清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房的使用

1、唐甩恩 l進(jìn)入動(dòng)物房要更衣、戴口罩、帽 子，經(jīng)過(guò)風(fēng)淋,為什么？ l對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為什么要實(shí)行環(huán)境控 制？ l如何維護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房正常運(yùn)行？ l進(jìn)入動(dòng)物房要更衣、戴口罩、帽子，經(jīng) 過(guò)風(fēng)淋， 為什么？ l實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物 l實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指經(jīng)人工培育，對(duì)其攜 帶微生物實(shí)行控制，遺傳背景明確，來(lái) 源清楚，可用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥品、生物 制品的生產(chǎn)和檢定及其它科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng) 物。 l1 遺傳角度有要求，必須經(jīng)人工培育， 遺傳背景明確，來(lái)源清楚。根據(jù)基因的 純合程度，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為：近交系、突 變系、雜交群、封閉群。 l2 對(duì)其攜帶的微生物、寄生蟲實(shí)行人工 控制。 l3 用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)，它是人類的替身，最 精密的儀器都

2、無(wú)法替代。 l實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物是指一切能用于科學(xué)實(shí) 驗(yàn)的動(dòng)物，除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物外，還包括野生 動(dòng)物、經(jīng)濟(jì)動(dòng)物和觀賞動(dòng)物。 動(dòng)物 人 工 培 育 繁育遺 傳 背 景 物 種 來(lái) 源 微生物、 寄生蟲 用途 實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物 嚴(yán)格人工明確明確人 工 控 制 科 學(xué) 實(shí) 驗(yàn) 野 生 動(dòng) 物 未經(jīng)自然不明確不明確自 然 選 擇 保 護(hù) 或 發(fā) 展 經(jīng) 濟(jì) 經(jīng) 濟(jì) 動(dòng) 物 一 定 程 度 人工一般一般擇 優(yōu) 劣 汰 發(fā) 展 經(jīng) 濟(jì) 觀 賞 動(dòng) 物 一 定 程 度 人工一般一般擇 優(yōu) 劣 汰 觀 賞 寵 物 l實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可分為 普通級(jí) 清潔級(jí) SPF級(jí)（Specific Pathogen Free)無(wú)特定病原 體的動(dòng)物

3、無(wú)菌動(dòng)物 l無(wú)菌動(dòng)物是指動(dòng)物體內(nèi)外無(wú)任何微 生物和寄生蟲的動(dòng)物。 是經(jīng)人工剖腹產(chǎn)凈化培育出來(lái)的。 飼養(yǎng)在隔離環(huán)境設(shè)施中。 lSPF級(jí)（無(wú)特定病原體的動(dòng)物）是指實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物體內(nèi)不存在特定病原微生物和寄生蟲的特 殊動(dòng)物。 不允許存在干擾實(shí)驗(yàn)的潛在感染，如綠膿桿菌。 飼養(yǎng)在屏障環(huán)境設(shè)施系統(tǒng)中。 l來(lái)源：無(wú)菌動(dòng)物悉生動(dòng)物SPF動(dòng)物 悉生動(dòng)物指體內(nèi)攜帶的微生物是經(jīng)人工有計(jì)劃 投給的已知菌或動(dòng)物生存必需菌。如大腸桿菌或雙 歧桿菌。 l清潔級(jí)動(dòng)物動(dòng)物體內(nèi)外不攜帶人畜 共患的病原體或動(dòng)物傳染病病原體的動(dòng) 物。 對(duì)動(dòng)物危害大的、科學(xué)研究干擾大的微生物 不允許存在。如肝炎病毒、仙臺(tái)病毒。 l普通級(jí)動(dòng)物未經(jīng)嚴(yán)格控制微

4、生物的 動(dòng)物，飼養(yǎng)在開(kāi)放環(huán)境設(shè)施中。用于教 育示教。 不允許存在人畜共患病和嚴(yán)重的動(dòng)物傳染病。 如沙門氏菌、出血熱、弓形蟲、螨、虱，猴 皰疹病毒（B病毒），鼠痘病毒。 l普通環(huán)境：該環(huán)境設(shè)施符合動(dòng)物居住的 基本要求，不能完全控制傳染因子，適 用于飼育教學(xué)等用途的普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 l屏障環(huán)境：該環(huán)境設(shè)施適用于飼育清潔 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及無(wú)特定病原體實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，該 環(huán)境嚴(yán)格控制人員和物品的進(jìn)出。 l隔離環(huán)境：該環(huán)境設(shè)施采用無(wú)菌隔離裝置以保 存無(wú)菌或無(wú)外來(lái)污染動(dòng)物，隔離裝置內(nèi)的空氣、 飼料、水、墊料和設(shè)備均為無(wú)菌，動(dòng)物和物料 的動(dòng)態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)既能 保證與環(huán)境的絕對(duì)隔離，又能滿足轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)物時(shí)

