功能性食品的毒理學及功能學評價.ppt

1、第三章 功能性食品的評價、管理、配方、加工及檢測技術,功能性食品與方便食品,毒理學評價 功能學評價 衛(wèi)生學評價,1,2020/8/1,毒性及功能檢驗評價依據(jù),功能性食品與方便食品,1996年3月衛(wèi)生部保健食品的管理方法 保健食品的標準、功能評價、審批程序和監(jiān)督管理辦法 1996年7月GB15193食品安全性毒理學評價程序和方法 衛(wèi)生部保健食品功能學評價程序和檢驗方法 僅包含了12項功能檢驗及評價方法 2001年7月 衛(wèi)生部保健食品功能學評價程序和檢驗方法 可受理和評價的功能調(diào)整到31項 2003年2月衛(wèi)生部保健食品檢驗與評價技術規(guī)范 將功能學、毒理學、功效成分及衛(wèi)生指標檢驗評價方法三者合一,2

2、,2020/8/1,毒理學評價的四個階段,功能性食品與方便食品,第一階段：急性毒性試驗 經(jīng)口急性毒性試驗：LD50，聯(lián)合急性毒性，一次最大耐受量試驗 第二階段：遺傳毒性試驗，30天喂養(yǎng)試驗，傳統(tǒng)致畸試驗 遺傳毒性試驗：原核細胞和真核細胞，體內(nèi)試驗和體外試驗相結合 Ames或基因突變試驗；微核試驗或染色體畸變試驗；精子畸變試驗等 第三階段：亞慢性毒性試驗 90天喂養(yǎng)試驗、繁殖試驗、代謝試驗 第四階段：慢性毒性試驗（包括致癌試驗）,3,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,一般無需進行毒性試驗的原料或成分 屬于普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源的物質： 采用傳統(tǒng)的工藝及食用方式 水提取

3、物，常規(guī)服用量，無不安全性報道 來源、工藝和質量符合國家要求的營養(yǎng)強化劑 或營養(yǎng)素補充劑,4,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,需進行一階段和三項致突變毒性試驗的原料或成分 屬于普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源的物質且用水提以外的其它常用工藝生產(chǎn)的： （1）服用量與常規(guī)用量相同 急性毒性、三項致突變試驗 （2）服用量大于常規(guī)用量 還需加做30天喂養(yǎng)試驗，必要時進行傳統(tǒng)致畸試驗和第三階段毒性試驗,5,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,需進行一、二階段毒性試驗的原料或成分 文獻顯示無危害，人群長期食用； 具有國際性毒理學評價結果的已知的化學物質，產(chǎn) 品質量規(guī)格

4、與國外產(chǎn)品一致； 國外廣泛食用且能提供安全性評價資料； 衛(wèi)生部規(guī)定允許使用的動植物及其提取物或微生物。,6,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,需進行一至三階段毒性試驗的情況： 一、二階段試驗結果與國外產(chǎn)品不一致的 國外少數(shù)國家或地區(qū)食用的原料或成分 水提取物，大于常規(guī)服用量 用水提以外的其它常用工藝生產(chǎn)的，大于常規(guī)用量,7,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,需進行一至四階段毒性試驗的原料和成分 國內(nèi)外均無食用先例 敏感指標及敏感試驗的保健食品 不同食用人群和（或）不同功能的保健食品,8,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,保健食品新原料

5、 保健食品新原料（以下簡稱新原料）是指不在國家食品藥品監(jiān)督管理局公布的可用于保健食品、衛(wèi)生部公布或批準可以食用以及生產(chǎn)普通食品的范圍內(nèi)，擬用于保健食品的原料。 國家食品藥品監(jiān)督管理局和國家有關部門規(guī)定的不可用于保健食品以及禁止使用的物品，不得作為新原料。,9,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,在已批準的保健食品中使用過，或衛(wèi)生部已批準為新資源食品的原料，符合以下情況的仍按新原料進行管理： 未列入國家食品藥品監(jiān)督管理局公布的可用于保健食品的物品名單； 尚未列入衛(wèi)生部公布或批準的食品新資源或新資源食品名單內(nèi)； 衛(wèi)生部已批準為食品新資源或新資源食品，但保健食品注冊申請人與食品新資

6、源或新資源食品生產(chǎn)批件中載明的申報單位不一致。,10,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,新原料安全性毒理學試驗項目的選擇 無食用史 需做四階段試驗 局部地區(qū)有食用史 需做三階段試驗 其中 ，100倍攝入量300倍 需做第四階段試驗 有食用史 需做二階段試驗 經(jīng)評價后 下一階段試驗 廣泛食用的原料 二階段試驗 （食用史包括地區(qū)、年代、人群、食用量、頻率等情況）,11,2020/8/1,毒性試驗原則,功能性食品與方便食品,新原料安全性毒理學試驗項目的選擇 已知化學物: -1 可只做二階段實驗的包括 已有權威機構進行系統(tǒng)的毒理學安全性評價 有資料證明所用原料與其一致 -2 如試驗

7、結果與權威機構進行的評價不一致，需進入下階段的試驗 有新原料的保健食品: 根據(jù)試驗結果綜合分析。,12,2020/8/1,對受試保健食品的要求,功能性食品與方便食品,單一已知化學成分，應提供物理和化學性質 多種原料的配方產(chǎn)品，應提供配方 配方產(chǎn)品，必要時還應提供各組分，功效成分的 物理和化學性質及其檢測報告 提供原料來源、生產(chǎn)工藝、人的可能攝入量。使 用說明書等有關資料 受試物應符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化產(chǎn)品,13,2020/8/1,實驗動物的選擇及給樣量,功能性食品與方便食品,1.根據(jù)各項實驗的具體要求，合理選擇實驗動物 常用大鼠和小鼠，品系不限，推薦使用近交系。 2.動物應符合實驗動物

8、管理條例 清潔級或清潔級以上 動物合格證號及動物實驗室合格證號 3.灌胃量,14,2020/8/1,樣品的預處理原則,1.介質的選擇 應選擇適合于受試動物的溶劑、乳化劑、助懸劑，要求無毒、與受試物不發(fā)生反應、穩(wěn)定性好。 常用的介質有：蒸餾水、食用植物油、淀粉、明膠及羧甲基纖維素等。 2.液體類 受試物濃縮倍數(shù)應符合試驗要求。 濃縮方法不應破壞其有效成份，常用的有6070減壓或常壓蒸發(fā)、冷凍干燥。 按工藝要求。,15,樣品的預處理原則,3.袋泡茶類 處理方法與產(chǎn)品推薦飲用方法相同 推薦用：80-90 常壓用水浸泡30min 水量為受試物的10倍，提取2次，2次提取液合并濃縮至所需濃度 標明該濃縮

