固體制劑溶出度方法開發(fā)及溶出儀校正要求

1,固體制劑溶出度方法開發(fā)及溶出儀校正要求,浙江省食品藥品檢驗研究院,2,內 容,一、中國藥典溶出度介紹二、國外藥典溶出度介紹三、溶出度檢查制訂原則四、溶出度方法的確立五、溶出量測定方法學驗證六、溶出度試驗的影響因素七、溶出結果評價八、口服緩控釋制劑的幾個問題九、溶出儀的校正,3,一、中國藥典溶出度介紹,溶出度：系指藥物從片劑、膠囊或顆粒劑等制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度。作用:評價和篩選制劑處方與工藝;控制藥品質量;臨床試驗提供參考。2010版“藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗指導原則”:應提供受試制劑和參比制劑的體外溶出度比較（n12）數(shù)據(jù)。,4,一、中國藥典溶出度介紹,USP18版(70年版引入13個品種，僅轉藍法)BP(73年版測定地高辛，僅品種方法)ChP(77版收載方法，85年版收載品種) JP（1981版收載4個品種),中、美、英藥典溶出度測定沿革,5,溶出概況圖,藥物 制劑 儀器 溶出 介質溶出取樣時間,溶解度,速釋制劑緩釋、控釋制劑遲釋制劑,籃法槳法其他方法,不同pH的水溶液不同類型、不同量的表明活性劑不同種類、不同量的有機溶劑水溶液,單點、兩點或多點取樣作溶出曲線,一、中國藥典溶出度介紹,6,第一法 轉籃法第二法 槳法 第三法 小杯法(小杯攪拌槳法)槳碟法 透皮貼劑釋放度測定(槳法),一、中國藥典溶出度介紹,7,一、中國藥典溶出度介紹,籃法: 除另有規(guī)定外，分別量取經脫氣處理的溶出介質900 ml，置各溶出杯內，加溫，待溶出介質溫度恒定在370.5后，取供試品6片(粒、袋)，分別投入6個干燥的轉籃內，按規(guī)定速度旋轉。除另有規(guī)定外，至規(guī)定時間時取樣，立即用不大于0.8m的適當濾膜濾過。自取樣至濾過應在30s內完成。限度:除另有規(guī)定外，取樣時間45min，限度（Q）為標示量70%,8,中國藥典溶出度結果判斷（1）6Q（2）6（Q-10%12 Q，Q平均Q ）（3）復試：6（12）Q ,Q-20%1Q-10%,Q平均Q； 合格：12（ 3Q， Q-20%1 Q-10%，Q平均Q）,一、中國藥典溶出度介紹,9,光纖原位藥物溶出度試驗儀:將藥物溶出度儀和光譜分析儀結為一體,探頭侵入溶出杯中,光源發(fā)出的光通過光纖照射到探頭,然后經探頭反射,將液體的光譜信號通過光纖輸入檢測系統(tǒng)并由計算機對數(shù)據(jù)進行處理,實現(xiàn)藥物溶出過程的原位、實時檢測。,一、中國藥典溶出度介紹,10,二、國外藥典溶出度介紹,1、儀器裝置與測定方法USP收載9種方法：籃法、槳法、往復筒法、流池法、槳碟法、轉筒法、往復支架法；往復筒法主要針對球形制劑,流室法主要用于難溶性藥物緩釋制劑。BP和JP收載3種方法：籃法、槳法和流室法。國外藥典槳法更被廣泛應用（如JP90%）。Chp1985引入流室法的裝置, Chp1990 年撤銷了該法。,11,二、國外藥典溶出度介紹,2、溶出介質USP、BP與ChP基本一致；USP體積一般為5001000 ml (籃法和槳法) ,常用900 ml ,最大可至24 L ,如thalidomide capsules 溶出介質SDS溶液達4 L。