全自動(dòng)生化分析儀工作原理

1、一、基本結(jié)構(gòu) （）按照反應(yīng)裝程得結(jié)構(gòu)，自動(dòng)生化分析儀主要分為流動(dòng)式（Flow system ）.分立式（Di s cr e t e s y s tem ）兩大類. 1。流動(dòng)式指測(cè)左項(xiàng)目相同得各待測(cè)樣品與試劑混合后得化學(xué)反應(yīng)在同一管道流動(dòng)得過程 中完成。這就是第一代自動(dòng)生化分析儀。 2 .分立式指各待測(cè)樣品與試劑混合后得化學(xué)反應(yīng)都就是在各自得反應(yīng)杯中完成。英中有幾 類分支。 （1）典型分立式自動(dòng)生化分析儀。此型儀器應(yīng)用最廣. （2）離心式自動(dòng)生化分析儀，每個(gè)待測(cè)樣品都就是在離心力得作用下，在各自得反應(yīng)槽內(nèi) 與試劑混合,完成化學(xué)反應(yīng)并測(cè)定由于混合，反應(yīng)與檢測(cè)幾乎同時(shí)完成，它得分析效率較高。 3.

2、袋式自動(dòng)生化分析儀就是以試劑袋來代替反應(yīng)杯與比色杯，每個(gè)待測(cè)樣品在各自得試劑 袋內(nèi)反應(yīng)并測(cè)定。 4. 固相試劑自圧生化分析儀（亦稱干化學(xué)式自動(dòng)分析儀）就是將試劑固相于膠片或?yàn)V紙片 等載體上，每個(gè)待測(cè)樣品滴加在相應(yīng)試紙條上進(jìn)行反應(yīng)及測(cè)左。操作快捷、便于攜帶就是它 得優(yōu)點(diǎn)。 （二）典型分立式自動(dòng)生化分析儀基本結(jié)構(gòu) 1 .樣品（S a mple）系統(tǒng) 樣品包括校準(zhǔn)品、質(zhì)控品與病人樣品系統(tǒng)一般由樣品裝載、輸送與分配等裝置組成。 樣品裝載與輸送裝置常見得類型有： （1）樣品盤（Sampledisk）,即放置樣品得轉(zhuǎn)盤有單圈或內(nèi)外多圈,單獨(dú)安置或與試劑轉(zhuǎn)盤或反 應(yīng)轉(zhuǎn)盤相套合，運(yùn)行中與樣品分配臂配合轉(zhuǎn)動(dòng)。有

3、得采用更換式樣品盤，分工作與待命區(qū)， 其中放置多個(gè)弧形樣品架（Sector）作轉(zhuǎn)載臺(tái)，儀器在測(cè)立中自動(dòng)放置更換，均對(duì)樣品盤上放 置得樣品杯或試管得髙度、直徑與深度有一泄要求，有得需專用樣品杯，有得可直接用采血試 管樣品盤得裝載數(shù),以及校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、常規(guī)樣品與急診樣品得裝載數(shù)，一般都就是固左 得。這些應(yīng)根據(jù)工作需要選擇。 （2）傳動(dòng)帶式或軌道式進(jìn)樣即試管架（Rack）不連續(xù)，常為10個(gè)一架，靠步進(jìn)馬達(dá)驅(qū)動(dòng)傳送 帶，將試管架依次前移，再單架逐管橫移至固左位置，由樣品分配臂采樣。 （3）鏈?zhǔn)竭M(jìn)樣試管固左排列在循環(huán)得傳動(dòng)鏈條上，水平移動(dòng)到采樣位置，有得儀器隨后可 淸洗試管. 分配加樣裝宜大都由注射器

4、、步進(jìn)馬達(dá)或傳動(dòng)泵、加樣臂與樣品探針等組成，注射器（s yrine uni t ）o根據(jù)注射器直徑與活塞移動(dòng)距離得多少，立量吸取樣品或試劑。它得精 度決左加樣得精度，一般可精確到1微升。注射器漏液時(shí)，首先考慮就是否探針堵塞，其次 就是注射器活塞磨損等。有得加液系統(tǒng)采用容積型注射泵與數(shù)控脈沖步進(jìn)馬達(dá)，提髙精度。 樣品探引（Probe）與加樣臂相聯(lián)，直接吸取樣品。探針均設(shè)有液而感應(yīng)器，防止探針損 傷與減少攜帶污染。有得設(shè)有阻塞檢測(cè)報(bào)警系統(tǒng)當(dāng)探針樣品中得血凝塊等物質(zhì)阻塞時(shí)儀器 會(huì)自動(dòng)報(bào)警沖洗探針，并跳過當(dāng)前樣品，對(duì)下一樣品加樣。有得還有智能化防撞裝豊遇到阻 礙探針立即停止運(yùn)動(dòng)并報(bào)警。即使如此，它仍就

