線性范圍及檢測(cè)限.doc

學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考線性與范圍 (linearity and range) 分析方法的線性是在給定范圍內(nèi)獲取與樣品中供試物濃度成正比的試驗(yàn)結(jié)果的能力。換句話說(shuō)，就是供試物濃度的變化與試驗(yàn)結(jié)果(或測(cè)得的響應(yīng)信號(hào))成線性關(guān)系。 所謂線性范圍是指利用一種方法取得精密度、準(zhǔn)確度均符合要求的試驗(yàn)結(jié)果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，其最大量與最小量之間的間隔，可用mgL mgL、 ugml ugml等表示。 線性與范圍的確定可用作圖法(響應(yīng)值Y濃度X)或計(jì)算回歸方程(Ya+bX)來(lái)研究建立。 測(cè)定樣品時(shí)所有生物藥物分析方法都必須同時(shí)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。每次作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，方法應(yīng)與分析方法考核時(shí)完全一致。標(biāo)準(zhǔn)濃度應(yīng)包括一定梯度的5-8個(gè)濃度(非線性者如免疫分析可適當(dāng)增加)，每個(gè)濃度只需測(cè)定一次(免疫分析可測(cè)定兩次并取均值)；標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)覆蓋樣品可能的濃度范圍，對(duì)于含量測(cè)定要求一般濃度上限為樣品最高濃度的120，下限為樣品最低濃度的80 (但應(yīng)高于LOQ)；目前仍廣泛采用相關(guān)系數(shù)(r)表示標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度、并控制r0.9900。對(duì)照品的LOQ必須包括在線性范圍。 線性范圍是指 與檢測(cè)器響應(yīng)信號(hào)成線性關(guān)系的樣品的含量范圍. 一般情況下,標(biāo)準(zhǔn)曲線的最低和最高值是包含在線性范圍內(nèi)的,而且不同人做的標(biāo)準(zhǔn)曲線,他所取的最低和最高值也不會(huì)都相同,打個(gè)比方來(lái)說(shuō),A做5個(gè)點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,所選擇的標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度分別為:1,5,10,15,20,那么最低最高值分別為1和20,而對(duì)于這種要檢測(cè)的物質(zhì)來(lái)說(shuō),它的線性范圍可能是10E5,要遠(yuǎn)大于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線所選擇的濃度范圍.通常在建立一個(gè)新方法的時(shí)候可以通過(guò)文獻(xiàn)查到一些物質(zhì)的線性范圍,而實(shí)際工作中,要確切知道某種物質(zhì)的線性范圍必要性可能也不大。S/N=3時(shí)的濃度是檢測(cè)限，也就是峰高約在基線噪音高的3倍，注入液相色譜儀的對(duì)照品百分濃度。S/N=10是定量限，也就是峰高約在基線噪音高的10倍時(shí)，注入液相色譜儀的對(duì)照品量。首先，配制一個(gè)較低濃度的對(duì)照品溶液，注入液相色譜儀，觀察其峰高比基線噪音高多少倍（假設(shè)X倍），將該溶液稀釋到X/3倍，基本即為該物質(zhì)的檢測(cè)限，將該溶液稀釋到X/10倍，基本即為該物質(zhì)的定量限。具體操作時(shí)，就是把一定濃度的溶液不斷稀釋，直到S/N=3。一般就是用眼來(lái)估計(jì)了，不過(guò)也可以計(jì)算出來(lái)，好像是用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的，具體公式你可以查一下書(shū)。Detection LimitLimit of DetectionDLLOD檢出限D(zhuǎn)L是一種比值，用%或ppm表示，等于最低檢出濃度與樣品溶液濃度（通常是一個(gè)固定的限度值）的比值，因此只有在滿足最低檢出濃度和最低檢出量的同時(shí)才能夠做出檢出限。它主要適用于雜質(zhì)測(cè)定中的雜質(zhì)限度檢查項(xiàng)目的方法驗(yàn)證，即你通過(guò)這個(gè)驗(yàn)證證明你的方法能夠檢出足夠低的雜質(zhì)，就是說(shuō)，如果你作出的檢測(cè)限（最低檢測(cè)濃度）比限度好高，那是萬(wàn)萬(wàn)不行的。