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文檔簡介

1、基因診斷與性傳播疾病 課件模板-14,基因診斷與性傳播疾?。旱诎斯?jié)診斷,第八節(jié)診斷:,梅毒的診斷應(yīng)十分認(rèn)真仔細(xì)、因為它和許多其它疾病的表現(xiàn)有相似之處,表現(xiàn)多樣,復(fù)雜且病程很長,有很長的時間處于潛伏狀態(tài),診斷時必須結(jié)合病史,體格檢查及化驗結(jié)果,進行綜合分析判斷,必要時還需進行追蹤隨訪,家庭調(diào)查和試驗治療等輔助方法。 一、病史: (一)不潔性交史:應(yīng)盡量詢問患者的嫖娼史或其他不潔性交史以確定傳染源。,基因診斷與性傳播疾?。旱诎斯?jié)診斷,第八節(jié)診斷:,如肛門有硬下疳,應(yīng)詢問是否有肛交史。問清楚不潔性交的時間,對于確定梅毒的潛伏期是十分必要的。 (二)現(xiàn)病史:有無陰部潰爛、皮膚紅斑、丘疹、濕疣史,有否發(fā)

2、生過硬下疳、二、三期梅毒史。梅毒血清學(xué)試驗檢測情況。 (三)婚姻史:有無涉外婚姻,結(jié)婚次數(shù),配偶有無性病或可疑性病的臨床表現(xiàn)等。,基因診斷與性傳播疾?。旱诎斯?jié)診斷,第八節(jié)診斷:,(四)分娩史:有無先兆流產(chǎn)、早產(chǎn)、流產(chǎn)和死產(chǎn)的病史,過去有無分娩胎傳梅毒兒史。 (五)如有可疑先天性梅毒,應(yīng)詢問父母是否患過梅毒,及兄弟姐妹受染情況及本人有無早期和晚期梅毒的癥狀和體征。 (六)如懷疑潛伏梅毒,詢問傳染史以及有無存在致使血清試驗生物學(xué)假陽性的疾病。 (七)治療史:是否做過驅(qū)梅治療,用藥劑量及療程,是否正規(guī),有無藥物過敏史等。,基因診斷與性傳播疾?。旱诎斯?jié)診斷,第八節(jié)診斷:,二、體格檢查 (一)一般檢查:

3、生長發(fā)育狀況是否良好,精神狀態(tài)情況; (二)皮膚粘膜:根據(jù)早期和晚期梅毒的皮膚損害特點仔細(xì)檢查全身皮膚、粘膜、淋巴結(jié)、毛發(fā)、生殖器官、肛門、口腔等。 (三)特殊檢查:眼、骨骼系統(tǒng)、心臟及神經(jīng)系統(tǒng)的深入檢查或進行??茩z查。 三、實驗室檢查: (一)早期梅毒應(yīng)做梅毒螺旋體暗視野顯微鏡檢查。,基因診斷與性傳播疾?。旱诎斯?jié)診斷,第八節(jié)診斷:,(二) 梅毒血清反應(yīng)素試驗(如VDRL、USR或RPR試驗),有必要時再做螺旋體 抗原試驗(如FTA-ABS或TPHA試驗)。 (三)腦脊液檢查,以除外神經(jīng)梅毒,尤其無癥狀神經(jīng)梅毒,早期梅毒即可有神經(jīng)損害,二期梅毒有35%的病人腦脊液異常,因此要檢查腦脊液。 (四

4、)基因診斷檢測。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,一、歷史與現(xiàn)狀: 梅毒是一種古老的性傳播疾病,人類在同梅毒作斗爭的過程中積累了許多經(jīng)驗,償試過許多治療方法,在我國古代早有用汞劑治療梅毒的記載。把治療梅毒從汞劑到青霉素使用,分成三個發(fā)展時期: (一) 汞劑治療時期(14971907):Widmann首先用汞劑治療梅毒,取得了很好的療效,在臨床應(yīng)用過程中反復(fù)改進劑型和用法,為當(dāng)時唯一有效的治療梅毒藥物。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,當(dāng)時多用肌肉注射法,常用汞劑有水溶汞劑,如20%二氰化汞,20%二氯化汞(升汞);汞油懸液,如10%水楊酸汞油懸液;汞軟膏,含50

