臨床常用免疫學(xué)檢驗.ppt

1、,臨床常用免疫學(xué)檢查,良鄉(xiāng)醫(yī)院檢驗科 李影 聯(lián)系電話：81356438 Email:,本章要點： 掌握 病毒性肝炎血清標(biāo)志物檢查的臨床意義 了解 血清免疫球蛋白檢測、 補體測定、 感染免疫檢測：ASO、 腫瘤標(biāo)志物檢測、 自身抗體檢查的臨床意義。,一、免疫球蛋白測定（Immunoglobulin-Ig）,免疫球蛋白: 指由漿細(xì)胞產(chǎn)生的具有抗體活性和 （或）抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。,5種: IgG：含量最多，惟一能通過胎盤的Ig。 IgA：血清型和分泌型2種； IgM：最早產(chǎn)生的Ig，分子量最大 ； IgD： IgE：含量最少的Ig；,免疫球蛋白的檢測方法： 單擴散法、ELISA法和免疫比濁法。,免

2、疫比濁法： 血清 IgG： 7.0 16.0 g/L； IgA： 0.57 4.14 g/L； IgM： 0.5 2.7 gL；,ELISA法 血清 lgE： 0.10.9 mgL,【參考值】,【臨床意義】 1免疫球蛋白增高,（l）單克隆性免疫球蛋白增高：僅某一種Ig增高。見于免疫增殖性疾病。如多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥等。,（2）多克隆性免疫球蛋白增高：多種Ig同時增高。見于慢性感染、自身免疫病、淋巴瘤等。,（3） IgE增高： IgE是親細(xì)胞抗體； 與變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病及皮膚過敏有關(guān) 。,【臨床意義】 2免疫球蛋白減低,免疫球蛋白減少癥： 當(dāng)IgG6.0gL、IgA和IgM均0.4gL。,

3、見于各類先天性或獲得性體液免疫缺陷病。 如先天性無丙球蛋白血癥；長期使用免疫抑制劑。,二補體測定,（）總補體溶血活性測定（CH50）,【參考值】 CH50： 50100 Uml,【臨床意義】 反映補體（C1C9）傳統(tǒng)途徑活化的活性程度。,CH50 增高：急性炎癥、組織損傷和某些惡腫瘤；,2. CH50降低：見于各種免疫復(fù)合物疾病， 如腎小球腎炎、自身免疫性疾?。ㄈ鏢LE）、感染性疾病、慢性肝病等。,二補體測定 （二）C3 含量測定,C3是由肝細(xì)胞合成的2-球蛋白。 在補體系統(tǒng)中含量最高； 是經(jīng)典和替代激活途徑的樞紐，起關(guān)鍵作用。,【參考值】 免疫比濁法： 0.83 l.77 g/L,C3 含量

4、測定【臨床意義】,1. C3增高：急性炎癥、傳染病早期、腫瘤和排異；,2.C3降低：急性腎小球腎炎診斷和鑒別診斷,急性腎小球腎炎：6周內(nèi)有70的病人C3降低；,鏈球菌感染后腎炎（ C3降低）與 病毒感染后腎炎（正常）的鑒別診斷；,判斷病程轉(zhuǎn)歸的指標(biāo)： 78%的狼瘡腎病人C3降低，病情緩解后可恢復(fù)；,二補體測定 （三）C4（1-球蛋白）含量測定,【參考值】 免疫比濁法：0.120.36 g/L,【臨床意義】,1C4增高： 見于急性風(fēng)濕熱、皮肌炎、關(guān)節(jié)炎和組織損傷。,2C4降低： 見于自身免疫性肝炎、SLE、類風(fēng)關(guān)、IgA型腎病、1型糖尿病、胰腺癌等。,三腫瘤標(biāo)志物檢查（tumor marker，

