農(nóng)藥殘留測(cè)定方法

1、第五章 農(nóng)藥殘留測(cè)定方法,學(xué)習(xí)指南,觀察思考,課外,復(fù)習(xí)自測(cè),退出本章,演示文稿,本章目錄,遼農(nóng)職院 工程系 質(zhì)檢中心,目的要求：掌握GC/HPLC中各種參數(shù)的設(shè)置方法，如色譜柱、柱溫、進(jìn)樣方式以及檢測(cè)器的選擇等。 學(xué)習(xí)要點(diǎn) 一般掌握： GC/HPLC的結(jié)構(gòu)；進(jìn)樣系統(tǒng)；儀器的維護(hù)及故障診斷技術(shù)等。 重點(diǎn)掌握： 最佳分析條件的設(shè)置，常見(jiàn)異常峰的優(yōu)化。,學(xué)習(xí)指南,本節(jié)首頁(yè),退出本章,第五章 農(nóng)藥殘留測(cè)定方法,第一節(jié) 氣相色譜儀 一、氣路系統(tǒng) 二、進(jìn)樣系統(tǒng) 三、分離系統(tǒng) 四、檢測(cè)系統(tǒng) 五、檢測(cè)條件的優(yōu)化,本節(jié)首頁(yè),退出本章,第二節(jié) 液相色譜儀 一、流動(dòng)相系統(tǒng) 二、進(jìn)樣系統(tǒng) 三、分離系統(tǒng) 四、檢測(cè)系統(tǒng)

2、 五、檢測(cè)條件的優(yōu)化,第一節(jié) 氣相色譜儀,一、氣路系統(tǒng),（一）、氣源與載氣種類,本節(jié)首頁(yè),退出本章,1、 惰性（不與樣品或固定相反應(yīng)） 2、 容易得到并易純化 3、 滿足檢測(cè)器要求 常用載氣：N2 H2 He Ar 輔助氣：氧氣或空氣,（二）、氣體的凈化,本節(jié)首頁(yè),退出本章,1、氣體不純的不良影響 樣品失真或消失 柱失效 對(duì)固定液保留特性的影響 對(duì)檢測(cè)器的影響,（二）、氣體的凈化,本節(jié)首頁(yè),退出本章,氧氣捕集器：氧氣破壞色譜柱，降低ECD 檢測(cè)器的功能。,（三）、氣體管路,本節(jié)首頁(yè),退出本章, 專用銅管或不銹鋼管。 塑料管會(huì)滲透O2和其它污染物。 管子使用前先用溶劑沖洗，載氣吹干。 每用完3瓶

3、氣，應(yīng)更換過(guò)濾器。 每隔一定時(shí)間，對(duì)所有外加接頭檢漏。,二、樣品的進(jìn)樣系統(tǒng) 與進(jìn)樣技術(shù),本節(jié)首頁(yè),退出本章,作用: 使樣品以一種可重復(fù)可再現(xiàn)的方式契入到氣相色譜柱中。 被引入的樣品應(yīng)具有代表性，除特殊要求外樣品引入過(guò)程不應(yīng)發(fā)生任何化學(xué)反應(yīng)。,（一）、進(jìn)樣方式,本節(jié)首頁(yè),退出本章,針進(jìn)樣： 手動(dòng)進(jìn)樣；自動(dòng)進(jìn)樣 閥進(jìn)樣：氣體進(jìn)樣閥；液體進(jìn)樣閥 其它進(jìn)樣裝置：吹掃捕集；頂空,1、 針進(jìn)樣,應(yīng)使樣品象一個(gè)塞子一樣地被進(jìn)樣。 為了得到重復(fù)性好的，尖銳的峰形，進(jìn)樣動(dòng)作應(yīng)迅速且穩(wěn)定。,2、針進(jìn)樣技術(shù)比較,3、 進(jìn)樣墊,注：以島津公司產(chǎn)品為例,知識(shí)窗,色譜柱進(jìn)樣墊通用技術(shù),使用輕觸點(diǎn) - 不能過(guò)緊。 保持清潔

