甲、戊肝抗體檢測內(nèi)容

1、B14.2【檢測原理】甲型肝炎病毒IgM抗體檢測試紙采用捕獲法及膠體金免疫層析 技術(shù)原理，在聚酯纖維（或無紡布）上預(yù)包被金標記HAV抗原和鼠單抗，在硝酸纖維膜檢測線和質(zhì)控對照線處分別包被抗人 IgMu鏈單抗和抗鼠IgG抗體。檢測陽性標本時，血清（或血漿） 樣本中甲型肝炎病毒IgM抗體與膠體金中的甲型肝炎病毒抗原 結(jié)合形成復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合物延紙條向前移動，經(jīng)過檢測線時于預(yù)包被的抗人IgMu鏈單抗結(jié)合形成“Au-HAV Ag-HAV IgM Ab-抗人IgM Ab ”夾心物，從而在檢測處顯示紫紅色條帶， 游離金標鼠單抗則于質(zhì)控對照線處與抗鼠IgG抗體結(jié)合，從而在質(zhì)控線處顯示紫紅色條帶。陰性

2、標本則僅在質(zhì)控對照線處顯示紫 紅色條帶。戊型肝炎病毒IgM抗體檢測試紙采用捕獲法及膠體金免疫層析 技術(shù)原理，在聚酯纖維（或無紡布）上預(yù)包被金標記HEV抗原和鼠單抗，在硝酸纖維膜檢測線和質(zhì)控對照線處分別包被抗人 IgMu鏈單抗和抗鼠IgG抗體。檢測陽性標本時，血清（或血漿） 樣本中戊型肝炎病毒IgM抗體與膠體金中的戊型肝炎病毒抗原 結(jié)合形成復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合物延紙條向前移動，經(jīng)過檢測線時于預(yù)包被的抗人IgMu鏈單抗結(jié)合形成“Au-HEV Ag-HEV IgM Ab-抗人IgM Ab ”夾心物，從而在檢測處顯示紫紅色條帶， 游離金標鼠單抗則于質(zhì)控對照線處與抗鼠IgG抗體結(jié)合，從而在 質(zhì)控線處

3、顯示紫紅色條帶。陰性標本則僅在質(zhì)控對照線處顯示紫 紅色條帶。B14.3【樣本要求】B14.3.1.在無菌條件下采集靜脈血樣本，盡快分離血清或血漿 以避免溶血。B14.3.2.檢測時應(yīng)盡量使用新鮮標本。如標本不能及時檢測，可在2-8 C冷藏7天。長期保存需冷凍于-20 C，反復(fù)凍融次數(shù)不 超過3次。B14.3.3.常規(guī)的 0.2mg/ml 肝素和 150mmol/L 的 EDTA-2Na 及 2.5 %枸櫞酸鈉抗凝劑不影響檢測結(jié)果。B14.3.4.溶血標本不適用于本試劑。B14.3.5.在標本中加入0.1% NaN3不影響檢測結(jié)果。B14.4【試劑盒組成成分】規(guī)格型號組份名稱主要生化成份卡型HA

4、V-HEV膠體金法試紙卡由甲型肝炎病毒IgM抗體試紙、戊型肝炎病毒 IgM抗體試紙、塑料卡、干燥劑、吸管和鋁箔袋 組成。HAV試紙由塑料基片、膠體金墊、纖維素 膜、上樣墊、吸收墊構(gòu)成。膠體金墊上預(yù)包被金 標記HAV抗原和鼠單抗，在硝酸纖維膜檢測線和 質(zhì)控對照線處分別包被抗人IgMu鏈單抗和抗鼠 IgG抗體。HEV試紙由塑料基片、膠體金墊、纖 維素膜、上樣墊、吸收墊構(gòu)成。膠體金墊上預(yù)包 被金標記HEV抗原和鼠單抗，在硝酸纖維膜檢測 線和質(zhì)控對照線處分別包被抗人IgMu鏈單抗和抗鼠IgG抗體。說明書紙制印制稀釋液PH值為8.0,主要含有Tris-Hcl緩沖液、防腐劑、絡(luò)蛋白B14.5【檢驗方法】進