5、TM）,TM是指腫瘤細(xì)胞所產(chǎn)生或分泌的某種蛋白質(zhì)，或其釋放的細(xì)胞結(jié)構(gòu)某個部分，與腫瘤的存在和發(fā)生發(fā)展過程密切有關(guān)，故稱為腫瘤標(biāo)志物。,生化本質(zhì)：蛋白質(zhì)、酶類、激素、核酸和糖蛋白；,腫瘤標(biāo)志物檢測意義： 腫瘤普查、輔助診斷、療效觀察和預(yù)后判斷。,（一）甲胎蛋白測定（ AFP或-FP） 【參考值】 20gL,1.原發(fā)性肝細(xì)胞癌：,2.生殖腺胚胎瘤（睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等）、 胃癌、胰腺癌及少數(shù)轉(zhuǎn)移癌增高；,【臨床意義】 AFP增高：,3.病毒性肝炎、肝硬化AFP也有不同程度升高；,4.妊娠34個月孕婦AFP開始升高； 78個月達高峰，以后下降。,（二）癌胚抗原測定（CEA）,【參考值】 5 g/

6、 L,【臨床意義】,CEA明顯升高： 90%胰腺癌、74%結(jié)腸癌、70%肺癌、60%乳腺癌患者，常超過60 g/ L。 病情好轉(zhuǎn)時濃度下降，病情加重時CEA可升高。,2. CEA輕度升高： 胰腺炎、結(jié)腸炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘時；,3.胃癌診斷：檢測胃液和唾液CEA有一定價值。,（三）前列腺特異抗原測定,【參考值】 T- PSA 4.0 F/T 0.25 F-PSA 0.8 g/L;,【臨床意義】,1. 60%90以上前列腺癌病人血清PSA升高； 術(shù)后可見PSA明顯下降。 術(shù)后PSA升高，提示可能有轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)。,2. 良性前列腺瘤、前列腺增生癥或急性前列腺炎時，14%可見PSA輕度升高

7、。,（四）EB病毒殼抗原IgA類抗體測定,【參考值】 陰性,【臨床意義】 抗-VCA IgA陽性見于：,可作為鼻咽癌的診斷、療效及預(yù)后判斷的指標(biāo)； 陽性符合率90，病情好轉(zhuǎn)時血清抗VCA -IgA滴度下降，腫瘤復(fù)發(fā)時則其滴度上升；,支氣管肺癌、甲狀腺癌、慢性鼻咽部炎癥，也偶呈陽性； 正常人約有34的陽性率。,（五）糖蛋白糖脂類標(biāo)志物測定,胰腺癌增高，陽性率8595%； 連續(xù)檢測病情進展、手術(shù)療效、復(fù)發(fā)判斷；,1. CA19-9 ： 參考值 37g/L,消化道癌：膽管癌及胃癌增高； 加測CEA胃癌診斷符合率可達85%。,急性胰腺炎、膽石癥、急性肝炎、肝硬化也有不同程度升高。,（五）糖蛋白糖脂類標(biāo)

8、志物測定,卵巢癌明顯升高、陽性率達60%90%；,2. CA-125 ： 參考值 40 g/L,宮頸癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、直腸癌、肺癌 均有增高；,3. 36%的良性卵巢瘤、子宮肌瘤、肝硬化失 代償也可增高。,（五）糖蛋白糖脂類標(biāo)志物測定, 30%50%的乳腺癌病人可見其明顯升高。 早期乳腺癌陽性率低（20%30%），用于乳癌治療后有無復(fù)發(fā)及乳癌是否轉(zhuǎn)移的監(jiān)測。,3. CA15-3： 參考值2.7g/L, 轉(zhuǎn)移性卵巢癌、結(jié)腸癌、支氣管癌、 孕婦亦可見增高。, 非惡性腫瘤（5%33%）也有增高。,（五）糖蛋白糖脂類標(biāo)志物測定,4. CA242 ： 參考值20g/L, 胰腺癌、結(jié)腸癌的標(biāo)志物。

