動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件

1、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件植物細(xì)胞植物細(xì)胞A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合雜合的原生質(zhì)體雜合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂分化發(fā)育分化發(fā)育愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株溫故知新:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程植物體細(xì)胞雜交過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件材料1: 1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。那么，如何實(shí)現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合，動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？人-鼠(想

2、像圖)動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件植物細(xì)胞植物細(xì)胞A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合雜合的原生質(zhì)體雜合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂分化發(fā)育分化發(fā)育愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株 如何實(shí)現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合？閱讀教材52頁(yè)相關(guān)內(nèi)容，思考下列問(wèn)題：思考：1 1、動(dòng)物細(xì)胞融合的概念是什么？、動(dòng)物細(xì)胞融合的概念是什么？ 2 2、動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這對(duì)它們雜交、動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這對(duì)它們雜交或融合過(guò)程有什么影響？或融合過(guò)程有什么影響？ 3 3、植物體細(xì)胞雜交誘

3、導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？那動(dòng)物細(xì)胞融合呢？有哪些？那動(dòng)物細(xì)胞融合呢？4 4、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同？是什么原理？是否相同？是什么原理？5 5、動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意義？主要應(yīng)用在哪些方、動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意義？主要應(yīng)用在哪些方面？面？6 6、參照植物細(xì)胞雜交過(guò)程寫出動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程。、參照植物細(xì)胞雜交過(guò)程寫出動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程。動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)、融合誘導(dǎo)、融合雜合的細(xì)胞雜合的細(xì)胞有絲分裂有絲分裂2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB 如何實(shí)現(xiàn)

4、人鼠細(xì)胞的融合？閱讀教材52頁(yè)相關(guān)內(nèi)容，思考討論下列問(wèn)題：小組活動(dòng)，討論：7、植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株，動(dòng)物、植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎?為什么？為什么？植物細(xì)胞植物細(xì)胞A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合雜合的原生質(zhì)體雜合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂分化發(fā)育分化發(fā)育愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件獲得雜種植株獲得雜種植株物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的

5、病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振蕩、電激）蕩、電激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）直接誘直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合去壁去壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體融合融合誘誘導(dǎo)新壁導(dǎo)新壁雜種植株雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性結(jié)果結(jié)果誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法步驟步驟融合的原理融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目獲得雜種細(xì)胞獲得雜種細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件材料材料2 2：在基因工程中在基因工程中, ,采用抗原采用抗原- -抗體雜交法檢測(cè)基抗體雜交法檢測(cè)基因表達(dá)產(chǎn)物需用到因表達(dá)產(chǎn)物需用到純度很高的抗體純度很高的抗體。材料材料3 3：

6、傳統(tǒng)：傳統(tǒng)獲得抗體的方法：把某種抗原反復(fù)注射獲得抗體的方法：把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體。到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體。 用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。思考：思考：1、抗體由哪種細(xì)胞產(chǎn)生的？、抗體由哪種細(xì)胞產(chǎn)生的？2、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺陷是什么？、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺陷是什么？3、能否通過(guò)相應(yīng)效應(yīng)、能否通過(guò)相應(yīng)效應(yīng)B細(xì)胞體外培養(yǎng)的方式大量獲得抗體細(xì)胞體外培養(yǎng)的方式大量獲得抗體?動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件材料4：效應(yīng)B

7、淋巴細(xì)胞在體內(nèi)只能由B淋巴細(xì)胞增殖分化而來(lái),不再進(jìn)行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。提示：提示：1 .1 .什么細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體？什么細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體？2 .2 .什么細(xì)胞可以無(wú)限增殖？什么細(xì)胞可以無(wú)限增殖？思考：用什么方法才能讓B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)既能產(chǎn)生抗體又能無(wú)限增殖?動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件材料5： 1975年, 米爾斯坦和柯勒首先將抗原注射入小鼠體內(nèi)，然后從小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，得到多種雜交細(xì)胞。 在特定的選擇性培養(yǎng)基中可篩選出雜交瘤細(xì)胞。 經(jīng)過(guò)再次篩選和抗體檢測(cè),得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。但純度達(dá)不到100%。 對(duì)單一雜

8、交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆培養(yǎng),獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，在體外培養(yǎng)或注射到小鼠體內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗體。 （由于產(chǎn)生抗體的細(xì)胞來(lái)自一個(gè)雜交瘤細(xì)胞,故產(chǎn)生的抗體稱為單克隆抗體.）請(qǐng)根據(jù)以上材料,討論設(shè)計(jì)單克隆抗體制備過(guò)程圖.討論：動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合融合多種多種雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞在具有在具有篩選篩選作用的培作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性驗(yàn)陽(yáng)性克隆上述雜交細(xì)胞克隆上述雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽(yáng)性

