第七章--紫外-可見分光光度法.ppt

1、第七章 紫外-可見分光光度法,學(xué)習(xí)目標(biāo) 知識(shí)要求 能力要求,學(xué)習(xí)目標(biāo),知識(shí)要求,能力要求,1.能夠用光的吸收定律解決定量計(jì)算問題 。 2.能夠繪制吸收光譜曲線，找出被測組分的最 大吸收波長。 3.能夠繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并能應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線對樣品進(jìn)行定量分析。 4.會(huì)使用常見的紫外-可見分光光度計(jì)測定溶液的吸光度。,案例導(dǎo)入,在夏天參加戶外活動(dòng)時(shí)，如果天氣晴朗，就應(yīng)該注意保護(hù)皮膚，否則，暴露在火辣辣太陽之下的皮膚，數(shù)小時(shí)后就會(huì)出現(xiàn)紅腫、瘙癢、發(fā)熱、刺痛癥狀，數(shù)日后出現(xiàn)蛻皮現(xiàn)象，這表明太陽光中有一種光線能傷害生物細(xì)胞?？茖W(xué)家研究證實(shí)，這種光線是紫外線。 根據(jù)可見光、紫外光與物質(zhì)分子的相互作用建立了紫外-可

2、見分光光度法，,第一節(jié) 概述,根據(jù)待測物質(zhì)（原子或分子）發(fā)射或吸收的電磁輻射，以及待測物質(zhì)與電磁輻射的相互作用而建立起來的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法，統(tǒng)稱為光學(xué)分析法。 利用光譜進(jìn)行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法稱為光譜分析法，簡稱光譜法。,第一節(jié) 概述,一、物質(zhì)對光的選擇性吸收,單色光: 單一波長的光束 復(fù)色光: 含有多種波長的光束 電磁波譜: 以波長大小順序排列的電磁波譜圖,第一節(jié) 概述,紅光與綠光互補(bǔ)、紫光與黃光互補(bǔ)，等等。 白光的組成 白光的色散,第一節(jié) 概述,二、透光率與吸光度 I0Ia + It + Ir I0Ia + It,第一節(jié) 概述,透射光強(qiáng)度It與入射光強(qiáng)度I0的比值稱為透光率或

3、透光度T 透光率的負(fù)對數(shù)為吸光度A,第一節(jié) 概述,三、吸收光譜曲線 概念：以波長為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，稱為吸收光譜曲線，簡稱吸收光譜。 特點(diǎn)：在相同條件下，同一物質(zhì)的不同濃度的溶液，其吸收光譜曲線相似，且max相同。這是定性分析的基礎(chǔ)。,第一節(jié) 概述,吸收光譜曲線示意圖,max=515,第一節(jié) 概述,四、紫外-可見分光光度的特點(diǎn),課堂活動(dòng) 1紫外-可見光的波長范圍是 A200400nm B400760nm C200760nm D360800nm 2下列敘述錯(cuò)誤的是 A光的能量與其波長成反比 B有色溶液越濃，對光的吸收也越強(qiáng)烈 C物質(zhì)對光的吸收有選擇性 D光的能量與其頻率成反比

4、,第一節(jié) 概述,課堂活動(dòng) 3紫外-可見分光光度法屬于 A原子發(fā)射光譜法 B原子吸收光譜法 C分子發(fā)射光譜法 D分子吸收光譜法 4分子吸收可見-紫外光后，可發(fā)生哪種類型的分子能級(jí)躍遷 A轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷 B振動(dòng)能級(jí)躍遷 C電子能級(jí)躍遷 D以上都能發(fā)生,第一節(jié) 概述,第一節(jié) 概述,點(diǎn)滴積累 1光的本質(zhì)是電磁波；物質(zhì)對光的吸收具有選擇性。 2吸光度與透光率的關(guān)系是 : 3吸收曲線是溶液在一定條件下的吸光度隨入射光波長變化而變化的曲線。,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,一、光的吸收定律 當(dāng)一束平行的單色光通過均勻、無散射的含有吸光性物質(zhì)的溶液時(shí)，在入射光的波長、強(qiáng)度及溶液的溫度等條件不變的情況下，