JP規(guī)定四種溶出介質：pH1.2 、pH4醋酸鹽緩沖液pH 6.8 磷酸鹽緩沖液、水,12,3、測定結果判定兩階段試驗 三階段試驗,二、國外藥典溶出度介紹,13,二、國外藥典溶出度介紹,美國藥典還在綜合信息(General information) 部分收載了劑型的體外與體內評價1 532 ( In vitro and in vivo evaluation of dosage forms) 及溶出度測定法的進展和驗證 (The dissolution procedure development and validation)；不屬于強制執(zhí)行要求,但對進行溶出度試驗方法的研究很有價值。,14,三、溶出度檢查制訂原則需制訂制劑,當藥物溶出影響其體內吸收時(如難溶性、多晶型藥物)當血藥濃度波動易引起臨床不良反應(如治療指數(shù)較小或治療窗較窄的藥物)。鹽酸地爾硫卓片和格列奇特片()主藥劑量較小，藥效強。用于預防和治療嚴重疾病。用于急救的固體制劑、避孕藥以及用于重點部位。用制劑學手段特殊處理（如微粉化、固體分散、CD包合、微囊化、脂質體、促吸收等）具有特殊釋藥要求（如速釋、遲釋、緩控釋等）,15,三、溶出度檢查制訂原則易溶藥物制劑,易溶藥物會因制劑的處方和生產工藝不同而導致藥物的溶出有很大差異，甚至同一廠家的不同批號的產品之間也存在著這種差異。藥物顆粒大??；藥物的晶型；賦形劑的成分;制片的壓力大小。新藥（仿制）研究和處方篩選研究階段，易溶性藥物制劑也應進行溶出度的研究和考察。結合處方，工藝研究，以便改進處方和工藝 。,16,三、溶出度檢查制訂原則易溶藥物制劑,可能做不出溶出曲線，可采用單點檢測，比如：15分鐘85。主藥易溶于水制劑，在質量研究中考察其溶出度后，確認制劑過程不改變溶解性能，溶出情況良好，溶出度可不一定訂入標準中，以崩解時限間接反映溶出情況。,17,三、溶出度檢查制訂原則,檢查方法要求:保持產品質量批間一致性；避免極端條件，區(qū)分質量優(yōu)劣；通過改進處方工藝，提高/降低溶出效果。,18,溶出度方法確立：包括溶出方法、轉速、溶出介質及用量的篩選過程，溶出限度確定；溶出量測定方法學驗證資料：按定量測定項目驗證，包括線性、范圍、專屬性、精密度等；考察其溶出均一性和溶出曲線(至少三批樣品)。,溶出度完整驗證的資料,19,溶出度方法的確立幾個方面(1)溶出方法的選擇(2)溶出介質的選擇(3)溶出介質體積的選擇(4)轉速的選擇(5)溶出度指標制定(6)溶出度均勻性試驗（批內）(7)溶出曲線試驗（重現(xiàn)性，批間）,四、溶出度方法的確立,20,(1)方法的選擇：籃法(B)/漿法(P)，不提首選漿法或藍法 非崩解型藥物（B）崩解型藥物 制劑中含有難以溶解、擴散的成分（P） 主藥或輔料為一定膠性物質（P） 懸浮的制劑（B）,如輔料易堵塞網孔(P,沉降籃使用藥典和SOP不一致？正文中規(guī)定)小杯法:500ml濃度過低,較靈敏的方法仍難以進行定量測定(不能使用沉降籃，測定不能再稀釋測定)。,21,(2)溶出介質的選擇水:不提以水為主（pH 值無法控制，在試驗過程中易發(fā)生改變，適合非pH依賴釋藥）人工胃液（0.010.1mol/L鹽酸溶液, 必要時可加胃蛋白酶）人工腸液（必要時可加胰蛋白酶）其他緩沖液（pH值一般不超過7.6） 三羥甲基氨基甲烷(Tris):緩沖范圍pH7.09.5，低離子強度(二氟尼柳膠囊) 其他 : 低濃度表面活性劑; 醇溶液（一般5）,人體生理pH值在胃內為13.5,小腸內約為7,結腸內約為7. 5,22,(2)溶出介質的選擇表面活性劑盡量避免使用，種類和濃度需通過多個試驗來驗證。FDA溶出度指導原則：對于難溶性藥物不提倡使用有機溶劑，推薦SDS，但必須證明表面活性劑的選用和用量的合理性。即應考察表面活性劑對藥物的增溶量，以確定最少且最佳的使用濃度。USP:氯貝丁酯膠囊5% SDS,最高。 