5、是非正規(guī)操作時(shí)得易損件。為了保護(hù)探針, 除預(yù)先需要根據(jù)樣品容器得髙低、最低液而高度等進(jìn)行設(shè)港外、，樣品容器得規(guī)格、放置以 及液面高度等設(shè)立條件不得隨意改變。在某些儀器上，采樣器與加液器組合在一起，加樣品 與加試劑或稀釋液一個(gè)探針一次完成。加樣臂。連接探引，在樣品杯（試劑瓶）與反應(yīng)杯 之間運(yùn)動(dòng)，完成采樣與加樣（加試劑）。它得運(yùn)動(dòng)方式，與儀器工作效率及工作壽命有一泄 關(guān)系。閥門用以決泄液體流動(dòng)方向。稀釋系統(tǒng)。對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)稀釋、過后稀釋或加倍， 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)原液系列稀釋等不同儀器得稀釋方式有所差異，要注意識(shí)別試劑系統(tǒng)亦有稀釋功能： 2、試劑（Reagen t ）系統(tǒng)一般由試劑儲(chǔ)放與分配加液裝置組成。 （1

6、）試劑倉(cāng)常與試劑轉(zhuǎn)盤結(jié)合在起。多數(shù)儀器將試劑倉(cāng)設(shè)為冷藏室，以提高在線試劑得穩(wěn)定 期。 （2）分配加液裝置（I） i s pcnse unit）.與樣品系統(tǒng)得類似.，試劑探針常?？梢詫?duì)試劑 預(yù)加溫，雙試劑系統(tǒng)得試劑2（R2）探針起始量宜較下，以便配合不同R1 /R2比例得試劑. （3）試劑瓶（Bo t tl e ）o有不同得形狀及大小規(guī)格。如CO BAS MIRA PLUS儀有4、10、 15、35ml等規(guī)格，瓶底呈凹形，OLYMPUS Au6 0 0儀有3 0與6 0ml兩種；日立7060 儀有20、50、1 00ml三種等規(guī)格.應(yīng)根據(jù)工作量與試劑規(guī)格.考慮試劑瓶殘留死體積與更換 頻率，合理選

7、用獨(dú)特設(shè)計(jì)得卡式試劑盒，體積小,防蒸發(fā)，方便儲(chǔ)存. （4）配套試劑常有條形碼，儀器設(shè)有條形碼檢查系統(tǒng)，可對(duì)試劑得種類、批號(hào)、存量、有效 期與校準(zhǔn)曲線等貨剌，進(jìn)行核對(duì)校驗(yàn)，如Beckm a nCX7等. （5）試劑瓶蓋自動(dòng)開關(guān)系統(tǒng)，更有利于試劑保存。有得儀器可在運(yùn)行中添加，更換試劑，有得 則須在暫停狀態(tài)進(jìn)行。 3。條形碼（Ba r c ode）識(shí)讀系統(tǒng) 一般由掃描系統(tǒng)、信號(hào)整形與譯碼器三部分組成。掃描系統(tǒng)以光源掃射黑條白空相間得條碼 符號(hào)由于條與空對(duì)光得反射不同、不同寬窄得條符反射光持續(xù)時(shí)間不同，產(chǎn)生強(qiáng)度不同得反 射光再經(jīng)光電轉(zhuǎn)換元件接收并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)強(qiáng)度得電信號(hào)，最后通過信號(hào)整形，由譯碼器解譯。