9、胰腺癌（68%79%） 結(jié)腸癌（55%80%） 增高； 胃癌（44%）,四感染免疫檢查,抗鏈球菌溶血素“O”試驗(ASO),【參考值】 膠乳法400單位（定性陰性） 免疫比濁法：0200 IUL,【臨床意義】 ASO增高：,表示近期內(nèi)A群溶血性鏈球菌感染。 輔診風(fēng)濕性疾病、急性腎小球腎炎等。 ASO滴度逐步下降表明疾病緩解； 抗體恒定在高水平多為疾病活動期。,金葡、銅綠假單胞菌感染可抑制ASO活性（假陰性）,五自身抗體檢查,【參考值】 陰性（血清1:10稀釋）,ANA是自身免疫性疾病的篩選試驗。 血清稀釋度高于1:40為陽性，1:320為強陽性。,1SLE、混合性結(jié)締組織病、自身免疫性肝炎、橋

10、本甲狀腺炎、重癥肌無力、類風(fēng)關(guān)等；,（）抗核抗體測定（ANA）,2服用抗心律失常藥物（普魯卡因） 服用降壓藥（肼苯達嗪） 可陽性 。,五自身抗體檢查 （二）抗脫氧核糖核酸抗體測定（anti-DNA）,抗雙鏈 DNA抗體（anti-ds-DNA） 抗單鏈 DNA抗體（anti-ss-DNA）,【參考值】 免疫熒光法、間接酶標(biāo)抗體染色法、 滴金免疫試驗：陰性,【臨床意義】,抗ds-DNA抗體陽性：對SLE高度特異的指標(biāo)； 抗ss-DNA抗體陽性：見于SLE但不具特異性 ；,五自身抗體檢查 （三）抗可提取性核抗原抗體測定（anti-ENA）,臨床上常檢測的有以下10余種： 抗Sm、RNP（特異性強鑒

11、別診斷）、RiB、SS-A、 SS-B、JO-l、Scl70、著絲點、PMl、核仁等；,【臨床意義】,1抗RNP抗體陽性：SLE、各種風(fēng)濕病、類風(fēng)關(guān)、進行性全身性硬化癥。,2. 抗Sm抗體陽性：SLE標(biāo)志抗體（陽性率2545%）； 抗Sm抗體陽性亦見于膠原重疊綜合征。,3抗SS-A和SS-B陽性： 干燥綜合征的特異性抗體。,抗Scl-70抗體：彌漫性硬皮病的標(biāo)志抗體；,4其他antiENA陽性：,抗JO-l抗體：皮肌炎診斷有一定價值；,抗RiB抗體：可作為狼瘡活動的診斷指標(biāo)；,抗U1-RNP抗體： 混合性結(jié)締組織?。∕CTD）的標(biāo)志性抗體。,五自身抗體檢查 （四）類風(fēng)濕因子測定（rheumat

12、oid factor，RF）,【參考值】 膠乳凝集法（低于1:10）； ELISA法：陰性 免疫比濁法： 220IUL,【臨床意義】,1類風(fēng)濕性疾?。宏栃月?0%90%；,2. 其它自身免疫病：多發(fā)性肌炎、硬皮病、 干燥綜合癥、SLE、自身免疫性溶貧、慢活肝；,3. 某些感染性疾?。?傳單增、結(jié)核病、感染性心內(nèi)膜炎等可呈陽性。,六. 病毒性肝炎血清標(biāo)志物檢查,1.甲型肝炎病毒（Hepatitis A virus HAV） 2.乙型肝炎 病毒（HBV） 3.丙型肝炎病毒（HCV） 4.丁型肝炎病毒（HDV） 5.戊型肝炎病毒（HEV） 6.庚型肝炎病毒（HGV）,甲型肝炎病毒抗體：IgM、IgG

13、 乙肝表面抗原（HBsAg）表面抗體（HBsAb）。 乙肝病毒 e抗原（HBeAg） e抗體（HBeAb）。 乙肝病毒核心抗體：HBcAb總抗體、HBcAb IgM 乙肝病毒DNA測定 3.丙型肝炎病毒抗體：lgM和IgG類。 4. 丁型肝炎病毒 5.戊型肝炎病毒,（一）、乙型肝炎的血清學(xué)檢查1,1、乙肝五項（兩對半） （1）HBsAg 稱為乙肝表面抗原，也稱澳抗，構(gòu)成HBV的表層結(jié)構(gòu)。 其陽性意義：患者處于HBV感染狀態(tài)。 急性潛伏期，HBsAg先于ALT和臨床癥狀出現(xiàn)。 急性期，HBsAg為高滴度。 慢性期，HBsAg持續(xù)陽性，無癥狀攜帶者HBsAg為陽性，肝功可正常。,（2）HBsAb