5、%汞,通過外擦經(jīng)皮膚吸收。汞有抑制梅毒螺旋體的作用,但毒性較大,現(xiàn)已不用。在此時期內(nèi),開始用碘治療梅毒,碘劑多為5%-10%碘化鉀溶液,每日碘化鉀劑量為1-3克或更多,碘劑不能殺滅螺旋體,只有消散肉芽腫的作用,常用于三期梅毒樹膠腫。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,其使用是促進毛細(xì)血管的滲透作用,及減低血中的抗胰蛋白酶而增強炎癥病灶中胰蛋白酶的溶解纖維組織作用。碘劑在過去只能作晚期梅毒的輔助藥物。 (二)砷劑治療時期(1907-1943),1907年Ehrlich創(chuàng)制三價砷,阿斯凡拉明(即606),Ehrilich又于1912年研制成新阿斯凡拉明(即914)。,基因診斷與性傳播

6、疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,后有硫914、氧化砷、五價砷劑如醋酰胺砷等,砷劑可殺滅梅毒螺旋體及其它螺旋體。以后又出現(xiàn)了鉍劑治療梅毒。當(dāng)時以硝酸鉍粉為代表,鉍劑治療梅毒的療效優(yōu)于汞劑。 (三)青霉素治療時期(1943至今 )從1943年Mahoney,Arnold及Harris開始用青霉素治療梅毒,開創(chuàng)了梅毒治療的新時代。,基因診斷與性傳播疾病:第九節(jié)治療,第九節(jié)治療:,青霉素治療梅毒,有強烈的抑制梅毒螺旋體的作用,治療早期梅毒可于16小時后即殺死梅毒螺旋體的絕大多數(shù),皮膚損害迅速消退,相繼血清反應(yīng)轉(zhuǎn)陰。在長期應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)青霉素治療梅毒療效快,副使用小,殺滅螺旋體徹底,是理想的治療梅毒藥物。而

7、且至今未發(fā)現(xiàn)梅毒螺旋體對青霉素有抗藥性。50年代開始又引入其他抗生素治療梅毒。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,二、抗生素治療: 自青霉素應(yīng)用以后,上述汞劑、碘劑、砷劑、鉍劑等治療梅毒的藥物就開始逐漸被淘汰了。目前青霉素是現(xiàn)代最好的首選治療梅毒的藥物。因為梅毒對青霉素非常敏感,梅毒螺旋體復(fù)制時間為30-33小時,一致認(rèn)為血清濃度在0.032IU/ml就可殺死螺旋體,但這血清濃度必須保持至少7-10天,不能降低。,基因診斷與性傳播疾病:第九節(jié)治療,第九節(jié)治療:,梅毒的青霉素治療方案(參考世界衛(wèi)生組織(1981)性病專家委員會提出的梅毒治療指導(dǎo)原則)。 (一)早期梅毒:包括一期、二

8、期和病期不足兩年的潛伏梅毒患者,可給予青霉素肌肉注射,每側(cè)臀部120萬單位,共240萬單位,只注射一次。亦可肌肉注射普魯卡因青霉素G混懸液,每日一次,共10天,總量600萬單位。,基因診斷與性傳播疾病:第九節(jié)治療,第九節(jié)治療:,治療后一年內(nèi),應(yīng)用兩次臨床及血清學(xué)檢查。為了消滅傳染源不僅對早期梅毒患者應(yīng)予以充足的治療,對于其性接觸者,也應(yīng)全部予以檢查及治療。 (二)晚期梅毒:包括有三期皮膚、粘膜、骨損害等患者,病期在兩年以上的潛伏梅毒,心血管梅毒和神經(jīng)梅毒等。對于良性晚期梅毒(血管、粘膜及骨等)可予以普魯卡因青霉素G肌肉注射,每日一次,每次60萬單位,共15次,總劑量900萬單位。,基因診斷與性

9、傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,或用芐星青霉素每周肌肉注射一次,每次240萬單位,共三次,總量720萬單位。 對于心血管和中樞神經(jīng)系統(tǒng)梅毒不用芐星青霉素而用普魯卡因青霉素,每天肌注一次,每次60萬單位,至少20次,總劑量1200萬單位以上。 晚期及晚期潛伏梅毒經(jīng)治療后,有相當(dāng)一部分患者血清學(xué)不發(fā)生明顯改進。治療后,應(yīng)每年檢查一次。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,神經(jīng)梅毒患者應(yīng)每年檢查脊髓液,至取得較理想的改進,一般細(xì)胞及蛋白含量恢復(fù)較早而脊髓液的血清學(xué)反應(yīng)恢復(fù)較遲。 對于晚期梅毒患者的配偶及治療前所生的子女應(yīng)進行檢查。 (三)對孕婦梅毒患者的治療:早期梅毒患者如能早期治療