5、該溶液的吸光度A與溶液的濃度c及液層厚度L的乘積成正比，即： AKL c 。 稱為光的吸收定律（朗伯-比爾定律）。 光的吸收定律是定量分析的理論依據(jù)。,朗伯-比爾定律不僅適用于可見光，而且也適用于紫外光和紅外光；不僅適用于均勻、無散射的溶液，而且也適用于均勻、無散射的固體和氣體。 實(shí)驗(yàn)證明：溶液對光的吸光度具有加和性。如果溶液中同時(shí)存在兩種或兩種以上的吸光性物質(zhì)，則測得的該溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物質(zhì)吸光度的總和，即： A（a+b+c）AaAbAc,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,課堂活動(dòng) 某化合物溶液遵守光的吸收定律，當(dāng)濃度為c時(shí)，透光率為T，試計(jì)算：當(dāng)濃度為0.5c、2c時(shí)所

6、對應(yīng)的透光率。,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,二、吸光系數(shù) 摩爾吸光系數(shù)：在入射光波長一定時(shí)，溶液濃度為1 mol/L，液層厚度為1cm時(shí)所測得的吸光度稱為摩爾吸光系數(shù)，常用表示 。 光吸收系數(shù) 在入射光波長一定時(shí)，溶液濃度為1g/L，液層厚度為1cm時(shí)的吸光度，稱為光吸收系數(shù)，常用表示，其量綱為L/(gcm)。,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,百分吸光系數(shù)：在入射光波長一定時(shí)，溶液濃度為1 （W/V）、層厚度為1cm時(shí)所測得的吸光度稱為百分吸光系數(shù)，常用 表示。 二者的關(guān)系：,課堂活動(dòng) 用雙硫腙測定Cd2+溶液的吸光度A時(shí)，Cd2+（

7、Cd的原子量為112）的濃度為140g/L，在525nm波長處，用L1cm的吸收池，測得吸光度A0.220，試計(jì)算摩爾吸光系數(shù)和百分吸收系數(shù)。,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,課堂互動(dòng) 某有色溶液的物質(zhì)的量濃度濃度為c，在一定條件下用1cm比色杯測得吸光度為A，則摩爾吸光系數(shù)應(yīng)為： AcA BcM CA/C DC/A,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,三、偏離光的吸收定律的主要因素 化學(xué)因素:(1)溶液的濃度 (2)物質(zhì)的化學(xué)變化 (3)溶劑的影響 光學(xué)因素:(1)非單色光 (2)雜散光 (3)非平行光 (4)反射現(xiàn)象 (5)散射現(xiàn)象,第二

8、節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,偏離光的吸收定律示意圖,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法的基本原理,點(diǎn)滴積累 1光的吸收定律表明了吸光度與液層厚度和濃度之間的關(guān)系，它是吸收光譜法定量分析的依據(jù)。 2吸光系數(shù)的表示方法有多種，隨待測溶液濃度的不同標(biāo)度而不同。 3偏離光的吸收定律的因素主要有化學(xué)因素和光學(xué)因素。,第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),一、紫外-可見分光光度計(jì)的主要部件： 光源單色器吸收池檢測器訊號(hào)處理與顯示器,第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),二、紫外-可見分光光度計(jì)的光學(xué)性能 1測光方式 2波長范圍 3狹縫或光譜帶寬 4雜散光 5波長準(zhǔn)確度 6吸光度范圍 7波長重復(fù)性 8測光準(zhǔn)確度 9光度重

9、復(fù)性 10分辨率,第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),三、紫外-可見分光光度計(jì)的類型 1.可見分光光度計(jì) 721型,第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),三、紫外-可見分光光度計(jì)的類型 1.可見分光光度計(jì) 722型,第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),三、紫外-可見分光光度計(jì)的類型 2.紫外-可見分光光度計(jì) （1）單波長分光光度計(jì) 單光束分光光度計(jì) 雙光束分光光度計(jì),第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),課堂活動(dòng) 1.試述紫外-可見分光光度計(jì)的主要部件及其作用？ 2.紫外-可見分光光度計(jì)有哪些類型？,第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),第三節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì),點(diǎn)滴積累 紫外-可見分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)相同，都由光源、單色器