9、液與受試物的比例,16,樣品的預處理原則,4.含乙醇類 （1）不需濃縮的受試物 乙醇濃度15 乙醇濃度應調(diào)至15 （2）需濃縮的受試物 乙醇濃度15 濃縮后調(diào)至15乙醇濃度 在進行乙醇濃度調(diào)整時必須用原酒基,17,樣品的預處理原則,5.膨脹系數(shù)較高的受試物 選擇可溶性介質 給受試物的方法：灌胃 其最高濃度最大灌胃量時達不到人體推薦量的100倍，按實際達到的倍數(shù) 標明受試物的膨脹系數(shù),18,樣品的預處理原則,6.益生菌等微生物類保健食品 在進行 Ames試驗或體外細胞試驗時需將受試物滅活。 需濃縮的應采用低溫干燥法或由企業(yè)提供所需濃度的受試物（附方法、技術參數(shù)）。 7.以食品為載體的受試物 （1

10、）有營養(yǎng)價值：按設計量進行飼料的營養(yǎng)成份調(diào)整，提供詳細的說明。 （2）大豆蛋白、乳清蛋白 如質量、工藝等符合食品標準和安全要求，允許去除。 如僅以該原料生產(chǎn)的，可申請免做毒理學試驗。,19,毒理學試驗項目要點介紹,急性經(jīng)口毒性試驗 鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗 骨髓細胞微核試驗 哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗 小鼠精子畸形試驗 小鼠睪丸染色體畸變試驗 30天喂養(yǎng)試驗,20,急性經(jīng)口毒性試驗,目的：測定LD50，毒性分級。了解毒性強度、性質和可能的靶器官，為進一步的毒性試驗提供劑量和觀察指標的選擇依據(jù)。 原理： 急性毒性：經(jīng)口一次性、24h內(nèi)多次給予，短時間內(nèi)的毒性反應。致死劑量通常用半數(shù)致死

11、劑量LD50表示。 急性聯(lián)合毒性：兩種或兩種以上的受試物，可能發(fā)生拮抗、相加或協(xié)同的聯(lián)合方式，可以根據(jù)一定的公式計算和判定標準來確定這三種不同的作用。,21,急性經(jīng)口毒性試驗,時間周期：一般為3周 3-5天，大、小鼠適應期 7-14天，染毒及實驗觀察期 發(fā)生動物死亡時，應進行大體解剖 觀察和評價指標： 毒性反應癥狀：各器官系統(tǒng)的反常表現(xiàn)（中樞、自主神經(jīng)、呼吸、心血管、胃腸、生殖泌尿系統(tǒng)、皮毛、粘膜等）及體重變化 死亡情況：死亡的時間、數(shù)量、性別、表現(xiàn)等。 大體尸檢結果：如果發(fā)生死亡動物,22,急性經(jīng)口毒性試驗,23,急性經(jīng)口毒性試驗,24,急性經(jīng)口毒性試驗,25,急性經(jīng)口毒性試驗,26,急性經(jīng)

12、口毒性試驗,27,急性毒性（LD50）劑量分級表,28,急性毒性（LD50）劑量分級表,29,急性經(jīng)口毒性試驗,試驗結果的判定： 1. LD50人可能攝入量的100倍，放棄；反之繼續(xù)下一步試驗。 2. LD5010g/kg體重或按最大耐受量染毒而未出現(xiàn)動物死亡的，可繼續(xù)下一步試驗。,30,鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗,原理：檢測受試物誘發(fā)鼠傷寒沙門氏菌組氨酸營養(yǎng)缺陷型突變株(his-)回復突變成野生型(his+)的能力。即組氨酸突變菌(his-) 在不含組氨酸的最低營養(yǎng)平皿上不能生長；回復突變成野生型(his+)，可在不含組氨酸的最低營養(yǎng)平皿上生長。 目的：檢測受試物的誘變性，預測其遺傳危害

13、和潛在致癌作用的可能性。,31,鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗,時間周期：一般為2周 第一周，鼠傷寒沙門氏菌種、試劑、培養(yǎng)基準備 第二周，染毒，培養(yǎng)48h，讀平板，菌落計數(shù) 劑量設計： 決定受試物最高劑量的因素是對細菌的毒性及其溶解度。最低劑量為0.2ug/皿；最高劑量為5mg/皿，或最大溶解劑量，最大飽和劑量以及最小毒性劑量?？稍O五個劑量組，組間距不超過5倍。同時設：陽性對照組，溶劑對照組和未處理對照組。,32,鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗,33,鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗,觀察及評價指標： 各受試物組及三個對照組的四種菌株（TA97a，TA98，TA100和TA102）分別在加和不加

14、S9情況下的菌落計數(shù)。 結果判斷: 只要在一種試驗菌株得到陽性結果，即認為受試物是致突變物 僅當四種試驗菌株均得到陰性結果，才認為受試物是非致突變物 不加S9 混合液得到陽性結果，說明受試物是直接致突變物 加S9 混合液才得到陽性結果，說明該受試物是間接致突變物,34,鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗,評價（摻入法）： 受試物組回變菌落數(shù)增加一倍以上（即回變菌落數(shù)2未處理對照組數(shù)），并有劑量反應關系或有可重復的陽性反應，即可判試驗陽性。,35,骨髓細胞微核試驗,原理： 微核是在細胞有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進入子細胞形成細胞核時，仍然留在細胞質中的色單體或染色體的無著絲點斷片 。末期之后，單獨形

15、成一個或幾個規(guī)則的次核，被包含在細胞胞質內(nèi)，因比主核小，故稱為微核。 1 有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點 的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中 2 斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動，從而遺留在細胞質中,36,骨髓細胞微核試驗,目的： 檢測整體動物體內(nèi)骨髓嗜多染紅細胞微核發(fā)生率，以評價受試物致突變的可能性。,37,骨髓細胞微核試驗,時間周期：一般為2周 3-5天適應期 小鼠經(jīng)口染毒，30h給受試物法 取胸骨或股骨，收集骨髓，涂片，染色，鏡檢 劑量設計：至少設置3個劑量，最高劑量組為動物出現(xiàn)嚴重中毒表現(xiàn)和/或個別動物出現(xiàn)死亡的劑量。低劑量組應不出現(xiàn)毒性反應。一般取

