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1、綠葉中色素的提取和分離綠葉中色素的提取和分離 第五第五屆中學(xué)生物教師實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新大賽屆中學(xué)生物教師實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新大賽 一、實(shí)驗(yàn)在教材中所處的地位與作用一、實(shí)驗(yàn)在教材中所處的地位與作用 綠葉中色素的提取和分離綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)是人教版高中實(shí)驗(yàn)是人教版高中 生物必修一第五章第四節(jié)生物必修一第五章第四節(jié)光與光合作用光與光合作用的內(nèi)的內(nèi) 容,是高中生物一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn),也是一個(gè)過(guò)程容,是高中生物一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn),也是一個(gè)過(guò)程 繁瑣,操作難度稍大的實(shí)驗(yàn)。光合作用是高中生繁瑣,操作難度稍大的實(shí)驗(yàn)。光合作用是高中生 物學(xué)習(xí)的重要內(nèi)容。葉綠體中色素在光合作用中物學(xué)習(xí)的重要內(nèi)容。葉綠體中色素在光合作用中 起著吸收、傳
2、遞與轉(zhuǎn)化光能的作用。起著吸收、傳遞與轉(zhuǎn)化光能的作用。 1 1、了解光合色素的種類和作用,促進(jìn)對(duì)的光合作、了解光合色素的種類和作用,促進(jìn)對(duì)的光合作 用的過(guò)程及應(yīng)用的理解;用的過(guò)程及應(yīng)用的理解; 本實(shí)驗(yàn)有助于本實(shí)驗(yàn)有助于: : 2 2、培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力和探究能力。、培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力和探究能力。 實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟: 1 1、提取綠葉中的色素、提取綠葉中的色素 稱取稱取5g5g綠葉,剪碎,放入研缽中。綠葉,剪碎,放入研缽中。 向研缽中加入少許向研缽中加入少許SiO2SiO2和和CaCO3CaCO3,再加入,再加入10ml10ml的無(wú)的無(wú) 水乙醇,進(jìn)行快速充分的研磨。水乙醇,進(jìn)行快速充分的研磨。
3、將研磨液迅速倒入玻璃漏斗進(jìn)行過(guò)濾,將綠葉收集將研磨液迅速倒入玻璃漏斗進(jìn)行過(guò)濾,將綠葉收集 到試管中,及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán)。到試管中,及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán)。 不足之處:提取葉綠素的過(guò)程需要較多的實(shí)驗(yàn)用不足之處:提取葉綠素的過(guò)程需要較多的實(shí)驗(yàn)用 具和用品,成本較高;無(wú)水乙醇容易揮發(fā),容易具和用品,成本較高;無(wú)水乙醇容易揮發(fā),容易 造成研磨不充分,導(dǎo)致提取的色素濃度不高;操造成研磨不充分,導(dǎo)致提取的色素濃度不高;操 作過(guò)程繁瑣,要稱取,剪碎,研磨,過(guò)濾,花費(fèi)作過(guò)程繁瑣,要稱取,剪碎,研磨,過(guò)濾,花費(fèi) 的時(shí)間較多。的時(shí)間較多。 二、實(shí)驗(yàn)原型及不足二、實(shí)驗(yàn)原型及不足 2 2、制備濾紙條、制備濾紙條
4、將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長(zhǎng)度與直徑的濾紙將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長(zhǎng)度與直徑的濾紙 條,將濾紙條的一端剪去兩角,并在距離這端條,將濾紙條的一端剪去兩角,并在距離這端1cm1cm處用鉛處用鉛 筆畫一條直線。筆畫一條直線。 3 3、畫濾液細(xì)線、畫濾液細(xì)線 用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻地畫一條細(xì)用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻地畫一條細(xì) 線。待濾液干后,再畫一兩次。線。待濾液干后,再畫一兩次。 不足之處:不好把握力度,很容易把毛細(xì)吸管不足之處:不好把握力度,很容易把毛細(xì)吸管 弄斷。由于毛細(xì)管吸取的綠葉較少,容易造成弄斷。由于毛細(xì)管吸取的綠葉較少,容易造成 濾液細(xì)線中的色素分布不
5、均勻,很難做到細(xì)、濾液細(xì)線中的色素分布不均勻,很難做到細(xì)、 齊、直,導(dǎo)致色素帶不整齊。齊、直,導(dǎo)致色素帶不整齊。 二、實(shí)驗(yàn)原型及不足二、實(shí)驗(yàn)原型及不足 4、分離綠葉中是色素分離綠葉中是色素 將適量的層析液倒入試管中,將濾紙條輕輕插入層析將適量的層析液倒入試管中,將濾紙條輕輕插入層析 液中,隨后用棉塞塞進(jìn)試管。液中,隨后用棉塞塞進(jìn)試管。 不足之處:試管空間小,操作難度大,層不足之處:試管空間小,操作難度大,層 析液倒入時(shí)會(huì)有少許留在試管壁上,層析時(shí)析液倒入時(shí)會(huì)有少許留在試管壁上,層析時(shí) 濾紙條貼壁,沾上層析液,影響實(shí)驗(yàn)效果。濾紙條貼壁,沾上層析液,影響實(shí)驗(yàn)效果。 二、實(shí)驗(yàn)原型及不足二、實(shí)驗(yàn)原型及
