溫州市科技局計(jì)劃項(xiàng)目可行性報(bào)告

1、溫州市科技局計(jì)劃項(xiàng)目可行性報(bào)告琥珀酸脫氫酶和丙酮酸脫氫酶激酶在鼻咽癌發(fā)生癌變過程中表達(dá)變化及臨床意義一、立項(xiàng)背景和意義鼻咽癌（，）為耳鼻喉科惡性腫瘤之首，占頭頸部惡性腫瘤。在世界大多數(shù)地方是一種非常罕見的惡性腫瘤，具有顯著的種族和地方分布的特點(diǎn)，好發(fā)于東南亞，比其他地區(qū)發(fā)病率高出大約倍。國內(nèi)鼻咽癌分布有明顯的地區(qū)性差異，以廣東、廣西為高發(fā)中心，向周圍逐漸降低，其發(fā)病率高達(dá)萬。鼻咽癌以男性居多，約為女性的倍，歲為高發(fā)年齡 。是原發(fā)于鼻咽粘膜上皮的惡性腫瘤，其發(fā)病隱匿，其中以上的鼻咽癌為低分化鱗癌和未分化癌， 高分化鱗癌較少見， 發(fā)現(xiàn)時(shí)常已有頸部淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，大多數(shù)病人在確診時(shí)已是第或第期。鼻

2、咽癌的發(fā)病因素是多方面的，多年來臨床觀察及實(shí)驗(yàn)研究表明，它與遺傳因素、病毒、環(huán)境因素等緊密相關(guān)。由于病變位置隱蔽、發(fā)病癥狀無特異性，早期確診率不高。 目前鼻咽癌首選放射治療， 盡管癌細(xì)胞對(duì)放射治療敏感，仍有較高的復(fù)發(fā)和 (或)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率，再放療效果較差，特別是鼻咽癌的中晚期患者，年生存率不夠理想， 而且放療常常引發(fā)各種并發(fā)癥，例如咽鼓管功能障礙、 涎腺損傷等。不少學(xué)者正在探索更有效的方法，如放射與化學(xué)藥物聯(lián)合治療、放射與熱療聯(lián)合應(yīng)用和放射加中藥治療等。近些年來由于正電子發(fā)射斷層顯像 ()技術(shù)等在惡性腫瘤臨床診斷上的成功應(yīng)用， 腫瘤細(xì)胞的糖代謝特異性重新引起人們的高度重視，探索通過靶向糖酵解代謝

3、途徑治療惡性腫瘤的策略正備受關(guān)注， 然而對(duì)惡性腫瘤的糖代謝過程中關(guān)鍵酶的選擇是一個(gè)很關(guān)鍵的問題。圖鼻咽癌（電子鼻咽鏡），獎(jiǎng)獲得者首次報(bào)道，肝癌細(xì)胞糖酵解活性較正常肝細(xì)胞明顯增高，活躍的糖酵解代謝是惡性腫瘤細(xì)胞顯著的生物化學(xué)特征， 即使在有氧條件下， 腫瘤細(xì)胞糖酵解仍明顯增強(qiáng)，這一現(xiàn)象被稱為效應(yīng) 。正常組織細(xì)胞在有氧條件下，糖酵解代謝受到抑制；只在缺氧時(shí)，其糖酵解代謝才代償性增強(qiáng) 。與線粒體有氧代謝相比，糖酵解代謝是個(gè)相對(duì)低效率的產(chǎn)能過程， 一個(gè)分子葡萄糖通過有氧代謝途徑凈生成個(gè)分子， 而一個(gè)分子葡萄糖經(jīng)過糖酵解途徑凈生成個(gè)分子， 因此線粒體氧化磷酸化輕度受抑， 需要代謝明顯增強(qiáng)的糖酵解才能補(bǔ)充