灰黃霉素片4% SDS（Chp 0.54% SDS）。 Chp貝諾酯片SDS1% ，最高。,23,(2)溶出介質的選擇表面活性劑 采用陽離子表面活性劑/非離子表面活性劑。十二烷基硫酸鈉 (Sodium lauryl sulfate SLS或SDS) 純度；pH2.5聚山梨酯(吐溫)20-80 (Tween 20-80 ) 茴三硫片/吉非替尼片/鹽酸雷洛昔芬片等溴化十六烷基三甲胺 粘度大月桂基二甲基氧化銨 替代 SDS 用于膠囊劑（可以與酶配伍）,24,ChP溶出度中用到有機溶劑的品種,(2)溶出介質的選擇有機溶劑的使用,25,(3)介質的體積選擇使藥物符合漏槽條件小規(guī)格品種一般不提倡將2粒/片投入1個溶出杯中來滿足測定的靈敏度需要。常用：大杯法：500 1000ml ，900ml為最普遍小杯法：100250ml。,26,(3)介質的體積選擇漏槽條件定義：即所用介質的體積應達到被測物質在37 時在此介質中達到飽和溶液濃度的體積的310倍。指溶出到溶液中的藥物很快被溶液稀釋帶走，藥物的溶出不受溶出介質中藥物濃度的影響，也即濃度差不是藥物溶出的限速步驟。如何確定：制劑時，輔料往往可以增大藥物的溶解度，單確定原料的溶解度無意義，需結合輔料測定。,27,(4)轉速的選擇低于20r/min不符合流體力學要求; 高于150r/min產生湍流，且轉速過快造成與生物利用度不相關 。常規(guī)：轉籃100r/min槳法50r/min 小杯35r/min (一般認為相當于正常胃腸道蠕動狀態(tài))。常規(guī): 無特殊要求時，一般為25r/min的整倍數(shù) 漿 法：5075r/min; 藍 法：50100r/min; 小杯法：3550r/min;,28,(5)溶出度指標制定基本原則：完全釋藥指標（如普通制劑12h內，釋藥90%標示量），以防藥物殘留而降低藥效控制釋藥指標（如緩控釋制劑初始釋藥、中間釋藥等），保證釋藥曲線特性藥效,不良反應預防釋藥指標（如腸溶、結腸釋藥制劑在胃中的滲漏等），保證釋藥部位 藥效,不良反應,29,(5)溶出度指標制定普通制劑在選擇的方法及溶出介質和預選的轉速下測定不同時間的溶出量，建立溶出曲線，從圖譜上來確定取樣液時間，一般溶出曲線的拐點處后推10-15分鐘；如果時間較長或太短，可適當提高或減低轉速后重新測定溶出曲線，制定出合理可行的取樣時間和釋藥量。 速釋制劑根據(jù)制劑設計思想制定合理取樣點和釋藥量。如分散片可定在15min，80%。,30,(6)溶出度均勻性試驗（批內）在確定的條件下測定6片（粒）樣品的溶出曲線，6條溶出曲線進行比較，應基本均勻一致。確定工藝的穩(wěn)定性。(7)溶出曲線試驗（重現(xiàn)性，批間）。考察方法設定的取樣時間以及限度是否合理。通過溶出曲線也可以看出藥物在何時能達到最大釋放，以及是否能達到最大釋放。為避免多次取樣造成的誤差，取樣點不宜過多，通常為56個點。 小杯法可采用34個點。,31,五、溶出量測定方法學驗證,(1)線性(2)輔料干擾和溶液穩(wěn)定性(3)回收試驗(4)重復性試驗(5)精密度,32,(1)線性作用：考察測定溶出液濃度是否符合測定要求。要求：如溶出和含量測定同一種方法，可參考含量線性；當兩者測定濃度有區(qū)別時，增加線性范圍。當兩者采用不同的方法時，要求。溶出度測定 以釋放量的10%120%間選取5個點即可。 可接受標準(常量):R0.998(0.990),Y軸截距在100響應值的2%(25%)以內,響應因子RSD2.0%(10%)。,33,(2)輔料干擾和溶液穩(wěn)定性輔料干擾:測定干擾2%以下可忽略不計;25%可考慮在限度上適當提高;超過5%以上測定方法不可取 。