8、 系統(tǒng)自動(dòng)識(shí)別樣品架及樣品編號(hào)識(shí)別試劑、校準(zhǔn)品及其批號(hào)、失效期，有得并可識(shí)別校驗(yàn)校 準(zhǔn)曲線等信息。 實(shí)驗(yàn)室常用條形碼類型有 CODE 3 9、CODE 128、2of 5 S t and a rd、Inter 1 ea v ed 2of 5等。要自編樣品條形碼需要條形碼輸入器，條形碼閱讀系統(tǒng)與條形碼要匹配.已有全 自動(dòng)試管分配暨條形碼粘貼準(zhǔn)備系統(tǒng)。 4。反應(yīng)系統(tǒng) （1）反應(yīng)盤裝載一系列反應(yīng)比色杯（Cu vettes），多為轉(zhuǎn)盤形式。反應(yīng)測(cè)左過程中按固泄程 序，在加樣臂、加液臂、攪拌棒、光路與淸洗裝置之間轉(zhuǎn)動(dòng).有得儀器在反應(yīng)杯中完成反應(yīng) 后再吸入比色杯比色，現(xiàn)在更常見反應(yīng)與檢測(cè)同在比色杯中進(jìn)行，

9、效率更髙，尤其適于連續(xù) 監(jiān)測(cè)法。比色杯多采用硬質(zhì)石英玻璃、硬質(zhì)玻璃、無紫外光吸收得丙烯酸塑料等，使用壽命 不一。Dime nsion系列得比色杯在機(jī)器內(nèi)自動(dòng)制造，自動(dòng)封口，免沖洗，無污染流動(dòng)池式 主要在小型分析儀用.容積一般幾十微升，但抽液管道占用較多反應(yīng)液，多樣品連續(xù)使用，增 加交叉污染機(jī)會(huì)。 蠕動(dòng)泵（Pump）.半自動(dòng)生化儀需要蠕動(dòng)泵抽吸反應(yīng)液進(jìn)人流動(dòng)比色池作測(cè)左。要求泄期 對(duì)蠕動(dòng)泵校準(zhǔn)，即通過吸人定量得水來檢驗(yàn)泵得吸液量就是否準(zhǔn)確。一般均設(shè)有泵校準(zhǔn)功能. （2）混合裝宜（Mix i ng unit）如采用多頭回旋攪拌棒（二頭雙淸洗式攪拌系統(tǒng)）。攪拌棒 常具特氟隆不粘涂層，避免液體粘附。

10、（3）溫控裝置生化分析儀通過恒溫控制裝置來保持孵育溫度得調(diào)控與恒定也就是由訃算機(jī) 來控制得,理想得孵冇溫度波動(dòng)應(yīng)小于01 C.保持恒溫得方式有三種?？諝庠『銣兀杭丛?比色杯與加熱器之間隔有空氣空氣浴恒溫得特點(diǎn)就是方便、速度快、不需要特殊材料，但穩(wěn) 定性與均勻性較水浴稍差羅氏（Ro c he）得cobas與01 y mpus Au2700系統(tǒng)采用得就就 是空氣浴恒溫模式。水浴循環(huán)式：即在比色杯周恫充盈有水，加熱器控制水得溫度。水浴 恒熱得特點(diǎn)就是溫度恒左，但需特殊得防腐劑以保證水質(zhì)得潔凈，且要泄期更換循環(huán)水。日 立系統(tǒng)生化分析儀采用得即就是水浴循環(huán)恒溫裝置恒溫液循環(huán)間接加熱式:結(jié)構(gòu)原理就是 在比

11、色杯周圍流動(dòng)著一種特殊得恒溫液（具無味、無污染、惰性、不蒸發(fā)等特點(diǎn)）。比色杯 與恒溫液之間有極小得空氣狹縫，恒溫液通過加熱狹縫得空氣達(dá)到恒溫，其溫度穩(wěn)泄性優(yōu)于 干式，與水浴式循環(huán)式相比不需要特殊保養(yǎng)。 5。淸洗（Wash）系統(tǒng) 探針與攪拌棒采用激流式等方式自動(dòng)沖洗。淸洗裝置一般由吸液針、吐液針與擦拭刷組成。 淸洗工作流程為吸出反應(yīng)一吸于一注入純水一吸干一擦干。淸洗液有堿性與酸睦兩種。一般 說來，在吸出反應(yīng)液后,儀器先用堿性液沖洗，再用酸性液沖洗，最后用去離子水沖洗三遍。 擦拭刷得功能就是吸去杯壁上掛淋得水,刷體內(nèi)部有負(fù)吸裝置使用進(jìn)程中要注意擦拭刷就是 否磨損。 值得注意得就是，對(duì)于常規(guī)沖洗還不

