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所全程參與規(guī)程的試驗(yàn)、編寫工作譚秦亮助理研究員果樹分子生物學(xué)廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所全程參與規(guī)程的編寫工作文峰高級(jí)農(nóng)藝師果樹分子生物學(xué)廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所核心SSR引物篩選技術(shù)及編寫覃旭助理研究員果樹遺傳育種廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所DNA提取及檢測技術(shù)及編寫黃顯雅助理研究員果樹遺傳育種廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所SSR-PCR反應(yīng)與產(chǎn)物檢測技術(shù)及編寫吳密研究實(shí)習(xí)員果樹學(xué)廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所DNA提取及檢測技術(shù)及編寫二、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義菠蘿是世界三大熱帶水果之一，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。中國是世界第三大菠蘿生產(chǎn)國，在廣西、廣東、海南、云南及臺(tái)灣等地廣泛種植，已成為廣西農(nóng)業(yè)重要的特色產(chǎn)業(yè)。由于菠蘿遺傳背景復(fù)雜以及形態(tài)相似，導(dǎo)致品種資源混亂，且菠蘿品種登記和知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)也沒有相關(guān)的分子鑒定技術(shù)，這給菠蘿優(yōu)良品種推廣與利用以及雜交育種帶來極大的麻煩?；诮鉀Q這一菠蘿產(chǎn)業(yè)急需的問題，有必要規(guī)范和統(tǒng)一菠蘿品種鑒定技術(shù)。通過廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《菠蘿品種SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)規(guī)程》的制定和實(shí)施，對(duì)于菠蘿品種鑒定、優(yōu)良品種選育與注冊(cè)、良種質(zhì)量監(jiān)測、知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)以及雜交育種等方面具有重要意義。三、主要起草過程時(shí)間主要完成內(nèi)容2021年11月15日前根據(jù)通知要求將編寫方案和進(jìn)度表上報(bào)。開始組織有關(guān)人員起草標(biāo)準(zhǔn)。2021年12月31日前查找最新的農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程、植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南、植物品種鑒定DNA指紋方法并選用。2022年3月31日前完成相關(guān)試驗(yàn)及支撐數(shù)據(jù)采集，并對(duì)技術(shù)示范驗(yàn)證。2022年7月31日前成立起草小組進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)編寫，形成初稿。初稿經(jīng)小組討論修改后，形成征求意見稿和編制說明，并上報(bào)征求意見。2022年11月30日前征求9位以上有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)研究、推廣、使用等不同領(lǐng)域、不同類型單位專家意見。匯總所有意見并進(jìn)行修改完善，形成廣西地方標(biāo)準(zhǔn)送審稿，上報(bào)。2023年2月30日前配合召開審定會(huì)，審定會(huì)結(jié)束后，根據(jù)專家審定意見進(jìn)行修改完善，形成報(bào)批稿，并上報(bào)。四、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況1.制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)（1）以現(xiàn)有國內(nèi)相關(guān)其他物種品種SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范為基礎(chǔ)，應(yīng)用廣西亞熱帶作物研究所的技術(shù)創(chuàng)新成果，與現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)相銜接。（2）本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容為推薦性。（3）本標(biāo)準(zhǔn)編制在遵循“適用性、充分的可預(yù)見性、高效的協(xié)調(diào)和兼容性、靈活的開放性”等原則的基礎(chǔ)上，按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草，力求各項(xiàng)要求科學(xué)合理，符合生產(chǎn)中的實(shí)際情況，并注重標(biāo)準(zhǔn)的吧可操作性。2.與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系為了深入貫徹落實(shí)《國家標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)展綱要》，根據(jù)澳洲堅(jiān)果產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展需要，推動(dòng)我區(qū)澳洲堅(jiān)果產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展，著眼滿足經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展對(duì)澳洲堅(jiān)果優(yōu)良品種選育及鑒定的標(biāo)準(zhǔn)需求，而且，根據(jù)本年度立項(xiàng)指南的重點(diǎn)（農(nóng)業(yè)農(nóng)村領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)），從而申請(qǐng)本標(biāo)準(zhǔn)《澳洲堅(jiān)果雜交育種技術(shù)》。本標(biāo)準(zhǔn)屬于推薦性標(biāo)準(zhǔn)，不屬于強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)，符合相關(guān)法律法規(guī)。3.