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1、,第五章 谷氨酸發(fā)酵機(jī)制 重點(diǎn):谷氨酸生物合成途徑及調(diào)節(jié)機(jī)制;EMP途徑和HMP途徑;TCA、DCA和CO2固定作用;氨的導(dǎo)入;細(xì)胞膜通透性控制;菌種選育模型與控制方法; 難點(diǎn):細(xì)胞膜通透性控制;菌種選育模型與控制方法;,谷氨酸,學(xué)名:-氨基戊二酸;其單鈉鹽:谷氨酸鈉,商品名稱味精,是重要的調(diào)味品。 早期生產(chǎn)谷氨酸的方法有兩種,一是提取法:甜菜廠付產(chǎn)物糖蜜中含有焦谷氨酸,用強(qiáng)堿處理可得到谷氨酸;二是蛋白質(zhì)水解法:將面筋加酸水解,再分離提純。1957年發(fā)酵法生產(chǎn)谷氨酸在日本協(xié)和發(fā)酵公司投產(chǎn)。 谷氨酸生產(chǎn)菌能夠在體外積累菌體最大生長(zhǎng)需要量300多倍的谷氨酸,研究發(fā)現(xiàn):大量積累并非是當(dāng)初設(shè)想的由于特
2、異代謝途徑導(dǎo)致,而是: 代謝調(diào)節(jié)控制; 細(xì)胞膜通透性的特異調(diào)節(jié); 發(fā)酵條件的適合;,第一節(jié) 谷氨酸的生物合成途徑及調(diào)節(jié)機(jī)制 一、EMP途徑、HMP途徑 谷氨酸生產(chǎn)菌存在著兩種代謝途徑:EMP、HMP ;EMP/HMP=10/90。 二、TCA、DCA和CO2固定作用 1.TCA環(huán)(三羧酸循環(huán)) 2.DCA環(huán)(乙醛酸循環(huán)) 3.CO2固定 PEP+CO2+GDP 草酰乙酸+GDP CO2 丙酮酸 蘋果酸 草酰乙酸 CO2 NAD+ NADH+H+,PEP羧化酶,蘋果酸酶,蘋果酸脫氫酶,三、氨的導(dǎo)入 -酮戊二酸還原氨基化谷氨酸 氨的導(dǎo)入有三種方式 谷氨酸合成酶途徑 第二節(jié) 細(xì)胞膜通透性控制 -酮戊二酸脫氫酶活性極低或缺失 細(xì)胞膜對(duì)谷氨酸的通透性高 P69 圖5-3,由天冬氨酸或丙酮酸通過氨基 轉(zhuǎn)移,將氨基轉(zhuǎn)給-酮戊二酸,谷氨酸脫氫酶活性很高, 不被低濃度的谷氨酸抑制,谷氨酸生產(chǎn)菌的 主要生化特點(diǎn),第三節(jié) 菌種選育模型與控制方法 控制磷脂的合成 使細(xì)胞膜受損(如表面活性劑) 青霉素?fù)p傷細(xì)胞壁,間接影響細(xì)胞膜 通過油酸的合成 控制磷脂含量 通過甘油合成 直接控制磷脂合成,提高細(xì)胞膜的 谷氨酸通透性,谷氨酸產(chǎn)生菌的選育可從以下幾個(gè)方面進(jìn)行: 1.選育生物素缺陷型 2.選育油酸缺陷型 3.選育甘油缺陷
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