16、LD50的1/2、1/4、1/8作為三個劑量。當受試物的LD5010g/kg.bw時，最高劑量通常采用10g/kg.bw。同時設陽性對照組和溶劑對照組。,38,骨髓細胞微核試驗,觀察及評價指標： 每只動物計數(shù)1000個嗜多染紅細胞 ，記錄含有微核的細胞數(shù)，并計算微核千分率。觀察嗜多染紅細胞與成熟紅細胞的比例。 結果評價： 受試物組與對照組微核率相比，增高呈劑量反應關系并有統(tǒng)計學意義，試驗結果為陽性。,39,哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗,目的：檢測受試物對整體動物骨髓細胞染色體畸變的致突變性，以評價其致突變的可能性。 原理：當受試物作用于細胞周期G1期和S期時，可誘發(fā)染色體型畸變，而作用于G2

17、期時則誘發(fā)染色體單體型畸變。給動物腹腔注射秋水仙素，抑制細胞分裂時紡錘體的形成，增加中期分裂相細胞的比例，并使染色體絲縮短、分散，輪廓清晰。在顯微鏡下便可觀察染色體數(shù)目和形態(tài)。,40,哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗,時間周期：一般為3周 3-5天適應期 小鼠或大鼠經(jīng)口染毒2-4次，每次間隔24h，在末次染毒18-24h進行取材（取材前2-4h，腹腔注射秋水仙素）。 取股骨，收集骨髓，制片，染色，鏡檢 劑量設計：同骨髓細胞微核試驗,41,哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗,觀察及評價指標： 每只動物分析100個中期相細胞 ，每個劑量組不少于1000個。記錄染色體數(shù)目及結構的改變。 結果評價： 受試物

18、組與對照組染色體畸變率相比，增高呈劑量反應關系并有統(tǒng)計學意義，試驗結果為陽性。,42,小鼠精子畸形試驗,目的： 檢測整體動物體內(nèi)精子畸形發(fā)生率，以評價受試物對體內(nèi)生殖細胞的致突變作用。 原理： 小鼠精子畸形受基因控制，具有高度遺傳性，許多常染色體及X、Y性染色體基因決定精子形態(tài)。精子的畸形主要是指形態(tài)的異常，已知精子的畸形是決定精子形成的基因發(fā)生突變的結果。因此形態(tài)的改變提示有關基因及其蛋白產(chǎn)物的改變。,43,小鼠精子畸形試驗,時間周期：一般為7周 3-5天適應期 小鼠經(jīng)口連續(xù)染毒5天，于首次給樣后的35天處死動物 取兩側附睪，收集精子，滴片，染色，鏡檢 劑量設計：同骨髓細胞微核試驗,44,小

19、鼠精子畸形試驗,觀察及評價指標： 每只動物檢查1000個精子 ，記錄精子畸形數(shù)目及類型。 結果評價： 受試物組與對照組精子畸變率相比，增高呈劑量反應關系并有統(tǒng)計學意義，試驗結果為陽性。,45,小鼠睪丸染色體畸變試驗,目的：檢測整體動物睪丸染色體畸變發(fā)生率，以評價受試物對整體哺乳動物睪丸生殖細胞的致突變性。 原理：不同周期的雄性生殖細胞對化學物質的敏感性不同，多數(shù)情況下化學誘變劑誘發(fā)染色體畸變必須經(jīng)過DNA復制期，故在前細線期處理。第1214d采樣，以觀察作用于前細線期引起的精母細胞染色體畸變效應。,46,小鼠睪丸染色體畸變試驗,時間周期：一般為7周 3-5天適應期 小鼠經(jīng)口連續(xù)染毒5天，與首次

20、給樣后的12-14天處死動物取材，（取材前6h，腹腔注 射秋水仙素）。取兩側睪丸，收集生殖細胞，滴片，染色，鏡檢 劑量設計：同骨髓細胞微核試驗,47,小鼠睪丸染色體畸變試驗,觀察及評價指標： 每只動物分析100個中期相細胞 ，記錄染色體數(shù)目及結構的改變（包括斷片、易位、畸變細胞率、常染色體單價體、性染色體單價體等）。 結果評價： 受試物組與對照組的斷片、易位、畸變細胞率、常染色體單價體、性染色體單價體等差異有統(tǒng)計學意義，試驗結果為陽性。,48,遺傳毒性試驗組合,試驗結果的判定： 如三項致突變試驗（Ames試驗，微核或骨髓細胞染色體畸變試驗，精子畸形或睪丸染色體畸變試驗）中，體外或體內(nèi)有一項或以

21、上陽性，一般應放棄該受試物用于保健食品。 如三項試驗均為陰性，則可繼續(xù)進行下一步的毒性試驗。,49,30天喂養(yǎng)試驗,目的：急性毒性試驗的基礎上，此試驗可進一步了解毒性作用，特別是觀察對生長發(fā)育的影響，并可初步估計最大觀察到的無作用劑量，估計亞慢性攝入的危害性。 原理： 以不同劑量受試物每日經(jīng)口給予各組實驗動物，連續(xù)30天。染毒期間每日密切觀察動物的毒性反應，染毒結束后進行大體解剖、血生化及病理檢查，以此觀察重復喂食不同劑量的受試物對動物引起的有害作用。,50,30天喂養(yǎng)試驗,時間周期：在獲得了急性毒性數(shù)據(jù)后，一般為2月 3-5天，大鼠適應期 30天，染毒及實驗觀察期 再進行大體解剖、血液、生化

22、、器官病 理檢查。,51,30天喂養(yǎng)試驗,劑量設計：至少設三個劑量組和一個對照組。高劑量應能引起動物明顯毒效應但不造成動物死亡。低劑量應不出現(xiàn)任何毒作用，同時在這二劑量之間設幾個中間劑量組。 對于能獲得LD50的受試物：最高劑量為1025的LD50，最低劑量組至少為人可能攝入量的3倍。 對于不能獲得LD50的受試物：最高劑量為人可能攝入量的100倍，或按最大灌胃劑量或在飼料中的最大摻入量。,52,30天喂養(yǎng)試驗,觀察及評價指標： 一般情況觀察：每日的表現(xiàn)、行為、中毒和死亡情況。每周1次體重及2次食物攝入量，計算食物利用率。 血液學指標：喂養(yǎng)結束后測定血紅蛋白、紅和白細胞總數(shù)及分類，必要時測定血