檢測(cè)限不但要低于限度，最好遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于雜質(zhì)限度。根據(jù)分析方法是采用非儀器分析還是儀器分析可用幾種方法來(lái)確定檢測(cè)限度，除了下面所列的方法外其他的方法也可能被接受。6 1 根據(jù)直觀評(píng)價(jià) 直觀評(píng)價(jià)可以用于非儀器分析方法，也可用于儀器分析方法。檢測(cè)限度的測(cè)定是通過(guò)對(duì)一系列已知濃度分析物的樣品進(jìn)行分析，并以能準(zhǔn)確測(cè)得被分析物的最小量來(lái)建立。【通過(guò)進(jìn)樣大量不同濃度的溶液，證明你所說(shuō)的檢測(cè)限是最低的，通常費(fèi)力不討好，但是卻是無(wú)奈的情況下最好的辦法。62根據(jù)信噪比 該方法儀適用于出現(xiàn)基線噪音的分析方法。信噪比的測(cè)定是通過(guò)比較含已知低濃度被分析物的樣品與空白樣品的測(cè)試信號(hào)，確定被分析物可被確切地檢測(cè)的最小濃度，當(dāng)信噪比在3：1或2：1時(shí)的檢測(cè)限度通常被接受?！敬朔ǔＳ茫杭从^察圖譜，保證圖譜中信號(hào)峰強(qiáng)度同一段平緩的噪音峰強(qiáng)度的平均值約為3：1即可?！?3 根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率 【這種方法好啊，省時(shí)省力，就是費(fèi)腦筋，我目前還沒(méi)搞懂，如果由高手事件過(guò)請(qǐng)指教，廢話少說(shuō)】檢測(cè)限度（DL）表示為：DL=3.3/S ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差 S：校正曲線的斜率斜率S可從被分析物的校正曲線來(lái)估算，的值可由多種途徑估算。如：631 根據(jù)空白的標(biāo)準(zhǔn)差 通過(guò)幾份空白樣品的分析，然后計(jì)算其響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差，測(cè)出分析背景響應(yīng)值的大小。632 根據(jù)校正曲線 通過(guò)對(duì)含有DL范圍內(nèi)被分析物樣品的分析來(lái)研究其標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸線的剩余標(biāo)難差或回歸線的y軸截距標(biāo)準(zhǔn)差都可作為標(biāo)準(zhǔn)差。64 申報(bào)數(shù)據(jù) 必須同時(shí)提供檢測(cè)限度和測(cè)定檢測(cè)限度的方法。如果見(jiàn)是根據(jù)直觀評(píng)估或信噪比得來(lái)的，應(yīng)提供相關(guān)的一些色譜圖。 如通過(guò)計(jì)算或外推法得到檢測(cè)限度的估算值，可對(duì)一系列接近或等于檢測(cè)限度樣品的逐個(gè)分析來(lái)論證這一估算值?！旧鲜鲑Y料引致ICHQ2B，建議諸位閱讀英文原文，恐翻譯不到位引起歧義】檢測(cè)限是一種限度檢驗(yàn)效能指標(biāo)，它既反映方法與儀器的靈敏度和噪音的大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白(本底)值的高低。要根據(jù)采用的方法來(lái)確定檢測(cè)限。當(dāng)用儀器分析方法時(shí)，可用已知濃度的樣品與空白試驗(yàn)對(duì)照，記錄測(cè)得的被測(cè)藥物信號(hào)強(qiáng)度S與噪音(或背景信號(hào))強(qiáng)度N，以能達(dá)到SN2或SN3時(shí)的樣品最低藥濃為L(zhǎng)OD；也可通過(guò)多次空白試驗(yàn)，求得其背景響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)差，將三倍空白標(biāo)準(zhǔn)差(即3空或3S空)作為檢測(cè)限的估計(jì)值。為使計(jì)算得到的LOD值與實(shí)際測(cè)得的LOD值一致，可應(yīng)用校正系數(shù)來(lái)校正，然后依之制備相應(yīng)檢測(cè)限濃度的樣品，反復(fù)測(cè)試來(lái)確定LOD。如用非儀器分析方法時(shí)，即通過(guò)已知濃度的樣品分析來(lái)確定可檢出的最低水平作為檢測(cè)限。另外，實(shí)際工作中以下幾個(gè)概念是經(jīng)?；煜模?，最低檢測(cè)濃度2，最低檢出量3，檢出限1，最低檢出濃度：滿足最低檢測(cè)限要求時(shí)，進(jìn)樣供試品溶液的濃度，常見(jiàn)單位：微克/毫升，納克/毫升，克/毫升【濃度單位】。2，最低檢出量：最低檢出量=最