10、可防止發(fā)生先天梅毒。 在梅毒流行區(qū),對可能患梅毒的孕婦,應(yīng)在懷孕的前三個月及產(chǎn)前三個月,至少各進行一次血清學(xué)檢查。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,如為陽性,病史及體檢符合梅毒時,應(yīng)按所患梅毒的分期予以青霉素治療。 (四)早期先天梅毒患者的治療:對已經(jīng)治療的梅毒孕婦所生的嬰兒,應(yīng)進行臨床及血清學(xué)檢查,直至血清學(xué)檢查轉(zhuǎn)陰或維持陰性三個月以上為止。若發(fā)生臨床癥狀或放射學(xué)檢查有骨梅毒損害,或血清學(xué)滴度上升二管以上或持續(xù)升高時,或孕婦未經(jīng)充分青霉素治療或無條件對嬰兒進行仔細(xì)檢查時,須給嬰兒進行治療。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,治療方法可用普魯卡因青霉素肌肉注射,每

11、日一次,每次每公斤體重予以5萬單位,連續(xù)注射十天,總劑量一般在150萬單位至300萬單位左右。對于不便連續(xù)注射而脊髓液正常的早期先天梅毒兒,可肌注芐星青霉素,一次注射每公斤體重5萬單位。 (五)晚期先天梅毒的治療:兩歲以上的先天梅毒治療方法可按成人的相應(yīng)病期進行,其用量不超過成人的劑量。,基因診斷與性傳播疾病:第九節(jié)治療,第九節(jié)治療:,青霉素是高效抗梅毒螺旋體的藥物,血清濃度高于0.03單位/毫升時,即可殺滅梅毒螺旋體。由于青霉素注射后引起大量的螺旋體死亡放出異性蛋白,可引起Jarisch-Herxheimer反應(yīng)。在早期患者這種反應(yīng)常在注射后3-12小時出現(xiàn)發(fā)熱,乏力及皮膚損害或骨膜炎疼痛癥

12、狀等加重,但一般并不嚴(yán)重,可于24小時左右緩解。,基因診斷與性傳播疾病:第九節(jié)治療,第九節(jié)治療:,但在晚期梅毒偶可引起病灶性反應(yīng),如注射后心血管梅毒患者出現(xiàn)心絞痛、心律不齊,甚至發(fā)生主動脈瘤破裂等;亦可使神經(jīng)梅毒癥狀加重,如耳聾加重或出現(xiàn)頭痛癥狀。有人主張在用青霉素治療心血管或神經(jīng)梅毒前2-3日,開始用強的松,可減輕Jarisch-herxheimer反應(yīng)。服法,每日20-30毫克,治療開始2-3后,如無反應(yīng)或反應(yīng)較輕即逐漸減量,停止此種預(yù)防措施。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,其它抗生素:目前有許多青霉素以外的抗生素用于治療梅毒螺旋體。這些抗生素有紅霉素類如阿奇霉素,羅紅霉

13、素,利君沙;四環(huán)素類如強力霉素,土霉素,鏈霉素。近幾年又試用頭孢曲松鈉,頭孢噻肟鈉,臨床上都收到了較好的效果。 三、治療原則 對早期梅毒要徹底治愈以消滅傳染源,對晚期梅毒則要求控制癥狀,保護器官功能,延長生命,提高工作能力。,基因診斷與性傳播疾?。旱诰殴?jié)治療,第九節(jié)治療:,治療必須早期足量、正規(guī)、按計劃完成療程,并進行治療后追蹤,以發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)。治療前必須進行系統(tǒng)檢查。,基因診斷與性傳播疾病:第五章非淋菌性泌尿生殖道炎,第五章非淋菌性泌尿生殖道炎:,非淋菌性泌尿生殖道炎(nongonococcal urethristis,NGU)又稱非淋菌性尿道炎,是一種性傳播疾病,包括有明顯尿道炎癥狀卻找不到淋

