《免疫缺陷動物》PPT課件.ppt

1、免疫缺陷動物,蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗中心,免疫缺陷動物是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成的一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物，是一類帶有突變基因的動物,一、定義,二 、分 類,三 、裸小鼠,發(fā)現(xiàn)與發(fā)展,1962年英國格拉斯哥醫(yī)院Grist在非近交系的小鼠中 偶然發(fā)現(xiàn)有個別小鼠無毛。 1966年證實是由于第11對染色體基因突變所致。 1968年P(guān)antelouris解剖發(fā)現(xiàn)裸鼠失去了正常的胸腺。 1969年Rygaard首先將人結(jié)腸腺癌移植獲得成功。 由于裸鼠原種抵抗力差，生育力低，壽命短，不能 用于實際。和純系BALB/c，C3H，C57BL/6小鼠交 配，不斷選育，獲得了三種近交系鼠新種。

2、裸鼠自發(fā)現(xiàn)以來，廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)、免疫學(xué)和病 毒學(xué)等多個學(xué)科的研究,生物學(xué)特性,一般特點 純合子突變裸鼠（nu/nu）主要表現(xiàn)為無毛以及胸腺 缺陷。雜合子小鼠（nu/+）各方面表現(xiàn)正常。 體重小于同齡普通鼠，發(fā)育緩慢。 必須養(yǎng)育在 SPF環(huán)境中 。 繁殖方式：一般采用隱性純合子雄性與雜合子雌鼠 交配（nu/nunu/,解剖生理特點 胸腺殘留一些上皮樣細(xì)胞；淋巴組織胸腺依賴區(qū)的淋 巴細(xì)胞消失；外周血淋巴細(xì)胞減少。 雖然有原始的T細(xì)胞，但缺乏成熟的T細(xì)胞。T細(xì)胞的 輔助，抑制及殺傷功能不全。在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中 無有絲分裂反應(yīng)，對刀豆素A或植物凝集素P亦無促分 裂原應(yīng)答。 無接觸敏感性，無移植排斥

3、，無移植物抗宿主反應(yīng)。 B細(xì)胞數(shù)量正常但功能有缺陷，合成的免疫球蛋白主 要是IgM，只有少量IgG。 粒細(xì)胞功能較低，NK細(xì)胞活性高,裸鼠的應(yīng)用 1、腫瘤研究上的應(yīng)用 制作人類腫瘤移植瘤模型 人類腫瘤移植于動物的歷史 免疫排斥問題 眼前房，腦內(nèi)，地鼠的頰囊等免疫逃避部位 免疫抑制劑、射線照射的使用 裸鼠作為人類腫瘤受體,腫瘤移植瘤模型在腫瘤基礎(chǔ)研究中的意義 添加人為因子（致突變劑，癌基因，藥物等）觀察腫瘤病 因及機理和治療。 建立腫瘤細(xì)胞株，提供大量腫瘤組織供分析。 腫瘤移植瘤模型在臨床腫瘤學(xué)中的意義 診斷和預(yù)后。 建立平行模型，明確診斷和跟蹤預(yù)后。 個體化療有效試驗。 對于晚期和復(fù)發(fā)腫瘤有重

4、要意義。 藥物有效的標(biāo)準(zhǔn)。 腫瘤不生長；腫瘤生長緩慢；腫瘤長出后又消失； 腫瘤無轉(zhuǎn)移；動物壽命延長,腫瘤移植瘤模型制作方法,腫瘤組織塊或腫瘤細(xì)胞 皮下移植 腹腔內(nèi)或腎包膜下移植 原位移植,腫瘤組織 惡性程度：惡性和轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)瘤成功率較高 種類：細(xì)胞系成功率活檢標(biāo)本 來源：淋巴瘤、骨腫瘤等難獲成功 部位：腫瘤塊的外周部接種易成活 裸鼠 遺傳背景：胰腺癌接種BALB/c 成功，NIH系則失敗 性別：雌激素依賴性腫瘤接種雄鼠生長慢 鼠齡：46周齡 動物健康狀態(tài),影響移植瘤模型制作的因素,接種部位 原位移植成功率高，移植腫瘤與人類原發(fā)瘤相似。 有些腫瘤需要接種在特定的部位（對雌激素依賴的人 乳腺癌MCF

5、-7 細(xì)胞系，接種乳腺脂肪墊才能活）。 其他 環(huán)境：細(xì)菌病毒可以影響NK細(xì)胞活性；接種時間 越早越好，注意無菌操作,2、放射治療實驗中的研究 3、微生物學(xué)和免疫學(xué)方面的應(yīng)用 4、在遺傳學(xué)上的研究和應(yīng)用 5、醫(yī)學(xué)其他領(lǐng)域的應(yīng)用 寄生蟲感染的動物模型，美洲錐蟲，卡氏肺囊蟲；皮膚（魚鱗?。?；免疫缺陷模型（麻風(fēng)，結(jié)核,四、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠 （Sever Combined Immunodeficient Mice, SCID mice,1983年Bosma首次報告,來源于C.B-17小鼠。 由于第16對染色體隱性基因突變，純合突變導(dǎo)致 淋巴細(xì)胞抗原受體基因VDJ區(qū)域重排的重組酶活性 異常，基因重排時

6、斷裂無法正常連接，從而影響 B、T細(xì)胞的正常功能分化。 1988年我國醫(yī)科院動物所從美國Jackson實驗室 引進(jìn)；1992年中山大學(xué)從澳大利亞引進(jìn),發(fā)現(xiàn)與發(fā)展,一般特點 外觀體重與普通小鼠相同。 繁殖特點 純合子兄妹交配。 必須養(yǎng)育在 SPF環(huán)境中，平均壽命1年以上。對 鼠肝炎，巴氏桿菌、卡氏肺囊蟲極易感染，感染后 易發(fā)病死亡,生物學(xué)特性,組織解剖學(xué)特點 脾臟、胸腺、淋巴結(jié)體積低于普通小鼠的30%。淋 巴組織缺乏淋巴細(xì)胞。胸腺殘留上皮樣細(xì)胞和成纖 維細(xì)胞，脾臟沒有脾小體，白髓缺陷，紅髓正常。淋 巴結(jié)由網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成。 外周血白細(xì)胞總數(shù)減少，淋巴細(xì)胞占1020%,非淋 巴性造血細(xì)胞如粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞正常。NK、LAK 細(xì)胞正常,免疫功能特點 沒有T 、B細(xì)胞陽性標(biāo)志細(xì)胞，對外來抗原無細(xì)胞 和體液免疫。NK、LAK細(xì)胞功能正常或增高；肥大 細(xì)胞因缺乏T細(xì)胞因子而分化受阻。 約223%的SCID小鼠在青年期T 、B細(xì)胞功能可以 恢復(fù)，稱為滲漏（Leaky），此時仍帶有SCID基因， 淋巴細(xì)胞不受影響而發(fā)育成熟，原因不明?？梢杂醚?清學(xué)和組織學(xué)方法診斷,SCID小鼠的應(yīng)用,免疫學(xué) 用于自然防御細(xì)胞如NK、LAK、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞，及免 疫輔助細(xì)胞的分化和功能研究，也可以研究這些細(xì)胞與輸入的 B、T細(xì)胞、淋巴因子的