細(xì)菌培養(yǎng)基的制備、滅菌及接種、培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)PPT

1、1 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 二二 細(xì)菌培養(yǎng)基的配制、滅細(xì)菌培養(yǎng)基的配制、滅 菌及接種、培養(yǎng)技術(shù)菌及接種、培養(yǎng)技術(shù) 2 第一部分第一部分 細(xì)菌培養(yǎng)基的制備、滅菌細(xì)菌培養(yǎng)基的制備、滅菌 目的要求目的要求 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序 3 目目 的的 要要 求求 熟悉玻璃器皿的洗滌和滅菌前的準(zhǔn)備。熟悉玻璃器皿的洗滌和滅菌前的準(zhǔn)備。 掌握培養(yǎng)基和無菌水的制備方法。掌握培養(yǎng)基和無菌水的制備方法。 掌握高壓蒸氣滅菌技術(shù)。掌握高壓蒸氣滅菌技術(shù)。 4 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 材材 料料 藥品：牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、蒸餾水藥品：牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、蒸餾水等等。 高壓蒸氣滅菌鍋、烘箱、細(xì)菌過濾器、酒精燈。高壓蒸氣

2、滅菌鍋、烘箱、細(xì)菌過濾器、酒精燈。 其它：培養(yǎng)皿、試管、移液管、錐形瓶、燒杯、玻其它：培養(yǎng)皿、試管、移液管、錐形瓶、燒杯、玻 璃珠等。璃珠等。 5 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序 玻璃器皿的洗滌和包裝玻璃器皿的洗滌和包裝 培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的制備 無菌稀釋水的制備無菌稀釋水的制備 培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌 6 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （玻璃器皿的洗滌和包裝）（玻璃器皿的洗滌和包裝） 清洗并烘干玻璃器皿：如培養(yǎng)皿、移液管、試管等。清洗并烘干玻璃器皿：如培養(yǎng)皿、移液管、試管等。 棉塞的制作棉塞的制作 包裝培養(yǎng)皿和移液管等。包裝培養(yǎng)皿和移液管等。 7 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序2 （培養(yǎng)基的

3、種類）（培養(yǎng)基的種類） 據(jù)組成成分可分為據(jù)組成成分可分為: 1.合成培養(yǎng)基：由各種純化學(xué)物質(zhì)按一定比例配制而成。合成培養(yǎng)基：由各種純化學(xué)物質(zhì)按一定比例配制而成。 2.半合成培養(yǎng)基：有一部分純化學(xué)物質(zhì)和另一部分天然物質(zhì)配制半合成培養(yǎng)基：有一部分純化學(xué)物質(zhì)和另一部分天然物質(zhì)配制 而成。而成。 3.天然培養(yǎng)基：利用天然來源的有機(jī)物配制而成。天然培養(yǎng)基：利用天然來源的有機(jī)物配制而成。 從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)可分為從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)可分為 1.液體培養(yǎng)基：不加凝固劑的液體狀態(tài)培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基：不加凝固劑的液體狀態(tài)培養(yǎng)基。 2.固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入1530g/l左右的

4、瓊脂。左右的瓊脂。 3.半固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入半固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入35g/l左右的瓊脂。左右的瓊脂。 8 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序2 （培養(yǎng)基的種類）（培養(yǎng)基的種類） 常用凝固劑為瓊脂（其次為明膠），又叫洋菜、凍粉。常用凝固劑為瓊脂（其次為明膠），又叫洋菜、凍粉。 9 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序2 （培養(yǎng)基的配制方法和步驟）（培養(yǎng)基的配制方法和步驟） 1. 取一個(gè)取一個(gè)300ml燒杯，裝燒杯，裝150ml蒸餾水。蒸餾水。 2. 按配方逐一正確稱取各種成分，依次加入水中溶解。按配方逐一正確稱取各種成分，依次加入水中溶解。 注意：注意： a. 前一種成分溶解之后，才能加入下一種成分

5、前一種成分溶解之后，才能加入下一種成分 b. 可加熱促進(jìn)各成分溶解可加熱促進(jìn)各成分溶解 c. 加熱過程應(yīng)不斷攪拌，以免糊底燒焦，并適當(dāng)加熱過程應(yīng)不斷攪拌，以免糊底燒焦，并適當(dāng) 補(bǔ)充因蒸發(fā)而損失的水量。補(bǔ)充因蒸發(fā)而損失的水量。 培養(yǎng)基配方 牛肉膏蛋白胨氯化鈉瓊脂蒸餾水ph 數(shù)量0.75g1.5g0.75g3g150ml7.6 10 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序2 （培養(yǎng)基的配制方法和步驟）（培養(yǎng)基的配制方法和步驟） 3. 調(diào)調(diào)ph值：用值：用10 naoh調(diào)調(diào)ph至至7.6，用精，用精 密密ph試紙對照。試紙對照。 4. 分裝：將培養(yǎng)基分裝于分裝：將培養(yǎng)基分裝于5支試管，其余全部支試管，其余全部 倒入