4、足夠能量， 一些腫瘤細(xì)胞通過糖酵解合成的占總量的之多， 而且糖酵解所致的酸性環(huán)境有利于腫瘤細(xì)胞生長 ?；钴S的糖酵解代謝是腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的生物能量學(xué)基礎(chǔ)，改變了腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性，可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)化療或放療等凋亡刺激產(chǎn)生耐受 。首先，腫瘤細(xì)胞受內(nèi)外因素影響，線粒體氧化磷酸化過程受到不同程度的抑制，糖酵解代謝可補(bǔ)充能量；其次，腫瘤細(xì)胞還可獲取中間代謝產(chǎn)物，如脂肪酸、氨基酸等用于直接合成脂肪和蛋白質(zhì)， 以滿足其活躍的合成代謝需求； 再者，糖酵解產(chǎn)生大量乳酸， 導(dǎo)致微環(huán)境酸化。 早期酸化的微環(huán)境對(duì)腫瘤細(xì)胞生存有一定的不利影響，但腫瘤發(fā)生、 發(fā)展是一個(gè)不斷變異選擇的過程。 當(dāng)耐酸的腫瘤細(xì)胞株優(yōu)性選擇形

5、成， 酸化的微環(huán)境則對(duì)腫瘤細(xì)胞有著保護(hù)作用， 因?yàn)橐恍﹥?nèi)源性免疫細(xì)胞、免疫分子以及外源性堿性抗癌藥物在明顯酸化的條件下均會(huì)失效， 此外酸化的細(xì)胞外液對(duì)細(xì)胞基質(zhì)有分解破壞作用，有利于腫瘤細(xì)胞的浸潤與轉(zhuǎn)移 。目前技術(shù)正是利用腫瘤細(xì)胞攝入葡萄糖明顯增多的特性來診斷腫瘤， 而腫瘤細(xì)胞對(duì)葡萄糖攝入增加與糖酵解代謝活躍密切相關(guān)。 現(xiàn)已有多種正電子核素顯像劑， 臨床最常用的是利用氟標(biāo)記的脫氧葡萄糖 ()，是葡萄糖的類似物，能被葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞， 被催化為磷酸氟化葡萄糖， 但磷酸氟化葡萄糖不能進(jìn)入三羧酸循環(huán)參與分解代謝或被用于合成糖原，而是滯留于細(xì)胞內(nèi)使沉積組織細(xì)胞顯影。由于腫瘤細(xì)胞胞膜上葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)

6、蛋白數(shù)量增多和細(xì)胞內(nèi)活性增加， 其攝取并濃集能力明顯增強(qiáng)， 正是基于良、 惡性病變之間的這種葡萄糖代謝水平差異， 可被用于區(qū)別顯示良、惡性病變。對(duì)腫瘤分期、分型，復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的診斷，壞死與存活組織的鑒別，腫瘤生物特征的預(yù)測(cè)及治療反應(yīng)的監(jiān)測(cè)作用等都得到了認(rèn)可 。隨著臨床診斷腫瘤的成功應(yīng)用，極大地促進(jìn)了人們對(duì)腫瘤細(xì)胞糖酵解特性的關(guān)注，然而利用腫瘤細(xì)胞糖酵解增高特性來治療腫瘤的研究還處于探索階段。 隨著腫瘤細(xì)胞糖酵解代謝增高機(jī)制、 糖酵解酶亞型和功能的不斷闡明， 通過干預(yù)糖酵解途徑來實(shí)現(xiàn)對(duì)惡性腫瘤靶向性治療的策略正備受重視 。圖 針向惡性腫瘤細(xì)胞糖酵解途徑的作用靶點(diǎn)因此我們?cè)O(shè)想鼻咽癌細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)其細(xì)

7、胞中線粒體呼吸受損，糖酵解代謝增強(qiáng)，本實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)了利用半定量和免疫組化方法分別檢測(cè)例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織，一方面研究琥珀酸脫氫酶 ()、丙酮酸脫氫酶激酶（）在鼻咽癌癌組織、 癌旁組織及正常組織不同組織中的表達(dá)變化；另一方面研究蛋白、 蛋白在鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同組織中的表達(dá)變化。如果實(shí)驗(yàn)如預(yù)期一樣，我們得出結(jié)論 、基因表達(dá)水平與鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，三羧酸循環(huán)受抑制和糖酵解增強(qiáng)在鼻咽黏膜癌變過程中可能起到重要作用，針對(duì)鼻咽癌的糖代謝過程中關(guān)鍵酶， 利用靶向糖酵解代謝途徑治療鼻咽癌提供了科學(xué)合理的依據(jù)。二、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì)、琥珀酸脫氫酶與惡性腫瘤關(guān)