14、病雙球菌,以及淋病經(jīng)治療后,培養(yǎng)或涂片未發(fā)現(xiàn)淋球菌而尿道炎癥狀持續(xù)存在的患者(也稱淋病后尿道炎post-gonococcal urethritis),過去統(tǒng)稱為非特異性尿道炎(Non-specificurethritis)。,基因診斷與性傳播疾病:第五章非淋菌性泌尿生殖道炎,第五章非淋菌性泌尿生殖道炎:,據(jù)統(tǒng)計,約70-80%的非淋菌性尿道炎是由沙眼衣原體與分解尿素支原體引起。非淋菌性尿道炎可與淋菌性尿道炎同時或交叉感染,約25-50%的女性患者可合并淋病。 非淋菌性尿道炎與淋病一樣,好發(fā)于青年性旺盛期,好發(fā)年齡組依次為20-24歲,15-19歲,25-29歲,其中25歲以下占60%。,基因診

15、斷與性傳播疾?。旱谖逭路橇芫悦谀蛏车姥?第五章非淋菌性泌尿生殖道炎:,60年代以來,非淋菌性尿道炎的發(fā)病率急驟上升,已超過淋病而居歐美性病的首位(在英國,非淋菌性尿道炎是淋病的2倍,而美國則達3倍之多)。80年代,美國每年新發(fā)生的病例達300-400萬,故有人稱之為80年代的性病。女性患者由于癥狀不明顯,難以得到確切的發(fā)病率,但有人統(tǒng)計女性患者是男性的4倍。,基因診斷與性傳播疾?。旱谖逭路橇芫悦谀蛏车姥?第五章非淋菌性泌尿生殖道炎:,下面分別介紹衣原體感染和解脲支原體感染引起的非淋菌性尿道炎。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一

16、節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,沙眼衣原體是(chlamydia trachomatis,CT)是一種在人體內(nèi)長期生存并又廣泛傳播的病原體,屬條件致病菌。它在一定條件下能引起子宮頸感染、早產(chǎn)、流產(chǎn)及尿道感染等多種疾病,尤其是在與淋球菌等其他病原體合并感染時更加重疾病的發(fā)展及引起其它并發(fā)癥,在無癥狀子宮頸和男、女性泌尿系統(tǒng)常有沙眼衣原體的存在,其檢出率不一。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,至今,西方國家已有10-20%的人口感染有沙眼衣原體

17、,特別是性接觸而傳播其感染率更高,成為目前醫(yī)學(xué)所關(guān)注的重大問題之一。最近,在對我國大陸性亂人群進行檢查時發(fā)現(xiàn),有相當(dāng)多的人其泌尿生殖系統(tǒng)感染有CT,并已構(gòu)成我國性傳播疾?。⊿TDs)。 一、病原學(xué) 衣原體是一類能通過細(xì)胞濾器,有獨特發(fā)育周期、嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,具有以下特點(1)具有DNA和RNA兩種類型的核酸;(2)二分裂方式繁殖,發(fā)育周期特別;(3)細(xì)胞壁成份中含有肽聚糖;(4)含有核蛋白體;(5)對多種抗生素都敏感。衣

18、原體廣泛寄生于人類,哺乳動物及鳥類,僅少數(shù)有致病性。只有沙眼衣原體和鸚鵡熱衣原體可以引起人類疾病。 目前已知衣原體有15種血清型。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,A、B、Ba、C血清型主要引起眼疾患,D-K型引起生殖器疾患,L1-L3型為引起性病淋巴性肉芽腫的病原體。它們嚴(yán)格稱細(xì)胞內(nèi)寄生微生物,大小約300-400m,在細(xì)胞內(nèi)生長繁殖,有特殊的發(fā)育周期,感染力為基本小體,增殖力為網(wǎng)狀體,在電鏡下可見胞膜呈有絲分裂繁殖。 衣原體對熱敏感,56-60僅能存活5-10分鐘,在

19、-70可保存數(shù)年。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,0.1%甲醛液、0.5%石碳酸可將衣原體在短期內(nèi)殺死,75%乙醇?xì)缌軓?,半分鐘即有效,對利福平、四環(huán)素、紅霉素均敏感。 二、流行病學(xué) 近年來各種報道顯示,淋菌性尿道炎發(fā)病率下降,而非淋菌性尿道炎卻不斷上升,居STDs的首位。其中CT感染所致的病例顯著增加,如美國報道非淋菌性尿道炎約半數(shù)為CT所致,在淋病中有20-40%從病灶中分離出CT,另據(jù)報道男性非淋菌性尿道炎在世界急劇上升,以美國為例、一年間就300萬人患本癥。