12、能清除交叉污染（carr y -ov e r）得實(shí)驗(yàn)要特別處理，以 減少交叉污染或攜帶污染例如，膽固醇測(cè)龍?jiān)噭┲械媚懰猁}對(duì)血淸總膽汁酸得測(cè)定有干擾, 在消除交叉污染得程序中,可輸入程序，指令總膽汁酸不在測(cè)試膽固醇得比色杯中進(jìn)行測(cè)左, 如不能避開，儀器則對(duì)比色杯進(jìn)行特別沖洗,防止發(fā)生交叉污染。 沖洗水得水溫自動(dòng)控制到與恒溫反應(yīng)槽溫度相近，保證反應(yīng)系統(tǒng)得恒溫，并增加去污力。急 診測(cè)左后采用針對(duì)性淸洗，似乎比采用固龍得全而清洗程序更有效率更經(jīng)濟(jì)。耗水量?jī)x器間 相差較大。 AB BOTT AERO SET自動(dòng)生化分析儀等系統(tǒng)具有自動(dòng)淸洗功能（sma r t wash）與最佳 標(biāo)本順序選擇功能（OSS）

13、。即儀器根據(jù)試劑或樣品間交叉污染得項(xiàng)目組合，自動(dòng)改變檢測(cè) 順序，避免互有影響得分析項(xiàng)目：確實(shí)無法回避時(shí)，則采用選左得特殊淸洗劑作自動(dòng)淸洗。 6. 比色系統(tǒng) （1）光源多數(shù)采有鹵素?zé)?，工作波長(zhǎng)為3 2 58 00nmo鹵素?zé)舻檬褂脡勖^短，一般只有1 0007 5 0 0小時(shí)。當(dāng)燈得發(fā)光強(qiáng)度不夠時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警，應(yīng)及時(shí)更換，部分生化分析儀 采用得就是長(zhǎng)壽命得氤燈，24小時(shí)待機(jī)可工作數(shù)年，工作波長(zhǎng)2 85-750nmo （2）比色杯自動(dòng)生化分析儀得比色杯也就是反應(yīng)杯。比色杯得光徑0、50.7 cm不等，通 常為石英或優(yōu)質(zhì)塑料光徑小得省試劑，當(dāng)比色杯光徑小于1 cm時(shí)，部分儀器可自動(dòng)校正為 1 c

14、m.生化分析儀得比色杯自動(dòng)沖洗裝置在儀器完成比色分析后做自動(dòng)反復(fù)沖洗、吸F得動(dòng) 作,比色杯在自動(dòng)檢査合格后繼續(xù)循環(huán)使用。要及時(shí)更換不合格得比色杯。如采用得就是石 英比色杯，比色杯要定期檢査淸洗。 （3）單色器與檢測(cè)器各類自動(dòng)生化分析儀應(yīng)用得就是可見一紫外吸收光譜法,即監(jiān)測(cè)200- 700nm光區(qū)某特定波長(zhǎng)下發(fā)色基團(tuán)吸光度得變化，輔以微機(jī)軟件系統(tǒng)得計(jì)算來完成測(cè)定。可 見一紫外吸光譜定量得基礎(chǔ)就是L amber-Beer泄律. 傳統(tǒng)得分光度測(cè)左普適采用前分光，即在光源燈與樣品杯之間先要用濾光片、棱鏡或光柵分 光，通過可調(diào)得狹縫，取得與樣品“互補(bǔ)”得單色光之后，照射到樣品杯，再用光電池或光 電管作為

15、檢測(cè)器，測(cè)定樣品對(duì)單色光得吸收星（吸光度）。 而現(xiàn)代大多生化分析儀采用后分光測(cè)量技術(shù)。后分光測(cè)左：將一束白光（混合光）先照到樣 品杯，然后再用光柵分光，同時(shí)用一列發(fā)光二極管排在光柵后面作為檢測(cè)器。后分光得優(yōu)點(diǎn) 就是不需移動(dòng)儀器比色系統(tǒng)中得任何部件，可同時(shí)選用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，這樣可降 低比色得噪聲，提髙分析得精確度與減少故障率。 生化儀得單色器即分光裝置，有干涉濾光片與光柵分光兩類。干涉濾光片有插入式與可旋轉(zhuǎn) 得圓盤式兩種。插入式就就是將需用得濾光片插入濾片槽中，圓盤式就是將儀器配備得濾光 片都安裝在圓盤中，使用時(shí)旋轉(zhuǎn)至所需濾光片處即可。涉濾光片價(jià)格便宜，但易變潮霉變, 從而影響檢測(cè)結(jié)果