23、小板或網(wǎng)織紅細胞數(shù)等指標。 生化學指標：喂養(yǎng)結束后測定谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、尿素氮、肌肝、血糖、白蛋白、總蛋白、膽固醇和甘油三酯。 病理檢查：大體解剖、臟器稱重、組織病理學檢查。,53,30天喂養(yǎng)試驗,試驗結果的判定： 對于只要求進行一、二階段試驗者，最大未觀察到有害作用劑量人可能攝入量的100倍，綜合其它試驗結果可初步做出安全性評價。 最小觀察到有害作用劑量人可能攝入量的100倍，或觀察到毒性反應的最小劑量組其受試物在飼料中比例10，放棄。 在中低劑量組中個別指標與對照組相比有差異，應綜合分析，決定取舍或進行下一步毒理試驗。,54,其它試驗結果判斷,傳統(tǒng)致畸試驗： 需大于或等于人攝入量的1

24、00倍。在50倍至100倍之間需進行安全性評價，小于50倍需放棄。 90天喂養(yǎng)試驗、繁殖試驗： 1.僅在國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，需大于或等于人攝入量的100倍。 2.國內(nèi)外均無食用歷史的原料或成分時，需大于或等于人攝入量的300倍。在100倍至300倍之間需進行慢性毒性試驗，小于100倍需放棄。,55,其它試驗結果判斷,慢性毒性試驗： 以LD50或30天喂養(yǎng)試驗的最大未觀察到有害作用劑量設計受試物各劑量組，未見有毒性作用。 致癌試驗陽性判定依據(jù)： 腫瘤只發(fā)生在實驗組動物，對照組中無腫瘤發(fā)生。 實驗組和對照組均發(fā)生腫瘤，但實驗組發(fā)生率高。 實驗組和對照組腫瘤發(fā)生率無明顯

25、差異，但實驗組發(fā)生時間較早。 符合以上三項中的情況之一，并經(jīng)統(tǒng)計學處理有統(tǒng)計學意義，可認為致癌試驗陽性。,56,安全性評價的科學性和藝術性,安全性評價的藝術性： 1.動物實驗結果外推到人必須考慮動物與人的種屬差異； 2.安全性標準與社會經(jīng)濟基礎、技術能力的相符性； 3.安全性標準與社會和公眾利益之間的平衡性。 結論：在對化學物質進行科學地安全性評價之后，應結合試驗的局限性，社會經(jīng)濟狀況，人們的生活習慣等因素，對評價結果作出一個合理的分析，為衛(wèi)生標準的制定提供具有實際指導意義的依據(jù)。,57,應綜合考慮的問題,1.試驗指標的統(tǒng)計學意義和生物學意義 在分析試驗組與對照組指標統(tǒng)計學的顯著性時，應根據(jù)其

26、有無劑量反應關系及與本實驗室的歷史性對照值范圍比較的原則,來綜合考慮指標差異有無生物學意義。 2.生理作用與毒性作用 對實驗中某些指標的異常改變，在結果分析時要注意區(qū)分是生理學表現(xiàn)還是受試物的毒性作用。,58,應綜合考慮的問題,3.時間-毒性效應關系 對由受試物引起的毒性效應進行分析評價時，要考慮在同一劑量水平下毒性效應隨時間的變化情況。 4.特殊人群和敏感人群 對孕婦、乳母或兒童食用的保健食品，應特別注意其胚胎毒性或生殖發(fā)育毒性、神經(jīng)毒性和免疫毒性。,59,應綜合考慮的問題,5.人的可能攝入量較大的保健食品 應考慮給予受試物量過大時，可能影響營養(yǎng)素攝入量及其生物利用率，從而導致某些毒理學表現(xiàn)

27、，而非受試物本身的毒性作用所致。 6.含乙醇的保健食品 對實驗中出現(xiàn)的某些指標的異常改變，在結果分析評價時應注意區(qū)分是乙醇本身還是其它成分的作用。,60,應綜合考慮的問題,7.動物年齡對試驗結果的影響 對實驗中出現(xiàn)的某些指標的異常改變，要考慮是否因動物年齡選擇不當所致。 8.安全系數(shù) 鑒于動物、人的種屬和個體之間的生物學差異，安全系數(shù)通常為100。,61,應綜合考慮的問題,9.人體資料 在評價保健食品的安全性時，應盡可能收集人群食用受試物后反應的資料。 10.綜合評價 在對保健食品進行最后評價時，必須綜合考慮受試物的原料來源、理化性質、毒性大小、代謝特點、蓄積性、接觸的人群范圍、食品中的使用范

28、圍、人的可能攝入量及保健功能等因素，確保其對人體健康的安全性。,62,應綜合考慮的問題,11.保健食品安全性的重新評價：很早的毒性評價可 能因為當時科學水平和技術條件的限制，現(xiàn)已不適用需重新評價。 12.若受試物摻入飼料的最大加入量（10）或液體受試物經(jīng)濃縮后仍達不到最大觀察到有害作用劑量為人的可能攝入量的規(guī)定倍數(shù)時，如何綜合其它的毒性試驗結果進行安全性評價。,63,審評結論的判定,1.認可毒理學試驗：試驗設計合理，操作規(guī)范，試驗結果能夠證明受試物的安全性。 2.屬以下幾種情況之一，補充資料后建議批準： （1）檢驗報告格式不規(guī)范，需要重新出具檢驗報告毒理學試驗報告。 （2）數(shù)據(jù)偏離歷史對照較大

29、，需檢驗機構做出解釋。 （3）未提供某些試驗數(shù)據(jù)，需要補充提供。,64,2020/8/1,審評結論的判定,3.重做試驗，大會再審，屬以下幾種情況之一： （1）由于實驗操作不規(guī)范，根據(jù)提供的檢驗報告無法評價產(chǎn)品的安全性，需要做除30天/90天喂養(yǎng)試驗以外的毒理學試驗； （2）已有數(shù)據(jù)提示可能存在安全性問題，但難以下結論，需要重復試驗。,65,2020/8/1,（1）毒理學評價的結果表明產(chǎn)品在推薦劑量下對人體具有一定的毒性，存在安全性問題。 （2）產(chǎn)品的原料、配方存在明顯的安全性問題，如配方含有“可用于保健食品的原料”名單以外的原料，且未進行新資源食品安全性毒理學評價。 （3）選擇安全性毒理學試驗