6、倒入250ml錐形瓶中，分別塞上棉塞。錐形瓶中，分別塞上棉塞。注意注意 不要污染棉塞和瓶口不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，掛上標(biāo)簽，注明何種培養(yǎng)基。包扎成捆，掛上標(biāo)簽，注明何種培養(yǎng)基。 6. 滅菌備用：培養(yǎng)基滅菌后必須在滅菌備用：培養(yǎng)基滅菌后必須在37下恒下恒 溫培養(yǎng)溫培養(yǎng)24h，確定無菌生長，方可使用。，確定無菌生長，方可使用。 11 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序2 （培養(yǎng)基的分裝和斜面培養(yǎng)基的制作）（培養(yǎng)基的分裝和斜面培養(yǎng)基的制作） 每支試管裝的量為試管高度的每支試管裝的量為試管高度的1/41/3. 斜面長度為試管長度的斜面長度為試管長度的1/31/2. 12 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序2 （培養(yǎng)基

7、的配制方法和步驟）（培養(yǎng)基的配制方法和步驟） 13 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序3 （無菌稀釋水的制備）（無菌稀釋水的制備） 取一個(gè)取一個(gè)250ml的錐形瓶裝的錐形瓶裝90(或或99)ml蒸餾水，蒸餾水， 放放30顆玻璃珠顆玻璃珠(用于打破活性污泥、菌塊或土壤用于打破活性污泥、菌塊或土壤 顆粒顆粒)于錐形瓶內(nèi)，塞棉塞、包扎，待滅菌。于錐形瓶內(nèi)，塞棉塞、包扎，待滅菌。 另取另取5支支18mm180mm的試管，分別裝的試管，分別裝9ml 蒸餾水，塞棉塞、包扎，待滅菌。蒸餾水，塞棉塞、包扎，待滅菌。 無菌稀釋水為微生物分離實(shí)驗(yàn)中所需要的材料。無菌稀釋水為微生物分離實(shí)驗(yàn)中所需要的材料。 14 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序4

8、（培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌）（培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌） 加熱滅菌有加熱滅菌有干熱滅菌干熱滅菌和和濕熱滅菌濕熱滅菌。 干熱滅菌法：電熱烘箱作為干熱滅菌器干熱滅菌法：電熱烘箱作為干熱滅菌器 干熱滅菌的操作方法干熱滅菌的操作方法 a. 將待滅菌的物品放入恒溫箱，將溫度調(diào)節(jié)至將待滅菌的物品放入恒溫箱，將溫度調(diào)節(jié)至160 并維持并維持2h； b. 把恒溫箱的調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)回零處，待溫度降到把恒溫箱的調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)回零處，待溫度降到50 左右，才能將物品取出。左右，才能將物品取出。 15 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序4 （培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌）（培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌） 濕熱滅菌：高壓蒸氣滅菌法濕熱滅菌：高壓蒸氣滅菌

9、法 高壓蒸氣滅菌法的操作步驟如下：高壓蒸氣滅菌法的操作步驟如下： 1. 滅菌鍋內(nèi)加入一定量的水。滅菌鍋內(nèi)加入一定量的水。 2. 將待滅菌的物品放入鍋內(nèi)，并關(guān)嚴(yán)鍋蓋。將待滅菌的物品放入鍋內(nèi)，并關(guān)嚴(yán)鍋蓋。 注意：器物不能裝得太滿。注意：器物不能裝得太滿。 3. 接通電源，進(jìn)行加熱。接通電源，進(jìn)行加熱。 4. 排除高壓鍋內(nèi)的冷空氣，可將排氣閥打開，待溫度排除高壓鍋內(nèi)的冷空氣，可將排氣閥打開，待溫度 計(jì)指示溫度為計(jì)指示溫度為100時(shí)關(guān)閉排氣閥；或當(dāng)排出的蒸氣相時(shí)關(guān)閉排氣閥；或當(dāng)排出的蒸氣相 當(dāng)猛烈且微帶藍(lán)色時(shí)關(guān)閉排氣閥。當(dāng)猛烈且微帶藍(lán)色時(shí)關(guān)閉排氣閥。 16 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序4 （培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅

10、菌）（培養(yǎng)基和玻璃器材等的滅菌） 5. 當(dāng)壓力達(dá)當(dāng)壓力達(dá)1.05kg/cm2(滅菌器內(nèi)的溫度為滅菌器內(nèi)的溫度為121) 即開始滅菌即開始滅菌，使其維持，使其維持1530min。對熱不穩(wěn)定的培。對熱不穩(wěn)定的培 養(yǎng)基如含有葡萄糖、氨基酸等物質(zhì)時(shí)，應(yīng)適當(dāng)降低壓力養(yǎng)基如含有葡萄糖、氨基酸等物質(zhì)時(shí)，應(yīng)適當(dāng)降低壓力 (0.56kg/cm2) ，延長時(shí)間。，延長時(shí)間。 6. 滅菌時(shí)間一到，切斷電源，滅菌時(shí)間一到，切斷電源，待壓力降至零時(shí)待壓力降至零時(shí)，才能，才能 打開排氣閥，然后打開滅菌器蓋，取出物品，排出鍋內(nèi)打開排氣閥，然后打開滅菌器蓋，取出物品，排出鍋內(nèi) 剩余水。剩余水。 7. 待培養(yǎng)基冷卻后置于待培養(yǎng)

11、基冷卻后置于37恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h，若無，若無 菌生長則放入冰箱或陰涼處保存?zhèn)溆?。菌生長則放入冰箱或陰涼處保存?zhèn)溆谩?17 18 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序4 （培養(yǎng)基和玻璃器材的滅菌方法）（培養(yǎng)基和玻璃器材的滅菌方法） 間歇滅菌法：間歇滅菌法：即常壓滅菌，用于一些受高溫而破壞的培即常壓滅菌，用于一些受高溫而破壞的培 養(yǎng)基的滅菌。養(yǎng)基的滅菌。 操作方法：操作方法： a. 待滅菌的物品放在滅菌器或蒸籠里，每天蒸煮待滅菌的物品放在滅菌器或蒸籠里，每天蒸煮1次，次， 每次在每次在100煮沸煮沸3060min，連續(xù)，連續(xù)3d重復(fù)進(jìn)行。重復(fù)進(jìn)行。 b. 在每兩次蒸煮之間，將物品（指培養(yǎng)基）放在在每兩次

12、蒸煮之間，將物品（指培養(yǎng)基）放在37 恒溫條件下培養(yǎng)恒溫條件下培養(yǎng)24h，這樣可以使每次蒸煮后未殺死殘，這樣可以使每次蒸煮后未殺死殘 留的芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體，以便下次蒸煮時(shí)殺滅。留的芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體，以便下次蒸煮時(shí)殺滅。 c. 第三次蒸煮之后基本無菌，但為了確保無菌仍要放在第三次蒸煮之后基本無菌，但為了確保無菌仍要放在 37恒溫條件下培養(yǎng)恒溫條件下培養(yǎng)24h，確定無菌才能使用。，確定無菌才能使用。 19 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序4 （培養(yǎng)基和玻璃器材的滅菌方法）（培養(yǎng)基和玻璃器材的滅菌方法） 過濾除菌法過濾除菌法： 不能用加熱滅菌的不能用加熱滅菌的 液體物質(zhì)（如維生液體物質(zhì)（如維生 素、血清），一般素、

13、血清），一般 可用細(xì)菌過濾器進(jìn)可用細(xì)菌過濾器進(jìn) 行除菌。行除菌。 20 第二部分第二部分 細(xì)菌純種分離、培養(yǎng)和接細(xì)菌純種分離、培養(yǎng)和接 種技術(shù)種技術(shù) 目的要求目的要求 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序 21 目目 的的 要要 求求 掌握從環(huán)境中分離培養(yǎng)細(xì)菌的方法，從掌握從環(huán)境中分離培養(yǎng)細(xì)菌的方法，從 而獲得若干種細(xì)菌純培養(yǎng)技能。而獲得若干種細(xì)菌純培養(yǎng)技能。 掌握幾種接種技術(shù)。掌握幾種接種技術(shù)。 22 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 材材 料料 無菌培養(yǎng)皿無菌培養(yǎng)皿(直徑直徑90mm)10套、無菌移液管套、無菌移液管1ml2 支、支、10ml1支支。 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1瓶，活性污泥或土壤或湖水瓶，活性