16、得準(zhǔn)確性，半自動(dòng)生化分析儀多采用此種濾光片。 光柵分光可分為全息反射式光柵與蝕刻式凹而光柵兩種。前者就是在玻璃上覆蓋一層金屬膜 后制成，有一泄程度得相差易被腐蝕：后者就是將所選波長(zhǎng)固定地刻制在凹而玻璃上，耐磨 損、抗腐蝕、無相差。全自動(dòng)生化分析儀多采用光柵分光。 7. 程序控制系統(tǒng) 計(jì)算機(jī)就是自動(dòng)生化分析儀得大腦，標(biāo)本、試劑得注加與識(shí)別,條碼得識(shí)別，恒溫控制，沖洗 控制，結(jié)果打印,質(zhì)控得監(jiān)控，儀器各種故障得報(bào)警等都就是由汁算機(jī)控制完成。儀器一代 勝過一代，自動(dòng)化程度越來越髙，有得儀器甚至可以完成部分日常保養(yǎng)程序。自動(dòng)生化分析 儀數(shù)據(jù)處理功能日趨完善，如：反應(yīng)進(jìn)程中吸光度，務(wù)種測(cè)定方法,各種校準(zhǔn)

17、方法室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果 得統(tǒng)訃等，生化儀都可進(jìn)行處理。計(jì)算機(jī)還可以調(diào)瞧病人得數(shù)拯、儀器得性能指標(biāo)、儀器得 運(yùn)行狀態(tài)等自動(dòng)生化儀中得質(zhì)控與病人結(jié)果還可通過儀器計(jì)算機(jī)與實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIS） 得對(duì)接進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)管理. 程序控制器就是系統(tǒng)得硬件部分。它主要包括： （1）微處理器與主機(jī)電腦。用于儀器各個(gè)單元與總體控制，應(yīng)具有程控操作、故障診斷、多 種數(shù)據(jù)處理與儲(chǔ)存等強(qiáng)大功能.一般根拯儀器功能得需要與電腦硬件市場(chǎng)得主流產(chǎn)品來配置. 顯示器（CRT mo n i t or unit）。通常用鍵盤、鼠標(biāo)、觸摸屏等方式進(jìn)行操作. （3）系統(tǒng)及配套軟件。多采用Windows-NT或wind o vs界而，具全圖形化設(shè)計(jì)

18、，多菜 單選擇，信息導(dǎo)引，故障報(bào)警，幫助提示.人機(jī)“對(duì)話”，方便直觀，不少儀器有即時(shí)反應(yīng)曲線 顯示。 （4）通過Rs 232 c等數(shù)據(jù)接口與苴她訃算機(jī)、打印機(jī)等設(shè)備傳輸數(shù)據(jù)。具人工智能雙向 通訊系統(tǒng)（Host query）,儀器可直接自行向主電腦詢問病人/樣品基本資料及檢測(cè)項(xiàng)目. 有得具遠(yuǎn)程通訊及監(jiān)控功能，可遙控遠(yuǎn)處測(cè)試及維修檢查，實(shí)現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)工作。 自動(dòng)生化分析儀均采用程序控制得自動(dòng)分析。分析程序一經(jīng)確左，工作時(shí)只要簡(jiǎn)單地輸入測(cè) 定項(xiàng)目或編碼，儀器即可撥編制程序自動(dòng)完成測(cè)定、汁算與報(bào)告。具體得控制程序因儀器而 異，一般分為固左程序與自編程序兩種。固定程序?yàn)閮x器廠家預(yù)先設(shè)左，常與指泄試劑配套; 有

19、得不能更改，有得也可由用戶修改.它與配套試劑一同使用時(shí)，既方便工作，質(zhì)量也比較可 靠,但成本較髙。自編程序靈活實(shí)用，便于開發(fā)新項(xiàng)目,強(qiáng)調(diào)程序得靈活性。比如，成批測(cè)左 過程中應(yīng)可隨時(shí)插入急診標(biāo)本測(cè)泄而不打亂原有程序;單個(gè)急診標(biāo)本測(cè)左操作簡(jiǎn)捷、消耗少, 可靈活預(yù)稀釋或重復(fù)測(cè)定. 二、儀器一般工作流程 生化分析儀得正確應(yīng)用，只就是掌握了測(cè)龍技術(shù)原理還不夠，還需要對(duì)具體儀器得工作流程 及測(cè)泄計(jì)算方法有足夠得了解。 （-）一般工作流程 工作流程可以通過儀器得測(cè)立周期來考察。重點(diǎn)關(guān)注比色杯空白讀數(shù)點(diǎn)（CB）、加樣品點(diǎn) （S）、各試劑加液點(diǎn)（Rl、R2、）、試劑空白讀數(shù)點(diǎn)（RB）、各測(cè)定讀數(shù)點(diǎn)（P）、各點(diǎn)時(shí)