10、、吸收池、檢測器、訊號(hào)處理與顯示器等主要部件構(gòu)成，但不同型號(hào)儀器的外形差別很大，質(zhì)量和價(jià)格相差懸殊，操作方法迥異，使用之前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器使用說明書。,第四節(jié) 分析條件的選擇,一、儀器測量條件的選擇 1.應(yīng)選擇最大吸收波長作為入射光。 2.應(yīng)控制吸光度讀數(shù)范圍： 吸光度在0.20.7之間； 透光率在20%65%之間。,第四節(jié) 分析條件的選擇,二、顯色反應(yīng)條件的選擇 1.對顯色劑及顯色反應(yīng)的要求 2.控制合適的顯色反應(yīng)條件 三、參比溶液的選擇 1.溶劑參比溶液 2.試樣參比溶液 3.試劑參比溶液 4.平行操作參比溶液,第四節(jié) 分析條件的選擇,課堂活動(dòng) 測定試樣時(shí)，吸光度的讀數(shù)應(yīng)控制在0.20.7范

11、圍內(nèi)。若吸光度讀數(shù)不在此范圍，可采用哪些方法進(jìn)行調(diào)整?,第四節(jié) 分析條件的選擇,點(diǎn)滴積累 1選擇吸光性物質(zhì)的最大吸收波長作為測定波長。 2使用紫外-可見分光光度計(jì)時(shí)，讀數(shù)范圍應(yīng)控制在吸光度為0.20.7，透光率為65% 20%之間。 3待測物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)無吸收時(shí)，應(yīng)加顯色劑。顯色劑不得有干擾，反應(yīng)必須完全。 4一般用溶劑作參比溶液。必要時(shí)采用試樣參比溶液、試劑參比溶液或平行操作參比溶液。,第五節(jié) 定性定量方法,一、定性分析方法 定性的基本依據(jù)：比較光譜的一致性。 未知物和標(biāo)準(zhǔn)品的吸收光譜曲線，對比二者是否一致。 比較吸收光譜的特征數(shù)據(jù)及比值的一致性。 二、雜質(zhì)檢查： 將藥品光譜與藥品標(biāo)準(zhǔn)

12、光譜相對照，利用雜質(zhì)的特征吸收，可以檢測出微量雜質(zhì)及其含量。,案例分析 貝諾酯的定性鑒別 中國藥典(2010年版)規(guī)定：貝諾酯加無水乙醇制成每1ml約含7.5g的溶液，在240nm處有最大吸收，相應(yīng)的百分吸光系數(shù)( )應(yīng)為730760。 維生素B12也有三個(gè)吸收峰，分別在278nm、361nm、550nm波長處，它們的吸光度比值應(yīng)為：A361nm/A278nm在1.701.88之間，A361nm/A550nm在3.153.45之間。,第五節(jié) 定性定量方法,案例分析 葡萄糖注射液是臨床上常用的藥品之一。制備時(shí)需要高溫滅菌，葡萄糖會(huì)轉(zhuǎn)化為5-羥甲基糠醛而引入雜質(zhì)。中國藥典（2010年版）規(guī)定葡萄糖

13、注射液在284nm波長處的吸收度不得過0.32，以此控制其雜質(zhì)5-羥甲基糠醛的量。 在284nm波長處，葡萄糖無吸收，而雜質(zhì)5-羥甲基糠醛在此波長處有最大吸收，可以通過控制供試品溶液在此波長處的吸收度來控制雜質(zhì)的含量。,第五節(jié) 定性定量方法,第五節(jié) 定性定量方法,三、定量分析方法 定量分析的依據(jù): AK c L（光的吸收定律） （一）單組分溶液的定量方法 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法： 是紫外-可見分光光度法中最經(jīng)典的定量方法。,第五節(jié) 定性定量方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線法的方法和步驟如下: （1）配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，選擇合適的參比溶液，在相同條件下，以待測組分的最大吸收波長 作為入射光，分別測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液