20、,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,女性宮頸炎等,在女性生殖器感染癥中CT也是其主要的病原菌。 男性非淋菌性尿道炎最常見的病原菌是沙眼衣原體。在美國異性戀男性中沙眼衣原體陽性率達40%,每年約有60萬男性患者呈持續(xù)性或復(fù)發(fā)性NGU,同時發(fā)現(xiàn)沙眼衣原體宮頸炎婦女其男性性伴侶的感染率為42%,患衣原體尿道炎的男性其女性性伴侶的感染率為62%,無癥狀的沙眼衣原體感染在性活躍的男人間傳播率更高。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis)

21、,第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,引起男性不孕癥的因素很多,但最近發(fā)現(xiàn)從無生殖力的膿性精液及男子性腺活檢標(biāo)本中分離出沙眼衣原體,進一步提示和證明了沙眼衣原體引起男性不孕癥的可能性。有人對淋病感染癥的男性患者進行觀察,發(fā)現(xiàn)體內(nèi)有高效價的抗衣原體抗體,衣原體陰性淋菌尿道炎者亦有高價抗衣原體抗體,并發(fā)現(xiàn)65-85%的非淋菌性后尿道炎是由沙眼衣原體引起。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,附睪炎是男性NGU最主要的并發(fā)癥,在年輕的性活躍的男性附睪

22、炎患者中,45-60%是由沙眼衣原體引起。大多數(shù)病人有尿道癥狀或體征,尿道標(biāo)本和附睪吸取液中可分離到衣原體。 沙眼衣原體性子宮頸炎在女性衣原體感染中最多。因為感染只發(fā)生于子宮頸的柱狀上皮,而不感染陰道的鱗狀上皮,故不造成陰道炎。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,英國去性病門診就醫(yī)的婦女衣原體培養(yǎng)陽性率為20-30%,微量免疫熒光法檢測血清抗體達60%。淋病患者的宮頸炎標(biāo)本衣原體陽性率為30-35%,伴不典型宮頸炎或無癥狀衣原體宮頸感染為3-5%,說明衣原體隱性感染率和混和

23、型感染率相當(dāng)高,對宮內(nèi)避孕器的應(yīng)用者進行測定,發(fā)現(xiàn)由避孕器引起的盆腔炎癥中大部分是由衣原體感染所致。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,在男性NGU患者配偶的宮頸中有30-60%分離出衣原體。在與感染的 此處缺少一些內(nèi)容 性亂及正常家庭中,沙眼衣原體的泌尿生殖道感染率在5-25%之間,特別是家庭成員之間的傳播更應(yīng)引起重視,不少兒童性NGU是由沙眼衣原體的感染引起的。 三、傳播途徑 男性非淋菌性尿道炎約30-70%可通過性交傳染給女性,反之亦有25-50%患有衣原體性宮頸炎的

24、女性經(jīng)性交亦可傳給男性。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,新生兒由母體垂直感染,發(fā)生衣原體性結(jié)膜炎,有10-20%發(fā)生肺炎,女性感染CT還有由宮頸炎上升而并發(fā)腹腔內(nèi)諸器宮感染。由于“口交”亦能引起口腔內(nèi)衣原體感染。另外,由宮頸、輸卵管處分離出CT的事實,也可說明其傳播途徑。 應(yīng)該說明一點:當(dāng)今有些所謂NGU與性行為并無關(guān)系,如醫(yī)源性感染(尿道插管、膀胱鏡以及外傷或化學(xué)性刺激等)。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一

25、節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,還有所謂NGU并非是由衣原體性微生物所致,在含義上應(yīng)該與NGU加以區(qū)別,因為病原體不同,而傳播途徑也有所不同,故醫(yī)生在診治中要心中有數(shù)。 四、發(fā)病機理與免疫 衣原體感染人體后,首先侵入柱狀上皮細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)生長繁殖,然后進入單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞內(nèi)增殖。由于衣原體在細(xì)胞內(nèi)繁殖,導(dǎo)致感染細(xì)胞死亡,同時尚能逃避宿主免疫防御功能,得到間歇性保護。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,衣原體的致病機理是抑制被感染細(xì)胞代謝