30、不符合程序規(guī)定，未完成相應階段的毒理學試驗。,4.對產(chǎn)品的安全性不予認可的情況如下（一）：,66,2020/8/1,（4）毒理、功能、興奮劑與衛(wèi)生學、穩(wěn)定性試驗樣品的批號不一致。 （5）未按規(guī)定提供安全性毒理學評價資料的。 （6）30天/90天喂養(yǎng)試驗劑量設計不合理或某些指標異常，結果不可信。,4.對產(chǎn)品的安全性不予認可的情況如下(二)：,67,2020/8/1,功能性食品與方便食品,68,2020/8/1,69,功能食品的功能學評價,對功能食品進行功能學評價是功能食品科學研究的核心內(nèi)容，主要針對功能食品所宣稱的生理功效進行動物學甚至是人體試驗。本節(jié)將介紹評價功能食品的統(tǒng)一程序和試驗規(guī)程。,2

31、020/8/1,功能性食品與方便食品,一個保健食品最多可以申報兩個功能。 27個保健食品功能學評價的具體方法。其中有7個功能不需做人體試食試驗。 功能學評價 增強免疫力 改善睡眠 緩解體力疲勞 提高缺氧耐受力 對輻射危害有輔助保護功能 增加骨密度 對化學性肝損傷有輔助保護功能 改善皮膚油份,70,2020/8/1,功能性食品與方便食品,5 個保健功能學評價只需進行人體試食試驗，不必進行動物試驗 緩解視疲勞 祛痤瘡 祛黃褐斑 改善皮膚水份 改善皮膚油份,71,2020/8/1,72,一、功能學評價的基本要求,（一）對受試樣品的要求 1.學性質（包括化學結構、純度、穩(wěn)定性等）有關資料。 2.受試樣

32、品必須是規(guī)格化的定型產(chǎn)品，即符合既定的配方、生產(chǎn)工藝及質量標準。 3.提供受試樣品的安全性毒理學評價的資料以及衛(wèi)生學檢驗報告，受試樣品必須是已經(jīng)過食品安全性毒理學評價確認為安全的食品。功能學評價的樣品與安全性毒理學評價、衛(wèi)生學檢驗的樣品必須為同一批次（安全性毒理學評價和功能學評價實驗周期超過受試樣品保質期的除外）。 4.應提供功效成分或特征成分、營養(yǎng)成分的名稱及含量。 5.如需提供受試樣品違禁藥物檢測報告時，應提交與功能學評價同一批次樣品的違禁藥物檢測報告。,2020/8/1,73,（二）對實驗動物的要求,1.根據(jù)各項實驗的具體要求，合理選擇實驗動物。常用大鼠和小鼠，品系不限，推薦使用近交系動

33、物。 2.動物的性別、年齡依實驗需要進行選擇。實驗動物的數(shù)量要求為小鼠每組1015只（單一性別），大鼠每組812只（單一性別）。 3. 動物應符合國家對實驗動物的有關規(guī)定。,2020/8/1,74,（三）對給受試樣品劑量及時間的要求,1.各種動物實驗至少應設3組，必要時可設陽性對照組或空白對照組。劑量選擇應合理，盡可能找出最低有效劑量。在3個劑量組中，其中一個劑量應相當于人體推薦攝入量（折算為每公斤體重的劑量）的5倍（大鼠）或10倍（小鼠），且最高劑量不得超過人體推薦攝入量的30 倍（特殊情況除外），受試樣品的功能實驗劑量必須在毒理學評價確定的安全劑量范圍之內(nèi)。 2.給受試樣品的時間應根據(jù)具體

34、實驗而定，一般為30天。當給予受試樣品的時間已達30天而實驗結果仍為陰性時，則可終止實驗。,2020/8/1,75,（四）對受試樣品處理的要求,1. 受試樣品推薦量較大，超過實驗動物的灌胃量、摻入飼料的承受量等情況時，可適當減少受試樣品的非功效成分的含量。 2.對于含乙醇的受試樣品，原則上應使用其定型的產(chǎn)品進行功能實驗，其三個劑量組的乙醇含量與定型產(chǎn)品相同。如受試樣品的推薦量較大，超過動物最大灌胃量時，允許將其進行濃縮，但最終的濃縮液體應恢復原乙醇含量，如乙醇含量超過15，允許將其含量降至15。調(diào)整受試樣品乙醇含量應使用原產(chǎn)品的酒基。,2020/8/1,76,3.液體受試樣品需要濃縮時，應盡可

35、能選擇不破壞其功效成分的方法。一般可選擇6070減壓進行濃縮。濃縮的倍數(shù)依具體實驗要求而定。 4.對于以沖泡形式飲用的受試樣品（如袋泡劑），可使用該受試樣品的水提取物進行功能實驗，提取的方式應與產(chǎn)品推薦飲用的方式相同。如產(chǎn)品無特殊推薦飲用方式，則采用下述提取的條件：常壓，溫度8090，時間3060分鐘，水量為受試樣品體積的10倍以上，提取2次，將其合并濃縮至所需濃度。,2020/8/1,77,（五）對給受試樣品方式的要求 必須經(jīng)口給予受試樣品，首選灌胃。如無法灌胃則加入飲水或摻入飼料中，計算受試樣品的給予量。 （六）對合理設置對照組的要求 以載體和功效成分（或原料）組成的受試樣品，當載體本身可

36、能具有相同功能時，應將該載體作為對照。,2020/8/1,78,（七）人體試食試驗規(guī)程,評價食品保健作用時要考慮的因素 1.人的可能攝入量 除一般人群的攝入量外，還應考慮特殊的和敏感的人群(如兒童、孕婦及高攝入量人群)。 2.人體資料 由于存在動物與人之間的種屬差異、在將動物試驗結果外推到人時，應盡可能收集人群服用受試物的效應資料，若體外或體內(nèi)動物試驗未觀察到或不易觀察到食品的保健效應或觀察到不同效應，而有關資料提示對人有保健作用時，在保證安全的前提下，應進行必要的人體試食試驗。 3. 結果的重復性和劑量反應關系 在將評價程序所列試驗的陽性結果用于評價食品的保健作用時，應考慮結果的重復性和劑量

37、反應關系，并由此找出其最小有作用劑量。,2020/8/1,79,二、試驗項目、試驗原則及結果判定,(一) 免疫調(diào)節(jié)作用 1.試驗項目: （1）動物試驗 臟器/體重比值:a.胸腺/體重比值b.脾臟/體重比值 細胞免疫功能測定 a.小鼠脾淋巴細胞轉化實驗b.遲發(fā)型變態(tài)反應 體液免疫功能測定 a.抗體生成細胞檢測b.血清溶血素測定 單核巨噬細胞功能測定： a.小鼠碳廓清試驗b.小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗 NK細胞活性測定,2020/8/1,80,（2）人體試食試驗,細胞免疫功能測定外周血淋巴細胞轉化試驗 體液免疫功能試驗單向免疫擴散法測定IgG、IgA、IgM 非特異性免疫功能測定 吞噬與殺菌