與有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況標(biāo)準(zhǔn)起草人已經(jīng)在國際標(biāo)準(zhǔn)查詢網(wǎng)站（/s/std_list）和國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)標(biāo)準(zhǔn)查詢網(wǎng)站（/）和全國標(biāo)準(zhǔn)信息公共服務(wù)平臺(tái)（/），通過關(guān)鍵詞“菠蘿”+“品種鑒定”+“SSR標(biāo)記”進(jìn)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)搜索，截止2023年2月2日還未發(fā)現(xiàn)國內(nèi)外與“菠蘿品種SSR標(biāo)記鑒定技術(shù)規(guī)程”相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)，即國內(nèi)外尚未有與所申請(qǐng)標(biāo)準(zhǔn)相應(yīng)（或相似）的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)。五、主要條款的說明，主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證的論述1.標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容本文件擬規(guī)定利用簡單重復(fù)序列(SSR)分子標(biāo)記進(jìn)行菠蘿品種鑒定的試驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)記錄與統(tǒng)計(jì)、判定標(biāo)準(zhǔn)。本文件主要技術(shù)內(nèi)容包括：①樣品的采集與制備；②基因組DNA提取與純化；③DNA質(zhì)量與濃度檢測；④核心SSR引物篩選；⑤SSR-PCR反應(yīng)與產(chǎn)物檢測；⑥等位變異數(shù)據(jù)記錄與統(tǒng)計(jì)分析等方面。2.試驗(yàn)驗(yàn)證及工作基礎(chǔ)在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)、廣西自然科學(xué)基金的實(shí)施下，該標(biāo)準(zhǔn)期研究已經(jīng)完成了其所有的相關(guān)實(shí)驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)初稿，并獲得了相應(yīng)的研究成果，其主要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和研究成果如下：①基因組DNA提取圖1.32個(gè)菠蘿品種葉片基因組DNA的電泳檢測結(jié)果②SSR引物篩選與評(píng)價(jià)圖2.菠蘿高度多態(tài)性的SSR核心引物篩選③參照品種PCR擴(kuò)增的毛細(xì)管電泳熒光檢測圖3.3對(duì)核心引物對(duì)3個(gè)菠蘿品種的毛細(xì)管電泳熒光檢測結(jié)果A：引物PS3擴(kuò)增“牛奶菠蘿”品種；B：引物PS27擴(kuò)增“冬蜜菠蘿”品種；C：引物PS64擴(kuò)增“剝粒菠蘿”品種④獲得7項(xiàng)與相關(guān)的國家專利（1）楊祥燕，蔡元保.一種菠蘿授粉液及雜交授粉方法.申請(qǐng)日2021-11-26,公告日2022-06-10,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,發(fā)明專利,授權(quán)專利號(hào)ZL202111423935.7(2)蔡元保，楊祥燕，黃強(qiáng)，李穆，龐新華，李季東，譚秦亮，郝小玲，韋林杏，吳耿寰.一種用于雜交育種的花粉自動(dòng)收集器.申請(qǐng)日2019-09-16，公開日2020-06-02,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,實(shí)用新型專利,ZL201921536212.6(3)蔡元保，楊祥燕，黃強(qiáng)，龐新華，李穆，李季東，黃思婕，譚秦亮，巫輔民，潘如軍.一種基于無人機(jī)的液體花粉授粉器.申請(qǐng)日2019-10-24，公開日2020-07-07,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,實(shí)用新型專利,ZL201921800422.1(4)楊祥燕，蔡元保，龐新華，陳濤，覃旭，黃強(qiáng)，李穆，曾黎明，趙媛，馮春梅，黃顯雅，周俊岸.一種簡易的菠蘿去芯削皮器.申請(qǐng)日2018-04-11，公開日2020-09-11,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,實(shí)用新型專利,ZL201820505878.4(5)蔡元保，楊祥燕，李穆，陳濤，李季東，黃強(qiáng)，譚秦亮，覃旭，唐秀觀，周俊岸.一種適合于菠蘿催花的無人機(jī)均勻噴灑器.申請(qǐng)日2019-08-02，公開日2020-05-22,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,實(shí)用新型專利,ZL201921245364.0(6)蔡元保，楊祥燕，周俊岸，李穆，曾黎明，黃強(qiáng)，龐新華，鄭文武，馮春梅，葉維雁，李季東，趙媛.一種滾動(dòng)式菠蘿削皮器.申請(qǐng)日2018-04-11，公開日2019-06-07,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,實(shí)用新型專利,ZL201820505777.7（7）楊祥燕，蔡元保，馮春梅，覃旭，彭欣怡，黃顯雅.一種菠蘿果實(shí)采摘裝置.申請(qǐng)日2021-05-20,公告日2021-11-30,中國,國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局,實(shí)用新型專利,授權(quán)專利號(hào)ZL202121087758.5六、重大意見分歧的處理依據(jù)和結(jié)果本文件（征求意見稿）在制定過程中未發(fā)現(xiàn)重大意見分歧。七、實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的措施根據(jù)廣西壯族自治區(qū)市場監(jiān)督管理局下達(dá)通知文件桂市監(jiān)函[2021]2199號(hào)“廣西壯族自治區(qū)市場監(jiān)督管理局關(guān)于下達(dá)2021年第二批廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知”（本標(biāo)準(zhǔn)制定項(xiàng)目計(jì)劃序號(hào)為2021-2080）精神進(jìn)行制定，建議本標(biāo)準(zhǔn)作為推薦性標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施。八、其他應(yīng)當(dāng)說明的事項(xiàng)本技術(shù)規(guī)程編寫參考了《GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》、《GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》