5、行測試前必須先完整閱讀使用說明書：B14.5.1.在測試卡(不要打開鋁箔袋)及待測的樣本恢復(fù)至室溫(20-30C)B14.5.2.將采集的血清或血漿樣品用稀釋液按1: 100倍比例稀釋（取2ul樣本加入到198ul稀釋液中，混勻）B14.5.3.從鋁箔包裝袋中取出測試卡，并標記病人或樣品編號， 將測試卡平放于臺面上。B14.5.4.用一次性塑料吸管吸取上述已稀釋的血清或血漿，分 別滴加2滴于二個加樣孔內(nèi)。B14.5.5.陽性標本可在115分鐘內(nèi)檢出，建議15分鐘時在最 終觀察并記錄實驗結(jié)果，20分鐘后顯示的結(jié)果無臨床意義。注意：從包裝鋁箔袋中取出的試紙，在室溫低于 30 C及相對濕 度小于65

6、%條件下應(yīng)于1小時內(nèi)盡快使用；在室溫高于 30C或 相對于濕度大于65%條件下應(yīng)立即使用。B14.6【檢驗結(jié)果的解釋】B14.6.1.顯示編號、T (HAV)T(HEV)C結(jié)果HAVHEV1未出現(xiàn)未出現(xiàn)出現(xiàn)陰性陰性2出現(xiàn)出現(xiàn)出現(xiàn)陽性陽性3未出現(xiàn)出現(xiàn)出現(xiàn)陰性陽性4出現(xiàn)未出現(xiàn)出現(xiàn)陽性陰性5未出現(xiàn)未出現(xiàn)未出現(xiàn)無效無效6出現(xiàn)出現(xiàn)未出現(xiàn)無效無效陽性結(jié)果表明：標本中檢測出甲型肝炎病毒IgM抗體/或戊型肝炎病毒IgM抗體。HQBJS/MYXM-14-2014SOP 文件陰性結(jié)果表明：標本中檢測不出甲型肝炎病毒IgM抗體和戊型肝炎病毒IgM抗體。無效：質(zhì)控對照線未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確操作過程或試劑盒失效

7、。在此情況下應(yīng)再次閱讀說明書，并用新的試紙卡重新檢測。如仍存在問題，應(yīng)立即停止使用該批號產(chǎn)品，并與當?shù)毓?應(yīng)商聯(lián)系，更換新批號合格產(chǎn)品。B14.6.2.質(zhì)控對照線處出現(xiàn)紫紅色條帶是作為試紙卡內(nèi)在控制的 標準，以確定是否使用了正確的操作步驟和得到正確的測試結(jié) 果。B14.6.3.檢測不同標本時，檢測不同標本時，檢測線處的紫紅色 條帶可呈現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象，這是由于甲型肝炎病毒IgM抗體或戊型肝炎病毒IgM抗體濃度高低不同的原因。但是在規(guī)定內(nèi)， 不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽性結(jié) 果。B14.7【檢驗方法的局限性】B14.7.1.本產(chǎn)品檢測結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的

8、唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查、治療反應(yīng)及流行病學(xué)等信息綜合考慮。B14.7.2.感染初期，病毒特異性IgM抗體未產(chǎn)生或滴度很低會 導(dǎo)致陰性結(jié)果，如懷疑有病毒感染，應(yīng)提示患者在7-14天內(nèi)復(fù)查，抽取第二份樣本，并和第一份樣本在同條件下同時檢測，以確定是否有初次感染的血清轉(zhuǎn)化或病毒特異IgM或IgG抗體滴度明顯升高。HQBJS/MYXM-14-2014SOP 文件B14.7.3.高滴度病毒特異性IgG抗體會與特異性IgM抗體競爭 抗原結(jié)合部位，會使檢測的敏感性降低，IgM結(jié)果可能會出現(xiàn)假 性低值或陰性結(jié)果。尤其是懷疑先天性病毒感染的新生兒樣本， 他們的血清中可