8、系細(xì)胞有氧氧化分四個(gè)主要步驟： ()糖酵解； ()乙酰輔酶的形成； ()三羧酸循環(huán)； ()電子傳遞偶聯(lián)氧化磷酸化。其中糖酵解在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行，而乙酞輔酶的形成、三羧酸循環(huán)及電子傳遞偶聯(lián)氧化磷酸化均在線粒體內(nèi)進(jìn)行。 因此線粒體是細(xì)胞呼吸的重要部位。琥珀酸脫氫酶 (，)位于線粒體內(nèi)膜，三羧酸循環(huán) ( ， )是線粒體呼吸鏈的組成部分 。是氧化呼吸鏈中最小的復(fù)合物，由核基因編碼，含有輔基、個(gè)鐵硫中心和個(gè)細(xì)胞色素， 由個(gè)亞基構(gòu)成 : ( ，黃素蛋白 )、(，鐵硫蛋白 )、與。其中與是催化亞基， 構(gòu)成水溶性的具有催化活性的異二聚體， 由兩個(gè)跨膜蛋白、亞基位于線粒體內(nèi)膜。 作為參與三羧酸循環(huán)的一個(gè)重要的催化酶

9、， 催化琥珀酸轉(zhuǎn)變成延胡索酸， 是反映線粒體功能的標(biāo)志酶之一， 其活性可作為評(píng)價(jià)三羧酸循環(huán)運(yùn)行程度的指標(biāo)； 同時(shí)是連接氧化磷酸化與電子傳遞的樞紐之一， 可為真核細(xì)胞線粒體和多種原核細(xì)胞需氧和產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子， 因此的改變必然會(huì)影響細(xì)胞有氧呼吸過程。 是的催化亞基， 其表達(dá)缺失可導(dǎo)致活性的喪失， 從而引起線粒體三羧酸循環(huán)功能障礙。 三羧酸循環(huán)是線粒體細(xì)胞氧化的重要步驟， 細(xì)胞能量供應(yīng)主要來自糖酵解和線粒體有氧氧化， 因此，表達(dá)缺失可引起腫瘤細(xì)胞能量代謝紊亂。近年來，能量代謝紊亂在腫瘤發(fā)生與演變過程中的作用及機(jī)制逐漸受到重視，通過干預(yù)能量代謝方式抑制腫瘤生長已經(jīng)成為腫瘤研究與治療的一個(gè)新的思路

10、。我們分析， 表達(dá)下調(diào)或缺失導(dǎo)致活性降低， 造成線粒體三羧酸循環(huán)的功能障礙，導(dǎo)致惡性腫瘤能量代謝紊亂。一方面，功能喪失可以導(dǎo)致的活化，而的活化可以促進(jìn)糖酵解基因如葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、乳酸脫氫酶等的表達(dá)， 以促進(jìn)糖酵解。另一方面，是的催化亞基，表達(dá)缺失可以導(dǎo)致活性的喪失，從而引起線粒體三羧酸循環(huán)障礙， 最終導(dǎo)致線粒體有氧代謝降低、糖酵解增強(qiáng)， 促進(jìn)腫瘤的生長與侵襲轉(zhuǎn)移。因此表達(dá)降低引起活性下降可能是惡性腫瘤能量代謝紊亂的機(jī)制之一。目前研究認(rèn)為基因突變導(dǎo)致活性喪失，從而抑制了的降解， 活化的激活了下游一系列靶基因而介導(dǎo)了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。同時(shí)發(fā)現(xiàn)在基因缺陷的腫瘤細(xì)胞或組織中的表達(dá)明顯增高 。近年研究發(fā)