4、。 避免污染 - 指紋、油脂等。 檢查使用的密封墊是否有裂紋、碎片、或其它的損壞。,知識(shí)窗,進(jìn)樣墊相關(guān)問(wèn)題,應(yīng)在推薦溫度范圍內(nèi)避免： 泄漏、降解、樣品丟失、出現(xiàn)鬼峰 減少或者避免鬼峰的出現(xiàn)： 進(jìn)樣口帶有隔墊吹掃功能。 應(yīng)使用耐高溫的相應(yīng)進(jìn)樣墊。,作用：可重復(fù)，可再現(xiàn)的方式契入色譜柱中。被引入的樣品應(yīng)具有代表性，除特殊要求外樣品引入過(guò)程不應(yīng)發(fā)生任何化學(xué)反應(yīng)。,本節(jié)首頁(yè),退出本章,（二）、進(jìn)樣口類型,進(jìn)樣口類型氣路控制,本節(jié)首頁(yè),退出本章,分流/不分流進(jìn)樣口 EPC 與 non-EPC 隔墊吹掃填充進(jìn)樣口 EPC 與 non-EPC 冷柱頭進(jìn)樣口 只有EPC 程序升溫汽化進(jìn)樣口 只有EPC 揮發(fā)進(jìn)

5、樣口 只有EPC,分流/不分流進(jìn)樣口,本節(jié)首頁(yè),退出本章,分流方式是特為毛細(xì)管柱GC設(shè)計(jì)的樣品引入方式,1、分流進(jìn)樣 進(jìn)樣前,防止樣品 歧視現(xiàn)象, 進(jìn)樣時(shí)刻, 樣品與載氣混合,為了保證分流比的概念真實(shí)有效，樣品（溶劑+分析物）必須與載氣充分混合，形成一個(gè)均勻的混合物。 這一混合物的一小部分將會(huì)從進(jìn)樣口的底部進(jìn)入色譜柱，而大部分的混合物則會(huì)從分流出口流出。, 襯管過(guò)載,如果進(jìn)樣量過(guò)大，溶劑會(huì)膨脹為很大的體積，致使進(jìn)樣口襯管過(guò)載。 其結(jié)果必將導(dǎo)致樣品從吹掃出口流出而造成樣品損失，同時(shí)也會(huì)造成載氣輸入管路的污染。,知識(shí)窗,本節(jié)首頁(yè),退出本章,1、襯管過(guò)載的后果,其結(jié)果必將導(dǎo)致樣品從吹掃出口流出而造成

6、樣品損失，同時(shí)也會(huì)造成載氣輸入管路的污染。,知識(shí)窗,本節(jié)首頁(yè),退出本章,2、溶劑膨脹計(jì)算公式,微升=22400ABC A=密度/分子量 B=15/(15+柱前壓psi） C=（進(jìn)樣口溫度+273）/273,知識(shí)窗,本節(jié)首頁(yè),退出本章,3、溶劑膨脹計(jì)算例子,知識(shí)窗,4、常用溶劑的膨脹率,進(jìn)樣口溫度為250，柱前壓為13psi,本節(jié)首頁(yè),退出本章, 分流比計(jì)算,分流出口流量 = ？, 總流量,本節(jié)首頁(yè),退出本章,隔墊：13ml或3 6ml 分流流量：分流流量/柱流量 如100：1或50：1 柱流量：受柱前壓控制，流量與壓力在 一定范圍內(nèi)呈正相關(guān)關(guān)系, 如何實(shí)現(xiàn)分流,2、不分流進(jìn)樣系統(tǒng), 進(jìn)樣前 進(jìn)

7、樣閥關(guān)閉,關(guān)閉分流閥使氣流不能從襯管外逃出。由于柱前壓并未改變，所以柱流量將會(huì)保持恒定。原來(lái)吹過(guò)襯管的氣流現(xiàn)在必為通過(guò)隔墊吹掃管路流出。, 進(jìn)樣時(shí)刻 分流閥關(guān)閉,樣品會(huì)擴(kuò)展到進(jìn)樣口的底部。使用250uL的襯管以及柱流量，很容易使襯管過(guò)載，特別是當(dāng)進(jìn)樣體積大于1uL且使用非烴類溶劑時(shí)。, 樣品的汽化 分流閥關(guān)閉,由于樣品組分與溶劑的擴(kuò)散率的不同（更小體積/低分子量），組分在襯管中分層。與載氣混合成為低臨界狀態(tài)，這是因?yàn)楸４鏁r(shí)間長(zhǎng)且?guī)缀跛械臉悠范冀?jīng)過(guò)襯管而進(jìn)入到色譜柱中了。通過(guò)使用某一種“捕集”技術(shù)可將樣品聚集在柱頭。, 樣品的注入 分流閥關(guān)閉,到此被分析物轉(zhuǎn)移入柱已經(jīng)完成。仍有一些溶劑留在襯管