14、對應(yīng)的吸光度。 （2）以濃度c為橫坐標(biāo)、吸光度A為縱坐標(biāo)描繪標(biāo)準(zhǔn)曲線。,第五節(jié) 定性定量方法,（3）按照相同的實(shí)驗(yàn)條件和操作程序，用待測溶液配制未知試樣溶液并測定其吸光度A樣，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到與之對應(yīng)的未知試樣溶液的濃度c樣 。 如右圖。,第五節(jié) 定性定量方法,2.標(biāo)準(zhǔn)對比法: 在相同的條件下，配制濃度為cs的標(biāo)準(zhǔn)溶液和濃度為cx的試樣溶液，在最大吸收波長處，分別測定二者的吸光度值為As、Ax ，依據(jù)朗伯-比爾定律得： As=csL Ax=cxL 則:,第五節(jié) 定性定量方法,3.吸光系數(shù)法: 吸光系數(shù)法直接利用朗伯-比爾定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式AKcL進(jìn)行計(jì)算的定量分析方法。在手冊中查出待測物質(zhì)在最大

15、吸收波長 處的吸光系數(shù) 或 ,并在相同條件下測量樣品溶液的吸光度A，則其濃度為： 或,第五節(jié) 定性定量方法,有時(shí)也可以將待測樣品溶液的吸光度換算成樣品組分的吸光系數(shù)，計(jì)算與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光系數(shù)的比值，求出樣品中待測組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 或,第五節(jié) 定性定量方法,實(shí)例：維生素B12水溶液在 =361nm處的百分吸光系數(shù) =207。取維生素B12樣品30.0mg，加純化水溶解，用1L的容量瓶定容。將溶液盛于1cm的吸收池，測得361nm波長處的吸光度A=0.600，試求樣品中維生素B12的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 解：,第五節(jié) 定性定量方法,（二）二元組分溶液的定量方法 1. 解聯(lián)立方程組法 當(dāng)試樣溶液中各待測組分相互

16、干擾不太嚴(yán)重時(shí)，可根據(jù)吸光度具有加和性的特點(diǎn)，在同一試樣溶液中同時(shí)測定兩個(gè)或兩個(gè)以上的待測組分。假設(shè)要測定試樣中有兩個(gè)待測組分a和b，如果分別繪制a、b兩個(gè)純物質(zhì)的吸收光譜，則有三種情況。,第五節(jié) 定性定量方法,第五節(jié) 定性定量方法,（）表明，兩個(gè)待測組分在各自的最大吸收波長處，另一組分沒有吸收，可以用測定單組分溶液的方法，分別在1和2波長處測定組分a、b的吸收度, 由光的吸收定律求得ca、cb。測定時(shí)兩組分互不干擾。 （）表明，在組分a的最大吸收波長1處，組分b對組分a的測定無干擾，而在組分b的最大吸收波長2處，組分a對組分b的測定有干擾。這時(shí)，先在1波長處單獨(dú)測量組分a；然后在2波長處測量

17、組分a、b的總吸光度，根據(jù)吸光度的加和性，從而可以求出cb。,第五節(jié) 定性定量方法,（）表明，兩個(gè)待測組分彼此相互干擾，此時(shí)，在波長1和2處分別測定試樣溶液的總吸光度 及 ，同時(shí)測定a、b純物質(zhì)的吸光系數(shù) 、 和 、 ，根據(jù)吸光度的加和性，則由聯(lián)立方程組求得ca、cb。,第五節(jié) 定性定量方法,2.等吸收波長消去法（雙波長分光光度法） 當(dāng)試樣中兩個(gè)待測組分的相互干擾比較嚴(yán)重時(shí)，用解聯(lián)立方程組的方法進(jìn)行定量分析會(huì)產(chǎn)生較大的誤差，這時(shí)可以用等吸收波長消去法進(jìn)行測定。 在試樣中含有兩個(gè)待測組分a和b時(shí)，若要測定組分b，組分a有干擾，應(yīng)設(shè)法消除組分a的吸收干擾。首先選擇待測組分b的最大吸收波長2作為測量

