氣相色譜法測定食用酒中乙醇含量

1、實,驗,一,氣相色譜法測定食用酒中乙醇含量,一,實驗目的,1,了解氣相色譜儀的基本結構,2,學習和掌握使用氫火焰離子化檢測器的基本,操作,3,掌握以內標法進行色譜定量分析的方法及特,點,4,學習氣相色譜法測定乙醇含量的分析方法,二、實驗原理,氣相色譜法是一種高效、快速而靈敏的分離分,析技術,當液體樣品由進樣口注入后立即被汽化，并被,載氣帶入色譜柱，經(jīng)過多次分配而得以分離的各,個組分逐一流出色譜柱進入檢測器，隨時間變化,而產(chǎn)生的電信號由記錄儀得到氣相色譜圖。對氣,相色譜圖進行數(shù)學分析，即可對樣品進行定性定,量分析,三、儀器與試劑,1,儀器：氣相色譜儀、氫火焰檢測器,FID,色譜柱、微量注射器、容

2、量瓶,10cm,3,色譜工作站、吸量管,2,5cm,3,2,試劑：無水乙醇,A.R,無水,n-C,3,H,7,OH(A.R,丙酮、食用酒,四、實驗步驟,1,色譜操作條件,柱溫,90,汽化室溫度,150,檢測器溫度,130,N,2,載氣）流速,40cm,3,min,H,2,流速,35cm,3,min,空氣流速,400cm,3,min,2,標準溶液的測定,用吸量管準確吸取,0.50cm,3,無水乙醇和,0.50cm,3,無,水,n-C,3,H,7,OH,于,10cm,3,的容量瓶中，用丙酮定容,至刻度，搖勻。用微量注射器吸取,0.5L,標準溶,液，注入色譜儀內，記錄各色譜峰的保留時間,t,R,和色

3、譜峰面積，求出以無水,n-C,3,H,7,OH,為標準物,的相對校正因子,3,樣品溶液的測定,用吸管吸取,1.00cm,3,的食用酒樣品和,0.50cm,3,的,內標物（無水,n-C,3,H,7,OH,于,10cm,3,容量瓶中,用丙酮定容至刻度，搖勻。用微量注射器吸取,0.5L,樣品溶液，注入色譜儀內，記錄各色譜,峰的保留時間,t,R,對照比較標準溶液與樣品溶,液的,t,R,以確定樣品中的醇，記錄,C,2,H,5,OH,和,n-C,3,H,7,OH,色譜峰面積，求出樣品中,C,2,H,5,OH,的,含量,實,驗,二,氣相色譜法測定生物柴油中脂肪酸甲酯,一、實驗目的,1,了解氣相色譜儀的基本構

4、造與一般使用方法,2,掌握氣相色譜檢測器的原理和操作,3,了解程序升溫色譜法的操作特點,4,學會用氣相色譜儀進行歸一化法定量分析,二、實驗原理,程序升溫是指色譜柱的溫度按照適宜的程序連續(xù)地隨,時間呈線性或非線性升高。在程序升溫中，采用較低,的初始溫度，使低沸點的組分得到良好分離，然后隨,著溫度不斷升高，沸點較高的組分逐一“推出”。由,于高沸點組分較快地流出，因而峰形尖銳，與低沸點,組分類似,在一定的色譜操作條件下，每種物質有一定的保留時,間，而響應值與進樣量成線性關系。當樣品中所有組,分都能流出色譜柱，并能給出可以測定的信號時，可,以采用采用歸一化法進行定量分析,歸一化法只適用于樣品中所有組分

5、都從色譜柱流出并,被檢測器檢出、且都在線性范圍內、同時又能測定或,查出所有組分相對校正因子的樣品,三、儀器與試劑,1,儀器,6890,型氣相色譜儀；色譜柱,HP,innowax,毛細管色譜柱,30,0.25,0.25,；氫火焰離子化檢,測器；微量注射器,2,試劑：生物柴油；正己烷,四、實驗步驟,1,色譜操作條件：汽化室溫度,280,檢測器溫,度,280,柱溫采用程序升溫：初始溫度,170,保持,0.5min,以,5,min,的升溫速率升至,200,然后以,15,min,的升溫速率升至,240,保持,時間,5min,載氣,N2,柱頭壓,60kPa,氫氣,32mL,min,空氣,320mL,min

6、,進樣量,1,L,2,取一定量的生物柴油樣品于,1mL,的容量瓶中,用正己烷定容后，在上述色譜條件下進行氣相,色譜分析，記錄下各色譜峰的保留時間和峰面,積,100,i,i,i,i,i,f,A,X,f,A,根據(jù)公式,1,計算各脂肪酸甲酯的百分含量,實,驗,三,高效液相色譜法測定萘,一、實驗目的,1,認識高效液相色譜儀,掌握高效液相色譜儀的,基本操作,2,掌握高效液相色譜法進行定性和定量分析的,原理,3,掌握外標法進行定量分析的方法,二、實驗原理,在一定的色譜操作條件下，每種物質有一定,的保留時間，而響應值與進樣量成線性關系,外標法也叫標準曲線法,三、儀器與試劑,1,儀器,Shimadzu LC-