20、 間間隔及周期總時(shí)間等。每個(gè)儀器一般都在反應(yīng)轉(zhuǎn)盤得固定位巻與反應(yīng)測(cè)左周期得固定時(shí)間 設(shè)置樣品試劑與稀釋得加液位，以及測(cè)左讀數(shù)點(diǎn)。如HITACHI 7 1 70任P 1到P34周期為 10分鐘時(shí),PO前加樣品，R1在P1前,R2在P5與P6間，R 3在P1 6與P17間,R4在：P3 3與P34間。 （二）數(shù)據(jù)處理計(jì)算方法 儀器在各個(gè)吸光度讀數(shù)點(diǎn)讀取得吸光度數(shù)據(jù)，并不一定都納人濃度訃算。儀器往往根拯儀器 龍義與操作者設(shè)立得要求，對(duì)吸光度原始數(shù)據(jù)作計(jì)算處理，轉(zhuǎn)換成所謂反應(yīng)數(shù)據(jù)，再按系數(shù) 或公式作濃度計(jì)算。舉例如下： 1 o HITACII 71 7 0得終點(diǎn)法測(cè)圧點(diǎn)（A ）吸光度計(jì)算為（AX+AX

21、-l）/2。實(shí)際吸光度 =吸光度數(shù)據(jù)X 10 000. 2. OLYHPUS AU 600試劑空白數(shù)據(jù):P0點(diǎn)試劑空白（RB） =P0點(diǎn)吸光度一比色杯水空 白（wB）：任一測(cè)定點(diǎn)試劑空白（RB ）。該點(diǎn)吸光度一比色杯水空白（WB）。 3. M o na r ch 1 00 0兩點(diǎn)終點(diǎn)法得反應(yīng)數(shù)據(jù)。（終點(diǎn)測(cè)上吸光度一終點(diǎn)空白吸光度）一（始 點(diǎn)測(cè)宦吸光度一始點(diǎn)空白吸光度）。 4. AU 600得終點(diǎn)法（帶試劑空白,END法）得反應(yīng)數(shù)據(jù)=終點(diǎn)吸光度一 P 0點(diǎn)吸光度（試 劑空白.RB）。終點(diǎn)法（不帶試劑空白.END）.法）得反應(yīng)數(shù)據(jù)=終點(diǎn)吸光度一比色杯水空白 （WB）0 5. Au 6 00得兩點(diǎn)法

22、（自身空白）得反應(yīng)數(shù)據(jù)=加第二試劑后測(cè)立點(diǎn)讀數(shù)一 P0點(diǎn)讀數(shù) 一加第二試劑前測(cè)定點(diǎn)讀數(shù)一 PO點(diǎn)讀數(shù). 三、主要操作程序 （一）儀器運(yùn)行前操作程序 主要進(jìn)行儀器得基本設(shè)宜： 1。試驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置對(duì)試驗(yàn)名稱、編碼,試驗(yàn)組合（Profile）.試驗(yàn)輪次（Round）,必要時(shí)包括試 驗(yàn)順序等設(shè)宜。 2。各試驗(yàn)得參數(shù)設(shè)置包括試驗(yàn)間比值、結(jié)果核對(duì)等參數(shù)得設(shè)左。 3。劑設(shè)置根據(jù)有關(guān)試驗(yàn)參數(shù)，設(shè)置各試驗(yàn)得試劑位、試劑瓶規(guī)格，必要時(shí)設(shè)左試劑批號(hào)、 失效期等. 4。校準(zhǔn)品設(shè)宜對(duì)校準(zhǔn)品得位置、濃度與數(shù)量等進(jìn)行設(shè)置。 5。質(zhì)控設(shè)宜 根據(jù)質(zhì)控要求。設(shè)置質(zhì)控物個(gè)數(shù)，質(zhì)控規(guī)則，質(zhì)控項(xiàng)目及相應(yīng)質(zhì)控參數(shù)等。 6。樣品管設(shè)置包括樣