11、現(xiàn)和突變的腫瘤有明顯的差別 ：基因突變大多數(shù)與頭頸部副神經(jīng)節(jié)瘤有關(guān)， 而突變?cè)谀I上腺和腎上腺外嗜鉻細(xì)胞瘤以及非副神經(jīng)節(jié)瘤腫瘤中發(fā)生率更高， 突變也與惡性嗜鉻細(xì)胞瘤、 部分腎細(xì)胞癌等惡性以及轉(zhuǎn)移性腫瘤發(fā)病相關(guān)。 的亞基突變導(dǎo)致酶活性降低， 造成三羧酸循環(huán)功能紊亂，觸發(fā)糖酵解增強(qiáng)成為產(chǎn)生的主要來源。 同時(shí)由于的失活， 其催化底物琥拍酸在線粒體基質(zhì)中積聚，并滲漏到胞漿中，進(jìn)而抑制了脯氨酞輕化酶(，)，的抑制導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞對(duì)某些凋亡信號(hào)產(chǎn)生抵抗和或激活缺氧誘導(dǎo)因子( ， )，從而促進(jìn)了腫瘤生成與發(fā)展。、丙酮酸脫氫酶激酶（）表達(dá)與鼻咽癌關(guān)系丙酮酸脫氫酶 ()是調(diào)節(jié)細(xì)胞糖酵解的關(guān)鍵酶之一，丙酮酸脫氫酶激酶

12、(，)是細(xì)胞糖酵解關(guān)鍵限速酶丙酮酸脫氫酶()的調(diào)節(jié)酶，有種同工酶： 、以及。有三 。此外，促進(jìn)腫瘤 ，的激活使被抑制，從而限制個(gè)特異調(diào)節(jié)位點(diǎn)，其中種同工酶均能磷酸化位點(diǎn)和，而位點(diǎn)只能被磷酸化 。所以能多點(diǎn)磷酸化三個(gè)位點(diǎn)，并與的長期抑制有關(guān)了丙酮酸流入線粒體進(jìn)行氧化磷酸化，而在胞漿進(jìn)行糖酵解細(xì)胞發(fā)生糖酵解，因此它對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的拮抗也有很大的影響 。既往研究發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、頭頸部癌、腎癌細(xì)胞中表達(dá)增高 。但是否能作為治療鼻咽癌的有效治療靶點(diǎn)還需進(jìn)一步明確。 線粒體功能的維持在細(xì)胞生長、 增殖、凋亡中有著十分重要的作用， 細(xì)胞生長增殖離不開線粒體是因?yàn)榧词乖谀[瘤細(xì)胞傾向于糖酵解獲取能量

13、時(shí)仍有的能量是通過線粒體獲得的 。而凋亡也是依賴于線粒體能量的產(chǎn)生。 在線粒體里有很多促進(jìn)凋亡的分子， 如細(xì)胞色素和凋亡誘導(dǎo)因子，在線粒體膜電位正常時(shí)它們存在于線粒體內(nèi)， 而當(dāng)呼吸鏈中的電子鏈產(chǎn)生電子 (，)時(shí)，線粒體膜電位才能降低，它們就流入到胞漿內(nèi)，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡 。有研究表明，抑制了三羧酸循環(huán)的進(jìn)行，從而導(dǎo)致了線粒體功能失常 。因此，抑制是否通過對(duì)線粒體功能的改變而影響結(jié)鼻咽癌細(xì)胞增殖和化療敏感性也是本研究的關(guān)注點(diǎn)之一。 研究發(fā)現(xiàn)的表達(dá)可被缺氧誘導(dǎo)因子 調(diào)控，可能與腫瘤缺氧的環(huán)境有關(guān)。 除了具有糖代謝酶的催化活性， 對(duì)細(xì)胞凋亡拮抗還有一定的影響，線粒體功能的調(diào)節(jié)在細(xì)胞的生長、增殖、凋亡