18、波長，然后用作圖的方法選擇參比波長1，使組分a在這兩個(gè)波長處的吸光度相等。,第五節(jié) 定性定量方法,試樣溶液在2和1兩個(gè)波長處的吸光度之差，只與待測組分b（ a）的濃度成正比，而與干擾組分的濃度無關(guān)。,3.差示分光光度法 當(dāng)待測組分含量過高時(shí)，吸光度超出了準(zhǔn)確測量的讀數(shù)范圍，可以采用差示分光光度法。具體方法是用一個(gè)比試樣溶液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為參比溶液，將分光光度計(jì)調(diào)零（透光率100%），測得的吸光度就是被測試樣溶液試液與參比溶液的吸光度差值（相對吸光度）。根據(jù)光的吸收定律得： AAxAsL(cxcs) 即：待測溶液與參比溶液的吸光度差值與兩溶液的濃度之差成正比。,第五節(jié) 定性定量方法,第五節(jié)

19、 定性定量方法,課堂活動(dòng) 1.在紫外-可見分光光度法中，影響吸光系數(shù)的因素是 A溶劑的種類和性質(zhì) B溶液的物質(zhì)量濃度 C物質(zhì)的本性和光的波長 D吸收池大小 E待測物的分子結(jié)構(gòu) 2.紫外-可見分光光度法常用的定量分析方法有 A間接滴定法 B標(biāo)準(zhǔn)對比法 C標(biāo)準(zhǔn)曲線法 D直接電位法 E吸光系數(shù)法,第五節(jié) 定性定量方法,課堂互動(dòng) 3在符合朗伯-比爾定律的條件下，有色物質(zhì)的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關(guān)系是 A增加、增加、增加 B增加、減小、不變 C減小、增加、減小 D減小、不變、減小 4維生素D2的摩爾吸收系數(shù)264nm=18200。用2.0cm吸收池測定，如果要控制吸光度A在0.6990.187

20、范圍內(nèi)，應(yīng)使維生素D2溶液的濃度在什么范圍內(nèi)？,第五節(jié) 定性定量方法,點(diǎn)滴積累（1） 紫外-可見分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點(diǎn)： 1標(biāo)準(zhǔn)曲線法的優(yōu)點(diǎn)：測定大批量樣品時(shí)，操作簡單、準(zhǔn)確、快速。缺點(diǎn)：不同人處理相同的測量數(shù)據(jù)，得到的結(jié)果不易完全相同。 2標(biāo)準(zhǔn)對比法的優(yōu)點(diǎn)：測量數(shù)據(jù)相同，任何人都能得到完全一致的結(jié)果。缺點(diǎn)：隨機(jī)誤差較大。 3吸光系數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)：與標(biāo)準(zhǔn)對比法的優(yōu)點(diǎn)相同。 缺點(diǎn)：測定條件不易與文獻(xiàn)完全一致，從而引入誤差。,第五節(jié) 定性定量方法,點(diǎn)滴積累（2） 紫外-可見分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點(diǎn)： 4解聯(lián)立方程組法的優(yōu)點(diǎn)：可以不經(jīng)分離直接測定二元組分溶液。缺點(diǎn)：在兩個(gè)測定波長處，要

21、求兩個(gè)組分的吸光系數(shù)有較大的差別。 5等吸收波長消去法的優(yōu)點(diǎn)：可以不經(jīng)分離直接測定二元組分溶液，還適于測定混濁液的測定。缺點(diǎn)：要求干擾組分的吸收光譜中有一個(gè)峰或谷。 6差示分光光度法的優(yōu)點(diǎn)：可以直接測定高濃度溶液。缺點(diǎn)：需要用高精密度的儀器。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,一、有機(jī)化合物的紫外-可見吸收光譜 有機(jī)化合物的紫外-可見吸收光譜主要是由分子中價(jià)電子的能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的。 電子的能級(jí)躍遷有4個(gè)基本類型。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,二、根據(jù)紫外-可見吸收光譜推斷官能團(tuán) 三、根據(jù)紫外-可見吸收光譜推斷異構(gòu)體 （一）判別順反異構(gòu)體

22、 （二）測定某些化合物的互變異構(gòu)現(xiàn)象,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,點(diǎn)滴積累 1紫外-可見吸收光譜是化合物的價(jià)電子能級(jí)躍遷形成的。 2根據(jù)紫外-可見吸收光譜的光譜特征，可以推斷待測化合物的官能團(tuán)、順反異構(gòu)和互變異構(gòu)。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,一、選擇題 （一）單項(xiàng)選擇題 1紫外-可見光的波長范圍是： A. 200400nm B400760nm C200760nm D360800nm 2下列敘述錯(cuò)誤的是： A光的能量與其波長成反比 B有色溶液越濃，對光的吸收也越強(qiáng)烈 C物質(zhì)對光的吸收有選擇性 D光的能量與其頻率成反比,【目標(biāo)檢測】