7、10ATvp,高效液相色譜儀,紫外吸收檢測器,254mm,C,18,柱,25cm,4.6mm,微量注射器；超聲波清,洗器,1,臺；溶劑過濾器,1,套,2,試劑,甲醇：色譜純；二次蒸餾水；萘,AR,級,四、實驗步驟,1,色譜操作條件,色譜柱,C,18,柱,流動相：甲醇：水,80,20,流速,1mL/min,檢測波長,254nm,柱溫,40,進樣量,20,L,2,標準溶液配制,3,樣品溶液的配制,4,進樣并記錄色譜圖,五、數(shù)據(jù)處理與分析,100,s,s,i,i,m,A,A,P,實,驗,四,內標法測定聯(lián)苯,一、實驗目的,1,進一步熟悉高效液相色譜儀的基本構造與一,般使用方法,2,理解內標法的測定原理

8、和優(yōu)點,3,初步學會設計色譜法進行樣品測定的實驗步,驟，并以萘為內標物測定樣品中聯(lián)苯的含量,二、實驗原理,在一定的色譜操作條件下，每種物質有一定,的保留時間，而響應值與進樣量成線性關系,內標法也叫內標標準曲線法,三、儀器與試劑,1,儀器,Shimadzu LC-10ATvp,高效液相色譜儀,紫外吸收檢測器,254mm,C,18,柱,25cm,4.6mm,微量注射器；超聲波清,洗器,1,臺；溶劑過濾器,1,套,2,試劑,甲醇：色譜純；二次蒸餾水；萘、聯(lián),苯,AR,級,四、實驗步驟,1,色譜操作條件,色譜柱,C,18,柱,流動相：甲醇：水,90,10,流速,1mL/min,檢測波長,254nm,柱

9、溫,40,進樣量,20,L,2,標準溶液配制,3,樣品溶液的配制,4,進樣并記錄色譜圖,五、數(shù)據(jù)處理與分析,100,i,is,is,i,is,is,i,i,A,A,m,m,m,m,A,A,P,實,驗,五,常見陰離子色譜分析,一、實驗目的,1,了解離子色譜儀的基本構造與一般使用方,法,2,能用于測定樣品中常見陰離子的含量,二、實驗原理,離子色譜法是以為離子交換樹脂為固定相,電解質溶液為流動相的液相色譜方法，常以,電導檢測器作為通用的檢測器,常見陰離子經(jīng)過陰離子柱分離后，利用保,留時間進行定性分析，利用峰面積進行定量,分析,三、儀器與試劑,1,儀器,ICS-90,型離子色譜儀；電導檢測器；陰,離子

10、分析系統(tǒng)，微量注射器,2,試劑,Na,2,SO,4,NaNO,3,NaCl,均為分析,純,9 mmol/L Na,2,CO,3,溶液,四、實驗步驟,1,色譜操作條件的設置,2,標準溶液配制,3,樣品溶液的配制,4,進樣并記錄色譜圖,五、數(shù)據(jù)處理與分析,100,s,s,i,i,m,A,A,P,實,驗,六,分子熒光光譜分析法測定維生素,B,2,一、實驗目的,1,了解熒光光譜分析基本原理,2,掌握熒光法的定量分析方法,3,了解日立,F-2500,型熒光分光光度計的構造及,其使用方法,二、實驗原理,維生素,B,2,核黃素）在一定波長的激發(fā)光照,射下會發(fā)射出綠色熒光，根據(jù)熒光強度在一,定濃度范圍內與熒光

11、物質濃度成正比，用標,準曲線法對樣品進行定量分析,三、儀器與試劑,1,儀器：日立,F-2500,型熒光分光光度計，液體,樣品架,50mL,容量瓶,8,個,100mL,燒,杯,2,個，洗瓶一個，玻璃棒二根，蒸餾,水,2,試劑,1,的醋酸溶液,維生素,B,2,標準溶液：稱出,10.0mg,維生,素,B,2,先溶于少量的,1,的醋酸溶液，然,后轉移到,1000mL,容量瓶中，用,1,的醋,酸溶液定容至刻度，搖勻，至陰暗處,保存。此液含維生素,B,2,10.0g/mL,四、實驗步驟,1,按照日立,F-2500,型熒光分光光度計的使用方,法開好儀器,2,配制系列標準溶液：取,5,個,50mL,容量瓶，分