6、不足 1 1、技術(shù)創(chuàng)新:、技術(shù)創(chuàng)新: 1 1)極大地簡(jiǎn)化色素的提取步驟,改成用鑷子破壞)極大地簡(jiǎn)化色素的提取步驟,改成用鑷子破壞 綠葉細(xì)胞使綠葉中的色素流出,借助蓋玻片,將綠葉細(xì)胞使綠葉中的色素流出,借助蓋玻片,將 色素吸附到濾紙條上,保證色素細(xì)線細(xì)齊直。色素吸附到濾紙條上,保證色素細(xì)線細(xì)齊直。 2 2)用甲苯代替層析液中的苯,減少毒性。)用甲苯代替層析液中的苯,減少毒性。 3 3)分離色素時(shí),燒杯代替試管,用濾紙蓋住燒杯)分離色素時(shí),燒杯代替試管,用濾紙蓋住燒杯 ,避免了試管壁上的層析液對(duì)色素分離的影響,避免了試管壁上的層析液對(duì)色素分離的影響, 并且可以同時(shí)層析多條濾紙條。并且可以同時(shí)層析多
7、條濾紙條。 4 4)白菜葉代替菠菜葉,材料更易獲得。)白菜葉代替菠菜葉,材料更易獲得。 三、實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新及改進(jìn)之處三、實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新及改進(jìn)之處 2 2、理念創(chuàng)新:、理念創(chuàng)新: 設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn),分離黃葉中的色素,對(duì)比綠設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn),分離黃葉中的色素,對(duì)比綠 葉和黃葉中色素的組成,探究葉子變黃的原因葉和黃葉中色素的組成,探究葉子變黃的原因 。 三、實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新及改進(jìn)之處三、實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新及改進(jìn)之處 1 1、用鑷子破壞綠葉細(xì)胞的生物膜,使綠葉、用鑷子破壞綠葉細(xì)胞的生物膜,使綠葉 中的色素暴露出來(lái),通過(guò)擠壓直接被吸附中的色素暴露出來(lái),通過(guò)擠壓直接被吸附 到濾紙條上。到濾紙條上。 2 2、綠葉中不同的色素在層析液中的溶解度、
8、綠葉中不同的色素在層析液中的溶解度 不同,溶解度高的隨層析液擴(kuò)散的速度快;不同,溶解度高的隨層析液擴(kuò)散的速度快; 反之則慢,幾分鐘就能將不同的色素分開。反之則慢,幾分鐘就能將不同的色素分開。 3 3、低溫環(huán)境,葉綠素易被分解,葉子變黃。、低溫環(huán)境,葉綠素易被分解,葉子變黃。 四、實(shí)驗(yàn)原理四、實(shí)驗(yàn)原理 五、實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)步驟 1 1、制備濾紙條、制備濾紙條 用干燥的定性濾紙剪好長(zhǎng)用干燥的定性濾紙剪好長(zhǎng)8cm8cm、寬、寬1.5cm1.5cm的的 濾紙條,在距一端濾紙條,在距一端1cm1cm處用鉛筆畫一條細(xì)線,處用鉛筆畫一條細(xì)線, 并剪去兩角。并剪去兩角。 五、實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)步驟 2 2、“畫
9、畫”色素細(xì)線色素細(xì)線 用鑷子尖端把白菜葉片的下表皮及葉肉細(xì)胞刮破,用鑷子尖端把白菜葉片的下表皮及葉肉細(xì)胞刮破, 把已備好的濾紙條沿鉛把已備好的濾紙條沿鉛 筆細(xì)線對(duì)折,然后在上筆細(xì)線對(duì)折,然后在上 述處理過(guò)的葉片上述處理過(guò)的葉片上 沿鉛筆細(xì)線用蓋玻片稍微用沿鉛筆細(xì)線用蓋玻片稍微用 力均勻地來(lái)回拉力均勻地來(lái)回拉4-64-6次,這樣色素細(xì)線就次,這樣色素細(xì)線就“畫畫” ” 好了。好了。 3 3、分離色素、分離色素 將將6ml6ml層析液倒層析液倒50ml50ml燒杯燒杯 中內(nèi)。將濾紙條遠(yuǎn)離色素中內(nèi)。將濾紙條遠(yuǎn)離色素 細(xì)線的一端對(duì)折,放入燒細(xì)線的一端對(duì)折,放入燒 杯中,掛在燒杯口,用圓杯中,掛在燒杯口
10、,用圓 形濾紙蓋住燒杯。幾分鐘形濾紙蓋住燒杯。幾分鐘 后在濾紙條上可以很清晰后在濾紙條上可以很清晰 地看到地看到4 4 條色素帶。條色素帶。 五、實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)步驟 六、實(shí)驗(yàn)效果六、實(shí)驗(yàn)效果 胡蘿卜素胡蘿卜素 葉黃素葉黃素 葉綠素葉綠素a a 葉綠素葉綠素b b u1 1、簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟、降低實(shí)驗(yàn)難度、縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并且、簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟、降低實(shí)驗(yàn)難度、縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并且 取得了很好的實(shí)驗(yàn)效果。取得了很好的實(shí)驗(yàn)效果。 u2 2、節(jié)約實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)用品,降低實(shí)驗(yàn)成本和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、節(jié)約實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)用品,降低實(shí)驗(yàn)成本和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 難度。不用使用無(wú)水乙醇、難度。不用使用無(wú)水乙醇、SiOSiO2 2、CaCOCaCO3 3等用品。不用準(zhǔn)備等用品。不用準(zhǔn)備 天平、漏斗、研缽、毛細(xì)吸管等用具。天平、漏斗、研缽、毛細(xì)吸管等用具。 u3 3、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)環(huán)境,減少安全隱患。用甲苯代替苯,降低、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)環(huán)
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