23、,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,3紫外-可見分光光度法屬于： A原子發(fā)射光譜 B原子吸收光譜 C分子發(fā)射光譜 D分子吸收光譜 4分子吸收紫外-可見光后，可發(fā)生哪種類型的分子能級(jí)躍遷： A轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷 B振動(dòng)能級(jí)躍遷 C電子能級(jí)躍遷 D以上都能發(fā)生,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,5某有色溶液的摩爾濃度為c，在一定條件下用1cm比色杯測得吸光度為A，則摩爾吸光系數(shù)為： AcA BcM C D 6某吸光物質(zhì)的摩爾質(zhì)量為M，其摩爾吸收系數(shù)與比吸收系數(shù)的換算關(guān)系是 A M B /M C M/10 D /M10,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化

24、合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,7關(guān)于光的性質(zhì)，描述正確的是： A光具有波粒二象性 B光具有發(fā)散性 C光具有顏色 D本質(zhì)是單色光 8某吸光物質(zhì)的吸光系數(shù)很大，則表明： A該物質(zhì)溶液的濃度很大 B測定該物質(zhì)的靈敏度高 C入射光的波長很大 D該物質(zhì)的分子量很大,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,9相同條件下，測定甲、乙兩份同一有色物質(zhì)溶液的吸光度。若甲溶液1cm吸收池，乙溶液2cm吸收池進(jìn)行測定，結(jié)果吸光度相同，甲、乙兩溶液濃度的關(guān)系： Ac甲c乙 Bc乙4 c甲 Cc甲2c乙 Dc乙2 c甲 10在符合光的吸收定律條件下，有色物質(zhì)的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關(guān)系是： A

25、增加、增加、增加 B增加、減小、不變 C減小、增加、減小 D減小、不變、減小,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,11吸收曲線是在一定條件下以入射光波長為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，又稱為： A工作曲線 BA-曲線 CA-c曲線 D滴定曲線 12 標(biāo)準(zhǔn)曲線是在一定條件下以吸光度為橫坐標(biāo)、濃度為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，也可稱為： AA-曲線 BA-c曲線 C滴定曲線 DE-V曲線,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,13紫外-可見分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)可分為： A二個(gè)部分 B三個(gè)部分 C四個(gè)部分 D五個(gè)部分 14722型分光光度計(jì)的比色皿的材料為

26、： A石英 B鹵族元素 C硬質(zhì)塑料 D光學(xué)玻璃,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,15紫外-可見分光光度法定量分析的理論依據(jù)是： A吸收曲線 B吸光系數(shù) C光的吸收定律 D能斯特方程 16下列說法正確的是： A吸收曲線與物質(zhì)的性質(zhì)無關(guān) B吸收曲線的基本形狀與溶液濃度無關(guān) C濃度越大，吸光系數(shù)越大 D吸收曲線是一條通過原點(diǎn)的直線,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,17測定大批量試樣時(shí)，適宜的定量方法是： A標(biāo)準(zhǔn)曲線法 B標(biāo)準(zhǔn)對比法 C解聯(lián)立方程組法 D差視分光光度法 18. 紫外-可見分光光度法是基于被測物質(zhì)對： A光的發(fā)射 B光的散射 C光的

27、衍射 D光的吸收,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,19下面有關(guān)顯色劑的正確敘述是： A本身必須是無色試劑并且不與待測物質(zhì)發(fā)生反應(yīng) B本身必須是有顏色的物質(zhì)并且能吸收測定波長的輻射 C能夠與待測物質(zhì)發(fā)生氧化還原反應(yīng)并生成鹽 D在一定條件下能與待測物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)并生成穩(wěn)定的吸收性物質(zhì) 20某種溶液的吸光度： A與比色杯厚度成正比 B與溶液的濃度成反比 C與溶液體積成正比 D與入射光的波長成正比,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,21雙光束分光光度計(jì)與單光束分光光度計(jì)的主要區(qū)別是： A能將一束光分為兩束光 B使用兩個(gè)單色器 C用兩個(gè)光源獲得兩束光