26、,溶解破壞細(xì)胞并導(dǎo)致溶解酶釋放,代謝產(chǎn)物的細(xì)胞毒作用,引起變態(tài)反應(yīng)和自身免疫。 當(dāng)人體感染衣原體后,產(chǎn)生特異性的免疫,但是這種免疫力較弱,持續(xù)時間短暫,因此,衣原體感染容易造成持續(xù),反復(fù)感染,以及隱性感染。細(xì)胞免疫方面,大部分活動性已治愈的衣原體患者,給予相應(yīng)的抗原皮內(nèi)注射時,常引起遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,這種變態(tài)反應(yīng)可用淋巴細(xì)胞進行被動轉(zhuǎn)移。此種免疫性很可能是T細(xì)胞所介導(dǎo)。體液免疫方面,在衣原體感染后,在血清和局部分泌物中出現(xiàn)中和抗體。中和抗體

27、可以阻止衣原體對宿主細(xì)胞的吸附,也能通過調(diào)理作用增強吞噬細(xì)胞的攝入。 五、臨床表現(xiàn) (一)男性衣原體性尿道炎(chlamydia urethritis,CU) 又稱為非淋菌性尿道炎(NGU)。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,是由衣原體感染引起的非急性化膿性尿道粘膜炎性病變。目前已成為STDs中最常見的一種。 本病潛伏期比淋病長,約1-3周或數(shù)月,主要表現(xiàn)為尿道內(nèi)不適,刺痛及燒灼感,并伴有不同程度的尿頻、尿急、尿痛,尿痛較淋病為輕。尿道口輕度紅腫并有漿液或粘液膿性分泌物,

28、稀薄而量少,長時期不排尿或早晨首次排尿前可見尿道口分泌物污染內(nèi)褲,并可見尿道口有“糊口”現(xiàn)象;分泌物少時,于晨起擠壓尿道才流出少量粘液。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,合并膀胱炎時可有血尿;無癥狀性非淋菌性尿道炎,約30-40%病人癥狀不典型或根本無癥狀。約1/3左右的淋球菌尿道炎病人合并沙眼衣原體感染,淋病治愈后又出現(xiàn)尿道炎癥狀,易誤診為慢性淋病或PPNG菌株感染。 沙眼衣原體感染易并發(fā)附睪炎,表現(xiàn)為附睪腫大,變硬及觸痛,多為單側(cè),部分患者的抗沙眼衣原體抗體升高,可直

29、接從附睪抽吸液中離出沙眼衣原體;累及睪丸可出現(xiàn)睪丸炎,表現(xiàn)為睪丸疼痛、觸痛、陰囊水腫及輸精管變硬變粗;累及前列腺時可出現(xiàn)后尿道、會陰及肛門部位鈍痛或觸痛,可有性功能障礙,直腸鏡檢可觸及有壓痛的前列腺。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,如前列腺明顯腫大,可壓迫后尿道而出現(xiàn)尿流變細(xì)、排尿無力及尿流中斷等;本病還可以合并Reiter綜合征,即關(guān)節(jié)炎,結(jié)膜炎,尿道炎三聯(lián)癥。 (二)女性生殖系統(tǒng)衣原體感染癥 女性感染衣原體不限于尿道,可累及整個泌尿生殖器官,此類感染常因缺乏自覺癥狀

30、或癥狀輕微而忽視了治療,造成傳染源而擴散,形成危害。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,女性衣原體感染比男性感染引起的癥侯要多,其主要感染部位為宮頸,由此垂直感染給新生兒,以至發(fā)生PID等,其后遺癥多導(dǎo)致不孕癥。 無癥狀感染(缺乏癥狀反應(yīng)):由于本病缺乏自覺癥狀,則局部病象便成為診斷的一個重要指標(biāo),表現(xiàn)為陰道有膿樣分泌物,亦可為粘液或漿液性。分泌物量較多(為中等量),稍有臭味。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣

31、原體感染癥(chlamydia trachomatis):,陰道粘膜為正常顏色,但常伴有宮頸糜爛。 衣原體性宮頸炎:當(dāng)伴發(fā)宮頸炎時、宮頸發(fā)紅,有漿液或膿性分泌物增加、陰道內(nèi)糜爛擴大,易于出血等癥狀。鏡檢下陰道分泌物的所謂“陰道清潔度”多為III度以上。沙眼衣原體主要侵犯宮頸的柱狀上皮細(xì)胞,而磷狀上皮細(xì)胞常不被侵犯,故陰道,宮頸局部沒有改變。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,宮頸炎的主要癥狀是白帶增多,不時出血及小腹部疼痛等一般癥狀,無特異性表現(xiàn),多因其性伴患有尿道炎而來院