14、污泥或土壤或湖水1瓶，瓶， 無菌稀釋水無菌稀釋水90ml1瓶、瓶、9ml5管。管。 其它：接種環(huán)、酒精燈、恒溫箱。其它：接種環(huán)、酒精燈、恒溫箱。 23 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 程程 序序 細(xì)菌的純種分離細(xì)菌的純種分離 細(xì)菌的接種方法細(xì)菌的接種方法 24 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離）（細(xì)菌的純種分離） 稀釋平板法稀釋平板法 平板劃線法平板劃線法 25 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離稀釋平板法）稀釋平板法） 1. 取樣。取樣。 2. 將將1瓶瓶90ml和和5管管9ml無菌水排列好，用記號筆無菌水排列好，用記號筆 依次編上依次編上10 1、 、 10 2、 、10 3、 、10

15、4、 、10 5、 、10 6。 。 在無菌操作條件下，用在無菌操作條件下，用10ml的無菌移液管吸取的無菌移液管吸取 10ml水樣水樣(或其它樣品或其它樣品)加入編號為加入編號為10 1無菌水 無菌水(內(nèi)內(nèi) 含玻璃珠含玻璃珠)中，將移液管吹洗三次，用手搖中，將移液管吹洗三次，用手搖10min將將 顆粒狀樣品打散。即為顆粒狀樣品打散。即為10 1濃度的菌液。用 濃度的菌液。用1ml無無 菌移液管吸取菌移液管吸取1ml 10 1濃度的菌液于編號為 濃度的菌液于編號為10 2 無菌水中，將移液管吹洗三次，搖勻即為無菌水中，將移液管吹洗三次，搖勻即為10 2濃度 濃度 菌液。同樣方法，依次稀釋到菌液

16、。同樣方法，依次稀釋到10 6 。 。 26 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離稀釋平板法）稀釋平板法） 稀釋液的制備稀釋液的制備 27 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離稀釋平板法）稀釋平板法） 3. 平板的制作平板的制作 取取10套無菌培養(yǎng)皿編號，套無菌培養(yǎng)皿編號， 10 4、 、10 5、 、10 6各 各3個(gè)，另一個(gè)個(gè)，另一個(gè) 為空氣對照。為空氣對照。 取取1支支1ml無菌移液管從無菌移液管從濃度小的菌液濃度小的菌液開始，以開始，以10 6、 、10 5、 、 10 4為序分別吸取 為序分別吸取0.5ml菌液于相應(yīng)編號的培養(yǎng)皿內(nèi)菌液于相應(yīng)編號的培養(yǎng)皿

17、內(nèi)(每次吸取每次吸取 前，用移液管在菌液中吹泡使菌液充分混勻前，用移液管在菌液中吹泡使菌液充分混勻)。 28 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離稀釋平板法）稀釋平板法） 3. 平板的制作平板的制作 加熱培養(yǎng)基，當(dāng)其冷至加熱培養(yǎng)基，當(dāng)其冷至45 左右時(shí)，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐左右時(shí)，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐 形瓶，左手拿培養(yǎng)皿，以中指、形瓶，左手拿培養(yǎng)皿，以中指、 無名指和小指托住皿底，拇指和無名指和小指托住皿底，拇指和 食指夾住皿蓋，靠近火焰，將皿食指夾住皿蓋，靠近火焰，將皿 蓋掀開，倒入培養(yǎng)基后將培養(yǎng)皿蓋掀開，倒入培養(yǎng)基后將培養(yǎng)皿 平放在桌上，順時(shí)針和逆時(shí)針來平放在桌上，順時(shí)針和

18、逆時(shí)針來 回轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基和菌液回轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基和菌液 充分混勻，冷凝后即成平板，倒充分混勻，冷凝后即成平板，倒 置于置于30培養(yǎng)培養(yǎng)2448h，然后觀，然后觀 察結(jié)果。察結(jié)果。 29 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離稀釋平板法）稀釋平板法） 3. 平板的制作平板的制作 取對照無菌培養(yǎng)皿，倒平板待凝固后，打開皿取對照無菌培養(yǎng)皿，倒平板待凝固后，打開皿 蓋蓋10min后蓋上，倒置于后蓋上，倒置于30培養(yǎng)培養(yǎng)2448h，然，然 后觀察結(jié)果。后觀察結(jié)果。 30 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離平板劃線法）平板劃線法） 1. 平板制作：平板制作：將融