12、,別加入,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL,濃度,為,10.0g/mL,的標準溶液，用水稀釋至刻,度，搖勻,3,標準曲線的繪制,把各標準樣品置于試樣架內，設置好儀器的,工作條件，用蒸餾水做空白，分別掃描空白,和標樣的熒光光譜，根據(jù)峰高和濃度繪制標,準曲線,4,未知試樣的測定,準確稱出一定量的未知試樣于小燒杯中，用,水溶解并定容至,100mL,容量瓶內，搖勻，用,測定標準曲線相同的條件，測其熒光強度,五、數(shù)據(jù)處理與分析,根據(jù)試液的熒光強度，從標準曲線上查出試液中,維生素,B,2,的濃度，按下列公式計算維生素,B,2,的含,量,維生素,B,2,的含量,C,100/G,g/g,C

13、,試液中維生素,B,2,的濃度（從標準曲線上查,出，單位是,g/mL,C,未知試樣的重量，單位是克,g,100,試樣被稀釋的體積,實,驗,七,紫外吸收光譜法測定苯甲酸,一、實驗目的,1,了解紫外吸收光譜儀的基本構造與一般使用,方法,2,能用于測定樣品中苯甲酸的含量,二、實驗原理,苯甲酸在,225nm,處有最大吸收峰，其吸光度與,濃度的關系服從朗伯比爾定律,三、儀器與試劑,1,儀器,UV1600,紫外分光光度計,10mL,容量,瓶,7,個,20 mL,5 mL,吸量管各,1,支,2,試劑,0.1mol,L,1,NaOH,溶液,苯甲酸鈉,AR,蒸,餾水,四、實驗步驟,1,苯甲酸鈉貯備液的配制：稱量

14、經(jīng)過干燥的苯,甲酸鈉適量于,1000mL,容量瓶中，用水溶,解，并定容,2,苯甲酸鈉工作溶液的配制：取,20.00mL,貯備,液稀釋定容至,1000mL,3,苯甲酸鈉系列標準溶液的配制：分別取苯甲,酸鈉工作溶液,0-5.00 mL,按下表配制,容量瓶編號,1,2,3,4,5,6,7,8,工作液,mL,0,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,4.00,4.00,加入,NaOH,mL,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,定容,mL,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,C,ppm,0,2.0,4.0

15、,6.0,8.0,10.0,X,1,X,2,五、數(shù)據(jù)處理與分析,1,標準曲線的繪制：以苯甲酸鈉系列標準溶液,的吸光度為縱坐標，相應的濃度為橫坐標,繪制作,A-C,標準曲線,2,樣品溶液中苯甲酸鈉含量計算：從,A-C,標準,曲線上查出,X,值，從而求出樣品中苯甲酸的,含量,實,驗,八,雙波長法同時測定維生素,C,和,E,一、實驗目的,1,進一步熟悉紫外吸收光譜儀的基本構造，掌,握其一般使用方法,2,能用雙波長法同時測定雙組分的含量,二、實驗原理,吸光度具有加合性，根據(jù)兩組分吸收曲線的,性質，選擇兩個合適的測定波長，通過解聯(lián),立方程的可以同時測出樣品中雙組分的含量,三、儀器與試劑,1,儀器,UV1

16、600,紫外分光光度計,50mL,容量瓶,10,個,20 mL,5 mL,吸量管各,2,支,2,試劑,維生素,C,維生素,E,無水乙醇,四、實驗步驟,1,維生素,C,和維生素,E,標準溶液的配制,2,維生素,C,和維生素,E,紫外吸收曲線的繪制，確,定測定波長,3,維生素,C,和維生素,E,標準曲線的繪制,4,未知試樣的測定,五、數(shù)據(jù)處理與分析,1,維生素,C,吸收曲線的繪制,2,維生素,E,吸收曲線的繪制,3,根據(jù)吸收曲線測定波長的選定,4,維生素,C,標準曲線的繪制,5,維生素,E,標準曲線的繪制,6,樣品溶液中維生素,C,和,E,含量計算,實,驗,九,原子吸收光譜法測定,井水、河水中鎂,

17、一、實驗目的,學會原子吸收光譜法測定金屬元素的原理與,方法,了解原子吸收分光光度計的基本構造，初步,熟悉其操作方法,掌握火焰法測鎂的條件選擇,二、實驗原理,將樣品試液吸入空氣,乙炔火焰中，在火焰的高,溫下，鎂化合物離解為鎂基態(tài)原子，基態(tài)原子蒸,氣對鎂空心陰極燈發(fā)射的特征譜線產(chǎn)生吸收。將,測得的試樣溶液的吸光度扣除試劑空白的吸光度,利用標準曲線法，確定試液中的鎂含量,三、儀器與試劑,儀器,TAS-986,型,GGX,型原子吸收分光,光度計,試劑,10,g/ml Mg,標準液,四、實驗步驟,配制,Mg,標準系列,取,10,g/ml Mg,標準液,0.50,1.00,0.50,2.00,2.50ml

