結(jié)核分枝桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告.doc

.結(jié)核分枝桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(偶爾可由牛型或非洲型分枝桿菌)引起的一種細(xì)菌性疾病。結(jié)核病可累及全身各個(gè)器官，但以肺結(jié)核最為常見。該病具有傳染性強(qiáng)，散播面廣，不分地域均可發(fā)生。結(jié)核病可由呼吸道、消化道、皮膚等途徑感染，但其主要傳播途徑是以空氣為傳播因子的呼吸道傳染，而排菌的肺結(jié)核病人傳染性更大，是傳播感染的主要傳染源。 1. 傳播途徑 呼吸道感染(respirator tract infection)是肺結(jié)核的主要傳染途徑(routes of infection)，飛沬傳染(droplet infection)為最常見的方式。傳染源主要是排菌的肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽性未經(jīng)治療者)。飛沬核(droplet nuclei), 10m時(shí)可被吸人呼吸道，健康人可因吸入患者咳嗽、打噴嚏時(shí)噴出的帶菌飛沫而受感染。 2. 危害程度分級(jí) 微生物按其是否致病、致病力強(qiáng)弱、危害人體的嚴(yán)重性、傳染性的大小、臨近人群的抵抗力、有無免疫制劑和特效治療藥物等綜合評(píng)價(jià)，可分為四個(gè)不同的危害等級(jí)。結(jié)核分枝桿菌屬于3級(jí)危險(xiǎn)。 3級(jí)危險(xiǎn)(對(duì)個(gè)體具有極大危害，對(duì)群體具有較大的危害性):指有特殊危險(xiǎn)的致病菌。感染后癥狀較重，并可能危及生命，或者缺乏有效的預(yù)防方法、發(fā)病后不易治療的微生物。 3. 實(shí)驗(yàn)室感染的原因及預(yù)防 (一)技術(shù)操作可能導(dǎo)致的感染及其預(yù)防措施。 1. 接種:應(yīng)使用無彈力的鉑絲接種環(huán)，結(jié)核菌接種后接種環(huán)火焰滅菌易崩散，酒精燈燒灼時(shí)要特別注意。 2. 混勻:吸管吸吹菌液時(shí)不要產(chǎn)生氣泡，應(yīng)沿容器壁排出。 3. 研磨:最好使用組織研磨器，乳缽易產(chǎn)生氣溶膠。 4. 移液:吸管上端的棉花松緊要適度，吸液時(shí)要從管底吸取，吹出時(shí)要輕緩，不要全部吹凈，以免產(chǎn)生氣泡，形成氣溶膠。 5. 開封:要避免壓力和氣流的急劇變化。 6. 離心:離心管套底墊要完好，使用匹配的管、套、離心頭，加蓋。 7. 注射:做好個(gè)人防護(hù)，正確使用注射器。 8. 搬運(yùn):室內(nèi)移動(dòng)要避免滑落，移出室外要有堅(jiān)實(shí)密閉的外包裝。 (二)技術(shù)保障 1. 雙人原則，不允許單人操作1、2類病原。 2. 入口處應(yīng)有危險(xiǎn)警示標(biāo)識(shí)，并標(biāo)明所操作的微生物的種類。 3. 培訓(xùn)考核上崗，掌握相關(guān)技術(shù)操作要領(lǐng)，熟悉規(guī)章制度，適應(yīng)工作環(huán)境。 4. 完備的管理措施，技術(shù)操作規(guī)范。 5. 良好的工作行為可降低生物危害風(fēng)險(xiǎn)。 4. 實(shí)驗(yàn)室中的分枝桿菌及分枝桿菌氣溶膠 結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室工作人員，在分枝桿菌檢驗(yàn)過程中，會(huì)接觸到各種潛在感染源標(biāo)本和各種危險(xiǎn)物，特別是許多操作易產(chǎn)生分枝桿菌氣溶膠。含有結(jié)核分枝桿菌的微滴核(1-5微米)通過呼吸進(jìn)入人體肺泡，可以黏附在肺泡內(nèi)生長繁殖。因此，首先要對(duì)實(shí)驗(yàn)室中生物危險(xiǎn)物產(chǎn)生的途徑和存在的地點(diǎn)有充分的認(rèn)識(shí)，以便明確生物安全防護(hù)的環(huán)節(jié)。 (一) 分枝桿菌存在的地點(diǎn) 1、各種臨床標(biāo)本，通常是痰，胃或支氣管灌洗液、腦脊液、尿液等。 2、被污染的操作臺(tái)、器械、儀器、試劑等。 3、收集的結(jié)核分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌菌株等。 4、細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室的部分區(qū)域。 (二) 產(chǎn)生分枝桿菌氣溶膠 1、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可疑肺結(jié)核患者痰標(biāo)本的采集。 2、樣本的制備和涂片的火焰固定。 3、分離培養(yǎng)或接種培養(yǎng)物。 4、用火焰燒灼接種環(huán)。 5、使用移液器混合培養(yǎng)物。 6、培養(yǎng)管或培養(yǎng)瓶中含有培養(yǎng)物的滴落物。 7、溢出的分枝桿菌懸浮液。 8、高速混合含有分枝桿菌的液體。 9、轉(zhuǎn)移液態(tài)培養(yǎng)物和上清液，或培養(yǎng)液、上清液的傾倒。 10、離心過程中離心管的破碎。 11、用做原代培養(yǎng)所需的組織勻漿。 5. 安全防護(hù) (一) 嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程，任何時(shí)侯都要警惕分枝桿菌氣溶膠的產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須經(jīng)過生物安全培訓(xùn)后方可上崗。 (二) 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格限制非實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入，減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外交叉生物污染。完成實(shí)驗(yàn)工作離開實(shí)驗(yàn)室，要關(guān)好門窗。 (三) 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)避免攜帶非必需物品。 (四) 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，工作人員應(yīng)穿著工作服，操作時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)隔離衣、口罩、帽子和手套，長發(fā)者應(yīng)將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。 (五) 實(shí)驗(yàn)過程中絕對(duì)禁止吸煙、飲食等，不要以手撫頭面部等。 (六) 試驗(yàn)前須開啟紫外線燈對(duì)實(shí)驗(yàn)室和操作區(qū)域進(jìn)行照射消毒1小時(shí)以上;試驗(yàn)結(jié)束后，立即開啟紫外燈進(jìn)行照射消毒2小時(shí)以上。 (七) 任何試驗(yàn)的開始和結(jié)束后，操作人員要用70%酒精浸泡雙手或仔細(xì)擦后，用清潔劑或清水洗凈。 (八) 每次試驗(yàn)結(jié)束后，必須清理好實(shí)驗(yàn)臺(tái)，并用70%酒精液或3-5%石炭酸擦洗實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。 (九) 實(shí)驗(yàn)室中的生物危險(xiǎn)品要根據(jù)檢查項(xiàng)目和性質(zhì)不同，局限在相應(yīng)的試驗(yàn)區(qū)間，不得隨意將其帶到其它的實(shí)驗(yàn)室。 (十) 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何微生物的樣本，廢棄物都必須經(jīng)高溫高壓滅菌后，方可按一般垃圾處理。 綜合實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系文件 6. 安全保障 (一) 首先各級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按等級(jí)要求完善實(shí)驗(yàn)設(shè)施，如簡(jiǎn)易安全柜內(nèi)的抽氣排風(fēng)功能、紫外燈消毒功能，生物安全柜維護(hù)與除菌濾膜定期更換等。 (二) 實(shí)驗(yàn)室采集病人痰標(biāo)本時(shí)應(yīng)在戶外進(jìn)行，避免因病人咳漱造成室內(nèi)氣溶膠污染。 (三) 普通實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意氣流方向，實(shí)驗(yàn)過程中盡量避免強(qiáng)氣流變化而產(chǎn)生氣溶膠(如:涂片、染色過程中)。 (四) 細(xì)菌的分離培養(yǎng)、菌種開封、轉(zhuǎn)種、研磨、稀釋等操作，各級(jí)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)在簡(jiǎn)易安全柜或生物安全柜中進(jìn)行。 (五) 使用接種環(huán)進(jìn)行操作時(shí)，接種環(huán)應(yīng)在工作燈的內(nèi)焰中燃燒，以避免菌液或菌塊飛濺。 (六) 稀釋菌液時(shí)，吸管、針管要緩慢插入試管或燒瓶底部，小心操作避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。 (七) 使用注射器加樣時(shí)，用過的針頭切勿再重新入套或拔開注射器與針頭，應(yīng)直接放入銳器收集器，以免劃破皮膚造成接種感染。 (八) 菌株庫要設(shè)專人管理，并按照國家微生物菌毒種管理辦法執(zhí)行。 (九) 進(jìn)行毒菌操作過程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或毒菌區(qū)以外區(qū)域，避免由于粗心擴(kuò)大污染范圍。 (十) 試驗(yàn)結(jié)束后，操作過程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的設(shè)備、儀器，應(yīng)使用有效的消毒劑擦洗后再以紫外燈近距離長時(shí)間消毒。 (十一) 實(shí)驗(yàn)中發(fā)生意外污染情況，應(yīng)立即通知主管人員并做好處理污染物和相應(yīng)區(qū)域的準(zhǔn)備，不得擅自采用其它禁止的方法進(jìn)行消毒處理。 (十二) 實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)制定規(guī)章和程序，只有告知潛在風(fēng)險(xiǎn)并符合進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室特殊要求(如，經(jīng)過免疫接種)的人，才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。 (十三) 操作致病性微生物時(shí)，實(shí)驗(yàn)室入口處應(yīng)貼有生物危險(xiǎn)標(biāo)志，并顯示以下信息:有關(guān)病原、生物安全級(jí)別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話號(hào)碼、在實(shí)驗(yàn)室中必須佩帶的個(gè)人防護(hù)設(shè)施、出實(shí)驗(yàn)室所要求的程序。 (十四) 實(shí)驗(yàn)室主任為實(shí)驗(yàn)室人員特別制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序或生物安全手冊(cè)中，應(yīng)包括生物安全程序。對(duì)于有特殊風(fēng)險(xiǎn)的人員，要求閱讀并在工作及程序上遵照?qǐng)?zhí)行。 (十五) 實(shí)驗(yàn)室主任保證實(shí)驗(yàn)及其輔助人員接受適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn)，包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險(xiǎn)、防止暴露的必要措施和暴露評(píng)估程序。 (十六) 實(shí)驗(yàn)室所用任何個(gè)人防護(hù)裝備應(yīng)符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保具備足夠的有適當(dāng)防護(hù)水平的清潔防護(hù)服供使用。還應(yīng)穿戴其它的個(gè)人防護(hù)裝備，如手套、防護(hù)鏡、面具、頭部面部保護(hù)罩等。 (十七) 處理樣本的過程中易產(chǎn)生高危害氣溶膠時(shí)，要求同時(shí)使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備、生物安全柜和/或其它物理防護(hù)設(shè)備。如可產(chǎn)生含生物因子的氣溶膠，應(yīng)在適當(dāng)?shù)纳锇踩裰胁僮鳌?(十八) 實(shí)驗(yàn)用鞋應(yīng)舒適，鞋底防滑。應(yīng)用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類。在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時(shí)可穿一次性防水鞋套。在實(shí)驗(yàn)室的特殊區(qū)域(例如有防靜電要求的區(qū)域)或BSL-3和BSL-4實(shí)驗(yàn)室要求使用專用鞋(例如一次性或橡膠靴子)。 7. 結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室廢物處理 一、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理的目的: (一) 將操作、收集、運(yùn)輸、處理及處置廢棄物的危險(xiǎn)減至最小; (二) 將實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境的有害作用減至最小。 二、實(shí)驗(yàn)室污物處理及消毒 (一) 實(shí)驗(yàn)室含有生物危險(xiǎn)物的臨床標(biāo)本及被污染的一次性用品，試驗(yàn)完成后，應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)以紫外燈近距離照射消毒 2小時(shí)以上，再經(jīng)高壓消毒后方可丟棄或焚燒。 (二) 可重復(fù)使用的實(shí)驗(yàn)用品及器材，完成實(shí)驗(yàn)后，應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)經(jīng)紫外燈近距離照射消毒2小時(shí)以上后，再交有關(guān)人員進(jìn)行高壓消毒和煮沸洗刷。 (三) 實(shí)驗(yàn)用的試管、吸管、注射器，須裝在加蓋不漏的容器內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后取出。 (四) 培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)室垃圾，在丟棄前必須經(jīng)高壓消毒和紫外燈近距離長時(shí)間照射處理。不允許積存垃圾和實(shí)驗(yàn)室廢棄物。已裝滿的容器應(yīng)定期運(yùn)走。在去污染或最終處置之前，應(yīng)存放在指定的安全地方，通常在實(shí)驗(yàn)室區(qū)內(nèi)。 (五) 實(shí)驗(yàn)室廢棄物應(yīng)置于適當(dāng)?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。有害氣體、氣溶膠、污水、廢液應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)臒o害化處理后排放，應(yīng)符合國家相關(guān)的要求。 (六)實(shí)驗(yàn)過程中，如標(biāo)本或含標(biāo)本的前消化處理液被打翻污染了操作臺(tái)或地面，應(yīng)以吸滿70%酒精的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū)，15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去。 (七) 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)未經(jīng)消毒的污水，禁止直接排入公共排水系統(tǒng)，更不允許混入居民生活垃圾。 8. 意外事故的處理 (一) 如果發(fā)生意外，必須立即通知實(shí)驗(yàn)室主管人員，并在有關(guān)人員的指導(dǎo)監(jiān)督下對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行處理，絕對(duì)禁止未經(jīng)報(bào)告而私自對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)給予非規(guī)范的處理。 (二) 實(shí)驗(yàn)過程中，如污染物濺落到身體表面，或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行緊急處理，更換被污染的實(shí)驗(yàn)服，皮膚表面用消毒液清洗，傷口以碘酒或酒精消毒，眼睛用無菌生理鹽水沖洗。 (三) 如果發(fā)生菌液溢出，含菌種的培養(yǎng)管破碎等，造成中 、小面積污染，可用比污染面積大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域，邊緣用脫脂棉圍住，向紗布傾倒5%苯酚溶液或70%的酒精，浸泡2小時(shí)以上(其間適量加溶液防止干燥)，再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時(shí)以上;被污染的器械、容器等立即浸泡于70%酒精中2小時(shí)以上，實(shí)驗(yàn)完成后再進(jìn)行高壓消毒處理。 (四) 如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)并關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，