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1、第二章 臨床生化檢驗(yàn)基本知識(shí),教 學(xué) 目 標(biāo),1、了解生化檢驗(yàn)報(bào)告單的申請(qǐng)和報(bào)告方式, 2、說(shuō)出生化檢驗(yàn)工作流程, 3、簡(jiǎn)述生化檢驗(yàn)質(zhì)量管理要素, 4、說(shuō)出影響標(biāo)本采集的生物學(xué)因素有哪些? 5、熟練敘述標(biāo)本采集的注意事項(xiàng),第一節(jié) 臨床生化檢驗(yàn)的申請(qǐng)方式與報(bào)告,一、單項(xiàng)檢驗(yàn)與組合檢驗(yàn),單項(xiàng)血糖測(cè)定指導(dǎo)胰島素用量,不同時(shí)段血中孕酮測(cè)定了解是否排卵,評(píng)價(jià)早期妊娠,一)單項(xiàng)檢驗(yàn),測(cè)定24小時(shí)尿蛋白或電解質(zhì)含量發(fā)解排出量,二) 組 合 檢 驗(yàn),肝功八項(xiàng): 丙氨酸轉(zhuǎn)移酶(ALT) 門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶(AST) 總蛋白 白蛋白 球蛋白 白球比 總膽汁酸(TBA) 膽堿酯酶(CHE,二、報(bào)告單發(fā)放形式,第二節(jié) 臨

2、床生化檢驗(yàn)質(zhì)量管理要素,一、臨床生化檢驗(yàn)流程,檢驗(yàn)前階段,檢驗(yàn)中階段,檢驗(yàn)后階段,標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室前的階段:包括;醫(yī)生申請(qǐng)、患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本運(yùn)送與收檢,標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室到報(bào)告發(fā)出前的階段: 檢驗(yàn)人員完成,報(bào)告發(fā)放及發(fā)放后的工作,對(duì)以上三個(gè)階段的質(zhì)量控制稱:全面質(zhì)量控制,二、檢驗(yàn)前質(zhì)量管理要素,包括醫(yī)生申請(qǐng)、患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本運(yùn)送與收檢五個(gè)環(huán)節(jié)。 由臨床醫(yī)、護(hù)人員完成,檢驗(yàn)前的差占到總差錯(cuò)的60%以上,一)醫(yī) 生 申 請(qǐng),主要是合理的選擇項(xiàng)目。主要應(yīng)考慮4個(gè)要素: 1.針對(duì)性 2.敏感性和特異性 3.報(bào)告時(shí)間 4.經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),影響檢驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)因素,二)患 者 準(zhǔn) 備,1.避免劇烈運(yùn)動(dòng)

3、:運(yùn)動(dòng)可使血清中多種酶活性增高,ALT在2 h最先增高,CK在11小時(shí)達(dá)到峰值,最高可達(dá)7000 U/L(正常值10180 U/L),持續(xù)60h后才恢復(fù)正常,AST在5h增加41%。運(yùn)動(dòng)也常導(dǎo)致血鉀、鈉、鈣、堿性磷酸酶、白蛋白、糖、磷、尿酸、尿素、膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶等升高1倍以上,磷酸肌酸激酶升高4倍,2.年齡:人在不同的年齡階段,其生理指標(biāo)是不同的。新生兒紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白含量比成人高很多,乳酸脫氫酶(LD)、蘋果酸脫氫酶(MD)、異檸檬酸脫氫酶(ICD)高于成人23倍。血液中堿性磷酸酶含量提示成骨細(xì)胞活性,在青春期會(huì)達(dá)到一個(gè)高峰,活性從500 U/L左右升到750 U/L左右,18歲以后逐漸

4、降到200 U/L以下,3.性別:男性肌肉發(fā)達(dá),體重高,多數(shù)指標(biāo)都比女性高,如轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素、肌酸、尿酸、總蛋白、白蛋白、膽固醇、甘油三酯等。女性比男性高的有高密度脂蛋白-膽固醇、銅和網(wǎng)織紅細(xì)胞等,4.妊娠: 68周開(kāi)始血容量約增加30%45%,平均增加1 500 ml,由于血液稀釋紅細(xì)胞和血紅蛋白均下降。白細(xì)胞比較高,嗜中性粒細(xì)胞增加。妊娠期血液處于高凝狀態(tài),凝血因子、增加,僅、降低,纖維蛋白原含量增加40%50%,血沉可高達(dá)100 mm/h。 妊娠常引起甲狀腺素、脂類、銅、血糖含量升高,總蛋白、白蛋白、鐵、轉(zhuǎn)鐵蛋白減少,5、飲食和藥物的影響: (1)禁食各種煙、酒、飲料, (2)藥物影響被