14、等過程中發(fā)揮重要的功能。它具有能夠調(diào)節(jié)， 催化丙酮酸脫羧氧化的活性， 并進(jìn)一步將糖酵解與三羧酸循環(huán)以及的生成聯(lián)系在一起。 許多研究證明 在多數(shù)惡性腫瘤組織中都有表達(dá)， 并且與腫瘤惡性程度關(guān)系密切 。預(yù)示著 和可能成為判斷結(jié)鼻咽癌惡性程度的重要指標(biāo)。這也與文獻(xiàn)報(bào)道在頭頸部鱗癌中受 調(diào)控的研究結(jié)果一致， 故有可能成為鼻咽癌研究和治療的一個(gè)新靶點(diǎn)。具有促進(jìn)能量合成和拮抗細(xì)胞凋亡的雙重功能，線粒體功能的維持在細(xì)胞生長、增殖、凋亡中有著十分重要的作用，細(xì)胞生長增殖離不開線粒體是因?yàn)榧词乖谀[瘤細(xì)胞傾向于糖酵解獲取能量時(shí)仍有的能量是通過線粒體獲得的 。而凋亡也是依賴于線粒體能量的產(chǎn)生。在線粒體里有很多促進(jìn)凋

15、亡的分子， 如細(xì)胞色素和凋亡誘導(dǎo)因子， 在線粒體膜電位正常時(shí)它們存在于線粒體內(nèi)，而當(dāng)呼吸鏈中的電子鏈產(chǎn)生電子(，)時(shí)，線粒體膜電位才能降低，它們就流入到胞漿內(nèi)，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡 。同時(shí)，線粒體也能影響跟增殖和凋亡有關(guān)的下游機(jī)制， 如對(duì)胞內(nèi)鈣離子濃度的調(diào)節(jié)。 胞內(nèi)鈣離子濃度也是維持細(xì)胞生理穩(wěn)定的重要指標(biāo)之一， 它的增高會(huì)引起細(xì)胞的增生和很多轉(zhuǎn)錄因子的激活。有研究表明，抑制了三羧酸循環(huán)的進(jìn)行，擾亂了正常的線粒體工作程序，從而導(dǎo)致了線粒體功能失常。 因此，抑制是否是通過對(duì)線粒體功能的改變而影響結(jié)鼻咽癌細(xì)胞增殖和化療敏感性也是本研究的關(guān)注點(diǎn)之一。從臨床的觀點(diǎn)來看， 鼻咽癌的綜合治療主要包括放療、化療和

16、手術(shù)， 但腫瘤的本質(zhì)是細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長增殖的正常調(diào)控。因此基因治療與放療等傳統(tǒng)手段相結(jié)合可能取得比單一治療方法更好的效果。針對(duì)鼻咽癌的糖代謝過程中關(guān)鍵酶，抑制腫瘤增殖，促進(jìn)凋亡，進(jìn)一步提高腫瘤細(xì)胞對(duì)放、化療等敏感性，對(duì)鼻咽癌患者采用聯(lián)合療法即放、化療聯(lián)合靶基因治療， 可能會(huì)有意想不到的療效。參考文獻(xiàn) 黃選兆，汪吉寶，孔偉佳等。實(shí)用耳鼻咽喉頭頸外科學(xué)，第二版，北京，人民衛(wèi)生出版社，。().().,(). ().().(). ().()(): .():. ().().(). ().().().(). ().(). .(). ()： 菅記涌，張勇，朱大海。丙酮酸脫氫酶激酶的研究進(jìn)展 。基

17、礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，()。 ，. .()， ，.(). .() ().().三、項(xiàng)目主要研究開發(fā)內(nèi)容、技術(shù)關(guān)鍵及主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)。（一）研究開發(fā)內(nèi)容用半定量和免疫組化方法分別檢測(cè)例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中、和蛋白的表達(dá)水平變化及其生物學(xué)意義。、利用半定量 法檢測(cè) 、在 例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中表達(dá)水平變化。、利用免疫組化法檢測(cè)、蛋白在 例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中的表達(dá)水平變化。（二）技術(shù)關(guān)鍵、活檢患者癌組織、 癌旁組織以及正常鼻咽癌組織，每位鼻咽癌有完整的臨床資料、病理分級(jí)，病人術(shù)前均未行化療、放療。、利用半定量 法檢測(cè) 、在 例鼻

