河北省遷安一中高二生物基因工程的基本操作程序課時作業(yè)新人教版

1、河北省遷安一中高二生物 基因工程的基本操作程序課時作業(yè) 新人教版2013.31.下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：限制酶Bam HHind EcoRSma識別序列及切割位點GGATCC CCTAGGAAGCTT TTCGAAGAATTC CTTAAGCCCGGG GGGCCC(1)一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma 切割前后，分別含有_個游離的磷酸基團。(2)若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的Sma 酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma 切割，原因是_ (4)與只使用EcoR I相

2、比較，使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止_。(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入_酶。(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了_。2.通過基因工程的方法，科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并獲得成功表達。棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡?；ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵福豪弥参锘ǚ勖劝l(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導(dǎo)入尚不具備細胞壁的合子或早期胚體細胞中，借助天然的種胚系統(tǒng)，形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題：(1)下列所示的黏性末端是由_種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。(2)利用花粉管通道法將毒蛋

3、白基因?qū)朊藁毎?，此過程是基因工程操作步驟中的第三步，即_。獲取目的基因時，如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接_。(3)該目的基因在導(dǎo)入受體細胞前需要與載體結(jié)合，目前經(jīng)常使用的載體是_。(4)基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技術(shù)是_；其次還要檢測_，方法同樣是采用分子雜交技術(shù)；最后檢測_，方法是_雜交。3.2008年諾貝爾化學(xué)獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒

4、光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。已知GFP基因最初從發(fā)光水母中提取出來。GFP基因可作為目的基因用于培育綠色熒光小鼠，下圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程，請分析回答：(1)用于培育綠色熒光小鼠的基因表達載體的組成必須有啟動子、_和_。圖中過程需要的工具酶有_和_；過程常用的方法是_ (2)水母的GFP基因之所以能“嫁接”到小鼠染色體的DNA上，其原因是_。GFP基因進入小鼠受精卵內(nèi)，且能在其內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為_。(3)GFP基因有時還可與其他目的基因一起構(gòu)建到載體上，不影響目的基因的表達，且對細胞無毒害作用，因此GFP基因可以作為基因表達載體上的_。4.基

5、因工程又叫基因拼接技術(shù)。(1)在該技術(shù)中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉(zhuǎn)錄的_為模板，_成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成_。(2)基因工程中常用的受體細胞有細菌、真菌、_。(3)假設(shè)以大腸桿菌質(zhì)粒作為運載體，并以同一種限制性內(nèi)切酶切割運載體與目的基因，將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。連接產(chǎn)物至少有_種環(huán)狀DNA分子，它們分別是_。把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細菌細胞時一般用_處理以增加細菌細胞壁的通透性。(4)假如把抗蟲基因?qū)朊藁ǖ囊粋€葉肉細胞中，為了避免造成基因污染你認為應(yīng)該把目的基因連接在_(“核基因”或“質(zhì)基因”)中。1.(1)0、2(2)高(3)Sma會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化(5)DNA連接(6)鑒別和篩選含有目的基因的細胞2.(1)4(2)將目的基因?qū)胧荏w細胞人工合成(3)質(zhì)粒(其他合理答案也可)(4)DNA分子雜交技術(shù)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體3.(1)GFP基因終止子(兩空順序可以顛倒)限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶(兩空順序可以顛倒)顯微注射法 (2)GFP基因和小鼠DNA分子的空間結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成相同轉(zhuǎn)化(3)標記基因(4)蛋白質(zhì)改造GFP基因4.