溶液穩(wěn)定性:當和含量的溶劑不同時，須重新考察。,34,(3)回收試驗回收率范圍規(guī)定為限度的20（高、中、低常設為50、限度濃度、100）可接受標準：98.0102.0%(80120%) RSD2.0%(10%)(n=9)(4)重復性試驗同含量測定(5)精密度同含量測定,35,六、溶出度影響因素,(一)藥物性質的影響(二)處方中輔料的影響(三)溶出試驗條件的影響(四)測定方學的影響,36,(三)溶出試驗條件的影響,1、溫度的影響2、溶出介質脫氣的影響3、投樣與取樣操作的影響4、轉籃與轉桿的影響5 、轉速的影響6、藥片位置效應的影響7、震動的影響8、配制溶出介質的試劑影響,37,1、溫度的影響(1)外圍水浴高度應超過溶出杯里液面的高度，保證杯中溶出介質的溫度；(2) 當溶出介質中有機相比例較大時，注意預熱和試驗過程中介質揮發(fā)，使用密封性良好的溶出儀。,38,2、溶出介質脫氣的影響介質中氣體對樣品崩解、擴散和溶出產生影響。(1)改變溶出介質的pH值 ；(2)溫度改變時小氣泡釋出，對液體流型產生影響；(3)溶入的氣體有時會明顯改變有效成分的性質；(4)氣泡與聚集顆粒結合，使溶劑中顆粒的濃度及顆粒均勻度隨意改變；,39,2、溶出介質脫氣的影響(5) 氣泡在轉籃中聚集，改變了篩網的孔隙率，從而影響了藥品的溶出。 (6) 氣泡與藥物相連降低了與溶劑接觸的表面，或改變了比重而使崩解和解聚過程改變；,40,2、溶出介質中存在氣體的影響脫氣方法：煮沸法:煮沸15分鐘;真空脫氣:加熱至約41,并在真空條件下攪拌5分鐘以上;抽濾法:加熱至約41，趁熱減壓0.45m過濾;超聲法:減壓超聲脫氣5分鐘以上。指標：溶出介質中的溶解氧不超過2.8mg/L(20時為9.17mg/L ),41,方法：USP潑尼松校正片槳法，50rpm，500ml 水為溶劑，30min取樣。,42,2、溶出介質中存在氣體的影響,ZKT-18真空脫氣儀(天大天發(fā)科技有限公司)采用加溫抽真空循環(huán)脫氣。溫度控制范圍：3745分辨率：0.1控溫精度：0.5真空度控制范圍：0.02Mpa0.05 Mpa分辨率：0.01 Mpa處理溶液體積：7升或21升加熱功率：1500W,43,3、投樣與取樣操作的影響投樣分別置于干燥轉籃中或同時投入六個杯中(槳法)自接觸溶出介質時開始計時。間隔30 秒，逐片置于溶出杯中。自第一個樣品接觸溶出介質開始啟動攪拌并計時。(槳法)取樣經規(guī)定時取樣（20 秒），取樣至濾過應在30秒鐘內完成；6杯中完成取樣時間應在1分鐘內。取樣位置應在轉籃(槳葉)頂端至液面的中點距溶出杯內壁10mm (小杯6mm )。,44,4、轉籃與轉桿的影響(1)轉動時桿是否在溶出杯的正中央。(2)轉籃潔凈程度：轉籃空隙如有堵塞可超聲或在稀硝酸中煮沸、再在水中煮沸辦法進行。(3)槳板厚度:藥典規(guī)定漿板的厚度均為4.01.0mm。漿板越厚產生的物理機械力就越大。,45,5 、轉速的影響低轉速有時差異明顯6、藥片位置效應的影響(1)投放過程中要避免與槳桿或槳葉發(fā)生碰撞，(2)樣品在溶出杯中位置應處于底部中心位置，如有差異，距底部中心距離1cm。,46,8、配制溶出介質的試劑和試液(1) 無機鹽或有機溶劑，一般不會廠商不同而產生顯著性差異。注意熒光法測定。(2)水，有時會由于來源各異，pH值有所不同，從而導致測定結果的差異。(3)表面活性劑 SDS、吐溫-80等會因生產廠商的不同測定結果有差異。(4)緩沖液調節(jié)pH值至規(guī)定pH值0.05之內。