8、之中。如果依然保持分流閥關(guān)閉，則余下的所有溶劑都轉(zhuǎn)移入柱子中，那么溶劑色譜峰將會(huì)嚴(yán)重拖尾。, 樣品的注入 分流閥關(guān)閉,將分流閥從關(guān)閉位置轉(zhuǎn)為開(kāi)啟狀態(tài)以將留在襯管中的剩余溶劑吹出襯管。這個(gè)過(guò)程將會(huì)有效地減小溶劑峰的拖尾，以保證先流出峰的定量更加真實(shí)可信。, 樣品注完 分流閥開(kāi)啟,襯管的體積太小以及通過(guò)襯管的流量太低可能會(huì)導(dǎo)致使用非烴類溶劑的樣品進(jìn)樣量過(guò)大。 對(duì)于不分流進(jìn)樣來(lái)說(shuō)，進(jìn)樣量過(guò)大會(huì)造成定量結(jié)果的準(zhǔn)確性與精確性雙方面的明顯誤差。, 樣品過(guò)載 分流閥關(guān)閉, 溶劑效應(yīng)：設(shè)定柱溫的初始溫度低于溶劑的沸點(diǎn)，致使溶劑在柱關(guān)上冷凝，相當(dāng)于膨脹了固定相并捕集分析物。,本節(jié)首頁(yè),退出本章,樣品進(jìn)入色譜柱后

9、，減少分流出口的載氣流量以節(jié)約載氣。 柱前壓和柱流速仍保持不變，只有分流出口的流量減少?？捎糜诜至骱筒环至鞣绞健?節(jié)省載氣啟動(dòng)的時(shí)間應(yīng)選在樣品進(jìn)入色譜柱后。,（三）、節(jié)省載氣裝置,知識(shí)窗,本節(jié)首頁(yè),退出本章,尾 吹,毛細(xì)管柱內(nèi)流動(dòng)相流速低，流量小，組分會(huì)因柱后死體積突然增加而發(fā)生嚴(yán)重的縱向擴(kuò)散，從而導(dǎo)致峰形展寬，有可能使在柱中以分離的組分在柱后再次重疊，影響分離。 也可在使用FID時(shí)受阻于引入的H2壓力而出柱困難。 增加尾吹氣將改善這一狀況。,（四）、分流平板,此部件須非常清潔,1、在溶劑中超聲處理 - 常用樣品或清洗劑 2、使用金屬紗布擦磨清潔 - 高光潔度可提高其功效- 不要干擦 3、用溶

10、劑清洗 - 避開(kāi)氯化溶劑 - 先惰性洗滌 - 甲苯 - 再用醇類清洗 - 甲醇,（五）、毛細(xì)管襯管,未去活性的襯管的清洗 1) 移去玻璃毛 2) 在溶劑或酸液中超聲振蕩 3) 清洗且干燥 4) 更換去活性的玻璃毛 5) 去活性 - 硅烷化 6) 干燥 7) 精心維護(hù)襯管的內(nèi)表面避免劃傷,毛細(xì)管襯管結(jié)構(gòu)圖,本節(jié)首頁(yè),退出本章,（六）、進(jìn)樣口系統(tǒng)中注意點(diǎn),1、 進(jìn)樣口常見(jiàn)問(wèn)題 非代表性樣品、堵塞、溫度不正確、污染、泄漏 2、 操作條件的選擇 1) 汽化室溫度的選擇 2) 進(jìn)樣墊的材料與處理 3) 進(jìn)樣量,本節(jié)首頁(yè),退出本章,3、進(jìn)樣口的日常維護(hù),更換隔墊 清洗或更換進(jìn)樣針 進(jìn)行泄漏測(cè)試和維修 清洗或更換襯管/內(nèi)插件 清洗或更換分流