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1、2020年大腸菌群檢測(cè)方法(課件)大腸菌群檢測(cè)方法進(jìn)入無(wú)菌室步驟1. 進(jìn)入無(wú)菌室前應(yīng)打開(kāi)紫光燈進(jìn)行滅菌,時(shí)間為0。51小時(shí). 關(guān)燈后05小時(shí)后放可進(jìn)入。3 進(jìn)入更衣間更換衣服,佩帶口罩、帽子、鞋套實(shí)驗(yàn)步驟1, 進(jìn)入無(wú)菌室后,先把酒精燈點(diǎn)燃,然后在用酒精棉進(jìn)行手部消毒。(酒精棉是用75%的酒精加入脫脂棉中制成)2, 準(zhǔn)備雙料管根,單料管6根,培養(yǎng)皿7個(gè)。3,直接從原液中吸取10ml放入雙料管,(根每根各10ml)4, 再吸取原液1放入單料管中(根每根各1)5,再吸取原液1l放入培養(yǎng)皿中(2個(gè)培養(yǎng)皿各1ml)6, 再吸取原液1ml放入鹽水管中制成1梯度的樣液7, 更換一根吸管,從-1梯度的樣液吸取

2、1ml樣液放入單料管中(3根每根各1ml)8,再吸取梯度樣液1ml放入培養(yǎng)皿中(2個(gè)培養(yǎng)皿各1ml), 再把每個(gè)培養(yǎng)皿中到入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖允(注另作3個(gè)培養(yǎng)皿:空氣空白,把培養(yǎng)皿打開(kāi)十分鐘倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖勻.瓊脂空白,把培養(yǎng)皿中倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖勻。鹽水空白,吸m生理鹽水放入培養(yǎng)皿中,倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖勻。)0,把全部作好的放入培養(yǎng)箱中,溫度3CC,大腸2H+2H,菌落8H+,(待培養(yǎng)皿中的瓊脂凝固后反轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)放入培養(yǎng)箱中)1, 梯度:1梯度為l原液加入9l生理鹽水配成 2梯度為1m-梯度樣液加入9m生理鹽水配成 3梯度4梯度配制方法和1、-梯度的配制方法一樣1, 如果大腸初發(fā)酵產(chǎn)生氣泡,用接種筆沾一個(gè)產(chǎn)氣的液在伊紅美蘭平板上畫(huà)之字形然后放入培養(yǎng)箱中36C,24H+2H .(接種筆在每次使用前必須在酒精燈上消毒。所畫(huà)之形不能劃破伊紅美蘭瓊脂表面)3,取出后在用接種筆在伊紅美蘭平板之字形上挑菌,放入乳糖復(fù)發(fā)酵管中 ,然后再培養(yǎng)3C1C,24H+2H.1, 再在伊紅美蘭平板之字形上挑菌,放到載玻片上作鏡檢.(方法見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn))15, 只有鏡檢成紫紅色和乳糖復(fù)發(fā)酵管產(chǎn)氣同時(shí)成立的情況下,才能斷定這根管是不合格., 清洗消毒這根試管前必須進(jìn)行消毒霉菌,12

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