5、測(cè)物濃度、影響檢驗(yàn)方法,新藥不斷應(yīng)用,藥物的影響不確定因素較多。除了急診或其它特殊原因外,一般主張空腹12小時(shí)以后取血,胸腔、腹腔、心包膜,腰椎、小腦延髓池、嬰兒時(shí)期的前囟門作側(cè)腦室穿刺,三)標(biāo) 本 采 集,標(biāo)本:血液、尿液、腦脊液、胸水、腹水、漿膜腔積液等,滲出液、漏出液,1、血液標(biāo)本的采集,血液標(biāo) 本來(lái)源,毛細(xì)血管血:手指或耳垂,用于需血量少的檢驗(yàn),也主要用于兒童,靜脈血:是最常用的標(biāo)本,靜脈穿刺是最常用的采血方法,動(dòng)脈血:血?dú)夥治龆嗍褂?(,p,動(dòng)脈化毛細(xì)血管血,采血方法,1)靜脈采血法,步驟(普通采血法,核對(duì)容器準(zhǔn)備病人準(zhǔn)備體位前臂肘窩正中靜脈采血取針頭,將血液沿管壁緩慢注入容器,靜脈

6、采血一般用肘部靜脈,當(dāng)肘部靜脈不明顯時(shí),可采用手背靜脈、手腕靜脈及踝部靜脈。如還是無(wú)法將血采出時(shí)可選用股靜脈。嬰幼兒有時(shí)采取頸靜脈采血,扎止血帶 常規(guī)消毒,l 5度一30度角,注 意 事 項(xiàng),防止溶血,抽血器和容器必須干燥潔凈,因?yàn)榧t細(xì)胞遇水即會(huì)溶血,應(yīng)盡量使用一次性抽血器。 不用或短時(shí)間使用止血帶,忌長(zhǎng)時(shí)間壓迫血管。 抽血后取下針頭再將血液沿容器壁徐徐注入容器內(nèi),切勿用力過(guò)猛。 若需血漿可用抗凝管作容器,應(yīng)輕輕倒轉(zhuǎn)容器與抗凝劑混勻,切勿用力振搖,避免充血和血液濃縮 若病人正在進(jìn)行靜脈輸液,不宜在輸液同側(cè)手臂采血;若女性病人做了乳腺切除術(shù),應(yīng)在手術(shù)對(duì)側(cè)手臂采血 采血的體位 采血時(shí)只能向外抽,決

7、不能向靜脈內(nèi)推,以免注人空氣,形成氣栓而造成嚴(yán)重后果。 暈血處理,2)動(dòng)脈采血法,部 位,肱動(dòng)脈、股動(dòng)脈、橈動(dòng)脈以及其它任何部位的動(dòng)脈 都可以作為采血點(diǎn),但多選擇肱動(dòng)脈和橈動(dòng)脈,步 驟,觸摸消毒固定針頭成60角穿刺血液自動(dòng)注入容器,3)真空采血法(已普遍采用,優(yōu)點(diǎn):1、在完全封閉狀態(tài)下采血,避免血液外溢,有利保存。 2、標(biāo)準(zhǔn)真空采血管采用國(guó)際通用的頭蓋和標(biāo)簽顏色顯示采血管內(nèi)添加劑種類和試驗(yàn)用途??筛鶕?jù)需要選擇相應(yīng)的盛血試管,血清生化、血庫(kù)試驗(yàn),快速血清分離生化免疫 惰性膠體+促凝劑,全血血液血常規(guī)試驗(yàn) K2EDTA 或K3EDTA,血漿凝血試驗(yàn) PT,TT, 凝血因子試驗(yàn) 枸櫞酸鈉,全血血細(xì)胞