5、保持內(nèi)環(huán)境一致。該環(huán)境設(shè)施適用于飼育無(wú)特 定病原體（SPF）、悉生（Gnotobiotic）及無(wú) 菌（Germ Free）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 l 項(xiàng) 目 指 標(biāo) 小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、貓、兔、小型豬雞 普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境普 通 環(huán)境 屏障環(huán)境隔離 環(huán)境 隔離環(huán)境 溫度，192620251 6 26 18221626 日溫差， 4 3 4 3 3 相對(duì)濕度， 4070 換氣次數(shù)，次/ h81010202050810102020502050 氣流速度，m/s 0.10.2 壓強(qiáng)梯度，Pa -2050100150 -20501001 50 100150 空氣潔凈度，級(jí) -10000 100 -

6、10000 100 100 落下菌數(shù)，個(gè)/皿 30 3無(wú)檢出 30 3無(wú)檢 出 無(wú)檢出 氨濃度，mg/m3 14 噪聲， dB 60 照度， lx 工 作 照 度 150300 動(dòng) 物 照 度 1520 100200 510 晝夜明暗交替時(shí)間h 12/12或10/14 l對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為什么要實(shí)行環(huán) 境控制？ 基因型 表現(xiàn)型 演出型 發(fā)育環(huán)境 周圍環(huán)境 l動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的目的是對(duì)演出型進(jìn)行各種有 控制的處理而獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。為求得動(dòng) 物實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性好，就必須要求演出 型穩(wěn)定。這就需要對(duì)決定演出型的遺傳 和 環(huán) 境 條 件 加 以 控 制 。 反應(yīng)的重復(fù)性指不同的實(shí)驗(yàn)工作者， 在不同的實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)，不同的時(shí)間

7、，用同 一品系動(dòng)物所做的實(shí)驗(yàn)，幾乎沒(méi)有差異 地均能獲得相同的結(jié)果。 lR = （ A + B + C ） D E R 實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物 的 總 反 應(yīng) ； A 實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物 種 的 共 同 反 應(yīng) ； B動(dòng)物品種和品系的特有反應(yīng)； C動(dòng)物個(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）； D環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理）； E實(shí)驗(yàn)誤差。 l實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境因素包括兩個(gè)方面： 自然因素（物理、化學(xué)、生物） 人為因素 品質(zhì)控制 遺傳因素 人為因素：設(shè)施、飼養(yǎng)、管理、調(diào)教和實(shí)驗(yàn)處理等 生物因素：各種病原體（細(xì)菌、病毒、寄生蟲） 物理因素： 溫度 濕度 氣流 光照 噪聲 籠具 墊料 飼養(yǎng)密度 化學(xué)因素： 飼料 飲水 空氣 臭氣 殺蟲劑

8、消毒劑 有毒物質(zhì) l如何維護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房正常運(yùn)行？ 1 、 外購(gòu)的大、小鼠品系，需查明該生產(chǎn)單位 是否具 備該動(dòng)物生產(chǎn)合格證，如不具備合法 證明，則立即退回。 2、 動(dòng)物運(yùn)輸盒箱包裝是否符合該級(jí)別要求， 如發(fā)現(xiàn)有破漏等不符合該級(jí)別要求的情況，則 立即退回。 l3、 如懷疑該品系動(dòng)物不合要求或不健康， 則應(yīng)立即向法定檢測(cè)機(jī)構(gòu)要求鑒定，如確屬不 合格或以次充好，則將該批動(dòng)物如數(shù)退回，并 通報(bào)上級(jí)動(dòng)物管理委員會(huì)嚴(yán)肅處理。 l 4、 在以上三點(diǎn)均符合要求的前提下，將動(dòng)物 連同包裝盒一起送入緩沖間，不得在送入之前 將動(dòng)物包裝盒打開(kāi)。 l5、 動(dòng)物連同合格的包裝盒放入緩沖間 后，即噴灑過(guò)氧乙酸等空氣消毒劑，