9、細(xì)胞檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞專一抗體檢專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性驗(yàn)陽(yáng)性單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠體內(nèi)注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體結(jié)合單克隆抗體的制備過(guò)程，思考結(jié)合單克隆抗體的制備過(guò)程，思考以下問(wèn)題：以下問(wèn)題：1、（只考慮兩兩融合）融合細(xì)胞、（只考慮兩兩融合）融合細(xì)胞幾種類型？幾種類型？2、本過(guò)程中進(jìn)行了兩次篩選，目、本過(guò)程中進(jìn)行了兩次篩選，目的分別是什么？第的分別是什么？第1次篩選要淘汰次篩選要淘汰哪些細(xì)胞？哪些細(xì)胞？3、本過(guò)程利用的那些技術(shù)？、本過(guò)程利用的那些技術(shù)？4、雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？、雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件單克隆抗體的應(yīng)

10、用信息材料6：動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件診斷疾病診斷疾?。ㄗR(shí)別作用，如同位素（識(shí)別作用，如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）心血管畸形等）優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：?jiǎn)慰寺】贵w的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用用于治療疾病和運(yùn)載藥物（用于治療疾病和運(yùn)載藥物（主要用于主要用于癌癥治療，如單克隆抗體癌癥治療，如單克隆抗體+藥物藥物= “生物生物導(dǎo)彈導(dǎo)彈”）優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小 閱讀教材閱讀教材P54相關(guān)內(nèi)容，試說(shuō)明單克隆抗體有何應(yīng)用？相關(guān)內(nèi)容，試說(shuō)明單克隆抗體有何應(yīng)用？?jī)?yōu)點(diǎn)是什么？?jī)?yōu)點(diǎn)是什么

11、？動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件單克隆抗體單克隆抗體B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)誘導(dǎo)融合融合選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)雜交瘤雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞克隆化克隆化培養(yǎng)培養(yǎng)抗體抗體檢測(cè)檢測(cè)產(chǎn)生所需產(chǎn)生所需抗體的雜抗體的雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體單克隆抗體多種雜多種雜交細(xì)胞交細(xì)胞1、該過(guò)程中用到了兩種技術(shù)、該過(guò)程中用到了兩種技術(shù)單克隆抗體的制備過(guò)程：?jiǎn)慰寺】贵w的制備過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)2、單克隆抗體的制備過(guò)程的三個(gè)、單克隆抗體的制備過(guò)程的三個(gè)“一一”：一種一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法，產(chǎn)生了誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方

12、法，產(chǎn)生了一種一種新細(xì)胞，得到了新細(xì)胞，得到了一種一種優(yōu)勢(shì)優(yōu)勢(shì)抗體?？贵w。滅活病毒誘導(dǎo)融合滅活病毒誘導(dǎo)融合雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體單克隆抗體優(yōu)勢(shì)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，優(yōu)勢(shì)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備可大量制備動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件1 1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A.A.經(jīng)過(guò)免疫的經(jīng)過(guò)免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 B.B.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞C.C.經(jīng)過(guò)免疫的經(jīng)過(guò)

13、免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 D.D.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的淋巴細(xì)胞沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的淋巴細(xì)胞A2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同所用的技術(shù)手段基本相同 C. 操作步驟基本相同操作步驟基本相同 D. 都能形成雜種細(xì)胞都能形成雜種細(xì)胞 D動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件3. 單克隆抗體制備過(guò)程中培育的雜交細(xì)胞是（單克隆抗體制備過(guò)程中培育的雜交細(xì)胞是（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合 B.由小鼠一個(gè)由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)

14、融合而成淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 C.由小鼠一個(gè)由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D.由小鼠一個(gè)由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D4.4.只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（ ）A APEGPEG B B滅活的病毒滅活的病毒 C C電刺激電刺激 D D離心離心B動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件5. 5. 單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是殖的細(xì)胞是 （ ）淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A.A. B. B.C.C. D.D. C C6.“6.“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”是指是指 （ ）A.A.單克隆抗體單克隆抗體 B.B.雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞C.C.產(chǎn)生特定抗體的產(chǎn)生特定抗體的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 D.D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體最新課件有夢(mèng)想，才會(huì)有