28、D使用兩個(gè)檢測器 22下列說法錯(cuò)誤的是： A標(biāo)準(zhǔn)曲線與物質(zhì)的性質(zhì)無關(guān) B吸收曲線的基本形狀與溶液濃度無關(guān) C濃度越大，吸光系數(shù)越大 D從吸收曲線上可以找到最大吸收波長,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,（二）多項(xiàng)選擇題 1在可見光區(qū)測定吸光度時(shí)，吸收池的材質(zhì)可用： A彩色玻璃 B光學(xué)玻璃 C石英 D溴化鉀 E以上均可 2在紫外-可見分光光度法中，影響吸光系數(shù)的因素是： A溶劑的種類和性質(zhì) B溶液的物質(zhì)的量濃度 C物質(zhì)的本性和光的波長 D吸收池大小 E待測物的分子結(jié)構(gòu),第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,3影響摩爾吸光系數(shù)的因素是： A溫度 B溶

29、劑的種類 C物質(zhì)的結(jié)構(gòu) D入射光的波長 E溶液的濃度 4光的吸收定律通常適用于： A散射光 B單色光 C平行光 D折射光 E稀溶液,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,5紫外-可見分光光度法常用的定量分析方法有： A間接滴定法 B標(biāo)準(zhǔn)對比法 C標(biāo)準(zhǔn)曲線法 D直接電位法 E吸光系數(shù)法 6紫外-可見分光光度計(jì)的主要部件是： A光源 B單色器 C吸收池 D檢測器 E顯示器,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,7分光光度計(jì)常用的色散元件是： A鎢絲燈 B棱鏡 C飽和甘汞電極 D光柵 E光電管 8紫外-可見分光光度法可用于某些藥物的： A定性鑒別 B純度檢

30、查 C毒理實(shí)驗(yàn) D含量測定 E藥理檢查,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,二、填空題 1可見光的波長范圍為 ，近紫外分光的波長范圍為 。 2光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式（A=KcL）中，K稱為吸光系數(shù)，常用三種方法來描述，分別是 、 、 ，物質(zhì)的吸光系數(shù)愈大，表示該吸光物質(zhì)的吸光性愈 。 3吸收光譜是以 為橫坐標(biāo)，以 為縱坐標(biāo)而繪制的曲線。吸收峰最高處所對應(yīng)的波長為 ，用 表示。 4紫外可見分光光度法進(jìn)行定量分析時(shí)，常選用 作入射光，此時(shí)測定的 最高。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,5在紫外光區(qū)測定吸光度時(shí)，應(yīng)使用紫外-可見分光光度計(jì)的 燈作

31、光源，所用吸收池的材質(zhì)是。 6測定吸光度時(shí)，當(dāng)空白溶液置入光路時(shí)，應(yīng)使T ，此時(shí) A 。 7為提高測定的準(zhǔn)確度，溶液的吸光度讀數(shù)范圍應(yīng)調(diào)節(jié)在0.20.7為宜，可通過調(diào)節(jié)溶液的 和 來實(shí)現(xiàn)。 8紫外-可見分光光度法對單組分溶液進(jìn)行定量分析的常用方法有 ， ， 。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,三、簡答題 1光的吸收定律的內(nèi)容是什么？偏離光的吸收定律的主要因素有哪些？ 2紫外-可見分光光度法對顯色劑及顯色反應(yīng)有哪些基本要求？ 3試述紫外-可見分光光度計(jì)的主要部件及其作用。 4請說出幾種常用的空白溶液。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,5測定試樣時(shí)，吸光度的讀數(shù)應(yīng)控制在0.20.7范圍內(nèi)。若吸光度讀數(shù)不在此范圍，可采用哪些方法進(jìn)行調(diào)整? 6試述紫外-可見分光光度法常用的定量分析方法。,第六節(jié) 紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介,四、實(shí)例分析題 1吸光度A值為0.20、0.60、1.00對應(yīng)透光率