9、開(kāi) 啟紫外線消毒20分鐘，然后打開(kāi)實(shí)驗(yàn)室 內(nèi)緩沖間的門，連盒進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，取出 動(dòng)物入籠架。 l實(shí)驗(yàn)中必需的器件、物品均需嚴(yán)格消毒 后由傳遞倉(cāng)（大物品由緩沖間）進(jìn)入， 并 按照傳遞倉(cāng)或緩沖間的進(jìn)入程序操作， 非實(shí)驗(yàn)所需的一切物品嚴(yán)禁帶入實(shí)驗(yàn)室。 l物品傳遞倉(cāng)（緩沖間）是傳送實(shí)驗(yàn)用品、 各種滅菌物品及更替下的物品的專用通 道，嚴(yán)禁隨意開(kāi)啟，開(kāi)而不關(guān)或改作其 他用途。 l滅菌物品傳入：開(kāi)啟外門消毒液噴灑倉(cāng)內(nèi) 去除外包裝（二層包布）放入倉(cāng)內(nèi)噴液 關(guān)閉外門開(kāi)紫外線燈30分鐘關(guān)紫外線燈 開(kāi)啟內(nèi)門傳入實(shí)驗(yàn)室 l物品傳出：開(kāi)紫外線燈30分鐘關(guān)紫外線燈 開(kāi)啟內(nèi)門放入送出物品關(guān)閉內(nèi)門開(kāi)啟外 門搬出物品噴液關(guān)閉外門

10、開(kāi)紫外線燈 l洗手更衣室 戴口罩、帽子 穿鞋套 風(fēng)淋 內(nèi)走廊 動(dòng)物室緩沖間 外走廊 在進(jìn)出時(shí)不能同時(shí)打開(kāi)兩扇門。 l加水喂料：飲水采用過(guò)濾水，飲水瓶應(yīng)及時(shí)更 換，防止漏水、斷水。定時(shí)消毒。飼料要保持 新鮮，滅菌飼料貯藏不超過(guò)一周。 l更換籠具：每天更換、清洗接糞盤，定期用消 毒液擦拭籠架。 l動(dòng)物的排泄物和廢物由實(shí)驗(yàn)者清除匯總，實(shí)驗(yàn) 結(jié)束后，通過(guò)緩沖室?guī)С?，交?dòng)物實(shí)驗(yàn)管理人 員處理。 非實(shí)驗(yàn)人員不得擅自進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。 實(shí)驗(yàn)后，不必要的儀器、物品、樣本或 死亡的動(dòng)物，應(yīng)在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)帶出 （通過(guò)緩沖室隨身帶出），死亡的動(dòng)物 應(yīng)交實(shí)驗(yàn)室管理人員統(tǒng)一處理。 1、 飼料需用可高壓滅菌的耐高壓飼料。

11、l2、 檢查飼料質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)飼料有霉變、 結(jié)塊及蟲蛀的情況，不得使用。 l3、將飼料裝入牛皮紙袋內(nèi)，外套布袋， 扎緊袋口，放高壓消毒鍋中消毒（120、 20分鐘）。 l4、將消毒過(guò)的飼料用脫皮法進(jìn)入傳遞倉(cāng) 和實(shí)驗(yàn)室。 l1、每天由值班人員觀察并記錄動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 室的溫度和相對(duì)濕度。 l2、大、小鼠要求室內(nèi)溫度保持在20 24之間。 l3、 發(fā)現(xiàn)溫度過(guò)高或過(guò)低時(shí)及時(shí)調(diào)整。 l 1、 動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中如發(fā)現(xiàn)有異常情況應(yīng)及時(shí)報(bào) 告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。 l2、 對(duì)動(dòng)物不明原因的死亡，須作必要的尸體 解剖，查明原因。 l3、 如發(fā)現(xiàn)尚未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物表現(xiàn)異常，應(yīng) 及時(shí)隔離觀察，并追查動(dòng)物來(lái)源。 l4、 如動(dòng)物經(jīng)檢驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)有烈性傳染病的感 染，應(yīng)立即隔離處死，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室需嚴(yán)格消毒。 l l1、 動(dòng)物的廢物應(yīng)統(tǒng)一置于規(guī)定地方傾倒，并 有專人負(fù)責(zé)處理。 l2、 廢物應(yīng)與動(dòng)物尸體分開(kāi)處理。 l3、 動(dòng)物尸體一定要焚燒，其他廢物可作焚燒、 發(fā)酵、無(wú)害化處理后丟棄或其他相應(yīng)辦法處理， 以不污染環(huán)境為原則。 l4、 對(duì)于有特殊試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物排泄物，要有 專人負(fù)責(zé)按規(guī)定