38、試驗 NK細胞活性測定,2020/8/1,81,2.試驗原則,要求選擇一組能夠全面反映免疫系統(tǒng)各方面功能的試驗，其中細胞免疫、體液免疫和單核巨噬細胞功能三個方面至少各選擇1種試驗，在確保安全的前提下盡可能進行人體試食試驗。,2020/8/1,82,3.結果判定,在一組試驗中，受試物對免疫系統(tǒng)某方面的試驗具有增強作用而對其他試驗無抑制作用，可以判定該受試物具有該方面的免疫調(diào)節(jié)效應；對任何一項免疫試驗具有抑制作用可判定該受試物具有免疫抑制效應。 在細胞免疫功能、體液免疫功能、單核巨噬細胞功能及NK細胞功能檢測中，如有兩個以上(含兩個)功能檢測結果陽性，即可判定該受試物具有免疫調(diào)節(jié)作用。,2020/

39、8/1,83,（二）延緩衰老作用, 1.試驗項目 （1）動物試驗 生存試驗 a.小鼠生存試驗 b.大鼠生存試驗 c.果蠅生存試驗 過氧化脂質含量測定 a.血(或組織)中過氧化脂質降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量測定 組織中脂褐質含量測定 抗氧化活力測定 a.血(或組織)中超氧化物歧化酶(SOD)活力測定 b.血(或組織)中谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX )活力測定,2020/8/1,84,（2）人體試食試驗,血中過氧化脂質降解產(chǎn)物丙二醛(MDA) 含量測定血中超氧化物歧化酶(SOD)活力測定血中谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)活力測定,2020/8/1,85,2.試驗原則,衰老機制比較復雜，迄今尚

40、無一種公認的衰老機制學說，因而無單一、簡便、實用的衰老指標可供應用，應采用盡可能多的試驗方法，以保證試驗結果的可信性。動物試驗，除上述生存試驗，過氧化脂質含量測定、抗氧化酶活力測定3個方面各選一項必做外，可能時應多選擇一些指標(如腦、肝組織中單胺氧化酶(MAO-B) 活力測定等)加以輔助。 生存試驗是最直觀、最可靠的實驗方法，果蠅具有自下而上期短，繁殖快，飼養(yǎng)簡便等優(yōu)點，通常多選果蠅作生存試驗，但果蠅種系分類地位與人較遠，故必須輔助過氧化脂質含量測定及抗氧化活力測定才能判斷是否具有延緩衰老作用。生化指標測定應選用老齡鼠，除設老齡對照外，最好同時增設少齡對照，以比較受試物抗氧化的程度，必要時可將

41、動物試驗與人體試食試驗相結合綜合評價。,2020/8/1,86,3.結果判定,若大鼠或小鼠生存試驗為陽性，即可判定該受試物具有延緩衰老的作用。 若果蠅生存試驗、過氧化脂質和抗氧化酶三項指標均為陽性，即可判定該受試物具有延緩衰老的作用。 若過氧化脂質和抗氧化酶兩項為陽性，可判定該受試物具有抗氧化作用，并提示可能具有延緩衰老作用。,2020/8/1,87,（三）改善記憶作用,1.試驗項目 （1）動物試驗 跳臺試驗 避暗試驗 穿梭箱試驗 水迷宮試驗 （2）人體試食試驗 韋氏記憶量表 臨床記憶量表,2020/8/1,88,2.試驗原則,（1）試驗應通過訓練前、訓練后及重測驗前3種不同的給予受試物方法觀

42、察其對記憶全過程的影響。 （2）應采用一組(2個以上)行為學試驗方法，以保證實驗結果的可靠性。 （3）人體試食試驗為必做項目，并應在動物試驗有效的前提下進行。 （4）除上述試驗項目外，還可以選用嗅覺厭惡試驗、味覺厭惡試驗、操作式條件反射試驗，連續(xù)強化程序試驗、比率程序試驗、間隔程序試驗。,2020/8/1,89,3.結果判定,動物試驗2項或2項以上的指標為陽性，且2次或2次以上的重復測試結果一致，可以認為該受試物具有改善該類動物記憶作用； 人體試食試驗結果陽性，則可認為該受試物具有改善人體記憶作用。,2020/8/1,90,（四）促進生長發(fā)育作用,1.試驗項目 本功能試驗研究是以動物學試驗為研

43、究基礎 （1）胎仔情況 包括活胎數(shù)、雌雄比例、死胎數(shù)、分娩胎仔總數(shù)。 （2）體重及食物利用率 記錄出生時及生后4、7、14、21、30、60d幼鼠的體重，計算斷乳后幼鼠的食物利用率。 （3）生理發(fā)育指標 記錄耳廓分離、門齒萌出、開眼、長毛時間、陰道開放、睪丸下降時間。 （4）神經(jīng)反射指標 平面翻正、前肢抓力、懸崖回避、嗅覺定位、聽覺警戒、負趨地性、回旋運動、視覺發(fā)育、空中翻正、游泳發(fā)育。,2020/8/1,91,2.試驗原則,（1）給受試物的時間可根據(jù)具體情況選擇在母鼠孕期或哺乳期至成年期。 （2）在神經(jīng)反射指標中應選擇一組(5個以上)的行為學試驗方法，以保證結果的可靠性。,2020/8/1,

44、92,3.結果判定,在胎仔情況、體重及食物利用率、生理發(fā)育、神經(jīng)反射4類指標中有3類以上(含3類) 指標為陽性，可認為受試物有促進生長發(fā)育的作用。,2020/8/1,93,（五）抗疲勞作用,本功能試驗研究是以動物學試驗為研究基礎 1.試驗項目 （1）運動試驗 a.負重游泳試驗 b.爬桿試驗 （2）生物化學指標測定 a.血乳酸含量 b.血清尿素氮含量 c.肝/肌糖原比值測定,2020/8/1,94,2.試驗原則 運動試驗與生化指標檢測相結合。在進行游泳或爬桿試驗前，動物應進行初篩。除以上生化指標外，還可檢測血糖、乳酸脫氫酶、血紅蛋白以及磷酸肌酸等指標。 3.結果判定 若1項以上(含1項)運動試驗