32、就診。 衣原體性輸卵管炎,本癥多由宮頸炎并發(fā)引起。用腹腔鏡直接從輸卵管抽吸物標(biāo)本中,約30%以上檢測出衣原體,病情經(jīng)過多數(shù)較輕、下腹部可有輕微疼痛,一般體溫不高,但血沉稍快。由于這種非典型經(jīng)過,使病人拖延就醫(yī),往往引起子宮附件損害,形成輸卵管炎的后遺癥,其最主要表現(xiàn)是輸卵管性不孕癥。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,盆腔炎(PID):PID不是固定疾患的用語,凡在盆腔內(nèi)感染癥,如宮內(nèi)感染,輸卵管炎等附件炎癥波及盆腔腹膜特定的部位感染均可稱之為PID,由CT引起的PID主要

33、是由宮頸炎上行感染所致。其主要表現(xiàn)是急腹癥型。 部分患者可導(dǎo)致宮外孕、流產(chǎn)、不孕、死胎及新生兒死亡。有些病人除不孕外,可無任何癥狀。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,也可通過產(chǎn)道傳染,引起嬰兒眼結(jié)膜炎、鼻炎、中耳炎、肺炎及陰道炎等。 六、診斷與鑒別診斷 診斷衣原體性疾患,目前在我國尚未普及,因此,往往漏診,所以應(yīng)當(dāng)重視臨床表現(xiàn),爭取做到化驗室檢測指標(biāo)求得確診。 患者來就醫(yī)時,男性主訴常常是尿道疼,不適感或從外尿道流出膿樣粘液,或因患“淋病”久治不愈,反復(fù)出現(xiàn)上述現(xiàn)象;女性

34、病人常常無癥狀,只是白帶多或因其丈夫有“淋病”史,特意來檢查確診。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,(一)臨床癥狀 首先應(yīng)排除淋菌性尿道炎 衣原體性尿道炎與淋菌性尿道炎鑒別 臨床病癥沙眼衣原體淋球菌潛伏期1-3周2-5日發(fā)病緩慢突然尿路刺激征輕或無多見全身癥狀無偶見尿道分泌物少或無,粘液性或漿液性稀薄常見,量多呈膿性無癥狀帶菌者相當(dāng)多有,但不多白細(xì)胞內(nèi)G-雙球菌(一)(+)病原菌培養(yǎng)沙眼衣原體淋球菌 (二)實驗室診斷 檢測出病原體或病原體特異性DNA是診斷本病唯一標(biāo)準(zhǔn),近

35、年來由于對CT直接分離培養(yǎng)成功,加之基因診斷技術(shù)在CT診斷方面的成功應(yīng)用,使過去認(rèn)為難以診斷的疾患已提高到最易診斷的一種疾患,但是上述兩項技術(shù)特殊,對操作人員及實驗設(shè)備要求嚴(yán)格,在一般醫(yī)院實行起來尚難完成。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,一般只用CT抗原法進行診斷。 1。衣原體細(xì)胞培養(yǎng):對沙眼衣原體敏感的細(xì)胞株為McCoy細(xì)胞、Hela-229細(xì)胞和BHK細(xì)胞,最常用的是經(jīng)放線菌酮處理的單層McCoy細(xì)胞,孵育后,用單克隆熒光抗體染色,可迅速診斷,但操作人員一定要熟練,

36、需專業(yè)培養(yǎng)。培養(yǎng)法的敏感性為80%-90%,陽性即可確立診斷。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,2。衣原體細(xì)胞學(xué)檢查法:在感染細(xì)胞內(nèi)可有衣原體的包涵體存在。從感染部位采取細(xì)胞標(biāo)本作涂片,姬姆薩染色包涵體是藍(lán)色或暗紫色,碘染色顯示褐色。但敏感性差(40%),目前已較少采用。 近年來采用熒光素標(biāo)記的抗衣原體單克隆抗體,來檢測細(xì)胞涂片中的衣原體,使用較為方便,目前主要用衣原體外膜蛋白(MOMP)的單克隆抗體的商品試劑(Mico Trak,Pathfinder,Monofluor