,47,(四)測定方學的影響,1、濾膜吸附影響2、囊殼的干擾影響3、溶液穩(wěn)定性的影響4、計算方法不同影響,48,1、濾膜吸附影響濾膜孔徑0.45m、0.80m水系和有機系兩種。水系:(混合)纖維素酯濾膜(WX),不耐酸、堿、有機溶劑。有機系:尼龍（N6、N66）濾膜、聚偏氟乙烯（PVDF）濾膜、聚四氟乙烯（PTFE）濾膜等。,49,1、濾膜吸附影響注意事項(1)過濾時濾膜與主成分間存在著一個吸附飽和過程，濾膜吸附一定量后達到飽和、不再吸附。(2) 吸附量2%以下時可忽略不計；超過2%應注意。(3) 0.45m濾膜吸附率高于 0.80m。,50,1、濾膜吸附影響濾膜吸附試驗方法：(a) 取溶出液，分別過濾不同體積初濾液后測定，觀察響應值的變化情況，考察濾膜吸附情況(b)取溶出液， 一份直接采用高速離心取上清液，與過濾掉一定體積后的另一份續(xù)濾液比較，觀察兩者間的測定數(shù)據(jù)是否存在顯著性差異。(c) 對照品溶液，經濾膜過濾一定體積后，與原溶液進行比較，觀察測定前后數(shù)據(jù)的變化情況。,51,1、濾膜吸附影響濾膜吸附替代（標準中注明）棄除規(guī)定初濾液離心(a)離心時離心管內可能形成藥物的濃度梯（離心分離）。(b) 繼續(xù)釋放。,52,2、囊殼的干擾影響(1)UV法在短波長處的測定干擾較多。(2)藥典規(guī)定:2%可忽略不計；2%測定結果進行校正;25%，測定方法不可行。 (3)某些空膠囊會發(fā)生交聯(lián)，從而溶脹不崩，這種情況下可以在溶出介質中加入1胃蛋白酶試驗。,53,3 、溶液穩(wěn)定性的影響主成分溶解于溶出介質后，因進行穩(wěn)定性其考察。(1)如不穩(wěn)定，則應在標準中注明取樣后立即測定；(2)溶液不穩(wěn)定時一般采用對照品平行操作法。,54,4 、計算方法不同影響(1) 以相當于標示量的百分數(shù)限度計算。因若是投料量不足的話，結果可能不合格 。(2) 自身對照法的僅限于沒有化學對照品的多組分藥品。應對對照溶液的制備方法進行驗證，以保證其有效成分盡可能完全溶解。,55,生物藥劑分類系統(tǒng)（BCS）溶解性和滲透性均好 吸收好可不必考慮測定溶出度溶解性好、滲透性差 吸收不佳一般采用促吸收手段，增加藥物的胃腸道透過性溶解性差、滲透性好 吸收易波動一般采用提高藥物溶解性，控制藥物溶出速率溶解性和滲透性均差 吸收極差不易改進且一般難成為有效口服藥物,七、溶出結果評價,56,大多數(shù)藥物只有在胃液或腸液中形成分子狀態(tài)，才能通過胃腸粘膜壁并被吸收至血液循環(huán)發(fā)生治療作用。如果藥物溶解至胃腸液中的小于胃腸吸收速度，則藥物溶出過程即成為吸收的限制步驟。,七、溶出結果評價,57,國際上通常采用以下4 種溶出介質來模擬pH 1.2 的溶液(氯化鈉2.0g，加水適量溶解，加鹽酸7ml，再加水稀釋至1000ml)。我國通常采用的0.1mol/L 鹽酸液。pH 4乙酸鹽緩沖液0.05mol/L乙酸-0.05mol/L乙酸鈉(16.43.6)。pH 6.8磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀3.4g和無水磷酸氫二鈉3.55g，加水適量溶解并定容至1000ml，再稀釋一倍) 。水 (2)(3)的離子濃度較我國藥典附錄中記載的低。,七、溶出結果評價,58,BCS普通口服固體制劑餐后胃平均保留（排空）T50%是1520min。當藥物在0.1M鹽酸中15min溶出85%以上時，一般認為藥物體內吸收速度與程度不再依賴于胃排空速率，除非處方中含顯著影響藥物吸收輔料。 