45、和2項以上(含2 項)生化指標為陽性，即可以判斷該受試物具有抗疲勞作用。,2020/8/1,95,（六）減肥作用,1.減肥原則 （1）減除體現(xiàn)人多余的脂肪，不單純以減輕體重為標準。 （2）每日營養(yǎng)素的攝入量應基本保證機體正常生命活動的要求。 （3）對機體健康無明顯損害。,2020/8/1,96,2.試驗項目,（1）動物試驗（首先建立動物肥胖模型） 體重測定 體內(nèi)脂肪重量測定 （2）人體試食試驗 主要測定指標：體重、體重指數(shù)、腰圍、腹圍、臀圍、體內(nèi)脂肪含量。,2020/8/1,97,3.試驗原則,在進行減肥試驗時，除上述指標必測外，還應進行機體營養(yǎng)狀況檢測，運動耐力測試以及與健康有關的其它指標的

46、觀察。該功能的人體試食試驗為必做項目，動物試驗與人體試食試驗相結合，綜合進行評價。,2020/8/1,98,4.結果判定,在動物試驗中，體重及體內(nèi)脂肪重量2個指標均陽性，并且對機體健康無明顯損害，即可初步判定該受試物具有減肥作用。 在人體試食試驗中，體內(nèi)脂肪量顯著減少，且對機體健康無明顯損害，可判定該受試物具有減肥作用。,2020/8/1,99,（七）耐缺氧作用,本功能試驗研究是以動物學試驗為研究基礎 1.試驗項目 小鼠常壓耐缺氧實驗 2.結果判定 耐缺氧實驗陽性，說明該受試物具有耐缺氧作用。,2020/8/1,100,（八）抗輻射作用,本功能試驗研究是以動物學試驗為研究基礎 1.試驗項目 （

47、1）亞急性試驗 30天存活率或平均存活時間 白細胞總數(shù) （2）亞慢性或慢性試驗 小鼠睪丸染色體畸變試驗 小鼠骨髓細胞微核試驗,2020/8/1,101,2.試驗原則,較高劑量一次輻射，選擇亞急性試驗；小劑量多次輻射，選擇亞慢性或慢性試驗。,2020/8/1,102,3.結果判定,亞急性試驗項目中2項結果為陽性，則可判定該受試物對較高劑量一次輻射有拮抗作用。 亞慢性或慢性試驗中2項結果為陽性，則可判定該受試物對小劑量多次輻射有拮抗作用。,2020/8/1,103,（九）抗突變作用,1.試驗項目 Ames試驗或V79細胞基因突變試驗 小鼠骨髓細胞微核試驗 小鼠睪丸染色體畸變試驗,2020/8/1,

48、104,2.試驗原則 Ames試驗與V79細胞基因突變試驗任選一項，采用體內(nèi)與體外試驗相結合的原則。 3.結果判定 抗突變?nèi)椩囼炛杏袃身棡殛栃詴r，則可判定該受試物具有抗突變作用。,2020/8/1,105,（十）抑制腫瘤作用,1.試驗項目 (1) 動物誘發(fā)性腫瘤試驗 (2) 動物移植性腫瘤試驗 (3) 免疫功能試驗 NK細胞活性測定 單核巨噬細胞功能測定,2020/8/1,106,2.試驗原則 動物誘發(fā)性腫瘤試驗及動物移植性腫瘤試驗兩項中任選一項，同時必做2項免疫功能試驗 3.結果判定 動物誘發(fā)性腫瘤試驗及動物移植性腫瘤試驗兩項試驗中有一項為陽性，并且對免疫功能無抑制作用，則可判定該受試物具

49、有抑制腫瘤的作用。,2020/8/1,107,（十一）輔助降血脂,1.試驗項目 （1）動物實驗 體重 血清總膽固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白膽固醇 （2）人體試食試驗 血清總膽固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白膽固醇,2020/8/1,108,2.試驗原則,（1）動物實驗和人體試食試驗所列指標均為必測項目。 （2）動物實驗選用脂代謝紊亂模型法，預防性或治療性任選一種。用高膽固醇和脂類飼料喂養(yǎng)動物可形成酯代謝紊亂動物模型，再給予動物受試樣品或同時給予受試樣品，可檢測受試樣品對高脂血癥的影響，并可判定受試樣品對脂質的吸收、脂蛋白的形成、脂質的降解或排泄產(chǎn)生的影響。,2020/8/1,109,（3）在進行人

50、體試食試驗時，應對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察后進行。選擇單純血脂異常的人群，保持平常飲食，半年內(nèi)采血2次，如兩次血清總膽固醇（TC）均為5.26.24mmol/L或血清甘油三酯（TG）1.652.2mmol/L，均可作為備選對象，受試者最好為非住院的高血脂癥患者，自愿參加試驗。受試期間保持平日的生活和飲食習慣，空腹取血測定各項指標。但年齡在18歲以下或65歲以上者、妊娠或哺乳期婦女、對功能食品過敏者、合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重疾病、精神病患者、短期內(nèi)服用與受試功能有關的物品，影響到對結果的判斷者、未按規(guī)定食用受試樣品，無法判定功效或資料不全影響功效或安全性判斷者不可作為人體試食試

51、驗對象。,2020/8/1,110,3.結果判定,（1）動物實驗 輔助降血脂結果判定檢測中血清總膽固醇和甘油三酯二項指標陽性，可判定該受試樣品輔助降血脂動物實驗結果陽性。 輔助降低甘油三酯結果判定 甘油三酯二個劑量組結果陽性；甘油三酯一個劑量組結果陽性，同時高密度脂蛋白膽固醇結果陽性，可判定該受試樣品輔助降低甘油三酯動物實驗結果陽性。 輔助降低血清總膽固醇結果判定 血清總膽固醇二個劑量組結果陽性；血清總膽固醇一個劑量組結果陽性，同時高密度脂蛋白膽固醇結果陽性，可判定該受試樣品輔助降低血清總膽固醇動物實驗結果陽性。,2020/8/1,111,（2）人體試食試驗,血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋

52、白膽固醇三項指標檢測中，血清總膽固醇和甘油三酯二項指標陽性，可判定該受試樣品具有輔助降血脂作用；血清總膽固醇、甘油三酯兩項指標中任一項指標陽性，同時高密度脂蛋白膽固醇結果陽性，可判定該受試樣品具有輔助降低血清總膽固醇或輔助降低甘油三酯作用。,2020/8/1,112,（十二）清咽功能,1.試驗項目 （1）動物試驗 大鼠棉球植入試驗 大鼠足趾腫脹試驗 （2）人體試食試驗 咽部癥狀、體征,2020/8/1,113,2.試驗原則,（1）動物實驗和人體試食試驗為必做項目。 （2）大鼠棉球植入實驗和大鼠足趾腫脹實驗任選其一。 （3）在進行人體試食試驗時，應對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察后進行。選擇

53、慢性咽炎人群，主觀癥狀有咽痛、咽癢、咽干、干咳、異物感、多言加重等。,2020/8/1,114,3.結果判定,（1）動物實驗 大鼠棉球植入實驗或大鼠足趾腫脹實驗結果陽性，可判定受試樣品清咽動物實驗結果陽性。 （2）人體試食試驗 咽部癥狀、體征明顯改善，癥狀、體征的改善率明顯增加，可判定受試樣品具有清咽的作用。,2020/8/1,115,（十三）調(diào)節(jié)血糖,1.試驗項目 （1）動物實驗 高血糖模型動物的空腹血糖值、糖耐量試驗。 正常動物的降糖試驗。 （2）人體試食試驗 空腹血糖值、糖耐量試驗、胰島素測定、尿糖測定。,2020/8/1,116,2.試驗原則,（1）建立高血糖動物模型，常用四氧嘧啶作為

54、建模藥物。 （2）人體試食試驗是必須項目，在動物學試驗有效基礎上并對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察后進行。試驗人群為型糖尿病患者，除測定規(guī)定的指標外，應加測一般健康指標。,2020/8/1,117,3.結果判定,（1）動物實驗 動物學試驗有一項指標陽性； （2）人體試食試驗的空腹血糖值、糖耐量試驗兩項指標中有一項陽性，胰島素又未升高，可判定受試樣品有降血糖作用。,2020/8/1,118,（十四）改善胃腸道功能,改善胃腸功能表現(xiàn)在多方面：促進消化吸收功能、改善胃腸道菌群功能、潤腸通便、保護胃粘膜功能。分述如下： 1.促進消化吸收功能 （1）試驗項目 動物試驗 體重、食物利用率、胃腸運動實驗

55、、消化酶活性、小腸吸收實驗 人體實驗 食欲、食量、胃脹腹感、大便性狀與次數(shù)、體征癥狀、體重、血紅蛋白、胃腸運動實驗、小腸吸收實驗。,2020/8/1,119,（2）試驗原則,動物試驗與人體試驗中的所列項目均為必做項目，人體試驗還應增加一般健康指標。 針對糾正兒童食欲不良或成人消化不良者可從所列項目中選擇重點項目。,2020/8/1,120,（3）結果判定,動物實驗中胃腸運動實驗、消化酶活性、小腸吸收實驗三項中一項陽性，檢測結果判定為陽性。 針對糾正兒童食欲不振時，重點觀察人體試驗中食欲、食量明顯增加，體重、血紅蛋白項中有一項陽性，檢測結果判定為有促進消化吸收功能。 針對成人消化不良時， 項目中

56、體征癥狀、胃腸運動實驗、小腸吸收實驗項中一項陽性，檢測結果判定為有促進消化吸收功能。,2020/8/1,121,2.改善胃腸道菌群功能,（1）試驗項目（腸道菌群以cfu/g糞便計） 動物試驗 雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。 人體實驗 雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。 （2）試驗原則 動物與人體所列檢驗項目均為必測項目。 人體試驗為必做項目，還可以加測一般健康指標。 動物可用正常動物或腸道菌群紊亂動物模型。,2020/8/1,122,（3）結果判定,動物試驗 A雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加，腸球菌、腸桿菌增加但幅度小于雙歧桿菌、乳桿菌的增幅，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化；B雙歧

57、桿菌、乳桿菌明顯增加而產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化、腸球菌、腸桿菌無變化。上兩項中一項符合可判定為陽性。 人體試食試驗 A雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加，腸球菌、腸桿菌增加但幅度小于雙歧桿菌、乳桿菌的增幅，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化；B雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加而產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化、腸球菌、腸桿菌無變化。上兩項中一項符合可判定有改善胃腸道菌群,2020/8/1,123,3.潤腸通便功能,（1）試驗項目 動物試驗：體重、小腸吸收實驗(小腸推進速度)、排便時間、糞便重量或粒數(shù)、糞便性狀。 （2）試驗原則 制造便秘動物模型，與正常對照動物一起實驗。 不得引起動物腹瀉。 （3）結果判定 動物實驗:糞便重量或粒

58、數(shù)明顯增加，小腸吸收實驗、排便時間一項陽性，檢測結果判定為有潤腸通便功能。,2020/8/1,124,4.保護胃粘膜功能,（1）試驗項目 動物試驗 胃粘膜損傷情況（損傷面積、潰瘍情況）。 人體試驗 胃部癥狀、體征、X線鋇餐或胃鏡檢查胃粘膜情況。 （2）試驗原則 人體試驗為必測項目。 人體試驗還可加測一般健康狀況指標。,2020/8/1,125,（3）結果判定,動物試驗 胃粘膜損傷情況有明顯改善，判定為陽性。 人體試食試驗 胃部癥狀、體征明顯改善，胃粘膜損傷癥狀好轉，可判定為有保護胃粘膜功能。,2020/8/1,126,（十五）改善睡眠,1.試驗項目 動物試驗: 體重。 睡眠時間。 睡眠發(fā)生率。

59、 睡眠潛伏期。 觀察指標:給被檢樣品在閾上劑量有催眠作用下是否延長睡眠時間;在閾下劑量作用下是否加快入睡時間。,2020/8/1,127, 2.試驗原則 (1)體重及另三項為必測項目。 (2)觀測被檢樣品對催眠劑(巴比妥或戊巴比妥) 在閾上或閾下劑量時的催眠作用。 3.結果判定 體重以外三項檢測項目中兩項為陽性，檢測結果判定為有改善睡眠功能。,2020/8/1,128,（十六）改善營養(yǎng)性貧血, 1.試驗項目 （1）動物試驗（所列項目均為必測項目） 體重 血紅蛋白 紅細胞壓積 血清鐵蛋白 紅細胞游離原卟啉 組織細胞鐵 （2）人體試驗 體重 血紅蛋白 紅細胞壓積 血清鐵蛋白,2020/8/1,129,2.試驗原則 (1)所列項目均為