9、能含有母親來源的高水平病毒特異的IgG抗體和胎兒產(chǎn)生的相對低水平的病毒特異IgM抗體，因此，對于該類樣本的陰性結(jié)果應(yīng)慎重分析。B14.7.4.由于臍帶血中可能含有源于母體的病毒特異性IgM抗體（胎盤滲漏），因此，最好在出生后 5天內(nèi)在對嬰兒的后續(xù)樣 本進行檢測，以證實臍帶血樣本病毒特異IgM抗體的陽性結(jié)果。強烈推薦新生兒與母親的血清樣本平行測試，如果是胎兒的先天性感染，其IgM抗體水平（以及IgG抗體水平）會持續(xù)存在或 上升趨勢，反之，如果抗體來源于母體，則在平行試驗中嬰兒的 抗體水平會逐漸下降或消失。B14.7.5.由于孕婦的實驗室檢查不能可靠地鑒定胎兒患病的風(fēng) 險，故不建議采用本試劑對無癥

10、狀的母體感染進行篩查，不得將本試劑的檢測結(jié)果單獨作為終止妊娠的依據(jù)。B14.7.6.免疫功能受損或接受免疫治療的患者，如人類免疫缺 陷病毒（HIV）感染患者或器官移植后接受免疫抑制治療的患者， 其血清學(xué)IgM抗體檢測的參考價值有限，可能會導(dǎo)致錯誤的醫(yī) 學(xué)解釋。B14.7.7.在近幾個月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品治療的人 群，對其陽性檢測結(jié)果的分析應(yīng)慎重。HQBJS/MYXM-14-2014SOP 文件B14.7.8.病毒特異性IgM抗體不僅出現(xiàn)于初次感染，當二次感 染和復(fù)發(fā)感染時也可能出現(xiàn)。B14.7.9.當疾病的流行程度降低時陽性預(yù)測值降低，對低危人群陽性結(jié)果的解釋應(yīng)當慎重。B14.8【預(yù)期

11、用途】體外定性檢測人血清（或血漿）中的甲型肝炎病毒和/或戊型肝 炎病毒IgM抗體，用于臨床輔助診斷。甲型病毒肝炎簡稱甲型肝炎（hepatitisA）,是由小核糖核酸病毒科（picornaviridae）嗜肝病毒屬（hepatovirus）的甲型肝 炎病毒（hepatitis A virus,HAV ）感染所致的急性傳染病，經(jīng)糞 - 口途徑傳播，多見于兒童和青少年，病程呈自限性，常無慢性感 染。甲肝有7個基因型，但HAV只有一個血清型，因此僅有1個抗原抗體系統(tǒng)，感染后可產(chǎn)生IgM型和IgG型抗體。IgM抗體出現(xiàn)早，一般可持續(xù) 812周，少數(shù)病例可延續(xù)6個月。IgG 抗體可持續(xù)數(shù)年，是主要的保護性抗體。甲型病毒肝炎感染方式 主要有：（1）0常生活接觸，（2）水源傳播，（3）食物傳播， 此外，蒼蠅和蟑螂也是傳播本病的重要媒介。戊型肝炎（戊肝，HE）是一種由戊型肝炎病毒（HEV ）引 起的急性傳染性肝炎，主要經(jīng)污染的水源傳播， 也可通過食物和 日常生活接觸，既往稱腸道傳播的非甲非乙型肝炎， 常引起爆發(fā)或流行，但也可散發(fā)。病死率約 0.5%1.5%，稍高于甲肝，但 孕婦戊肝的病死率可高達 20%。我國是戊肝的高流行區(qū)之一，HQBJS/MYXM-14-2014SOP 文件約占臨床散發(fā)性肝炎病例的