14、稱為乙肝表面抗體，是 HBsAg刺激機體產(chǎn)生的保護性抗體。 其陽性的意義： 提示乙肝感染處于恢復(fù)期。 即往感染過乙肝，現(xiàn)在仍有免疫力。 注射疫苗后抗-HBs陽性，說明疫苗接種成功。,（3）HBeAg 稱為乙肝e抗原，是 HBcAg切去一部分后由149個氨基酸組成的多肽，在HBV復(fù)制時生成，再從感染的肝細(xì)胞分泌入血，HBeAg的多少與HBV的復(fù)制量成正比，并與 HBsAg的含量平行，在 HBsAg消失前轉(zhuǎn)陰。 其陽性的意義： a、病人體內(nèi)有大量HBV復(fù)制，具有傳染性。 b、急性肝炎和慢性活動期，HBeAg均可為陽性 c、急性肝炎三個月后，HBeAg轉(zhuǎn)陰，表示預(yù)后佳 d、孕婦HBeAg陽性，母嬰傳

15、播率可達90%-100% e、可作為抗病毒藥物療效的考核指標(biāo)。,（4）HBeAb 稱為乙肝e抗體，多見于HBeAg轉(zhuǎn)陰的病人，它意味著HBV大部分已被清除或被抑制，HBV生成減少，是傳染性降低的一種表現(xiàn)。 但是HbeAb不是保護性抗體，不能抑制HBV的復(fù)制。當(dāng)HBeAg轉(zhuǎn)陰，抗HBe陽轉(zhuǎn)，表示預(yù)后佳，病情好轉(zhuǎn)。,（5）HBcAb 稱為乙肝核心抗體 ，其陽性的意義： a、急性乙肝窗口期的輔助診斷。（窗口期是指急性感染中，有一段時間滴度已下降至測不出，但相應(yīng)抗體尚未達到可檢出的程度） b、獻血員篩查，僅查HBsAg不夠，應(yīng)加查抗HBc，尤其是當(dāng)抗HBc高滴度時，不宜作獻血員。 C、觀察疫苗的安全性

16、 ，如接種后產(chǎn)生抗HBc，則認(rèn)為該批疫苗不純，不宜使用。,（二）、乙型肝炎的血清學(xué)檢查2,2、其它標(biāo)志物: HBV-DNA、DNAP、前S基因及其抗體、X基因抗原及其抗體。 3、乙型肝炎的血清學(xué)標(biāo)志物 的綜合判斷 幾種常見的乙肝五項結(jié)果,病毒標(biāo)記檢測（乙肝五項）,序號 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-Hbe 抗-HBc 1+ -+-+ 俗稱乙肝大三陽說明患者是慢性肝炎，有傳染性。 2 +-+ 急性乙肝感染階段或慢性乙肝表面抗原攜帶者，傳染性弱些。 3+ - -+ 乙肝趨向恢復(fù)-慢性攜帶者，傳染性弱；長期持續(xù)可轉(zhuǎn)變?yōu)楦伟?4- +- -+ 既往感染過乙肝-有免疫力，不典型恢復(fù)期；或急性乙肝感染期 5-+ 既往乙肝感染，屬于急性感染恢復(fù)期，也少數(shù)人仍有傳染性 。 6-+ 過去有乙肝感染或現(xiàn)在正處于急性感染。 7-+- 以前打過乙肝疫苗或以前感染過乙肝。 8-+-+ 急性乙肝恢復(fù)期，以前感染過乙肝。 9 +-急性感染早期或者慢性乙肝表面抗原攜帶者傳染性弱。 10+ -+ -慢性乙肝表面抗原攜帶者易轉(zhuǎn)陰或者是急性感染趨向恢復(fù) 。 11+-+- 早期乙肝感染或者慢性攜帶者，傳染性強。 12+-+ + 急性乙肝感染趨向恢復(fù)或者為慢