18、咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中和的表達(dá)水平變化。、利用免疫組化法檢測(cè)蛋白 、蛋白在 例鼻咽癌組織、 癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中的表達(dá)水平變化。（三）科研創(chuàng)新、基因表達(dá)水平與鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，三羧酸循環(huán)受抑制和糖酵解增強(qiáng)在鼻咽黏膜癌變過程中可能起到重要作用。 針對(duì)鼻咽癌的糖代謝過程中關(guān)鍵酶， 利用靶向糖酵解代謝途徑治療鼻咽癌提供了科學(xué)合理的依據(jù)。() 、和蛋白表達(dá)水平與鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，三羧酸循環(huán)受抑制和糖酵解增強(qiáng)在鼻咽黏膜癌變過程中可能起到重要作用。()鼻咽癌組織、癌旁組織中和蛋白表達(dá)顯著低于正常組織；鼻咽癌組織、癌旁組織中和蛋白表達(dá)顯著高于正常組織。()、作

19、為靶基因?yàn)楸茄拾┑奶谴x靶向治療提供科學(xué)依據(jù)。四、項(xiàng)目預(yù)期目標(biāo)、實(shí)驗(yàn)預(yù)期在鼻咽癌組織、癌旁組織中表達(dá)顯著低于正常組織（）；、實(shí)驗(yàn)預(yù)期鼻咽癌組織、癌旁組織中蛋白表達(dá)顯著高于正常組織（）。、預(yù)期等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示、 基因表達(dá)水平與組織的病理學(xué)分級(jí)呈顯著負(fù)相關(guān)（ ）。、本研究成果將在國內(nèi)外期刊發(fā)表篇，并通過國內(nèi)學(xué)術(shù)交流、 繼續(xù)教育等形式進(jìn)一步推廣應(yīng)用。應(yīng)用前景目前，鼻咽癌的糖代謝靶向治療成為惡性腫瘤治療的主要研究方向。 檢測(cè)、和蛋白在 例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中的表達(dá)水平變化，這樣可以在分子水平抑制腫瘤細(xì)胞的生長，進(jìn)而達(dá)到綜合治療目的。五、項(xiàng)目實(shí)施方案、技術(shù)路線、組織方式與

20、課題分解（一）實(shí)施方案、活檢每位鼻咽癌患者癌組織、癌旁組織以及正常鼻咽癌組織。、檢測(cè) 、在 例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中和的表達(dá)。、檢測(cè)蛋白 、蛋白在 例鼻咽癌組織、 癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中和的表達(dá)水平變化。、分析和的表達(dá)水平變化兩者相關(guān)性。、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：使用統(tǒng)計(jì)軟件如，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析。（二）技術(shù)路線病例標(biāo)本病例標(biāo)本石蠟切片提取組織總免疫組化法（三） 組織方式測(cè)定純度及濃度逆轉(zhuǎn)錄成擴(kuò)增片段產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳項(xiàng)目負(fù)責(zé)人實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)組組數(shù)據(jù)分析其中項(xiàng)目負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)本項(xiàng)目的管理和協(xié)調(diào)；軟件分析實(shí)驗(yàn)組、負(fù)責(zé)試劑等采購和本項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室操作；數(shù)據(jù)分析組負(fù)責(zé)對(duì)結(jié)果檢測(cè)和數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。（四）課題分解、活檢每位鼻咽癌患者癌組織、癌旁組織以及正常鼻咽癌組織，由實(shí)驗(yàn)組負(fù)責(zé)。、檢測(cè) 、在 例鼻咽癌組織、癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中和的表達(dá)，由實(shí)驗(yàn)組負(fù)責(zé)。、檢測(cè)蛋白 、蛋白在 例鼻咽癌組織、 癌旁組織及正常組織不同病理階段組織中和的表達(dá)水平變化，由實(shí)驗(yàn)組負(fù)責(zé)。、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用統(tǒng)計(jì)軟件如，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析組負(fù)責(zé)。六、計(jì)劃進(jìn)度安排年月年月（第一階段）準(zhǔn)確活檢每位鼻咽癌患者癌組織、癌旁組織以及正常鼻咽癌組織。年月年月（第二階段）檢