8、沉降率試驗(yàn) 枸櫞酸鈉,血清葡萄糖試驗(yàn) 氟化鈉+草酸鉀,普通血清管 紅色頭蓋,采血管內(nèi)不含添加劑,用于常規(guī)血清生化、血庫(kù)和血清學(xué)相關(guān)檢驗(yàn),快速血清管 橘紅色頭蓋,采血管內(nèi)有促凝劑,可激活纖維蛋白酶,使可溶性纖維蛋白變?yōu)椴豢扇艿睦w維蛋白多聚體,進(jìn)而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊??焖傺骞芸稍?分鐘內(nèi)使采集的血液凝固,適用于急診血清生化試驗(yàn),惰性分離膠促凝管 金黃頭蓋,采血管內(nèi)添加有惰性分離膠和促凝劑。標(biāo)本離心后,惰性分離膠能夠?qū)⒀褐械囊后w成分(血清或血漿)和固體成分(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、纖維蛋白等)徹底分開(kāi)并完全積聚在試管中央而形成屏障,標(biāo)本在48小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定。促凝劑可快速激活凝血機(jī)制,加速凝血

9、過(guò)程,適用于急診血清生化試驗(yàn),肝素抗凝管 綠色頭蓋,采血管內(nèi)添加肝素。具有抗凝血酶的作用,可延長(zhǎng)標(biāo)本凝血時(shí)間。適用于紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)、血?dú)夥治?、紅細(xì)胞壓積試驗(yàn)、血沉及普通生化測(cè)定,不適于做血凝試驗(yàn)。過(guò)量的肝素會(huì)引起白細(xì)胞的聚集,不能用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)。因其可使血片染色后背景呈淡藍(lán)色,故也不適于白細(xì)胞分類,血漿分離管 淺綠色頭蓋,在惰性分離膠管內(nèi)加入肝素鋰抗凝劑,可達(dá)到快速分離血漿的目的,是電解質(zhì)檢測(cè)的最佳選擇,也可用于常規(guī)血漿生化測(cè)定和ICU等急診血漿生化檢測(cè)。血漿標(biāo)本可直接上機(jī)并在冷藏狀態(tài)下保持48小時(shí)穩(wěn)定,EDTA抗凝管 紫色頭蓋,乙二胺四乙酸(EDTA)可螯合血液標(biāo)本中的鈣離子。防止血液標(biāo)本凝

10、固。適用于一般血液學(xué)檢驗(yàn),不適用于凝血試驗(yàn)及血小板功能檢查,亦不適用于鈣離子、鉀離子、鈉離子、鐵離子、堿性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的測(cè)定及PCR試驗(yàn),枸櫞酸鈉凝血試驗(yàn)管 淺藍(lán)頭蓋,枸櫞酸鈉主要通過(guò)與血樣中鈣離子螯合而起抗凝作用。適用于凝血實(shí)驗(yàn),抗凝劑與血液的比例是19,枸櫞酸鈉血沉試驗(yàn)管 黑色頭蓋,血沉試驗(yàn)要求的構(gòu)櫞酸鈉濃度是3.2(相當(dāng)于0.109molL),抗凝劑與血液的比例為14,3、尿液標(biāo)本的采集,尿液標(biāo)本分類,隨機(jī)新鮮尿 定時(shí)尿 24小時(shí)尿 晨尿 餐后2小時(shí)尿 其它包括中段尿、導(dǎo)尿、恥骨上膀胱穿刺尿,8-20,3h尿,注意事項(xiàng):1、容器清潔干燥 2、避免污染 3、及時(shí)送檢和防

11、腐保存,4、特殊標(biāo)本的采集(醫(yī)生采集,1)腦脊液的采集: 腦脊液正常和病變形狀:顏色、透明度、細(xì)胞化學(xué)成分 采集部位:腰椎、小腦延髓池、嬰兒時(shí)期的前囟門作側(cè)腦室穿刺 收集方法:收集于三支無(wú)菌試管中,第l管作細(xì)菌檢查,第2管作生化檢查,第3管作細(xì)胞計(jì)數(shù),2)漿膜腔積液的采集:胸腔、腹腔、心包膜,3)羊水的采集:產(chǎn)前診斷,四)標(biāo)本運(yùn)送與收檢,1、拒收標(biāo)本條件: 標(biāo)志脫落、不清或錯(cuò)誤 標(biāo)本容器使用錯(cuò)誤 標(biāo)本含量不合要求 抗凝的血液中有凝塊或用錯(cuò)抗凝劑 要求與空氣隔絕的標(biāo)本未能與空氣隔絕 標(biāo)本采集與送檢之間時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 嚴(yán)重違反標(biāo)本采集規(guī)程,2、其它要求: (1)對(duì)可能影響結(jié)果的標(biāo)本可在報(bào)告單上注明, (2)履行交接簽字手

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