18、,分別置于,5,個,50ml,容量瓶,中，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻，得,Mg,標準,系列,樣品,井水直接取,4.00ml,稀釋至,100ml,河水過濾,后取,10ml,稀釋至,100ml,元,素,光,源,燈電,流,波長,通,帶,火焰,燃燒器高,度,Mg,Mg,燈,1,mA,285.2,nm,2A,乙炔,空氣,mm,儀器檢測條件,按照上述條件，根據(jù)儀器操作步驟依次從低,到高濃度測定標液和樣液,五、數(shù)據(jù)處理,采用標準曲線法處理，樣品稀釋倍數(shù),附,一,TAS-986,原子吸收分光光度計火焰法操作規(guī)程,正確連接儀器及計算機各連線和插頭，確認,儀器電源開關處于“關”位，再開啟穩(wěn)壓器,電,源,順序打開打印機

19、、顯示器、計算機電源開,關，等待計算機處于,Windows,界面,裝上待測元素空心陰極燈，并記下燈位。打,開,TAS-986,主機電源開關，雙擊,AAwin,軟,自檢完成后，設定和選擇工作燈和預熱燈,下一步,修改或輸入正確的燈電流,分光帶寬、燃氣流量、燃燒器高度和位置,下一步“尋峰,下一步,完,成,在任務欄擊“儀器”，選擇“燃燒器參數(shù),調,節(jié)火焰原子化器的前后、上下及角度位,置，其對準光路,擊“儀器”選擇“扣背景方式”選擇,氘,燈,或“自吸”扣背景，并輸入適當?shù)碾疅綦娏?或,窄脈沖電流，在能量窗口再進行調節(jié)和能量,自動平衡。若不進行背景校正，本步可省去,擊“參數(shù)”按鈕在常規(guī)界面輸入“測量重,復

20、次,數(shù)”、“采樣間隔”、及“采樣延時參數(shù),在顯,示界面輸入“吸光度顯示范圍”及“頁面更,新時,擊“樣品”按鈕,選擇“校正方法”、“曲,線方,程”,濃度單位,下一步,選擇,標準系列樣品個數(shù)”，輸入“標準系列,樣品,濃度值,下一步,選擇“未知樣品,個數(shù),完成,順序打開空壓機“風機開關,工作開,關,10,打開乙炔鋼瓶總閥，檢查并調節(jié)出口壓力為,0.05 0.09 Mpa,之間（推薦壓力,0.06 Mpa,11,擊“點火”按鈕點火,吸噴蒸餾水,1 2,分鐘,吸噴標準系列空白溶液擊“校零”按鈕自動調,零,12,擊“測量”按鈕,順序吸噴標準系列溶液并在,測,13,吸噴未知樣品溶液，擊“開始”按鈕測,量未,

21、知樣品。全部未知樣品測量完畢后擊,終,止”按鈕退出測量,吸噴蒸餾水,1 2,分,鐘清洗燃燒器,14,擊“應用”按鈕,選擇“實驗記錄,輸入,測量元素”、“樣品名稱”、“分析,15,在測量表格上擊右鍵,選擇“表格設置,選擇所需顯示和打印的項目,在任務欄擊,打印”按鈕,選擇所需打印的內容,擊,確,定”打印相應內容,16,關閉乙炔鋼瓶總閥，燒去管路中余氣，待,火焰熄滅后按空壓機“放水閥”放水,關,閉,17,退出,AAWin,操作軟件,關閉,TAS-986,主機,電源,關閉打印機、計算機、穩(wěn)壓器電源,18,整理實驗室衛(wèi)生、檢查實驗室水、氣、電安,全,附二,GGX,型原子吸收分光光度計操作規(guī)程,1,開機前準備,將主機各操作鈕置于適當位置,安裝空心陰極燈,2,開機,依次開穩(wěn)壓器、總電源、調燈電流后預熱,15,20,分鐘,選擇分析線及狹縫寬度后，調燈及燃燒器,的位置，調負高壓，用“狀態(tài)檢查（工作,選,擇）”檢查負高壓與,15V,電源是否正常,3,點火,關緊主機上各氣體調節(jié)針閥，將“空氣,笑,氣,鈕旋至“空氣”，開排廢氣裝置,開空壓機，調空氣輸入壓為,2,3kg,cm-2,打開助燃氣針閥，開大至限壓開關被啟動,后，調助燃氣流量,依次打開乙炔鋼瓶總閥、分閥，調節(jié)乙炔,輸出壓力,0.8 kg,cm-2,調燃氣流量后點火,4,測定,依次從低到高濃