溶出比較試驗 介質：建議首選900mL0.1M 鹽酸溶液 方法：轉藍法（100r/min），槳法（50r/min） 如果15min 85% 如果15min 75%，用于考察釋藥量是否基本完全?？蒯屩苿簽榉从称浜闼籴尫诺奶攸c，應酌情增加取樣點,釋放度方法的確立,77,常見問題,釋放度研究與處方工藝研究割裂；溶劑選擇不合理；未考察不同溶劑、不同測定條件下的釋放度；釋放度限度不合理（時間點、限度范圍）,78,緩釋片改變規(guī)格一般應進行生物等效性研究以骨架片規(guī)格減半為例：若主輔料減少一半，工藝不變，則片劑釋藥面積增加，擴散層厚度減小，體內釋放速度若主藥減少一半，輔料不變，工藝不變，則片劑中藥物濃度減小，體內釋放速度若重新研究處方，需要驗證體內釋藥效果,79,緩釋膠囊改變規(guī)格 對于緩釋小丸裝膠囊制成的緩釋制劑，若僅是每粒裝量改變，可不進行生物等效性研究因為體內外釋藥特性均不會改變（若膠囊殼質量符合要求）,80,九、溶出儀的校正,一回一個樣一臺一個樣一室一個樣,不合格時無所適從莫衷一是,常常的為難,81,分析原因,溶出度結果偏差來源,我們要保證的是：1、確切的儀器性能狀態(tài)2、規(guī)范的實驗操作從而測得供試品的真實溶出,溶出儀操作者供試品,82,溶出儀的校正,溶出度結果偏差來源,我們要保證的是：1、確切的儀器性能狀態(tài)2、規(guī)范的實驗操作從而測得供試品的真實溶出,溶出儀操作者供試品,溶出儀的校正,目檢機械校正化學校正,83,目 檢（簡易機械校正）,目檢檢查：采用目測方法，主要檢查是否有銹蝕、網眼變形、表面劃痕、裂痕、凹痕、留有殘渣等簡易驗證工具采用游標卡尺（數(shù)顯）、水平尺、秒表、精密溫度計進行驗證 需符合中國藥典二部附錄溶出度測定法和釋放度測定法的要求,84,溶出杯,檢查溶出杯的規(guī)格檢查溶出杯的內表面是否不規(guī)則不規(guī)則的曲率可能造成溶出介質流動的差異,85,水平度,在裝置的頂板或基板處進行檢查使用木工水平儀或數(shù)顯水平儀不平，應作出調整如果頂板不能水平，則可能需要維修,86,水平度,87,轉速,用計時器手工檢查每個轉桿稱量，至少一分鐘使用轉速計（轉速儀）,88,振動,無明顯振動用手或指尖,89,溶出儀的機械校正,機械校正的定義測量或校正溶出儀的物理參數(shù)。當這些參數(shù)得到嚴格控制時，可以保證溶出儀器的良好運行狀態(tài),90,91,/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/UCM198649.pdf /sites/default/files/usp_pdf/EN/referenceStandards/dissolutionProcedureToolkit2010-03.pdf,FDA: 僅僅依靠標準片無法保證溶出儀滿足cGMP法規(guī)的要求，機械校正可以最大程度上減少儀器對試驗結果的影響。,溶出儀的機械校正,92,水平儀調節(jié)儀器水平外觀：包括器皿、轉籃、攪拌槳、碟等的外觀規(guī)格：包括器皿、轉籃、攪拌槳、碟等的規(guī)格,溶出儀的機械校正,93,傳動軸的擺動：轉籃或攪拌槳槳葉上方處的擺動量（籃1mm，槳0.5mm）轉籃的擺動：轉籃下緣的擺動量,溶出儀的機械校正,94,溶出儀的機械校正,95,轉籃與攪拌槳傳動軸的垂直度：X/Y方向的垂直度均不超過0.5器皿的垂直度：溶出杯內壁X/Y方向的垂直度均不超過1.0,溶出儀的機械校正,96,溶出儀的機械校正,97,器皿的定中：傳動軸與溶出杯內壁在上下兩點處一周的距離誤差1mm，低點為轉籃或攪拌槳上方2mm，高點為轉籃上方60mm、攪拌槳上方80mm,溶出儀的機械校正,98,溶出儀的機械校正,9