19、化并冷至約將融化并冷至約50的肉膏蛋的肉膏蛋 白胨瓊脂培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，使凝固成白胨瓊脂培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，使凝固成 平板。平板。 2. 劃線：劃線：用接種環(huán)挑取一環(huán)樣品，左手拿培養(yǎng)用接種環(huán)挑取一環(huán)樣品，左手拿培養(yǎng) 皿，中指、無名指和小指托住皿底，拇指和食皿，中指、無名指和小指托住皿底，拇指和食 指夾住皿蓋，將培養(yǎng)皿稍傾斜，左手拇指和食指夾住皿蓋，將培養(yǎng)皿稍傾斜，左手拇指和食 指將皿蓋掀半開，右手將接種環(huán)伸入培養(yǎng)皿內(nèi)，指將皿蓋掀半開，右手將接種環(huán)伸入培養(yǎng)皿內(nèi)， 在平板上輕輕劃線在平板上輕輕劃線(切勿劃破培養(yǎng)基切勿劃破培養(yǎng)基)。劃線完。劃線完 畢蓋好皿蓋，畢蓋好皿蓋，30培養(yǎng)培養(yǎng)244

20、8h后觀察結(jié)果。后觀察結(jié)果。 31 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1 （細(xì)菌的純種分離（細(xì)菌的純種分離平板劃線法）平板劃線法） 32 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序2 （細(xì)菌的接種技術(shù)）（細(xì)菌的接種技術(shù)） 接種方法：常用的有接種方法：常用的有斜面接種法斜面接種法、平板接種法平板接種法、液體接種法液體接種法、 試管深層固體培養(yǎng)基的試管深層固體培養(yǎng)基的穿刺接種法穿刺接種法。 接種工具：常用的有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接接種工具：常用的有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接 種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等。種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等。 圖6 33 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序2 （細(xì)菌的接種技術(shù)（細(xì)菌的接種技術(shù)斜面接種法斜面接種法） 左手平

21、托兩支試管，拇指壓住兩支試左手平托兩支試管，拇指壓住兩支試 管。外側(cè)是菌種試管，內(nèi)側(cè)是待接種的空管。外側(cè)是菌種試管，內(nèi)側(cè)是待接種的空 白斜面白斜面(兩支試管的斜面同時(shí)向上兩支試管的斜面同時(shí)向上) 。右手。右手 將棉塞旋松，以便在接種時(shí)容易拔出。將棉塞旋松，以便在接種時(shí)容易拔出。 右手拿接種環(huán)，在火焰上先將右手拿接種環(huán)，在火焰上先將環(huán)端環(huán)端燒燒 紅滅菌，然后紅滅菌，然后將有可能伸入試管的其余部將有可能伸入試管的其余部 位位也過火滅菌。也過火滅菌。 將兩支試管的上端并齊，靠近火焰，將兩支試管的上端并齊，靠近火焰， 用右手小指、無名指和手掌將兩支試管的用右手小指、無名指和手掌將兩支試管的 棉塞一并夾

22、住拔出，棉塞一并夾住拔出，棉塞仍夾在手中棉塞仍夾在手中，然，然 后讓試管口緩緩過火焰。后讓試管口緩緩過火焰。 1 2 3 34 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序2 （細(xì)菌的接種技術(shù)（細(xì)菌的接種技術(shù)斜面接種法斜面接種法） 將已灼燒過的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi)。將已灼燒過的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi)。先冷卻先冷卻， 而后再用環(huán)挑取少許菌種，將接種環(huán)抽出并迅速伸而后再用環(huán)挑取少許菌種，將接種環(huán)抽出并迅速伸 入待接種試管底部，在斜面上入待接種試管底部，在斜面上由底部向上劃線由底部向上劃線。抽。抽 出接種環(huán)，塞上棉塞將試管插在試管架上，最后再出接種環(huán)，塞上棉塞將試管插在試管架上，最后再 次燒紅接種環(huán)，則接種完畢。次燒紅接種環(huán)，則接種完畢。 4 5 67 8 35 實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序2 （細(xì)菌的接種技術(shù)（細(xì)菌的接種技術(shù)液體接種和穿刺接種液體接種和穿刺接種） 液體接種法液體接種法(從斜面菌種接入培養(yǎng)液從斜面菌種接入培養(yǎng)液)：用：用接種環(huán)接種環(huán)挑取斜面菌挑取斜面菌 種送入培養(yǎng)液中，使環(huán)在液體表面與管壁接觸輕輕研磨，將種送入培養(yǎng)液中，使環(huán)在液體表面與管壁接觸輕輕研磨，將 環(huán)上的菌種全部洗入培養(yǎng)液中，取出接種環(huán)塞上棉塞。將試環(huán)上的菌種全部洗入培養(yǎng)液中，取出接種環(huán)塞上棉塞。將試 管輕輕撞擊手掌使菌體在培養(yǎng)液中均勻分布。最后將接種環(huán)管輕輕撞擊手掌使菌體在培養(yǎng)液中均勻分布。最后將接種環(huán) 燒紅滅菌燒紅滅菌