23、品管類型，殘留液髙度（死體積），識(shí)別方式等設(shè)苣。 7。其她設(shè)宜對(duì)數(shù)據(jù)傳輸方式、結(jié)果報(bào)告格式、復(fù)査方式及復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)等設(shè)置。 （二）常規(guī)操作程序 開機(jī)（預(yù)熱、保養(yǎng)）一設(shè)置開始條件（日期時(shí)間索引、輪次、樣品起始號(hào)等）一根據(jù)需要,申請(qǐng)校 準(zhǔn)、質(zhì)控與病人測(cè)龍項(xiàng)目（包括架號(hào)、杯號(hào)或順序號(hào)。測(cè)立中可繼續(xù)申請(qǐng)）_裝載校準(zhǔn)品、質(zhì) 控物與病人標(biāo)本一裝載試劑一核對(duì)儀器起始狀態(tài)（未應(yīng)用條碼系統(tǒng),采用順序識(shí)別樣品時(shí)，尤 其要核對(duì)測(cè)定起始編號(hào)就是否與樣品架號(hào)與申請(qǐng)?zhí)栂喾┮恍箻?biāo)與質(zhì)控測(cè)左一檢查左標(biāo)與質(zhì) 控結(jié)果一病人標(biāo)本測(cè)定-測(cè)左過程監(jiān)控（試劑檢查，觀察分析結(jié)果，編借校正）一數(shù)據(jù)傳遞（打 印報(bào)告，向檢驗(yàn)管理系統(tǒng)傳輸，包括工作

24、量統(tǒng)計(jì)、財(cái)務(wù)統(tǒng)訃、病人情況追蹤、質(zhì)控分析等）。 測(cè)定后保養(yǎng)。 （三）測(cè)定結(jié)果檢查分析 1。要了解與熟悉儀器得各種警示符號(hào)得含義與作用在正確設(shè)定參數(shù)得前提下，利用各種警示 符能提髙我們發(fā)現(xiàn)問題與解決問題得效率。 2。要熟悉與靈活運(yùn)用儀器得相關(guān)操作屏（界而）如：用反應(yīng)過程監(jiān)iJ（Re a ction Monitor）, 觀察反應(yīng)時(shí)間進(jìn)程曲線：用校準(zhǔn)追蹤（Calibr a tion Trace）回顧分析校準(zhǔn)曲線；利用統(tǒng) 計(jì)（Sta t istic s）了解不同日期段病人測(cè)左均值及數(shù)據(jù)分析；運(yùn)用分析數(shù)據(jù)編輯（Da t a E dit）察瞧與校正測(cè)定數(shù)據(jù)。 3。校準(zhǔn)得檢查要充分利用儀器設(shè)置得功能,監(jiān)測(cè)校

25、準(zhǔn)曲線圖形、各校準(zhǔn)點(diǎn)吸光度值（不能忽 略試劑空白值及空白速率值）、計(jì)算K值等得波動(dòng)情況，以及與以往得比較。必要時(shí),應(yīng)進(jìn)一 步檢查反應(yīng)時(shí)間進(jìn)程曲線。必須結(jié)合質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)來把握實(shí)驗(yàn)條件. 4。病人結(jié)果得檢查除了目測(cè)觀察或用血淸指數(shù)了解標(biāo)本性狀，注意與了解臨床資料及診斷 外,學(xué)會(huì)分析反應(yīng)時(shí)間進(jìn)程曲線及數(shù)據(jù)就是重要得基本功。 四、基本測(cè)定方法 （一）終點(diǎn)法（End point m e t hod） 根拯反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物得吸收光譜特征及其吸光度大小，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析得方 法。對(duì)一般化學(xué)反應(yīng)來說，反應(yīng)完全（或正、逆反應(yīng)動(dòng)態(tài)平衡）、反應(yīng)產(chǎn)物穩(wěn)定時(shí)為反應(yīng)終點(diǎn)。 對(duì)抗原一抗體反應(yīng)來說，就是抗原與抗體完全反應(yīng)