37、)。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,結(jié)果判斷:要衣原體數(shù)10個才能判為陽性。 3。PCR檢測衣原體DNA: (1)標(biāo)本的處理: 取材部位為子宮頸管,男性為尿道,將滅菌白金耳深入宮頸管或尿道1cm左右,轉(zhuǎn)動數(shù)圈,停留約30s,取出后置標(biāo)本緩沖液中。 衣原體DNA提取: 將宮頸管內(nèi)或尿道內(nèi)刮取物置含0.5% NP-40、0.5%Tween 20,1% SDS和2mg/ml 蛋白酶K的TES緩沖液(50mmol/L Tris-HCl,50mmol/l NaCl,100mmol

38、/L EDTA,pH 8.0)置37裂解60min,沸水5min,酚、氯仿抽提DNA,乙醇沉淀,沉淀物溶于20lTE緩沖液(100mmol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA,pH 8.0)。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,(2)引物設(shè)計: 引物對選自衣原體16SrRNA基因,為衣原體屬特異性,以DNA合成儀固相亞磷酸三酯合成并純化。引物對的序列分別為5GTGGATAGTCTCAACCCTAt 3(16SrRNA基因位點832-851)和5TATCTGTCC

39、TTGCGGAAAAC3(位點1041-1022)。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,目的擴增片段(832-1041)長210bp。 (3)PCR擴增: 傳統(tǒng)的方法反應(yīng)體積為100l,含5x反應(yīng)緩沖液20l和FD-DNA聚合酶2U、4種dNTP各200mol/L以及引物對各25pmol/L。上述成分預(yù)先一次性分裝于0.5ml離心管,-20備用。臨用加模板DNa 2l,短暫離心,加100l礦物油覆蓋。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trach

40、omatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,現(xiàn)在試劑已商品化,反應(yīng)體積為25l,單管已分裝好,只要加入模板DNA即可。置DNA擴增儀進行40次循環(huán)擴增。每次循環(huán)包括90變性45s(第一次循環(huán)變性2min),55退火30s和72延伸40s(最后一次循環(huán)72,延伸5min)三個步驟。每次擴增均應(yīng)作陰陽性對照。 (4)擴增產(chǎn)物的檢測 1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測:取10u l PCR擴增物作1.5%瓊脂糖凝膠電泳、0.5g/ml溴化乙錠染色,以PGEM-3Zf(+)DNA-Hae 為分子量標(biāo)準(zhǔn),置紫外透射儀觀察結(jié)果。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(c

41、hlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):, 生物素寡核苷酸探針的檢測 a.探針序列及合成:探針序列為5ACTCAA-AAGAATTGACGGGGGCCCGCACAa3(30mer),衣原體16Sr RNA基因中的位點為909-938,與PCR擴增片段中間序列互補。以DNA合成儀固相亞磷酸三酯法合成并純化。 b.標(biāo)記:按Riely等方法略有修改。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,以末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(

42、TdT)催化Bio-11-dUTP標(biāo)記到合成的寡核苷酸探針片段3-OH端。反應(yīng)體系含:140mmol/L二甲胂酸鈉,30mmol/l Tris-HCl(pH 7.6),100mol/L Bio-11-dUTP,0.1mol/L 寡核苷酸片段,0.05%BSA,300U/mlTdT。,基因診斷與性傳播疾病:第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis),第一節(jié)衣原體感染癥(chlamydia trachomatis):,于37保溫3h后,加10mmol/LEDTA終止。寡核苷酸片段探針標(biāo)記后,將標(biāo)記針(1ng/l)作2倍系列稀釋,取5l點膜,封閉后顯色。結(jié)果探針經(jīng)32倍稀釋(最高稀釋度5ng)后仍呈現(xiàn)明顯的顯色反應(yīng),證實探針的標(biāo)記以及顯色效應(yīng)良好。 c.DNA斑點雜交:提取的DNA或其PCR擴增產(chǎn)物0.5mol/l NaOH變性20min,取5l點于硝酸纖維素膜,烘干;以6SSC(1xSSC為:0.15mol/l NaCl,0.015mol/L檸檬酸三鈉,pH 7.0)浸泡2次,80干烤2h。,基因診斷與性傳播疾?。旱谝还?jié)衣原體感染癥(chlam

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