26、、形成最大且穩(wěn)立得免疫復(fù)合物時(shí)為終點(diǎn)。 在反應(yīng)時(shí)間進(jìn)程曲線上為與x軸平行線區(qū)段。在測(cè)立計(jì)算方式上，一般分為一點(diǎn)法與兩點(diǎn)法 兩種。 1. 一點(diǎn)法（One Point）以試劑與樣品混合之前得空氣空白（GB）、水空白（WB）或試劑 空白（RB）得吸光度值為測(cè)定訃算基點(diǎn)，以反應(yīng)終點(diǎn)得吸光度讀數(shù)減去空白讀數(shù)，得到反 應(yīng)吸光度。通過與相同條件下校準(zhǔn)液反應(yīng)吸光度得比較，求得測(cè)左結(jié)果。常與一點(diǎn)校準(zhǔn)法配 合使用，即采用一個(gè)校準(zhǔn)濃度，校準(zhǔn)曲線通過零點(diǎn)且成線性.也應(yīng)用多點(diǎn)校準(zhǔn)。 2. 兩點(diǎn)終點(diǎn)法（Two Po i nt End）即終點(diǎn)一始點(diǎn)法 以試劑與樣品混合之后得某一時(shí) 間點(diǎn)作為始點(diǎn)，以反應(yīng)終點(diǎn)得吸光度讀數(shù)減去始

27、點(diǎn)讀數(shù)。一左條件下可降低樣品對(duì)反應(yīng)或反 應(yīng)本身得特異性于擾（主要指色度干擾）。常采用雙試劑，多以加R2前某一點(diǎn)作測(cè)泄始點(diǎn)； 某些情況下，也可以加R2后一點(diǎn)作測(cè)泄始點(diǎn)。若使用單試劑，主反應(yīng)啟動(dòng)太快或儀器起始讀 數(shù)點(diǎn)受限時(shí)難以運(yùn)用。 固圧時(shí)間法（Fi xed Met hod）與兩點(diǎn)終點(diǎn)法得區(qū)別只就是在:測(cè)泄讀數(shù)得末點(diǎn)不在反應(yīng) 平衡區(qū)段，而就是根據(jù)方法學(xué)選擇。如血淸肌肝（苦味酸法）測(cè)定。 3. 三點(diǎn)終點(diǎn)法即雙終點(diǎn)法，在一個(gè)通道內(nèi)一次進(jìn)行兩項(xiàng)反應(yīng)相關(guān)得終點(diǎn)法測(cè)左比如同測(cè)游 離脂肪酸與甘油三酯。某些儀器（如IIITACHI系列）設(shè)宜此方法。 （二）連續(xù)監(jiān)測(cè)法（Con t inuou s moni t o

28、 ri n g me t h od） 又稱速率法（Rate Assay）o即連續(xù)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過程，根據(jù)所測(cè)左得產(chǎn)物生成或底物消耗得速 度進(jìn)行定量分析得方法。在反應(yīng)時(shí)間進(jìn)程曲線上為反應(yīng)呈恒速區(qū)段（斜率保持不變），常用于 酶活性線性反應(yīng)期測(cè)定。 1連續(xù)監(jiān)測(cè)法即零級(jí)反應(yīng)速率法，亦稱斜率法。在較長(zhǎng)得反應(yīng)時(shí)間區(qū)段內(nèi)（至少9 0 1 2 0秒）, 每隔一左時(shí)間（常為230秒）讀取一次吸光度值，至少讀取4點(diǎn)，得到3個(gè)AA： 般將 連續(xù)多次讀數(shù)作最小二乘法處理，讀數(shù)間隔時(shí)間太短得作帶速率時(shí)間（TR）多點(diǎn)法處理，均 取線性反應(yīng)部分得讀數(shù)，求岀單位時(shí)間內(nèi)得反應(yīng)速率A/m i n。此法必須以零級(jí)反應(yīng)為 測(cè)泄計(jì)算得基礎(chǔ)，因?yàn)橹挥性诹慵?jí)反應(yīng)下，單位時(shí)間內(nèi)得吸光度變化（反應(yīng)速率AA / min） 才與酶活力呈正比。此法相對(duì)減少了分析誤差，大大提高了分析速度與準(zhǔn)確性但就是，半自 動(dòng)生化分析儀采用單樣品連續(xù)監(jiān)測(cè)，相當(dāng)耗時(shí)。應(yīng)用連續(xù)監(jiān)測(cè)法，首先應(yīng)準(zhǔn)備線性范朗內(nèi)得 高、中、低濃度得樣品，分別作反應(yīng)時(shí)間進(jìn)程曲線，了解不同濃度下反應(yīng)全過程，兼顧確泄 延遲時(shí)間與線性監(jiān)測(cè)期. 2。兩點(diǎn)速率法